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大腸桿(gan)菌(jun)（Escherichia coli），又叫大腸埃希氏菌(jun)，Escherich在1885年(nian)發現的。大腸桿(gan)菌(jun)是(shi)條件(jian)致(zhi)病菌(jun)，在一定條件(jian)下可以引起人(ren)和多種動物發生胃腸道感染或尿道等多種局部組織器官(guan)感染。

簡介

大(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)是動(dong)物(wu)腸(chang)道(dao)中(zhong)(zhong)的(de)正常寄(ji)居菌(jun)，其(qi)中(zhong)(zhong)很小一部分在一定(ding)條件下引(yin)(yin)(yin)起(qi)(qi)疾病。大(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)的(de)血(xue)清型能夠(gou)引(yin)(yin)(yin)起(qi)(qi)人體或(huo)動(dong)物(wu)胃腸(chang)道(dao)感(gan)染，主要是由特定(ding)的(de)菌(jun)毛抗(kang)原、致病性毒素等感(gan)染引(yin)(yin)(yin)起(qi)(qi)的(de)，除胃腸(chang)道(dao)感(gan)染以外，還會(hui)引(yin)(yin)(yin)起(qi)(qi)尿道(dao)感(gan)染、關節(jie)炎(yan)、腦膜炎(yan)以及(ji)敗(bai)血(xue)型感(gan)染等。

種類

按致病作用

目前(qian)國際公認的(de)(de)(de)(de)分類(lei)，主要有六(liu)個種類(lei)的(de)(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌，即能夠(gou)致(zhi)使胃腸(chang)(chang)道(dao)感(gan)(gan)染的(de)(de)(de)(de)腸(chang)(chang)道(dao)致(zhi)病(bing)性的(de)(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌（EPEC）、腸(chang)(chang)道(dao)產毒素性的(de)(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌（ETEC）、腸(chang)(chang)道(dao)侵襲性的(de)(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌（EIEC）、腸(chang)(chang)道(dao)出血性的(de)(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌（EHEC）、腸(chang)(chang)集聚(ju)性的(de)(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌（EAEC）以及近年來(lai)發現的(de)(de)(de)(de)腸(chang)(chang)產志賀(he)樣毒素同(tong)時具有一定侵襲力(li)的(de)(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌（ESIES），另(ling)外(wai)，還有能夠(gou)致(zhi)使尿道(dao)感(gan)(gan)染的(de)(de)(de)(de)尿道(dao)致(zhi)病(bing)性的(de)(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌（UPEC），以及最新命名的(de)(de)(de)(de)腸(chang)(chang)道(dao)集聚(ju)性的(de)(de)(de)(de)黏附(fu)大(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌（EAggEC）。

按溶血性

根(gen)據大腸桿(gan)菌(jun)的感(gan)染性(xing)狀(zhuang)能否產生溶(rong)血素和(he)(he)有無溶(rong)血的能力，可將大腸桿(gan)菌(jun)分為(wei)兩大類：即(ji)溶(rong)血性(xing)的大腸桿(gan)菌(jun)和(he)(he)非(fei)溶(rong)血性(xing)的大腸桿(gan)菌(jun)。

按產腸毒素性

根(gen)(gen)據(ju)大(da)(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)在感染(ran)過(guo)程(cheng)中能否(fou)產(chan)生腸(chang)(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)(su)(su)的(de)(de)能力，可將(jiang)大(da)(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)分為兩(liang)大(da)(da)(da)(da)類：即產(chan)腸(chang)(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)(su)(su)性(xing)(xing)的(de)(de)大(da)(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)和(he)(he)非產(chan)腸(chang)(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)(su)(su)性(xing)(xing)的(de)(de)大(da)(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)。產(chan)腸(chang)(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)(su)(su)性(xing)(xing)的(de)(de)大(da)(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)是人和(he)(he)多種動物的(de)(de)任何感染(ran)性(xing)(xing)腹瀉的(de)(de)重要(yao)病(bing)原，鑒定(ding)產(chan)腸(chang)(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)(su)(su)性(xing)(xing)的(de)(de)大(da)(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)主要(yao)是測定(ding)所分離大(da)(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)分泌的(de)(de)腸(chang)(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)(su)(su)的(de)(de)類型(xing)。除(chu)此(ci)之(zhi)外，也可以根(gen)(gen)據(ju)大(da)(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)產(chan)生腸(chang)(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)(su)(su)的(de)(de)能力，結合其(qi)對(dui)不同腸(chang)(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)(su)(su)的(de)(de)敏感性(xing)(xing)，而將(jiang)大(da)(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)分型(xing)，稱為腸(chang)(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)(su)(su)型(xing)。

