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沙門氏菌
#細菌# 0 0
沙門氏菌病是指由各種類型沙門氏菌所引起的對人類、家畜以及野生禽獸不同形式的總稱。據統計在世界各國的種類細菌性食物中毒中,沙門氏菌引起的食物中毒常列榜首。嬰兒、老年人、免疫功能低下的患者則可能因沙門氏菌進入血液而出現嚴重且危及生命的菌血癥,少數還會合并腦膜炎或骨髓炎。沙門氏菌有兩種是致命的,一種是腸道沙門氏菌,一種是傷寒沙門氏菌。
詳細(xi)介(jie)紹 PROFILE +

沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)是一種常見的(de)(de)食(shi)源性(xing)致(zhi)(zhi)病菌(jun)(jun)(jun)。沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)鑒(jian)定的(de)(de)傳統方(fang)法主要(yao)是根(gen)據形態學(xue)特(te)(te)(te)征、培養特(te)(te)(te)征、生(sheng)(sheng)理生(sheng)(sheng)化特(te)(te)(te)征、抗(kang)原特(te)(te)(te)征、噬菌(jun)(jun)(jun)體特(te)(te)(te)征等。1885年沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)等在霍亂(luan)(luan)流行時分離到豬霍亂(luan)(luan)沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun),故(gu)定名為沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)屬。沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)屬有(you)的(de)(de)專對人(ren)(ren)類(lei)致(zhi)(zhi)病,有(you)的(de)(de)只對動物(wu)致(zhi)(zhi)病,也(ye)有(you)對人(ren)(ren)和動物(wu)都致(zhi)(zhi)病。沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)病是指由(you)各種類(lei)型沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)所引起的(de)(de)對人(ren)(ren)類(lei)、家畜以(yi)及(ji)野生(sheng)(sheng)禽獸不(bu)同形式的(de)(de)總稱。感(gan)染沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)的(de)(de)人(ren)(ren)或帶(dai)菌(jun)(jun)(jun)者的(de)(de)糞(fen)便污(wu)染食(shi)品(pin),可使(shi)人(ren)(ren)發生(sheng)(sheng)食(shi)物(wu)中毒(du)(du)。據統計(ji)在世(shi)界各國(guo)(guo)的(de)(de)種類(lei)細菌(jun)(jun)(jun)性(xing)食(shi)物(wu)中毒(du)(du)中,沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)引起的(de)(de)食(shi)物(wu)中毒(du)(du)常列(lie)榜首(shou)。我國(guo)(guo)內(nei)陸地區也(ye)以(yi)沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)為首(shou)位。

簡介

沙門氏菌(jun)(jun)(jun)(jun)病的(de)病原體。屬腸桿菌(jun)(jun)(jun)(jun)科,革(ge)蘭氏陰性腸道桿菌(jun)(jun)(jun)(jun)。已發(fa)現(xian)的(de)近一(yi)千種(或菌(jun)(jun)(jun)(jun)株)。按其抗原成分,可(ke)分為甲(jia)、乙(yi)(yi)、丙、丁、戊等基本菌(jun)(jun)(jun)(jun)組(zu)。其中(zhong)與(yu)人(ren)體疾(ji)病有關的(de)主要有甲(jia)組(zu)的(de)副傷(shang)寒(han)(han)(han)(han)甲(jia)桿菌(jun)(jun)(jun)(jun),乙(yi)(yi)組(zu)的(de)副傷(shang)寒(han)(han)(han)(han)乙(yi)(yi)桿菌(jun)(jun)(jun)(jun)和(he)鼠傷(shang)寒(han)(han)(han)(han)桿菌(jun)(jun)(jun)(jun),丙組(zu)的(de)副傷(shang)寒(han)(han)(han)(han)丙桿菌(jun)(jun)(jun)(jun)和(he)豬霍亂(luan)桿菌(jun)(jun)(jun)(jun),丁組(zu)的(de)傷(shang)寒(han)(han)(han)(han)桿菌(jun)(jun)(jun)(jun)和(he)腸炎(yan)桿菌(jun)(jun)(jun)(jun)等。除傷(shang)寒(han)(han)(han)(han)桿菌(jun)(jun)(jun)(jun)、副傷(shang)寒(han)(han)(han)(han)甲(jia)桿菌(jun)(jun)(jun)(jun)和(he)副傷(shang)寒(han)(han)(han)(han)乙(yi)(yi)桿菌(jun)(jun)(jun)(jun)引起(qi)人(ren)類的(de)疾(ji)病外,大多數僅能引起(qi)家畜、鼠類和(he)禽類等動物(wu)的(de)疾(ji)病,但有時也(ye)可(ke)污染人(ren)類的(de)食(shi)物(wu)而引起(qi)食(shi)物(wu)中(zhong)毒。

沙門氏(shi)菌(jun)(jun)在水中(zhong)不易繁(fan)(fan)殖,但可(ke)(ke)生存2-3周,冰箱中(zhong)可(ke)(ke)生存3-4個月,在自然環(huan)境(jing)的(de)糞便中(zhong)可(ke)(ke)存活(huo)1-2個月。沙門氏(shi)菌(jun)(jun)最(zui)適繁(fan)(fan)殖溫(wen)度為37℃,在20℃以(yi)上即能大量繁(fan)(fan)殖,因此,低溫(wen)儲存食品是(shi)一項重要(yao)預防措(cuo)施(shi)。

