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大(da)腸桿(gan)菌(jun)（Escherichia coli），又(you)叫(jiao)大(da)腸埃希氏菌(jun)，Escherich在1885年(nian)發現的(de)。大(da)腸桿(gan)菌(jun)是條件(jian)致病(bing)菌(jun)，在一定條件(jian)下可以引起人和多(duo)(duo)種動物發生(sheng)胃腸道感染或(huo)尿道等多(duo)(duo)種局部組織器官(guan)感染。

簡介

大(da)腸桿(gan)菌是(shi)動(dong)物(wu)腸道(dao)中(zhong)的(de)正常(chang)寄(ji)居菌，其中(zhong)很小(xiao)一部(bu)分在一定條件下引起(qi)疾病(bing)。大(da)腸桿(gan)菌的(de)血(xue)清型(xing)能夠引起(qi)人體或動(dong)物(wu)胃(wei)腸道(dao)感(gan)染(ran)(ran)，主要是(shi)由特定的(de)菌毛抗原、致病(bing)性毒(du)素等(deng)感(gan)染(ran)(ran)引起(qi)的(de)，除胃(wei)腸道(dao)感(gan)染(ran)(ran)以(yi)外(wai)，還會引起(qi)尿道(dao)感(gan)染(ran)(ran)、關節炎(yan)、腦膜炎(yan)以(yi)及敗(bai)血(xue)型(xing)感(gan)染(ran)(ran)等(deng)。

種類

按致病作用

目前國際(ji)公認(ren)的(de)(de)(de)分類(lei)(lei)，主(zhu)要有(you)六個種類(lei)(lei)的(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)，即能夠致使胃腸(chang)(chang)(chang)道(dao)(dao)感染的(de)(de)(de)腸(chang)(chang)(chang)道(dao)(dao)致病性(xing)(xing)的(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)（EPEC）、腸(chang)(chang)(chang)道(dao)(dao)產毒(du)素(su)性(xing)(xing)的(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)（ETEC）、腸(chang)(chang)(chang)道(dao)(dao)侵(qin)襲(xi)性(xing)(xing)的(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)（EIEC）、腸(chang)(chang)(chang)道(dao)(dao)出血性(xing)(xing)的(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)（EHEC）、腸(chang)(chang)(chang)集聚性(xing)(xing)的(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)（EAEC）以及(ji)近年來發現的(de)(de)(de)腸(chang)(chang)(chang)產志(zhi)賀樣毒(du)素(su)同(tong)時具有(you)一定(ding)侵(qin)襲(xi)力的(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)（ESIES），另外，還有(you)能夠致使尿道(dao)(dao)感染的(de)(de)(de)尿道(dao)(dao)致病性(xing)(xing)的(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)（UPEC），以及(ji)最新命名(ming)的(de)(de)(de)腸(chang)(chang)(chang)道(dao)(dao)集聚性(xing)(xing)的(de)(de)(de)黏附大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)（EAggEC）。

按溶血性

根據大腸桿(gan)菌的(de)(de)感染性(xing)(xing)狀(zhuang)能否產(chan)生溶(rong)血素和有(you)無溶(rong)血的(de)(de)能力，可將大腸桿(gan)菌分為兩大類：即溶(rong)血性(xing)(xing)的(de)(de)大腸桿(gan)菌和非溶(rong)血性(xing)(xing)的(de)(de)大腸桿(gan)菌。

按產腸毒素性

根據大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)在感(gan)染過程中(zhong)能(neng)否(fou)產(chan)生腸(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)的能(neng)力(li)，可(ke)將(jiang)大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)分(fen)(fen)為(wei)兩大(da)(da)(da)類：即產(chan)腸(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)性(xing)(xing)的大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)和非產(chan)腸(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)性(xing)(xing)的大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)。產(chan)腸(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)性(xing)(xing)的大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)是人和多種動物的任何感(gan)染性(xing)(xing)腹瀉的重要病原(yuan)，鑒定產(chan)腸(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)性(xing)(xing)的大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)主要是測定所分(fen)(fen)離(li)大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)分(fen)(fen)泌(mi)的腸(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)的類型(xing)。除此之(zhi)外，也可(ke)以根據大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)產(chan)生腸(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)的能(neng)力(li)，結合(he)其對不同腸(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)的敏感(gan)性(xing)(xing)，而(er)將(jiang)大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)分(fen)(fen)型(xing)，稱為(wei)腸(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)型(xing)。

