色譜法也叫層析法，它是一種高效能的物理分離技術，將它用于分析化學并配(pei)合適當的(de)檢測手段，就稱為色譜(pu)分析(xi)法(fa)。
色(se)(se)譜(pu)法(fa)(fa)的(de)(de)最(zui)早應(ying)用是(shi)用于(yu)分離(li)植物色(se)(se)素，其方法(fa)(fa)是(shi)這(zhe)樣的(de)(de)：在一玻璃管中放入碳酸鈣，將含有植物色(se)(se)素（植物葉(xie)的(de)(de)提取液(ye)）的(de)(de)石油(you)醚倒入管中。此時，玻璃管的(de)(de)上端立即(ji)出現幾(ji)種顏(yan)色(se)(se)的(de)(de)混合譜(pu)帶(dai)。然后用純石油(you)醚沖洗，隨著石油(you)醚的(de)(de)加入，譜(pu)帶(dai)不斷地向下(xia)移動(dong)，并(bing)逐漸分開成幾(ji)個不同(tong)顏(yan)色(se)(se)的(de)(de)譜(pu)帶(dai)，繼續沖洗就可分別接得(de)各種顏(yan)色(se)(se)的(de)(de)色(se)(se)素，并(bing)可分別進行鑒定(ding)。色(se)(se)譜(pu)法(fa)(fa)也由此而得(de)名(ming)。
現在的(de)色譜(pu)(pu)法早(zao)已(yi)不(bu)局限于色素的(de)分(fen)離(li)，其(qi)方(fang)法也早(zao)已(yi)得到(dao)了極(ji)大的(de)發(fa)展，但其(qi)分(fen)離(li)的(de)原理仍然是一樣的(de)。我們(men)仍然叫它色譜(pu)(pu)分(fen)析。
色(se)譜儀(yi)是(shi)進行色(se)譜分析的裝置，包括檢測裝置，記錄和(he)數據處(chu)理(li)分析，具(ju)有靈敏感(gan)，自(zi)動化程度(du)高的特(te)點(dian)，被廣泛應用在化學產(chan)品。以下就(jiu)是(shi)色(se)譜儀(yi)的簡單的介紹。
色譜儀目(mu)前(qian)正(zheng)朝微(wei)型、高通量、多功能(neng)等方向(xiang)發(fa)展(zhan)，盡管(guan)全球毛細管(guan)電泳市(shi)場份額并不(bu)大，但是由于毛細管(guan)電泳已廣泛(fan)應(ying)用于蛋(dan)白(bai)質組學、代謝組學以及中(zhong)藥指紋圖譜等領(ling)域，因此其未來(lai)應(ying)用將(jiang)更為(wei)廣闊，市(shi)場規模將(jiang)不(bu)斷擴(kuo)大，也(ye)成為(wei)行業發(fa)展(zhan)不(bu)能(neng)忽(hu)視的(de)一點。
離子色譜(pu)儀(yi)器(qi)正逐漸向多個(ge)領域(yu)發(fa)(fa)展(zhan)，尤(you)(you)其是(shi)向生命科學領域(yu)進軍，并取得重要應(ying)(ying)用(yong)。而微(wei)型化、毛(mao)細管離子色譜(pu)、聯用(yong)色譜(pu)由(you)于(yu)(yu)更(geng)能適應(ying)(ying)市(shi)場(chang)需求，發(fa)(fa)展(zhan)尤(you)(you)為迅猛(meng)。在技(ji)術方面，微(wei)流(liu)控(kong)技(ji)術成(cheng)為關注焦點，目(mu)前已經廣泛應(ying)(ying)用(yong)于(yu)(yu)毛(mao)細管電泳、PCR等(deng)多種儀(yi)器(qi)，隨著(zhu)行業標(biao)準(zhun)的不(bu)斷發(fa)(fa)展(zhan)，未來發(fa)(fa)展(zhan)將更(geng)為快(kuai)速和規(gui)范。
經過多(duo)年的(de)(de)發展，離(li)子色譜(pu)已經在(zai)生產生活的(de)(de)各種領域發揮著重要的(de)(de)作用。
離子色譜在其產生初期最重要的(de)應用便是環境樣品的(de)分(fen)析，其應用對象主要是環境樣品中各種陰、陽離子的(de)定性、定量分(fen)析。
作為(wei)一種快速準確而(er)有(you)效果分(fen)析方法，離子(zi)色(se)譜廣泛(fan)應用于微(wei)電子(zi)、電力工業中高(gao)純水、高(gao)純試劑痕量雜質的分(fen)析。