生物學特征

理化特性

大(da)(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)是短桿(gan)菌(jun)，兩端(duan)呈鈍圓形(xing)，革蘭陰性(xing)。有時因環境(jing)不(bu)同，個別(bie)菌(jun)體出現近似球桿(gan)狀或(huo)長(chang)絲狀；大(da)(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)多(duo)是單一或(huo)兩個存(cun)在，但不(bu)會排列呈長(chang)鏈(lian)形(xing)狀；大(da)(da)多(duo)數(shu)的(de)(de)大(da)(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)菌(jun)株具(ju)有莢(jia)膜(mo)或(huo)微(wei)莢(jia)膜(mo)結構，但是不(bu)能形(xing)成芽孢；多(duo)數(shu)大(da)(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)菌(jun)株生(sheng)長(chang)有菌(jun)毛(mao)，其中一些菌(jun)毛(mao)是針對宿(su)主(zhu)及其他(ta)的(de)(de)一些組織或(huo)細胞具(ju)有黏附作用的(de)(de)宿(su)主(zhu)特(te)異性(xing)菌(jun)毛(mao)。

生化特性

大(da)腸桿菌(jun)(jun)的(de)(de)生化(hua)(hua)代謝(xie)非常(chang)活(huo)躍。大(da)腸桿菌(jun)(jun)可以發(fa)酵(jiao)葡萄糖(tang)產(chan)(chan)酸、產(chan)(chan)氣，個(ge)別菌(jun)(jun)株(zhu)不(bu)產(chan)(chan)氣，大(da)腸桿菌(jun)(jun)還(huan)能發(fa)酵(jiao)多種碳水化(hua)(hua)合物，也(ye)可以利(li)用(yong)多種有機酸鹽(yan)。大(da)腸桿菌(jun)(jun)在常(chang)用(yong)的(de)(de)生化(hua)(hua)特性(xing)(xing)(xing)檢測項目中，甲基(ji)紅試驗(yan)呈陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)，吲哚(duo)產(chan)(chan)生和乳糖(tang)發(fa)酵(jiao)是(shi)陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)（個(ge)別菌(jun)(jun)株(zhu)表(biao)(biao)現(xian)(xian)陰(yin)(yin)性(xing)(xing)(xing)），維-培試驗(yan)是(shi)陰(yin)(yin)性(xing)(xing)(xing)，尿素酶(mei)和檸檬酸鹽(yan)利(li)用(yong)呈陰(yin)(yin)性(xing)(xing)(xing)（極個(ge)別菌(jun)(jun)株(zhu)表(biao)(biao)現(xian)(xian)陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)），硝(xiao)酸鹽(yan)還(huan)原試驗(yan)表(biao)(biao)現(xian)(xian)陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)，氧化(hua)(hua)酶(mei)表(biao)(biao)現(xian)(xian)陰(yin)(yin)性(xing)(xing)(xing)，氧化(hua)(hua)-發(fa)酵(jiao)試驗(yan)表(biao)(biao)現(xian)(xian)為F型。

致病作用特性

對(dui)人(ren)和多(duo)種動(dong)物(wu)來講(jiang)，由于病(bing)原大(da)(da)(da)腸(chang)桿菌(jun)常(chang)常(chang)傾向(xiang)具有一定的(de)宿(su)主特異性，對(dui)人(ren)有致病(bing)作用的(de)菌(jun)株常(chang)常(chang)是很少引(yin)起動(dong)物(wu)的(de)感染(ran)，反之亦(yi)然，據此可將病(bing)原大(da)(da)(da)腸(chang)桿菌(jun)大(da)(da)(da)致上(shang)將其劃(hua)分(fen)為兩種：即(ji)人(ren)病(bing)原大(da)(da)(da)腸(chang)桿菌(jun)和動(dong)物(wu)病(bing)原大(da)(da)(da)腸(chang)桿菌(jun)。動(dong)物(wu)的(de)致瀉性大(da)(da)(da)腸(chang)桿菌(jun)已被明確的(de)特征主要(yao)是類似(si)于ETEC的(de)菌(jun)株。UPEC是一群能夠引(yin)起人(ren)的(de)尿道感染(ran)最(zui)常(chang)見(jian)的(de)病(bing)原大(da)(da)(da)腸(chang)桿菌(jun)。尿道感染(ran)是很少獨(du)立存在于動(dong)物(wu)的(de)大(da)(da)(da)腸(chang)桿菌(jun)病(bing)中的(de)感染(ran)癥狀。