生物學特征

理化特性

大腸桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)是短(duan)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)，兩端呈(cheng)鈍圓形(xing)，革蘭(lan)陰性。有時因環境不(bu)同，個別菌(jun)(jun)(jun)(jun)體出現(xian)近似(si)球桿(gan)(gan)狀(zhuang)或長絲狀(zhuang)；大腸桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)多(duo)是單一(yi)或兩個存在，但不(bu)會(hui)排(pai)列呈(cheng)長鏈形(xing)狀(zhuang)；大多(duo)數(shu)的大腸桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)菌(jun)(jun)(jun)(jun)株(zhu)(zhu)具有莢膜(mo)(mo)或微莢膜(mo)(mo)結(jie)構，但是不(bu)能形(xing)成芽孢；多(duo)數(shu)大腸桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)菌(jun)(jun)(jun)(jun)株(zhu)(zhu)生長有菌(jun)(jun)(jun)(jun)毛，其(qi)中一(yi)些菌(jun)(jun)(jun)(jun)毛是針對宿(su)主及其(qi)他的一(yi)些組織(zhi)或細胞(bao)具有黏(nian)附作用(yong)的宿(su)主特(te)異(yi)性菌(jun)(jun)(jun)(jun)毛。

生化特性

大(da)(da)腸(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)的生(sheng)化(hua)代謝非(fei)常(chang)活躍(yue)。大(da)(da)腸(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)可以(yi)(yi)發酵(jiao)葡(pu)萄糖(tang)產(chan)(chan)酸、產(chan)(chan)氣，個別菌(jun)株不產(chan)(chan)氣，大(da)(da)腸(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)還(huan)能(neng)發酵(jiao)多(duo)種碳水化(hua)合物，也可以(yi)(yi)利用(yong)多(duo)種有機酸鹽。大(da)(da)腸(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)在常(chang)用(yong)的生(sheng)化(hua)特性檢(jian)測項目中(zhong)，甲基紅試驗呈(cheng)陽性，吲哚產(chan)(chan)生(sheng)和(he)乳糖(tang)發酵(jiao)是(shi)陽性（個別菌(jun)株表(biao)現(xian)(xian)陰(yin)(yin)性），維(wei)-培(pei)試驗是(shi)陰(yin)(yin)性，尿素(su)酶(mei)和(he)檸檬酸鹽利用(yong)呈(cheng)陰(yin)(yin)性（極個別菌(jun)株表(biao)現(xian)(xian)陽性），硝酸鹽還(huan)原(yuan)試驗表(biao)現(xian)(xian)陽性，氧(yang)化(hua)酶(mei)表(biao)現(xian)(xian)陰(yin)(yin)性，氧(yang)化(hua)-發酵(jiao)試驗表(biao)現(xian)(xian)為(wei)F型。

致病作用特性

對人和多種動物(wu)(wu)來講(jiang)，由(you)于(yu)病原大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)常常傾向具有一定的(de)(de)宿主特異性，對人有致病作用(yong)的(de)(de)菌(jun)(jun)(jun)株常常是(shi)很少(shao)引(yin)起動物(wu)(wu)的(de)(de)感染(ran)，反之亦然(ran)，據此可將病原大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)大(da)(da)(da)致上將其劃分為兩(liang)種：即人病原大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)和動物(wu)(wu)病原大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)。動物(wu)(wu)的(de)(de)致瀉(xie)性大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)已被明確的(de)(de)特征(zheng)主要(yao)是(shi)類似于(yu)ETEC的(de)(de)菌(jun)(jun)(jun)株。UPEC是(shi)一群能夠引(yin)起人的(de)(de)尿道(dao)感染(ran)最常見的(de)(de)病原大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)。尿道(dao)感染(ran)是(shi)很少(shao)獨(du)立存(cun)在于(yu)動物(wu)(wu)的(de)(de)大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)病中的(de)(de)感染(ran)癥狀(zhuang)。