與傳統的分析(xi)方法相比，離(li)子色(se)譜法的突出(chu)優點是多組(zu)分同時進行分析(xi)，樣(yang)品(pin)處理簡單，因此成為(wei)食品(pin)和飲料中陰陽離(li)子、有機酸、胺和糖類分析(xi)的較好方法。
離子(zi)色(se)譜(pu)聯(lian)(lian)用技(ji)術(shu)(shu)是離子(zi)色(se)譜(pu)發(fa)(fa)展的(de)(de)一個方(fang)向。聯(lian)(lian)用技(ji)術(shu)(shu)的(de)(de)發(fa)(fa)展，使得(de)離子(zi)色(se)譜(pu)分析(xi)技(ji)術(shu)(shu)的(de)(de)應用范圍和檢測靈(ling)敏度(du)有了很大的(de)(de)提高(gao)，關于(yu)離子(zi)色(se)譜(pu)--原子(zi)吸收（發(fa)(fa)射）光譜(pu)、離子(zi)色(se)譜(pu)--電(dian)感耦(ou)合(he)等離子(zi)體、離子(zi)色(se)--質譜(pu)的(de)(de)聯(lian)(lian)用已(yi)有不(bu)少(shao)報道。
氣體工業名詞術語。一種對混合氣體中各組分進行分析檢測的儀器。樣品由載氣帶(dai)入，通過對欲檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)混合物中組(zu)分(fen)有(you)不同保留性能的(de)色譜柱，使各組(zu)分(fen)分(fen)離(li)，依(yi)次(ci)導入檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)器(qi)，以得到(dao)各組(zu)分(fen)的(de)檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)信號。按照導入檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)器(qi)的(de)先后次(ci)序，經過對比(bi)，可以區別出(chu)是(shi)什么組(zu)分(fen)，根(gen)據峰(feng)高度或峰(feng)面積可以計算出(chu)各組(zu)分(fen)含量。通常采用的(de)檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)器(qi)有(you)：熱導檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)器(qi)，火(huo)焰離(li)子(zi)化檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)器(qi)，氦離(li)子(zi)化檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)器(qi)，超聲波檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)器(qi)，光(guang)離(li)子(zi)化檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)器(qi)，電(dian)子(zi)捕獲檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)器(qi)，火(huo)焰光(guang)度檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)器(qi)，電(dian)化學檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)器(qi)，質譜檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)器(qi)等。
氣相色譜儀的構造
氣(qi)相色譜儀(yi)的(de)基本構造有兩部分，即分析單元和顯示(shi)單元。前者(zhe)主要包(bao)括(kuo)起源及(ji)控制(zhi)計量裝(zhuang)置﹑進(jin)樣裝(zhuang)置﹑恒溫器(qi)和色譜柱(zhu)。后者(zhe)主要包(bao)括(kuo)檢定(ding)(ding)器(qi)和自動記錄儀(yi)。色譜柱(zhu)（包(bao)括(kuo)固定(ding)(ding)相）和檢定(ding)(ding)器(qi)是氣(qi)相色譜儀(yi)的(de)核心(xin)部件。