流行病學特征

區域分布

大腸(chang)桿菌的發生與(yu)流行感染是(shi)呈(cheng)世界性(xing)分(fen)布(bu)(bu)的，但大腸(chang)桿菌的流行性(xing)還是(shi)存在(zai)一(yi)定(ding)的區(qu)域分(fen)布(bu)(bu)特征(zheng)的。這些(xie)區(qu)域分(fen)布(bu)(bu)的特征(zheng)在(zai)人(ren)的大腸(chang)桿菌感染中表現的更明顯些(xie)，最大的可能(neng)是(shi)因為(wei)與(yu)區(qu)域間經(jing)濟條件和社(she)會衛(wei)生狀況(kuang)等(deng)有一(yi)定(ding)聯系的。

易感宿主

動物(wu)的(de)大(da)腸(chang)桿菌病可以發(fa)生在多種家(jia)畜、家(jia)禽(qin)、養殖(zhi)經濟(ji)動物(wu)以及其他陸生動物(wu)和(he)某些(xie)水產動物(wu)，其中豬和(he)雞(ji)是最為易感(gan)的(de)，而且危害十分(fen)嚴重。

發病季節

大腸(chang)桿菌(jun)在(zai)(zai)動物群體間(jian)的(de)感染的(de)季(ji)節(jie)發(fa)病(bing)特(te)征不(bu)是非(fei)常明顯。在(zai)(zai)一年四季(ji)豬(zhu)均(jun)可(ke)發(fa)生(sheng)(sheng)(sheng)，但只要是發(fa)生(sheng)(sheng)(sheng)在(zai)(zai)豬(zhu)的(de)產(chan)仔期(qi)至斷乳期(qi)，這與豬(zhu)的(de)易感日齡(ling)相關聯。犢牛和(he)羔羊多發(fa)生(sheng)(sheng)(sheng)于冬季(ji)和(he)春季(ji)。其他(ta)動物的(de)大腸(chang)桿菌(jun)感染在(zai)(zai)常年均(jun)有發(fa)生(sheng)(sheng)(sheng)，季(ji)節(jie)性不(bu)明顯。

傳染源與傳播途徑

人的(de)大(da)腸(chang)桿菌病(bing)(bing)的(de)主要(yao)傳染(ran)源是(shi)因為(wei)在胃腸(chang)道感染(ran)患者的(de)糞(fen)便中有大(da)量大(da)腸(chang)桿菌病(bing)(bing)原菌排至體(ti)外構成(cheng)的(de)。大(da)腸(chang)桿菌在人之間的(de)傳播途徑(jing)多(duo)是(shi)通過糞(fen)-口這一傳播途徑(jing)，在一定(ding)的(de)條件(jian)下可(ke)引起(qi)大(da)腸(chang)桿菌病(bing)(bing)散發或流行(xing)。

檢測方法

食(shi)品中的大腸(chang)桿菌進行快速準確的檢測(ce)(ce)已成為了人(ren)們經(jing)常關注(zhu)的問題。下面闡(chan)述食(shi)品中的大腸(chang)桿菌檢測(ce)(ce)的方法及分(fen)析。

發酵法

這種方(fang)(fang)法(fa)(fa)主要(yao)是在(zai)44.5℃下的培(pei)養(yang)(yang)(yang)基上(shang)進行(xing)大腸(chang)桿菌的培(pei)養(yang)(yang)(yang)，該培(pei)養(yang)(yang)(yang)基含有(you)熒光底物，需(xu)要(yao)培(pei)養(yang)(yang)(yang)24h。然(ran)后對熒光底物進行(xing)釋放，需(xu)要(yao)采(cai)用(yong)葡萄糖(tang)醛酸進行(xing)，讓培(pei)養(yang)(yang)(yang)基能夠在(zai)紫外光的照射下發(fa)出熒光。采(cai)用(yong)這樣的方(fang)(fang)式方(fang)(fang)法(fa)(fa)，還可(ke)以進行(xing)統計(ji)學(xue)估計(ji)原來樣品中的菌落(luo)。主要(yao)步(bu)驟(zou)包(bao)括發(fa)酵、分離培(pei)養(yang)(yang)(yang)、二次發(fa)酵、顯微鏡觀(guan)察等。

