美洲大赤(chi)魷(DosidicusGigas)在食(shi)品(pin)加工過(guo)程中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)(de)軟骨廢(fei)棄物(wu)為(wei)(wei)原料,建立包括粉碎、脫水脫脂、酶解、除(chu)蛋白、醇沉、離子(zi)交(jiao)換、脫鹽等操作流程的(de)(de)(de)(de)CS制備(bei)(bei)方法,制備(bei)(bei)得(de)到(dao)新(xin)型(xing)CS。最(zui)終產(chan)品(pin)的(de)(de)(de)(de)產(chan)率達到(dao)16±2%。用(yong)(yong)商品(pin)化的(de)(de)(de)(de)硫(liu)酸(suan)(suan)軟骨素(su)(su)ABC酶、硫(liu)酸(suan)(suan)皮膚素(su)(su)酶、透明質酸(suan)(suan)酶(來自(zi)(zi)于StreptomycesHyalurolyticus)、以(yi)及(ji)實驗室自(zi)(zi)有產(chan)權(quan)的(de)(de)(de)(de)rHCLase降(jiang)解所(suo)(suo)得(de)多(duo)糖(tang)(tang),根據(ju)酶的(de)(de)(de)(de)底物(wu)專一(yi)性(xing),確認所(suo)(suo)制備(bei)(bei)的(de)(de)(de)(de)多(duo)糖(tang)(tang)為(wei)(wei)CS；通(tong)過(guo)咔唑(zuo)反應(ying)檢測樣(yang)品(pin)中(zhong)(zhong)新(xin)型(xing)CS含(han)(han)量(liang)(liang),BCA蛋白定(ding)量(liang)(liang)法檢測樣(yang)品(pin)中(zhong)(zhong)蛋白含(han)(han)量(liang)(liang)。結果(guo)提(ti)示(shi)(shi)：樣(yang)品(pin)中(zhong)(zhong)新(xin)型(xing)CS含(han)(han)量(liang)(liang)達到(dao)97%以(yi)上,蛋白含(han)(han)量(liang)(liang)低于2%。2.新(xin)型(xing)CS多(duo)糖(tang)(tang)結構的(de)(de)(de)(de)初(chu)步分(fen)(fen)(fen)析(xi)：參照葡聚糖(tang)(tang)分(fen)(fen)(fen)子(zi)量(liang)(liang)標準物(wu),經凝(ning)膠過(guo)濾HPLC分(fen)(fen)(fen)析(xi),確定(ding)所(suo)(suo)制備(bei)(bei)的(de)(de)(de)(de)NER-CS多(duo)糖(tang)(tang)平均分(fen)(fen)(fen)子(zi)量(liang)(liang)約為(wei)(wei)623.2 kDa。再(zai)通(tong)過(guo)硫(liu)酸(suan)(suan)軟骨素(su)(su)ABC酶完全(quan)降(jiang)解,結合HPLC分(fen)(fen)(fen)析(xi)二糖(tang)(tang)組成,發現NER-CS主要含(han)(han)有GlcAβ1-3GalNAcGlcAβ1-3GalNAc(4S)、GlcAβ1-3GalNAc(6S)、E-unit,其中(zhong)(zhong)E-unit含(han)(han)量(liang)(liang)最(zui)高(gao)可(ke)達44.5%,同時(shi)GlcAp1-3GalNAc、GlcAβ1-3GalNAc(4S)]、GlcAβ1-3GalNAc(6S)]含(han)(han)量(liang)(liang)分(fen)(fen)(fen)別(bie)為(wei)(wei)7.1%、12.6%、35.8%,總硫(liu)酸(suan)(suan)化度為(wei)(wei)1.37。是(shi)一(yi)種新(xin)型(xing)高(gao)硫(liu)酸(suan)(suan)化CS。3NER-CS生(sheng)物(wu)活(huo)(huo)(huo)性(xing)的(de)(de)(de)(de)初(chu)步分(fen)(fen)(fen)析(xi)：1)用(yong)(yong)Aglyco試劑(ji)盒檢測NER-CS的(de)(de)(de)(de)抗(kang)(kang)凝(ning)血活(huo)(huo)(huo)性(xing),結果(guo)顯示(shi)(shi)：NER-CS抗(kang)(kang)FⅡa和(he)(he)抗(kang)(kang)FXa活(huo)(huo)(huo)性(xing)分(fen)(fen)(fen)別(bie)為(wei)(wei)20±2U/mg和(he)(he)0.9±0.2U/mg,是(shi)陽性(xing)對照肝素(su)(su)抗(kang)(kang)FⅡa活(huo)(huo)(huo)性(xing)的(de)(de)(de)(de)10%左(zuo)右,抗(kang)(kang)FXa活(huo)(huo)(huo)性(xing)的(de)(de)(de)(de)4%左(zuo)右；2)利(li)用(yong)(yong)乳腺癌4T1細胞試驗轉移模型(xing),分(fen)(fen)(fen)析(xi)NER-CS在小鼠體內(nei)抗(kang)(kang)腫瘤轉移活(huo)(huo)(huo)性(xing),結果(guo)顯示(shi)(shi)：50、100和(he)(he)200μgNER-CS的(de)(de)(de)(de)抑瘤率分(fen)(fen)(fen)別(bie)為(wei)(wei)54.3±2.5%、75.1±3.5%、42.9±2.1%,同時(shi)陽性(xing)對照100μg肝素(su)(su)的(de)(de)(de)(de)抑瘤率為(wei)(wei)74.6±1.8%；3)用(yong)(yong)親(qin)和(he)(he)素(su)(su)修(xiu)飾的(de)(de)(de)(de)CM5芯(xin)片固(gu)定(ding)生(sheng)物(wu)素(su)(su)化NER-CS,分(fen)(fen)(fen)析(xi)NER-CS與五種生(sheng)長因子(zi)、三(san)種選擇(ze)素(su)(su)的(de)(de)(de)(de)相互(hu)(hu)作用(yong)(yong)活(huo)(huo)(huo)性(xing),結果(guo)顯示(shi)(shi)NER-CS與生(sheng)長因子(zi)HGF、bFGF相互(hu)(hu)作用(yong)(yong)活(huo)(huo)(huo)性(xing)較高(gao),親(qin)和(he)(he)力常(chang)數分(fen)(fen)(fen)別(bie)為(wei)(wei)(3.47±1.73)x10-6、(5.39±2.92)x10-8。4.NER-CS寡糖(tang)(tang)的(de)(de)(de)(de)制備(bei)(bei)及(ji)其抗(kang)(kang)腫瘤活(huo)(huo)(huo)性(xing)分(fen)(fen)(fen)析(xi)。