沙門氏菌屬

菌體大小(xiao)(0.6~0.9)×(1~3)微米(mi)無(wu)芽(ya)(ya)胞(bao),一般(ban)無(wu)莢膜,除雞白(bai)痢沙門(men)(men)氏菌和雞傷寒沙門(men)(men)氏菌外,大多(duo)有周身鞭毛(mao)。營養要求不(bu)高,分離(li)培養常(chang)采用(yong)腸道選擇(ze)鑒別(bie)(bie)培養基。生(sheng)化反應對(dui)本屬菌的鑒別(bie)(bie)具(ju)有重要參考意義(yi)(見表)。不(bu)液(ye)化明膠,不(bu)分解尿素,不(bu)產(chan)生(sheng)吲哚,不(bu)發(fa)(fa)酵(jiao)乳(ru)糖和蔗糖,能發(fa)(fa)酵(jiao)葡萄糖、甘露醇、麥芽(ya)(ya)糖和衛芽(ya)(ya)糖,大多(duo)產(chan)酸(suan)產(chan)氣(qi),少數只(zhi)產(chan)酸(suan)不(bu)產(chan)氣(qi)。VP試驗陰性,有賴氨酸(suan)脫羧酶。DNA的G+C含量為50~53%。對(dui)熱抵抗力不(bu)強,在(zai)60℃15分鐘可被殺死。在(zai)水中(zhong)存活2~3周。在(zai)5%的石炭酸(suan)中(zhong),5分鐘死亡。

本屬菌(jun)按(an)生(sheng)化反(fan)應分為4個亞(ya)屬。亞(ya)屬Ⅰ是生(sheng)化反(fan)應典型(xing)的(de)(de)和最常見的(de)(de)沙(sha)門氏菌(jun);亞(ya)屬Ⅱ和Ⅳ是生(sheng)化反(fan)應不典型(xing)的(de)(de)沙(sha)門氏菌(jun);亞(ya)屬Ⅲ是亞(ya)利桑那沙(sha)門氏菌(jun)。

沙(sha)門氏菌(jun)具有復(fu)雜的抗(kang)(kang)(kang)原結構,一般可分為菌(jun)體(O)抗(kang)(kang)(kang)原、鞭毛(H)抗(kang)(kang)(kang)原和表面(Vi)抗(kang)(kang)(kang)原3種。

理化特性

生化(hua)反應很活潑,能分(fen)解多(duo)種(zhong)糖類(lei)和醇。

培養特性

1)需氧(yang)及兼性厭氧(yang)菌。

2)在普通(tong)瓊脂培養基(ji)上生(sheng)長良好(hao),培養24h后,形(xing)成中等大(da)小、圓形(xing)、表面光(guang)滑、無色半透明(ming)、邊緣整齊(qi)的菌(jun)落,其(qi)菌(jun)落特(te)征亦(yi)與大(da)腸桿菌(jun)相似(無糞臭(chou)味)。

3)鑒別培養基(麥(mai)康凱、SS、伊紅美藍):一般無色菌落(luo)。

4)三(san)糖鐵瓊脂斜(xie)面:斜(xie)面為紅色,底部變黑(hei)并產(chan)氣。

生化特性

1)發酵葡萄糖(tang)(tang),麥芽糖(tang)(tang),甘(gan)露醇和山梨(li)醇產氣(qi);

2)不發酵乳糖、蔗糖和側金盞(zhan)花醇;

3)不產吲哚、V-P反應陰性(xing);

4)不水(shui)解尿素和(he)對苯(ben)丙(bing)氨酸不脫氨。

傷(shang)寒(han)沙(sha)(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)、雞(ji)傷(shang)寒(han)沙(sha)(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)及(ji)一部分雞(ji)白痢(li)沙(sha)(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)發(fa)酵(jiao)糖(tang)不產氣,大多數雞(ji)白痢(li)沙(sha)(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)不發(fa)酵(jiao)麥(mai)芽糖(tang);除雞(ji)白痢(li)沙(sha)(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)、豬傷(shang)寒(han)沙(sha)(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)、甲型(xing)副傷(shang)寒(han)沙(sha)(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)、傷(shang)寒(han)沙(sha)(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)和(he)仙臺沙(sha)(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)等外,均能利用枸櫞酸鹽(yan)。

血清學特性

沙(sha)門氏菌(jun)具有復雜的抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)結構,一(yi)般沙(sha)門氏菌(jun)具有菌(jun)體(O)抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)、鞭(bian)毛(H)抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)和表面抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(莢膜或包膜抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan))三(san)種抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)。

傳播途徑

肉的污染

肉及其(qi)制品(pin)的沙(sha)門氏(shi)菌檢出(chu)率(lv)美國為(wei)(wei)20%-25%、英國為(wei)(wei)9.9%、日本檢查(cha)進口(kou)家禽的污染率(lv)為(wei)(wei)10.3%,國內肉類沙(sha)門氏(shi)菌檢出(chu)率(lv)在1.1%-39.5%。

蛋的污染

中國蛋及其制品沙門氏菌檢(jian)出率為(wei)3.9%-43.7%,由于(yu)吃蛋引起鼠傷寒病(bing)的(de)病(bing)例報告(gao)逐漸有(you)增加(jia)的(de)趨(qu)勢。

環境污染

食品在加工(gong)、運輸、出售(shou)過程中往往被沙門氏菌污染。沙門氏菌在糞便、土(tu)壤、食品、水中可生(sheng)存5個月至2年(nian)之久。

傳播問題

恢復期患(huan)者和無癥狀(zhuang)的(de)帶菌(jun)者也是常見的(de)傳(chuan)染(ran)源。

分布

廣泛分(fen)布(bu)于自然界(jie),常常寄居在人(ren)和(he)動物體內,特別是(shi)家禽(qin)、家畜及寵物的(de)(de)腸道(dao)中。主要污染的(de)(de)食品(pin)有(you):肉和(he)肉制(zhi)品(pin)、蛋和(he)蛋制(zhi)品(pin)、奶和(he)奶制(zhi)品(pin)等(deng)。由于沙(sha)門氏菌不分(fen)解蛋白質,食物被其污染后(hou)表面看起(qi)來(lai)似乎并(bing)沒有(you)變化.