濾膜法

該方法主要過程：加入10mL左(zuo)右(you)的(de)無(wu)菌(jun)水(shui)于濾器(qi)中，然(ran)后(hou)(hou)(hou)摻入一些無(wu)菌(jun)水(shui)進(jin)(jin)行(xing)清潔濾器(qi)的(de)內壁，再進(jin)(jin)行(xing)過濾，將(jiang)濾膜放(fang)(fang)在M-FC培養基中，兩者之間不能(neng)夠有氣泡，然(ran)后(hou)(hou)(hou)進(jin)(jin)行(xing)密封，存(cun)放(fang)(fang)溫度為44.5℃，存(cun)放(fang)(fang)時間約(yue)24h，直到大腸桿菌(jun)的(de)菌(jun)群變成藍色或(huo)藍綠色。然(ran)后(hou)(hou)(hou)記錄(lu)數據，估(gu)算每一單(dan)位(wei)的(de)水(shui)溶(rong)液(ye)菌(jun)群數量(liang)，然(ran)后(hou)(hou)(hou)進(jin)(jin)行(xing)大腸桿菌(jun)量(liang)值的(de)換算。

平板計數法

用無菌(jun)吸(xi)管(guan)吸(xi)取稀(xi)釋(shi)(shi)度樣(yang)品(pin)1mL，該樣(yang)品(pin)與乳糖膽鹽(yan)發酵類似(si)，然(ran)(ran)后(hou)(hou)將其(qi)放(fang)入(ru)無菌(jun)培(pei)(pei)養(yang)(yang)皿(min)(min)中(zhong)(zhong)，再加入(ru)溫(wen)度于45℃下的(de)CDLJJD顯(xian)色培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)中(zhong)(zhong)10mL的(de)量，并進(jin)(jin)行(xing)(xing)(xing)培(pei)(pei)養(yang)(yang)皿(min)(min)中(zhong)(zhong)溶液均(jun)勻混合，可(ke)以(yi)(yi)通(tong)過(guo)快速轉(zhuan)動培(pei)(pei)養(yang)(yang)皿(min)(min)的(de)方(fang)式，等(deng)溶液凝固(gu)以(yi)(yi)后(hou)(hou)，加入(ru)5mL左右，然(ran)(ran)后(hou)(hou)快速搖晃培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)，使(shi)其(qi)可(ke)以(yi)(yi)均(jun)勻覆(fu)蓋(gai)平板表面，等(deng)其(qi)凝固(gu)以(yi)(yi)后(hou)(hou)，翻轉(zhuan)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)，在溫(wen)度37℃中(zhong)(zhong)培(pei)(pei)養(yang)(yang)24h左右，然(ran)(ran)后(hou)(hou)觀察其(qi)形態，顏色等(deng)變(bian)化。除此之(zhi)外(wai)，平行(xing)(xing)(xing)設(she)置兩個稀(xi)釋(shi)(shi)度培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)，步驟是先稀(xi)釋(shi)(shi)樣(yang)本，通(tong)過(guo)稀(xi)釋(shi)(shi)后(hou)(hou)，微生物可(ke)以(yi)(yi)分散(san)為(wei)(wei)單個細(xi)胞，然(ran)(ran)后(hou)(hou)進(jin)(jin)行(xing)(xing)(xing)一定環境條件下培(pei)(pei)養(yang)(yang)，直到其(qi)長成菌(jun)落為(wei)(wei)止，然(ran)(ran)后(hou)(hou)進(jin)(jin)行(xing)(xing)(xing)計(ji)(ji)算大腸桿菌(jun)的(de)數量，通(tong)過(guo)稀(xi)釋(shi)(shi)度和樣(yang)本數量進(jin)(jin)行(xing)(xing)(xing)計(ji)(ji)算。

免疫磁珠法

該(gai)分離技(ji)術的(de)(de)(de)主要原(yuan)理是以磁(ci)珠(zhu)(zhu)為載體和(he)抗(kang)體，進(jin)行抗(kang)體和(he)磁(ci)珠(zhu)(zhu)的(de)(de)(de)結合，然(ran)后通(tong)過磁(ci)力(li)技(ji)術完(wan)成力(li)學(xue)的(de)(de)(de)移動，進(jin)而(er)分離大(da)腸桿菌。與其他分離細菌的(de)(de)(de)方(fang)式相比，這樣(yang)的(de)(de)(de)方(fang)式方(fang)法具有一定的(de)(de)(de)優點，該(gai)技(ji)術可以提升樣(yang)本中病原(yuan)性(xing)弧(hu)菌的(de)(de)(de)檢測成功率，并且免疫磁(ci)珠(zhu)(zhu)技(ji)術可以于不(bu)(bu)同菌種中對不(bu)(bu)同的(de)(de)(de)微生物進(jin)行處(chu)理，進(jin)而(er)在很大(da)程度上提高(gao)檢測效率。