(1）操作要點
1.參(can)照所(suo)屬儀器的說明書(shu)擺放好儀器，將(jiang)有關插頭對(dui)號入座，接地線要牢固接地。
2.將層析柱接入氣(qi)路，檢查(cha)氣(qi)路是否漏(lou)氣(qi)，熟(shu)悉高壓氣(qi)瓶的用法；開總壓閥(fa)(fa)－>調節減(jian)壓閥(fa)(fa)（使壓力為2×10Pa）－>調節穩(wen)壓閥(fa)(fa)﹑針形閥(fa)(fa)，使載氣(qi)流速達到所需(xu)要求。
3.加熱層析柱至所需溫度（波動值<0.5℃)。加熱進樣器，使其溫度稍高于樣品組分的最高沸點。加熱檢定器，使其溫度與柱溫相同或稍高，切勿低于柱溫，以防樣品氣冷凝污染鑒定器(qi)。
4.打開檢定器溫壓開關，開動記錄儀放大部件（對氫火焰離子化檢定器是啟動直流放(fang)大器）。調(diao)節檢(jian)定器，使基線(xian)穩定，定好零點，即可開始進樣分析。
5.樣(yang)品為液體(ti)時(shi)，可直(zhi)接用微量(liang)注射(she)器(qi)由進(jin)樣(yang)口注入，若樣(yang)品為氣體(ti)時(shi)，即可用氣體(ti)六通閥(fa)或直(zhi)接用注射(she)器(qi)進(jin)樣(yang)。
?(2）條件的選擇
在選好色譜(pu)柱的前提下(xia)，還應注(zhu)意下(xia)述各(ge)點：
1.載(zai)氣流速。用氫作(zuo)載(zai)氣時，一般(ban)填(tian)充柱之載(zai)氣流速為5～10厘米(mi)/秒的線(xian)性速度。適當的流速，有利(li)于提高分(fen)辨率。
2.柱溫。通常采用與樣品平均沸點相等或高出10度的柱溫為宜。但是，在氣液色譜中，流動相以恒溫進入色譜柱時，將使相似化合物早餾出峰互相重疊，晚餾出峰寬度增加。若改為單階梯式或多(duo)階(jie)梯式線性程序升溫方式，則可大大提高(gao)其分(fen)辨率(lv)。在選擇(ze)初步（化合物中最低沸(fei)點(dian)）升溫速率(lv)（0.5～6℃/分(fen))和最終溫度(du)（化合物中最高(gao)沸(fei)點(dian)，但(dan)不(bu)高(gao)于固定相的(de)沸(fei)點(dian)）的(de)基礎(chu)上，經過試驗(yan)就(jiu)可找出(chu)與理想分辨率有關(guan)的柱(zhu)溫。
3.進樣的體積與速度。普通填充柱的氣體樣品進樣量為0.1～1毫升，液體樣品為0.1～2毫升。進樣體積過大，會使峰形扁平甚至重疊，有時還會出現畸形峰，不利于測量面積。此外，氫火焰離(li)子化檢定器的(de)進樣(yang)量應比熱導池檢定器小。至(zhi)于(yu)進樣(yang)速度，原則(ze)上要求越(yue)快越(yue)好，這樣(yang)可提高(gao)分離(li)效(xiao)果(guo)，降低進樣(yang)誤差。
高(gao)效液(ye)相色譜(pu)（HighPerformanceLiquidChromatography簡稱(cheng)HPLC）又稱(cheng)高(gao)速(su)或高(gao)壓液(ye)相色譜(pu)。該方法是吸收了普(pu)通液(ye)相層(ceng)析和(he)(he)氣(qi)相色譜(pu)的(de)(de)(de)優(you)點，經過適(shi)當改進(jin)發展(zhan)起來的(de)(de)(de)。它既有(you)普(pu)通液(ye)相層(ceng)析的(de)(de)(de)功能（可在常(chang)溫下(xia)分(fen)離制備水溶性的(de)(de)(de)物(wu)質），又有(you)氣(qi)相色譜(pu)的(de)(de)(de)特點（即(ji)高(gao)壓，高(gao)速(su)，高(gao)分(fen)辨率和(he)(he)高(gao)靈敏度）；它不僅適(shi)應于很多不易揮發，難熱分(fen)解物(wu)質的(de)(de)(de)定性和(he)(he)定量分(fen)析，而且(qie)也適(shi)用(yong)于上述物(wu)質的(de)(de)(de)制備和(he)(he)分(fen)離。