感染癥

沙門氏菌感染(ran)癥為(wei)人畜共患(huan)感染(ran)性疾病,主要(yao)由(you)食用遭受污染(ran)的(de)食物導(dao)致,是許多(duo)國家食物中毒(du)的(de)重要(yao)病源。

癥狀

典型癥狀(zhuang)包括發熱、惡心、嘔吐(tu)、腹(fu)瀉及(ji)腹(fu)部絞痛等癥狀(zhuang),通常在發熱后72小時內會好轉。嬰兒、老年人、免疫功能低下的(de)患(huan)者(zhe)則可(ke)能因沙門氏菌(jun)進入血液而出現(xian)嚴重且危及(ji)生命的(de)菌(jun)血癥,少數還會合并腦膜(mo)炎或(huo)骨髓炎。

治療

一般(ban)沙門氏菌造(zao)成(cheng)的腸胃炎不需要(yao)給予抗生素治療(liao);而以補充水分與電解質為主;但對于新生兒、免疫(yi)功能(neng)低下患者及特殊傷員;則需要(yao)視情況(kuang)紿予抗生素治療(liao)。

預防

1、餐前(qian)、便后(hou)、接(jie)觸食物(wu)前(qian)、接(jie)觸動物(wu)或生蛋后(hou)應仔細洗凈雙手。

2、處理生食(shi)和熟食(shi)的(de)砧(zhen)板要(yao)分開(kai)。

3、食物要熟(shu)透再吃(尤其是雞(ji)蛋與家禽(qin)類)。

4、非現做(zuo)現吃的食(shi)物應(ying)以保(bao)鮮膜包覆后放(fang)進冰(bing)箱保(bao)存,再次(ci)食(shi)用前應(ying)加熱(re)或(huo)煮熟(shu)。

5、撲滅并阻隔蒼蠅等病(bing)媒。被蒼蠅沾(zhan)染、過期或腐敗的不(bu)潔(jie)食(shi)物(wu)均應丟棄,切(qie)勿(wu)食(shi)用。

6、水塔應經常清洗(xi)、消毒。

7、旅(lv)行或野營時的飲(yin)用(yong)水應煮沸并消毒。

8、如有嘔吐、腹瀉(xie)或發熱(re)等癥狀,應盡快就醫。

感染

沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)是(shi)美國(guo)食(shi)(shi)物中(zhong)毒(du)致死(si)(si)的(de)(de)(de)主要(yao)原(yuan)因(yin)(yin)。美國(guo)人(ren)(ren)(ren)對(dui)這(zhe)(zhe)(zhe)種病(bing)菌(jun)(jun)一(yi)點都不(bu)(bu)(bu)陌生(sheng)(sheng),每年(nian)全(quan)國(guo)大(da)(da)(da)約報告40000例(li)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)感(gan)(gan)染(ran)病(bing)例(li)。但實際的(de)(de)(de)感(gan)(gan)染(ran)人(ren)(ren)(ren)數可能要(yao)達20倍(bei)以(yi)上(shang)(shang),因(yin)(yin)為(wei)(wei)許多輕型(xing)病(bing)人(ren)(ren)(ren)可能未確診,據不(bu)(bu)(bu)完(wan)全(quan)統計,每年(nian)大(da)(da)(da)約有(you)(you)(you)1000人(ren)(ren)(ren)死(si)(si)于急性沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)感(gan)(gan)染(ran)。但是(shi),以(yi)前(qian)各州爆(bao)發的(de)(de)(de)疫情幾乎(hu)都與人(ren)(ren)(ren)們(men)(men)吃(chi)(chi)了染(ran)上(shang)(shang)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)的(de)(de)(de)肉類(lei)、蛋(dan)(dan)類(lei)、乳類(lei)有(you)(you)(you)關,但迄今為(wei)(wei)止,很(hen)少聽(ting)說吃(chi)(chi)蔬果大(da)(da)(da)面積受沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)污(wu)(wu)染(ran)甚至(zhi)在(zai)人(ren)(ren)(ren)群(qun)中(zhong)引(yin)發大(da)(da)(da)疫情的(de)(de)(de)。對(dui)此,周福(fu)生(sheng)(sheng)教授解釋(shi)說,這(zhe)(zhe)(zhe)可能是(shi)西(xi)紅柿在(zai)生(sheng)(sheng)長的(de)(de)(de)過程中(zhong),由于空氣中(zhong)紫(zi)外線不(bu)(bu)(bu)夠強烈,植物在(zai)灌(guan)溉過程或因(yin)(yin)土壤中(zhong)含(han)有(you)(you)(you)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun),這(zhe)(zhe)(zhe)樣才使西(xi)紅柿的(de)(de)(de)表皮上(shang)(shang)沾染(ran)了沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun),加上(shang)(shang)不(bu)(bu)(bu)少人(ren)(ren)(ren)有(you)(you)(you)生(sheng)(sheng)食(shi)(shi)西(xi)紅柿的(de)(de)(de)習(xi)慣,如(ru)果沒有(you)(you)(you)清洗干(gan)凈,就(jiu)完(wan)全(quan)有(you)(you)(you)可能發生(sheng)(sheng)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)感(gan)(gan)染(ran)。不(bu)(bu)(bu)光是(shi)食(shi)(shi)用西(xi)紅柿,其他瓜果蔬菜也一(yi)樣。沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)主要(yao)污(wu)(wu)染(ran)肉類(lei)食(shi)(shi)品,魚(yu)、禽、奶、蛋(dan)(dan)類(lei)食(shi)(shi)品也可受此菌(jun)(jun)污(wu)(wu)染(ran)。沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)食(shi)(shi)物中(zhong)毒(du)全(quan)年(nian)都可發生(sheng)(sheng),吃(chi)(chi)了未煮透的(de)(de)(de)病(bing)、死(si)(si)牲畜肉或在(zai)屠宰后其他環節污(wu)(wu)染(ran)的(de)(de)(de)牲畜肉是(shi)引(yin)起沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)食(shi)(shi)物中(zhong)毒(du)的(de)(de)(de)最主要(yao)原(yuan)因(yin)(yin)。有(you)(you)(you)食(shi)(shi)品專家指出美國(guo)人(ren)(ren)(ren)吃(chi)(chi)雞(ji)蛋(dan)(dan)的(de)(de)(de)習(xi)慣與國(guo)人(ren)(ren)(ren)不(bu)(bu)(bu)同,他們(men)(men)喜歡吃(chi)(chi)半熟的(de)(de)(de)雞(ji)蛋(dan)(dan)甚至(zhi)是(shi)生(sheng)(sheng)雞(ji)蛋(dan)(dan),所以(yi)一(yi)旦雞(ji)蛋(dan)(dan)里(li)含(han)有(you)(you)(you)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun),感(gan)(gan)染(ran)的(de)(de)(de)幾率(lv)就(jiu)比(bi)較高。“在(zai)國(guo)內,生(sheng)(sheng)雞(ji)蛋(dan)(dan)里(li)含(han)有(you)(you)(you)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)其實并(bing)不(bu)(bu)(bu)奇(qi)怪,只不(bu)(bu)(bu)過國(guo)人(ren)(ren)(ren)喜歡將雞(ji)蛋(dan)(dan)煮熟吃(chi)(chi),這(zhe)(zhe)(zhe)樣就(jiu)大(da)(da)(da)大(da)(da)(da)減少了感(gan)(gan)染(ran)的(de)(de)(de)幾率(lv)。”