流行病學特征

區域分布

大腸(chang)桿菌(jun)的(de)(de)(de)發(fa)生與流行感染是(shi)呈(cheng)世界性分(fen)布(bu)的(de)(de)(de)，但大腸(chang)桿菌(jun)的(de)(de)(de)流行性還是(shi)存(cun)在一定的(de)(de)(de)區(qu)域分(fen)布(bu)特(te)征(zheng)的(de)(de)(de)。這些區(qu)域分(fen)布(bu)的(de)(de)(de)特(te)征(zheng)在人(ren)的(de)(de)(de)大腸(chang)桿菌(jun)感染中表現(xian)的(de)(de)(de)更明顯些，最大的(de)(de)(de)可能(neng)是(shi)因(yin)為(wei)與區(qu)域間經濟條件(jian)和社會衛(wei)生狀(zhuang)況等(deng)有一定聯(lian)系的(de)(de)(de)。

易感宿主

動(dong)(dong)物(wu)的大腸桿菌(jun)病可以發生在多種家(jia)畜、家(jia)禽、養殖經濟(ji)動(dong)(dong)物(wu)以及其(qi)他(ta)陸生動(dong)(dong)物(wu)和某些(xie)水產動(dong)(dong)物(wu)，其(qi)中(zhong)豬和雞是最為易感的，而且危害(hai)十分嚴重。

發病季節

大腸(chang)桿(gan)菌在(zai)動(dong)物群體(ti)間的感(gan)染的季節發(fa)病特征不是(shi)非常明(ming)顯。在(zai)一年(nian)四季豬(zhu)均可(ke)發(fa)生(sheng)(sheng)，但只要是(shi)發(fa)生(sheng)(sheng)在(zai)豬(zhu)的產仔期至(zhi)斷乳期，這(zhe)與豬(zhu)的易(yi)感(gan)日齡(ling)相關聯。犢牛和羔羊多發(fa)生(sheng)(sheng)于冬(dong)季和春(chun)季。其他動(dong)物的大腸(chang)桿(gan)菌感(gan)染在(zai)常年(nian)均有發(fa)生(sheng)(sheng)，季節性不明(ming)顯。

傳染源與傳播途徑

人的(de)(de)大腸(chang)桿(gan)(gan)菌病(bing)(bing)的(de)(de)主要傳染源是因為在(zai)胃腸(chang)道感染患者的(de)(de)糞便中有(you)大量大腸(chang)桿(gan)(gan)菌病(bing)(bing)原菌排至體外構成(cheng)的(de)(de)。大腸(chang)桿(gan)(gan)菌在(zai)人之間的(de)(de)傳播途(tu)徑(jing)多是通過糞-口這一傳播途(tu)徑(jing)，在(zai)一定的(de)(de)條(tiao)件下(xia)可(ke)引起(qi)大腸(chang)桿(gan)(gan)菌病(bing)(bing)散(san)發或(huo)流行。

檢測方法

食(shi)品中(zhong)的大腸桿(gan)菌進行(xing)快速(su)準確的檢(jian)(jian)測(ce)已成為(wei)了(le)人們經常關注的問題(ti)。下面闡述食(shi)品中(zhong)的大腸桿(gan)菌檢(jian)(jian)測(ce)的方(fang)法(fa)及分析(xi)。