高效液相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜按其固定相(xiang)(xiang)的(de)性(xing)質可分為高效凝(ning)膠色(se)(se)譜，疏(shu)水性(xing)高效液相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜，反相(xiang)(xiang)高效液相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜高效離子交換液相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜，高效親(qin)和(he)液相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜以及高效聚焦(jiao)液相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜等類型(xing)。用(yong)不(bu)同(tong)類型(xing)的(de)高效液相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜分離或分析各種(zhong)化(hua)合(he)物的(de)原理基(ji)本上(shang)與相(xiang)(xiang)對(dui)應的(de)普(pu)通液相(xiang)(xiang)層析的(de)原理相(xiang)(xiang)似。其不(bu)同(tong)之處是高效液相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜靈敏，快速，分辨率高，重復性(xing)好(hao)，且須在色(se)(se)譜儀(yi)中進行。
離子色(se)(se)譜(pu)是高效液(ye)相(xiang)色(se)(se)譜(pu)的一種，是分析(xi)陰陽離子的一種液(ye)相(xiang)色(se)(se)譜(pu)方法，該(gai)方法具有選(xuan)擇(ze)性好、靈敏(min)、快速、簡便(bian)等優點，并且可以(yi)同時測(ce)定多(duo)種組(zu)分。
通常(chang)情況下(xia)，離子(zi)色譜可以分為三(san)種類型(xing)：離子(zi)交換色譜、離子(zi)排斥色譜、離子(zi)對色譜。
離子(zi)(zi)交換色譜以離子(zi)(zi)間(jian)作用力不同(tong)為(wei)原理，主(zhu)要用于有機(ji)(ji)和無(wu)機(ji)(ji)陰、陽離子(zi)(zi)的分離。
離子排(pai)斥色譜基于Donnan排(pai)斥作(zuo)用(yong)，是(shi)利用(yong)溶質(zhi)和(he)固定相之間的(de)非離子性相互作(zuo)用(yong)進行分離的(de)。它主要用(yong)于無機(ji)(ji)弱酸(suan)和(he)有(you)機(ji)(ji)酸(suan)的(de)分離，也可(ke)以用(yong)于醇類(lei)(lei)、醛(quan)類(lei)(lei)、氨(an)基酸(suan)和(he)糖類(lei)(lei)的(de)分離。
離子對色譜的分離機(ji)理是(shi)吸附、分離的選擇性(xing)主(zhu)要由(you)流動相決定(ding)。
該(gai)方法(fa)主要用(yong)于表面活性陰離(li)子(zi)和陽(yang)離(li)子(zi)以及金屬絡合物的分離(li)。
下面我們(men)以離子(zi)交(jiao)換(huan)色(se)譜為例簡單介紹(shao)一下離子(zi)色(se)譜的原理。
一事實上(shang)酸(suan)度下，樣品離子(zi)(zi)和固(gu)定相基團(tuan)之間存在(zai)著相互作(zuo)用，對于不(bu)同(tong)的(de)(de)(de)(de)樣品離子(zi)(zi)，這種作(zuo)用的(de)(de)(de)(de)大小(xiao)是(shi)不(bu)同(tong)的(de)(de)(de)(de)。因此在(zai)隨流動相通過色譜(pu)柱的(de)(de)(de)(de)過程中，作(zuo)用力強的(de)(de)(de)(de)樣品離子(zi)(zi)保(bao)留時間要比作(zuo)用力弱的(de)(de)(de)(de)離子(zi)(zi)長(chang)，經(jing)過一段時間后，就可以(yi)實現(xian)樣品的(de)(de)(de)(de)分離。