癥狀及原因

由沙門氏菌(jun)(jun)引起(qi)的食品(pin)中毒癥狀(zhuang)主(zhu)要有惡心(xin)、嘔吐、腹(fu)痛、頭痛、畏(wei)寒和腹(fu)瀉等,還伴有乏力、肌肉酸痛、視覺模糊、中等程度發熱、躁(zao)動不安和嗜睡,延續時間2~3d,平均(jun)致死率為4.1%。其主(zhu)要原因(yin)是由于攝入(ru)了(le)含(han)有大量沙門氏菌(jun)(jun)屬的非(fei)寄主(zhu)專一(yi)性菌(jun)(jun)種或血清型的食品(pin)所引起(qi)的。在攝入(ru)含(han)毒食品(pin)之后.癥狀(zhuang)一(yi)般(ban)在12~14h內出現(xian),有些潛伏(fu)期較長。

預防措施

防止沙門(men)(men)氏菌污染(ran)食品;控制食品中沙門(men)(men)氏菌的(de)繁殖;加熱以徹(che)底殺滅病原菌。

沙(sha)門氏菌(jun)不(bu)耐高溫(wen),食物的中(zhong)心(xin)溫(wen)度達70℃以上,持續5分鐘一般都可(ke)以殺死包括沙(sha)門氏菌(jun)等常見(jian)食源性致病菌(jun)。家庭中(zhong)一般的熱處理烹(peng)調方式(shi)都可(ke)有效殺滅該菌(jun)。

檢測方法

前增菌

稱取25g(mL)樣(yang)品放入盛有225 mL BPW的無菌均(jun)(jun)質(zhi)杯中,以8000 r/min~10 000 r/min均(jun)(jun)質(zhi)1min~2min,或(huo)置于(yu)盛有225 mL BPW的無菌均(jun)(jun)質(zhi)袋中,用(yong)拍(pai)擊(ji)式均(jun)(jun)質(zhi)器拍(pai)打1min~2min。若樣(yang)品為液態,不需要均(jun)(jun)質(zhi),振蕩混勻。如(ru)需測(ce)定(ding)pH值,用(yong)1mol/mL無菌NaOH或(huo)HCl調(diao)pH至6.8±0.2。無菌操作將樣(yang)品轉至500mL錐形瓶中,如(ru)使用(yong)均(jun)(jun)質(zhi)袋,可直接進行培養(yang),于(yu)36 ℃±1℃培養(yang)8h~18h。

如為冷凍(dong)產品,應在45℃以下不超過15min,或2℃~5℃不超過18h解凍(dong)。

增菌

輕輕搖動培養過的樣(yang)品混合物,移取1mL,轉種(zhong)于(yu)(yu)10mL TTB內(nei),于(yu)(yu)42℃±1℃培養18h~24h。同(tong)時,另取1mL,轉種(zhong)于(yu)(yu)10 mL SC內(nei),于(yu)(yu)36℃±1℃培養18h~24h。