發酵法

這(zhe)種方(fang)(fang)法主(zhu)要(yao)(yao)是在(zai)44.5℃下(xia)的培(pei)(pei)養(yang)(yang)基上進(jin)行(xing)(xing)大腸桿菌(jun)的培(pei)(pei)養(yang)(yang)，該培(pei)(pei)養(yang)(yang)基含有熒光(guang)底物，需要(yao)(yao)培(pei)(pei)養(yang)(yang)24h。然后對熒光(guang)底物進(jin)行(xing)(xing)釋放，需要(yao)(yao)采用葡萄糖(tang)醛酸進(jin)行(xing)(xing)，讓培(pei)(pei)養(yang)(yang)基能夠在(zai)紫(zi)外光(guang)的照(zhao)射下(xia)發出熒光(guang)。采用這(zhe)樣的方(fang)(fang)式方(fang)(fang)法，還(huan)可(ke)以進(jin)行(xing)(xing)統計(ji)學估(gu)計(ji)原(yuan)來樣品中的菌(jun)落(luo)。主(zhu)要(yao)(yao)步驟(zou)包括發酵、分(fen)離培(pei)(pei)養(yang)(yang)、二(er)次發酵、顯(xian)微(wei)鏡(jing)觀察等。

濾膜法

該方(fang)法主要過程：加入10mL左右的(de)無(wu)菌(jun)水于濾器(qi)中，然后(hou)(hou)摻入一些無(wu)菌(jun)水進行清潔(jie)濾器(qi)的(de)內壁，再進行過濾，將濾膜放在M-FC培養基(ji)中，兩者之間不能夠有氣泡，然后(hou)(hou)進行密封(feng)，存(cun)放溫度為44.5℃，存(cun)放時間約24h，直到大(da)(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)的(de)菌(jun)群(qun)變成(cheng)藍(lan)色(se)或藍(lan)綠色(se)。然后(hou)(hou)記錄(lu)數據，估算每(mei)一單位的(de)水溶(rong)液菌(jun)群(qun)數量(liang)，然后(hou)(hou)進行大(da)(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)量(liang)值的(de)換算。

平板計數法

用(yong)無(wu)菌吸管吸取(qu)稀釋(shi)度(du)樣(yang)品(pin)1mL，該樣(yang)品(pin)與(yu)乳(ru)糖(tang)膽鹽發酵類似，然后(hou)(hou)將其放入無(wu)菌培(pei)養(yang)(yang)皿中(zhong)，再加入溫(wen)度(du)于(yu)45℃下(xia)的(de)CDLJJD顯色培(pei)養(yang)(yang)基中(zhong)10mL的(de)量(liang)，并進行(xing)(xing)培(pei)養(yang)(yang)皿中(zhong)溶(rong)液均勻混合，可以(yi)通(tong)過(guo)快速轉動培(pei)養(yang)(yang)皿的(de)方式，等溶(rong)液凝固以(yi)后(hou)(hou)，加入5mL左(zuo)右(you)，然后(hou)(hou)快速搖晃(huang)培(pei)養(yang)(yang)基，使(shi)其可以(yi)均勻覆蓋平板表面，等其凝固以(yi)后(hou)(hou)，翻(fan)轉培(pei)養(yang)(yang)基，在溫(wen)度(du)37℃中(zhong)培(pei)養(yang)(yang)24h左(zuo)右(you)，然后(hou)(hou)觀(guan)察(cha)其形態，顏(yan)色等變化。除(chu)此之外(wai)，平行(xing)(xing)設置兩(liang)個(ge)稀釋(shi)度(du)培(pei)養(yang)(yang)基，步驟是先稀釋(shi)樣(yang)本(ben)，通(tong)過(guo)稀釋(shi)后(hou)(hou)，微生物可以(yi)分散為單個(ge)細(xi)胞，然后(hou)(hou)進行(xing)(xing)一定環境(jing)條件(jian)下(xia)培(pei)養(yang)(yang)，直(zhi)到其長成菌落為止，然后(hou)(hou)進行(xing)(xing)計算(suan)大腸桿菌的(de)數(shu)量(liang)，通(tong)過(guo)稀釋(shi)度(du)和樣(yang)本(ben)數(shu)量(liang)進行(xing)(xing)計算(suan)。