以陰(yin)離(li)(li)子的分離(li)(li)為例(li)說明一下(xia)離(li)(li)子色譜的分離(li)(li)過(guo)程(cheng)。
在(zai)色譜柱中，填充了(le)無數的(de)離(li)(li)子(zi)(zi)交換劑作為離(li)(li)子(zi)(zi)分離(li)(li)的(de)固定(ding)相(xiang)，固定(ding)相(xiang)上吸附了(le)很多(duo)陽離(li)(li)子(zi)(zi)。
充滿色譜柱(zhu)的(de)流動(dong)相為某種鹽的(de)溶(rong)液，在沒(mei)有樣品進入(ru)時，流動(dong)相中的(de)陰離子(zi)和固定相的(de)陽離子(zi)保持(chi)平衡。
樣品中含有兩種待分(fen)離陰離子，基中體(ti)積較(jiao)大(da)的A與固定相的正電(dian)荷作(zuo)用(yong)力較(jiao)大(da)，而(er)體(ti)積較(jiao)小(xiao)的B作(zuo)用(yong)力小(xiao)。
在樣品進入色(se)譜柱(zhu)后，陰(yin)(yin)離(li)(li)子(zi)A、B與流(liu)動(dong)(dong)相陰(yin)(yin)離(li)(li)子(zi)一同前進，三種離(li)(li)子(zi)不斷的交替占據與固(gu)定相陽(yang)離(li)(li)子(zi)相吸的位置(zhi)；樣品陰(yin)(yin)離(li)(li)子(zi)A與正(zheng)電荷的作用(yong)力較大因(yin)而移(yi)動(dong)(dong)較慢，而B移(yi)動(dong)(dong)較快，從而實現了分離(li)(li)。
最終，因為流(liu)動相陰離子(zi)的(de)(de)數量(liang)有(you)絕對(dui)優勢(shi)，所以樣品陰離子(zi)A、B都分流(liu)出色譜(pu)(pu)柱，對(dui)在(zai)不同時間流(liu)出色譜(pu)(pu)柱，對(dui)在(zai)不同時間流(liu)出色譜(pu)(pu)柱的(de)(de)樣品離子(zi)進行檢測(ce)，就可以知道樣品組分的(de)(de)種類(lei)與含(han)量(liang)。
離子色(se)譜儀的(de)典(dian)型結構由輸液(ye)泵(beng)、進樣閥(fa)、色(se)譜柱、抑制柱、檢測器(qi)和(he)數據處理系統組成。
輸液泵
雙頭往復泵是非常常用的(de)一(yi)種輸(shu)液泵，它(ta)由電機帶動(dong)(dong)凸輪轉動(dong)(dong)，兩(liang)個(ge)柱塞(sai)桿往復運(yun)動(dong)(dong)，吸入排出流動(dong)(dong)相。兩(liang)個(ge)柱塞(sai)桿的(de)移動(dong)(dong)有一(yi)個(ge)時間差(cha)，正好補償流動(dong)(dong)相輸(shu)出的(de)脈沖，因而流速相當(dang)平穩。
進樣閥
量常用的(de)進樣方法是六通閥(fa)進樣，這種方法進樣量的(de)可變(bian)范圍大，耐高壓，而且易于自動化。
色譜柱
分離系(xi)統的(de)主(zhu)(zhu)要(yao)元件是色譜(pu)(pu)(pu)柱(zhu)，它(ta)是色譜(pu)(pu)(pu)分離過(guo)程(cheng)中存放固(gu)定相的(de)場所。離子(zi)色譜(pu)(pu)(pu)儀的(de)柱(zhu)填(tian)料是離子(zi)色譜(pu)(pu)(pu)儀研究的(de)熱點，是離子(zi)色譜(pu)(pu)(pu)儀發展的(de)主(zhu)(zhu)要(yao)推(tui)動力，發展很快。
離子(zi)檢(jian)測(ce)器(qi)(qi)分為兩大類，即電化(hua)學檢(jian)測(ce)器(qi)(qi)和(he)(he)光(guang)學檢(jian)測(ce)器(qi)(qi)，電化(hua)學檢(jian)測(ce)器(qi)(qi)包(bao)括電導、直流安(an)培(pei)(pei)、脈沖安(an)培(pei)(pei)和(he)(he)積分安(an)培(pei)(pei)等(deng)，而光(guang)學檢(jian)測(ce)器(qi)(qi)包(bao)括紫(zi)外、可見光(guang)和(he)(he)熒光(guang)檢(jian)測(ce)器(qi)(qi)。