分離

分(fen)(fen)別(bie)用接種環(huan)取(qu)增菌液1環(huan),劃線接種于(yu)一個(ge)(ge)BS瓊(qiong)脂(zhi)平(ping)板(ban)(ban)和一個(ge)(ge)XLD瓊(qiong)脂(zhi)平(ping)板(ban)(ban)(或HE瓊(qiong)脂(zhi)平(ping)板(ban)(ban)或沙(sha)門氏菌屬顯色培養(yang)基平(ping)板(ban)(ban))。于(yu)36℃±1℃分(fen)(fen)別(bie)培養(yang)18h~24h(XLD瓊(qiong)脂(zhi)平(ping)板(ban)(ban)、HE瓊(qiong)脂(zhi)平(ping)板(ban)(ban)、沙(sha)門氏菌屬顯色培養(yang)基平(ping)板(ban)(ban))或40h~48h (BS瓊(qiong)脂(zhi)平(ping)板(ban)(ban)),觀(guan)察(cha)各(ge)(ge)個(ge)(ge)平(ping)板(ban)(ban)上(shang)生(sheng)長的菌落,各(ge)(ge)個(ge)(ge)平(ping)板(ban)(ban)上(shang)的菌落特征(zheng)見表1。

表 1 沙門氏菌(jun)(jun)屬在(zai)不同選擇性(xing)瓊脂平板上的菌(jun)(jun)落(luo)特征

選擇性瓊脂平板 沙門氏(shi)菌

BS 瓊脂 菌(jun)(jun)(jun)落(luo)(luo)為黑(hei)色有金屬光澤、棕褐色或(huo)灰色,菌(jun)(jun)(jun)落(luo)(luo)周圍(wei)培養(yang)基可呈(cheng)黑(hei)色或(huo)棕色;有些菌(jun)(jun)(jun)株形成灰綠色的菌(jun)(jun)(jun)落(luo)(luo),周圍(wei)培養(yang)基不(bu)變。

HE 瓊脂 藍(lan)綠色(se)(se)或(huo)藍(lan)色(se)(se),多數菌落中心(xin)黑色(se)(se)或(huo)幾乎(hu)全黑色(se)(se);有些菌株(zhu)為黃色(se)(se),中心(xin)黑色(se)(se)或(huo)幾乎(hu)全黑色(se)(se)。

XLD 瓊脂 菌落呈(cheng)粉紅(hong)色,帶(dai)(dai)或不(bu)帶(dai)(dai)黑(hei)色中心,有些菌株可呈(cheng)現大的帶(dai)(dai)光澤的黑(hei)色中心,或呈(cheng)現全部黑(hei)色的菌落;有些菌株為黃色菌落,帶(dai)(dai)或不(bu)帶(dai)(dai)黑(hei)色中心。

沙門(men)氏菌屬顯色培養(yang) 按(an)照顯色培養(yang)基(ji)的說明(ming)進行(xing)判定。

自19世紀后期,沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)首次被鑒定(ding)(ding)為(wei)(wei)人類的(de)(de)(de)(de)(de)(de)一(yi)種病(bing)原以(yi)來(lai),檢(jian)(jian)測(ce)方(fang)法(fa)(fa)學都是(shi)建立在(zai)采取感染病(bing)人的(de)(de)(de)(de)(de)(de)糞便(bian)或(huo)(huo)血液作為(wei)(wei)臨床病(bing)料的(de)(de)(de)(de)(de)(de)基礎(chu)上(shang)。此(ci)后的(de)(de)(de)(de)(de)(de)60年間(jian),用(yong)于(yu)從食(shi)品(pin)中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)分離(li)沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)法(fa)(fa)實質(zhi)上(shang)與(yu)那(nei)些用(yong)于(yu)臨床病(bing)料的(de)(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)法(fa)(fa)是(shi)相(xiang)同(tong)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)。但至少(shao)有三(san)個(ge)(ge)因素限制了(le)用(yong)于(yu)臨床病(bing)料的(de)(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)法(fa)(fa)應用(yong)在(zai)食(shi)品(pin)分析(xi)上(shang)。第(di)一(yi),通常,沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)含(han)量(liang)水平(ping)在(zai)污染食(shi)品(pin)中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)比有感染病(bing)人的(de)(de)(de)(de)(de)(de)病(bing)料中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)要(yao)低很(hen)多;第(di)二,食(shi)品(pin)本身(shen)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)性(xing)質(zhi)會干擾病(bing)原的(de)(de)(de)(de)(de)(de)檢(jian)(jian)測(ce),例(li)如,某些食(shi)品(pin)中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)固有菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)群可(ke)能(neng)處在(zai)一(yi)個(ge)(ge)很(hen)高的(de)(de)(de)(de)(de)(de)水平(ping),從而影響特(te)定(ding)(ding)細(xi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)選(xuan)(xuan)擇性(xing)分離(li)和(he)鑒定(ding)(ding);第(di)三(san),與(yu)臨床病(bing)料不(bu)(bu)同(tong)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)是(shi),經過加工(gong)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)食(shi)品(pin),由于(yu)加熱、干燥、高含(han)鹽量(liang)、酸和(he)冷凍等因素的(de)(de)(de)(de)(de)(de)作用(yong),其中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)受到了(le)尚不(bu)(bu)致命的(de)(de)(de)(de)(de)(de)損傷(shang)或(huo)(huo)稱“致傷(shang)”。這就(jiu)形成了(le)一(yi)個(ge)(ge)具有不(bu)(bu)同(tong)生(sheng)長特(te)性(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)細(xi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)群。這種現象(xiang)對那(nei)些希(xi)望從食(shi)物(wu)樣品(pin)中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)分離(li)出(chu)沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)食(shi)品(pin)分析(xi)家(jia)來(lai)說有很(hen)大影響,因為(wei)(wei)在(zai)選(xuan)(xuan)擇培養(yang)基上(shang)直接培養(yang)“致傷(shang)”的(de)(de)(de)(de)(de)(de)沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)通常是(shi)以(yi)細(xi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)死亡和(he)試驗失敗而告終(zhong)。為(wei)(wei)克(ke)服這些困難,人們建立了(le)一(yi)種簡單的(de)(de)(de)(de)(de)(de)微生(sheng)物(wu)增殖(zhi)步驟,專門(men)(men)(men)針對以(yi)食(shi)品(pin)為(wei)(wei)傳播載體(ti)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)病(bing)原。雖然(ran)這些方(fang)法(fa)(fa)本身(shen)證明是(shi)可(ke)靠(kao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de),但卻很(hen)費力、耗時(shi),需(xu)要(yao)4~7天(tian)才能(neng)完成。因此(ci),在(zai)需(xu)要(yao)及時(shi)、快(kuai)速評價食(shi)品(pin)中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)微生(sheng)物(wu)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)安全性(xing)時(shi),通常不(bu)(bu)被采用(yong)。隨(sui)著DNA和(he)抗體(ti)技術(shu)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)發展,近10~15年間(jian)發展了(le)無數改進(jin)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)法(fa)(fa),其中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)許多可(ke)以(yi)在(zai)48h內(nei)檢(jian)(jian)出(chu)沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun),這些方(fang)法(fa)(fa)通稱為(wei)(wei)快(kuai)速檢(jian)(jian)測(ce)。