自動化儀器檢測法

主要是運(yun)(yun)用(yong)免疫自動(dong)化分析儀，該(gai)技(ji)術產生并(bing)運(yun)(yun)用(yong)于1970年。隨著科技(ji)的(de)(de)發展和進步(bu)，自動(dong)化儀器檢測技(ji)術應(ying)用(yong)非常(chang)廣泛(fan)，并(bing)且操作(zuo)起來(lai)非常(chang)方便，可以(yi)節(jie)約很多時間，其受干擾的(de)(de)程(cheng)度較小，可以(yi)節(jie)省(sheng)人力(li)物力(li)的(de)(de)投入，也可以(yi)提高檢測的(de)(de)精確(que)度。在(zai)現階段的(de)(de)發展過程(cheng)中，自動(dong)酶的(de)(de)免疫檢測體系的(de)(de)應(ying)用(yong)非常(chang)廣泛(fan)。

ATP生物發光法

在(zai)近些年的(de)(de)(de)發(fa)展過程中(zhong)，生(sheng)物發(fa)光(guang)技(ji)(ji)(ji)術(shu)(shu)應用很廣(guang)泛，是(shi)(shi)一種比較(jiao)快速的(de)(de)(de)檢(jian)測(ce)(ce)微生(sheng)物的(de)(de)(de)技(ji)(ji)(ji)術(shu)(shu)。在(zai)活性(xing)細(xi)(xi)胞中(zhong)，ATP是(shi)(shi)其常見的(de)(de)(de)能量代謝產，可(ke)(ke)(ke)以(yi)提供(gong)細(xi)(xi)胞生(sheng)理活動過程中(zhong)所需(xu)的(de)(de)(de)能量。并且(qie)(qie)，該(gai)(gai)技(ji)(ji)(ji)術(shu)(shu)可(ke)(ke)(ke)以(yi)在(zai)生(sheng)物體(ti)內可(ke)(ke)(ke)以(yi)在(zai)一定(ding)范(fan)圍內保持一定(ding)的(de)(de)(de)含(han)量。食品中(zhong)的(de)(de)(de)大(da)腸(chang)桿(gan)菌檢(jian)測(ce)(ce)技(ji)(ji)(ji)術(shu)(shu)可(ke)(ke)(ke)以(yi)采用熒(ying)(ying)(ying)光(guang)光(guang)度(du)的(de)(de)(de)方(fang)(fang)法(fa)，因(yin)為(wei)生(sheng)物體(ti)發(fa)光(guang)的(de)(de)(de)原因(yin)是(shi)(shi)有熒(ying)(ying)(ying)光(guang)素酶的(de)(de)(de)作(zuo)(zuo)用，產生(sheng)了發(fa)光(guang)的(de)(de)(de)效果。該(gai)(gai)物質(zhi)來源于(yu)北美的(de)(de)(de)螢火(huo)蟲體(ti)內，可(ke)(ke)(ke)以(yi)催化熒(ying)(ying)(ying)光(guang)素的(de)(de)(de)氧化作(zuo)(zuo)用，不過，該(gai)(gai)物質(zhi)性(xing)質(zhi)不穩定(ding)，可(ke)(ke)(ke)以(yi)對熒(ying)(ying)(ying)光(guang)進(jin)行(xing)快速分(fen)解。另外，該(gai)(gai)檢(jian)測(ce)(ce)技(ji)(ji)(ji)術(shu)(shu)結果獲得(de)過程是(shi)(shi)非常快的(de)(de)(de)，并且(qie)(qie)該(gai)(gai)設備攜帶方(fang)(fang)便(bian)，十分(fen)適(shi)用于(yu)現場(chang)檢(jian)測(ce)(ce)。

高溫消毒

可(ke)引起(qi)腹瀉的致病性大腸(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)、傷寒(han)桿(gan)(gan)菌(jun)、霍(huo)亂弧菌(jun)等普(pu)通細(xi)菌(jun)繁殖體，80℃熱水(shui)(shui)需(xu)要(yao)5-10分鐘、沸水(shui)(shui)需(xu)要(yao)2-5分鐘才能殺滅。