其中電導(dao)檢(jian)測器(qi)是離子色譜(pu)最重要的(de)檢(jian)測器(qi)，現簡單介紹如(ru)下。
所有的離子(zi)化(hua)合(he)物（有機離子(zi)、無機離子(zi)、強酸和(he)強堿）以及可(ke)被解(jie)離的化(hua)合(he)物（弱酸和(he)弱堿）的水(shui)溶液都能(neng)夠導(dao)電(dian)。電(dian)導(dao)檢測器就是以離子(zi)色譜流動相(xiang)中導(dao)電(dian)的變化(hua)作為定量的依據(ju)的。
電(dian)導檢測器(qi)的(de)結構(gou)比較簡單(dan)、檢測池在(zai)兩個電(dian)極中間，當在(zai)電(dian)極上加上電(dian)壓(ya)時(shi)，檢測池內溶液中的(de)離(li)(li)子(zi)就(jiu)會產生運(yun)動。通過對運(yun)動產生的(de)電(dian)流的(de)測量就(jiu)可以知(zhi)道溶液中離(li)(li)子(zi)的(de)濃度。
而如(ru)果流動相(xiang)的(de)導(dao)電性很高，而樣(yang)(yang)品的(de)導(dao)電性較低，那么電導(dao)檢測(ce)器就不會(hui)有效的(de)檢測(ce)出(chu)樣(yang)(yang)品離子的(de)濃度。
因(yin)此(ci)，人們在色譜柱和(he)(he)電導(dao)檢測器(qi)之(zhi)間加上了一個抑制柱，它可以改(gai)變流(liu)動相(xiang)和(he)(he)樣品的導(dao)電性，從(cong)而使樣品離子(zi)得到靈(ling)敏的檢測。
目前色譜儀正朝著微型化、快速、高通量、多功能、和其他儀器聯用等方向發展，維修要點微機控制電路板
作(zuo)用：柱(zhu)箱溫度(du)(du)(du)，進樣(yang)器溫度(du)(du)(du)，控制器溫度(du)(du)(du)的(de)(de)(de)控制，FID的(de)(de)(de)點火/高壓切換，分(fen)流(liu)/不分(fen)流(liu)的(de)(de)(de)切換，柱(zhu)箱后開(kai)門角度(du)(du)(du)的(de)(de)(de)控制，信號的(de)(de)(de)衰減，為檢測(ce)器電路(lu)板提供電源(yuan)。
原理：溫度傳感器(qi)（鉑電(dian)(dian)阻RΩ=100Ω/0℃）的(de)物(wu)理量（隨(sui)溫度變化的(de)電(dian)(dian)阻值）通過(guo)(guo)印板(ban)(ban)右(you)上方的(de)線(xian)性化電(dian)(dian)路，轉為模擬量（與溫度變化成線(xian)性關(guan)系的(de)電(dian)(dian)壓量值），經VFC轉為數字信號(hao)，由計算(suan)機(ji)進行運算(suan)處理，通過(guo)(guo)印板(ban)(ban)右(you)下(xia)方的(de)控(kong)制(zhi)元件，對(dui)加熱元件進行控(kong)制(zhi)。通過(guo)(guo)J300，J301，JP4插座連接線(xian)，對(dui)點火、后(hou)開門(men)，分流/不分流，繼電(dian)(dian)器(qi)的(de)切換控(kong)制(zhi)。
判斷：
1.用萬用表（直(zhi)流檔）分別(bie)測量J1的1號腳、
3號(hao)腳(jiao)、6號(hao)腳(jiao)、8號(hao)腳(jiao)、11號(hao)腳(jiao)、13號(hao)腳(jiao)對
地電壓分別為+60V、+5V、+15V、-15v、+18V、-18V。
2.用萬用表（直流檔）測量JP4插座與5號腳對地電壓應為+24V。
3.用(yong)萬(wan)用(yong)表(biao)（直流檔）,測量(liang)SIGNALI插座(zuo)的
1號腳對(dui)地電(dian)(dian)壓，調節調零電(dian)(dian)位器（對(dui)應J1的放(fang)大印板）使該點(dian)的電(dian)(dian)壓為+0.5V。然后按功能鍵[ATTA]，再分別按照順序按數字鍵[1]~[8]，在SIGNALI插座的1號腳，對(dui)地電(dian)(dian)壓分別為+0.2500V~+1.96mV。