抗體檢測

利(li)(li)用(yong)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)-抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)反應的(de)(de)(de)(de)顯(xian)著特(te)異性,來進行細菌(jun)的(de)(de)(de)(de)鑒別和血清(qing)學定(ding)型,已(yi)有(you)(you)半個(ge)多世紀(ji)的(de)(de)(de)(de)歷史。細菌(jun)菌(jun)體(ti)(ti)(ti)或鞭毛(mao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)的(de)(de)(de)(de)特(te)異性抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)的(de)(de)(de)(de)存在,使得(de)人們可以(yi)建立(li)一些快速方(fang)法(fa)來檢測(ce)以(yi)食品為(wei)(wei)載體(ti)(ti)(ti)的(de)(de)(de)(de)病原(yuan)(yuan)。已(yi)經(jing)建立(li)的(de)(de)(de)(de)沙(sha)門氏菌(jun)免(mian)疫(yi)(yi)學檢測(ce)方(fang)法(fa)有(you)(you)許多種,大致可分為(wei)(wei)以(yi)酶(mei)標(biao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ELISA),熒(ying)光抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)染色(免(mian)疫(yi)(yi)熒(ying)光法(fa)),同(tong)位素標(biao)記抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(放射免(mian)疫(yi)(yi)試驗)為(wei)(wei)基(ji)(ji)礎(chu)的(de)(de)(de)(de)方(fang)法(fa)及(ji)其(qi)它多種以(yi)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)為(wei)(wei)基(ji)(ji)礎(chu),利(li)(li)用(yong)乳膠(jiao)凝集、免(mian)疫(yi)(yi)傳感(gan)器、免(mian)疫(yi)(yi)擴(kuo)散及(ji)免(mian)疫(yi)(yi)色譜技術(shu)的(de)(de)(de)(de)方(fang)法(fa)。但(dan)常(chang)規中最廣泛采(cai)用(yong)的(de)(de)(de)(de)是以(yi)雙位點ELISA技術(shu)即夾心ELISA為(wei)(wei)基(ji)(ji)礎(chu)的(de)(de)(de)(de)方(fang)法(fa)。此法(fa)改進后用(yong)有(you)(you)放射活性的(de)(de)(de)(de)同(tong)位素替(ti)代標(biao)記抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti),概(gai)括地說,是指以(yi)固定(ding)在固體(ti)(ti)(ti)基(ji)(ji)質(zhi)上的(de)(de)(de)(de)“捕(bu)捉”抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)來捕(bu)捉目標(biao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan),經(jing)洗(xi)滌除去未(wei)結(jie)合的(de)(de)(de)(de)成(cheng)分,加入第(di)二(er)種酶(mei)標(biao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti),此者結(jie)合在捕(bu)捉到的(de)(de)(de)(de)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)的(de)(de)(de)(de)不同(tong)位點上,第(di)二(er)次洗(xi)滌后加入酶(mei)作(zuo)(zuo)用(yong)基(ji)(ji)質(zhi),并令其(qi)與(yu)顏色成(cheng)分反應,然后用(yong)分光光度法(fa)即很容易檢測(ce)到目標(biao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)。采(cai)用(yong)微量滴定(ding)板作(zuo)(zuo)為(wei)(wei)固態基(ji)(ji)質(zhi)使反應形式標(biao)準化(hua),并促成(cheng)其(qi)自動化(hua)。