免疫磁珠法

該分離技術(shu)的(de)(de)主要原理是以磁(ci)珠為(wei)載體(ti)和(he)(he)抗體(ti)，進(jin)(jin)行抗體(ti)和(he)(he)磁(ci)珠的(de)(de)結合，然后通(tong)過磁(ci)力技術(shu)完成(cheng)力學的(de)(de)移動，進(jin)(jin)而分離大(da)(da)腸桿(gan)菌(jun)。與其(qi)他分離細菌(jun)的(de)(de)方(fang)式相比，這樣(yang)的(de)(de)方(fang)式方(fang)法具有一(yi)定的(de)(de)優點，該技術(shu)可以提升樣(yang)本中病原性弧菌(jun)的(de)(de)檢測(ce)成(cheng)功率，并(bing)且免(mian)疫磁(ci)珠技術(shu)可以于不(bu)同(tong)菌(jun)種(zhong)中對不(bu)同(tong)的(de)(de)微生物進(jin)(jin)行處理，進(jin)(jin)而在很(hen)大(da)(da)程度上(shang)提高檢測(ce)效(xiao)率。

自動化儀器檢測法

主要(yao)是運用(yong)免(mian)疫(yi)自動化(hua)分析儀，該技(ji)術產生并(bing)運用(yong)于1970年。隨著科技(ji)的(de)(de)發展和進步(bu)，自動化(hua)儀器檢測技(ji)術應用(yong)非常廣泛(fan)，并(bing)且操作起來非常方便(bian)，可(ke)以(yi)節約(yue)很(hen)多時間，其受干擾的(de)(de)程度較小，可(ke)以(yi)節省(sheng)人(ren)力物力的(de)(de)投(tou)入，也可(ke)以(yi)提高檢測的(de)(de)精確度。在現階段(duan)的(de)(de)發展過(guo)程中，自動酶的(de)(de)免(mian)疫(yi)檢測體系的(de)(de)應用(yong)非常廣泛(fan)。

ATP生物發光法

在(zai)近些(xie)年的(de)發(fa)展過(guo)程中(zhong)(zhong)，生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)發(fa)光(guang)技(ji)術(shu)(shu)應(ying)用(yong)(yong)(yong)很廣泛，是(shi)一種比(bi)較(jiao)快速的(de)檢(jian)測(ce)微生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)的(de)技(ji)術(shu)(shu)。在(zai)活性(xing)細胞(bao)(bao)中(zhong)(zhong)，ATP是(shi)其常(chang)見的(de)能量代謝產，可(ke)(ke)以提(ti)供細胞(bao)(bao)生(sheng)(sheng)(sheng)理(li)活動過(guo)程中(zhong)(zhong)所需的(de)能量。并(bing)且，該(gai)技(ji)術(shu)(shu)可(ke)(ke)以在(zai)生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)體內(nei)可(ke)(ke)以在(zai)一定(ding)范圍內(nei)保持一定(ding)的(de)含量。食品(pin)中(zhong)(zhong)的(de)大腸桿(gan)菌檢(jian)測(ce)技(ji)術(shu)(shu)可(ke)(ke)以采用(yong)(yong)(yong)熒(ying)光(guang)光(guang)度的(de)方(fang)法，因為生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)體發(fa)光(guang)的(de)原因是(shi)有(you)熒(ying)光(guang)素酶的(de)作用(yong)(yong)(yong)，產生(sheng)(sheng)(sheng)了發(fa)光(guang)的(de)效果。該(gai)物(wu)(wu)質來源于北美的(de)螢火蟲體內(nei)，可(ke)(ke)以催化(hua)熒(ying)光(guang)素的(de)氧化(hua)作用(yong)(yong)(yong)，不(bu)過(guo)，該(gai)物(wu)(wu)質性(xing)質不(bu)穩定(ding)，可(ke)(ke)以對熒(ying)光(guang)進行快速分解。另外(wai)，該(gai)檢(jian)測(ce)技(ji)術(shu)(shu)結果獲得過(guo)程是(shi)非常(chang)快的(de)，并(bing)且該(gai)設備攜帶方(fang)便，十分適(shi)用(yong)(yong)(yong)于現場檢(jian)測(ce)。

高溫消毒

可引起(qi)腹瀉的致病(bing)性大腸桿菌(jun)、傷寒桿菌(jun)、霍亂弧菌(jun)等普(pu)通細(xi)菌(jun)繁殖體，80℃熱水需要(yao)5-10分鐘、沸水需要(yao)2-5分鐘才能殺滅。