黎(li)兆(zhao)(zhao)滾等(deng)(deng)人首次在國內(nei)(nei)口(kou)岸系(xi)統應(ying)用(yong)(yong)(yong)(yong)微(wei)量板(ban)ELISA法(fa)(fa)(fa)(fa)(Salmonelletest1)對(dui)進(jin)(jin)出(chu)口(kou)動物(wu)(wu)產(chan)品(pin)(魚粉、肉骨粉等(deng)(deng))進(jin)(jin)行(xing)(xing)沙(sha)門氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)檢(jian)(jian)測(ce)。該法(fa)(fa)(fa)(fa)采用(yong)(yong)(yong)(yong)預先包(bao)被了沙(sha)門氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(A-E群)單克隆(long)抗體的(de)(de)(de)微(wei)量板(ban),加(jia)入(ru)經增(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun)處理的(de)(de)(de)樣(yang)品(pin),反應(ying)后再(zai)加(jia)入(ru)一(yi)定的(de)(de)(de)指(zhi)示劑(ji),作用(yong)(yong)(yong)(yong)畢后用(yong)(yong)(yong)(yong)酶標(biao)儀測(ce)定OD值來(lai)判定結果(guo)。食物(wu)(wu)樣(yang)品(pin)經適當的(de)(de)(de)增(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun)處理,也(ye)可用(yong)(yong)(yong)(yong)此法(fa)(fa)(fa)(fa)進(jin)(jin)行(xing)(xing)沙(sha)門氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)檢(jian)(jian)測(ce)。ELISA法(fa)(fa)(fa)(fa)檢(jian)(jian)出(chu)沙(sha)門氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)的(de)(de)(de)極限范圍在105~106個(ge)細胞/ml,因此,要(yao)(yao)得(de)出(chu)可靠的(de)(de)(de)結果(guo),食物(wu)(wu)樣(yang)品(pin)首先必(bi)需進(jin)(jin)行(xing)(xing)預增(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun)、選擇(ze)性(xing)增(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun),通(tong)常(chang)還(huan)要(yao)(yao)在含有(you)D-甘露糖的(de)(de)(de)肉湯(M肉湯)中進(jin)(jin)行(xing)(xing)后增(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun),以促進(jin)(jin)鞭毛發(fa)育(yu)。總的(de)(de)(de)來(lai)說,標(biao)準的(de)(de)(de)ELISA法(fa)(fa)(fa)(fa)樣(yang)品(pin)的(de)(de)(de)制(zhi)備(bei),約需要(yao)(yao)經過(guo)40~48h的(de)(de)(de)孵(fu)育(yu)才能完成(cheng)。黎(li)兆(zhao)(zhao)滾等(deng)(deng)人的(de)(de)(de)微(wei)量板(ban)ELISA法(fa)(fa)(fa)(fa)(Salmonellatest1)樣(yang)品(pin)制(zhi)備(bei)過(guo)程分三步,共耗時24h:①選用(yong)(yong)(yong)(yong)營養肉湯進(jin)(jin)行(xing)(xing)預增(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun)(6h),使(shi)(shi)(shi)“致傷”、冷凍的(de)(de)(de)沙(sha)門氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)復(fu)蘇。②使(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)(yong)(yong)選擇(ze)性(xing)培養基(ji)(ji)RV進(jin)(jin)行(xing)(xing)增(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun)(14h),使(shi)(shi)(shi)沙(sha)門氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)大量繁殖,同(tong)時抑制(zhi)其它(ta)雜(za)菌(jun)(jun)(jun)生長。③使(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)(yong)(yong)營養肉湯(蛋白(bai)胨水)進(jin)(jin)行(xing)(xing)后增(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun)(4h),使(shi)(shi)(shi)沙(sha)門氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)的(de)(de)(de)數量大大增(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)加(jia)。比(bi)上述標(biao)準的(de)(de)(de)ELISA法(fa)(fa)(fa)(fa)樣(yang)品(pin)制(zhi)備(bei)過(guo)程縮短了一(yi)半的(de)(de)(de)時間(jian)(jian)(jian)。ELISA方(fang)法(fa)(fa)(fa)(fa)本身(shen),則(ze)(ze)僅需要(yao)(yao)大約2h而已(yi)(其中30min是操(cao)作時間(jian)(jian)(jian),90min是孵(fu)育(yu)時間(jian)(jian)(jian))。相比(bi)之下,黎(li)兆(zhao)(zhao)滾等(deng)(deng)人的(de)(de)(de)方(fang)法(fa)(fa)(fa)(fa)可在27h內(nei)(nei)完成(cheng),比(bi)上述方(fang)法(fa)(fa)(fa)(fa)縮短了一(yi)半的(de)(de)(de)時間(jian)(jian)(jian),頗值得(de)推廣應(ying)用(yong)(yong)(yong)(yong)。最新式的(de)(de)(de)沙(sha)門氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)免疫學(xue)檢(jian)(jian)測(ce)法(fa)(fa)(fa)(fa),利用(yong)(yong)(yong)(yong)經特異性(xing)抗體敏(min)化的(de)(de)(de)免疫色譜卡片(pian)為基(ji)(ji)礎。幾滴樣(yang)品(pin)加(jia)到(dao)卡片(pian)上,結果(guo)可以直接用(yong)(yong)(yong)(yong)肉眼讀出(chu)。免疫色譜卡片(pian)極易操(cao)作,且由于(yu)無需要(yao)(yao)特殊設備(bei),很適合小型實驗室使(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)(yong)(yong)。盡管卡片(pian)檢(jian)(jian)測(ce)法(fa)(fa)(fa)(fa)與ELISA法(fa)(fa)(fa)(fa)一(yi)樣(yang)需要(yao)(yao)對(dui)樣(yang)品(pin)進(jin)(jin)行(xing)(xing)增(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun)處理,但(dan)它(ta)(卡片(pian)法(fa)(fa)(fa)(fa))本身(shen)通(tong)常(chang)需時不超過(guo)10min,如果(guo)采用(yong)(yong)(yong)(yong)黎(li)兆(zhao)(zhao)滾等(deng)(deng)人的(de)(de)(de)樣(yang)品(pin)制(zhi)備(bei)法(fa)(fa)(fa)(fa),則(ze)(ze)可使(shi)(shi)(shi)操(cao)作時間(jian)(jian)(jian)更(geng)為縮短。

核酸法

細(xi)胞(bao)核(he)酸(suan)DNA和(he)(he)RNA是(shi)唯一(yi)(yi)一(yi)(yi)類可(ke)(ke)(ke)以(yi)攜帶(dai)信息(xi)的(de)(de)(de)大分(fen)(fen)子(zi)(zi)。由于(yu)(yu)所有(you)(you)的(de)(de)(de)細(xi)胞(bao)都含有(you)(you)這種分(fen)(fen)子(zi)(zi),可(ke)(ke)(ke)以(yi)利用(yong)(yong)(yong)它作為(wei)(wei)檢測(ce)的(de)(de)(de)標(biao)靶(ba)。標(biao)靶(ba)通常是(shi)一(yi)(yi)個特異(yi)性(xing)(xing)(xing)核(he)酸(suan)序列,它可(ke)(ke)(ke)通過以(yi)補體核(he)酸(suan)分(fen)(fen)子(zi)(zi)作為(wei)(wei)探(tan)(tan)(tan)針(zhen)來(lai)檢出。與(yu)免疫學(xue)方(fang)(fang)法(fa)(fa)相(xiang)似(si),探(tan)(tan)(tan)針(zhen)也(ye)需要(yao)(yao)加附適當的(de)(de)(de)標(biao)記,如(ru)放射(she)性(xing)(xing)(xing)同位(wei)(wei)素、酶(mei)或(huo)發光(guang)的(de)(de)(de)標(biao)識物(wu)。Fitts等人在食品(pin)(pin)沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)檢測(ce)中(zhong)引入了(le)(le)(le)第一(yi)(yi)代DNA—RNA雜交(jiao)(jiao)技術(shu)(shu),此(ci)法(fa)(fa)應(ying)用(yong)(yong)(yong)的(de)(de)(de)探(tan)(tan)(tan)針(zhen)含有(you)(you)用(yong)(yong)(yong)放射(she)性(xing)(xing)(xing)同位(wei)(wei)素標(biao)記的(de)(de)(de)傷寒沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)DNA片(pian)段(duan),其(qi)敏感(gan)(gan)性(xing)(xing)(xing)高,經(jing)大約48h的(de)(de)(de)增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)步(bu)驟(zou)后,檢測(ce)極(ji)限可(ke)(ke)(ke)達108個細(xi)菌(jun)(jun)/ml,但(dan)由于(yu)(yu)要(yao)(yao)使用(yong)(yong)(yong)放射(she)性(xing)(xing)(xing)同位(wei)(wei)素,只能(neng)(neng)在專門(men)(men)(men)的(de)(de)(de)實驗室應(ying)用(yong)(yong)(yong),此(ci)方(fang)(fang)法(fa)(fa)的(de)(de)(de)優(you)點(dian)都被抵消了(le)(le)(le)。為(wei)(wei)此(ci),以(yi)核(he)酸(suan)雜交(jiao)(jiao)為(wei)(wei)基(ji)礎的(de)(de)(de)第二代技術(shu)(shu)—比(bi)(bi)色(se)計已發展(zhan)起來(lai)。這種方(fang)(fang)法(fa)(fa)依(yi)賴于(yu)(yu)沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)核(he)糖(tang)(tang)體RNA(rRNA)—核(he)糖(tang)(tang)體發育(yu)過程中(zhong)儲存的(de)(de)(de)核(he)酸(suan)成(cheng)(cheng)分(fen)(fen)的(de)(de)(de)檢測(ce)。核(he)糖(tang)(tang)體是(shi)細(xi)胞(bao)蛋白質合成(cheng)(cheng)器的(de)(de)(de)一(yi)(yi)部(bu)分(fen)(fen),每個細(xi)菌(jun)(jun)細(xi)胞(bao)中(zhong)存在5000~20000個復制(zhi)體,而(er)相(xiang)比(bi)(bi)之下染色(se)體DNA復制(zhi)體僅2~10個。這種天然富(fu)含rRNA標(biao)靶(ba)序列的(de)(de)(de)情(qing)況使得用(yong)(yong)(yong)無輻射(she)計檢測(ce)成(cheng)(cheng)為(wei)(wei)可(ke)(ke)(ke)能(neng)(neng),同時(shi)又保(bao)(bao)持了(le)(le)(le)與(yu)放射(she)性(xing)(xing)(xing)同位(wei)(wei)素方(fang)(fang)法(fa)(fa)相(xiang)當或(huo)更高的(de)(de)(de)敏感(gan)(gan)性(xing)(xing)(xing)。其(qi)另一(yi)(yi)優(you)點(dian)是(shi)由于(yu)(yu)rRNA為(wei)(wei)單鏈(而(er)DNA為(wei)(wei)雙鏈),雜交(jiao)(jiao)前無需經(jing)過變性(xing)(xing)(xing)步(bu)驟(zou)。要(yao)(yao)得到陽性(xing)(xing)(xing)結果(guo),此(ci)法(fa)(fa)需要(yao)(yao)105個靶(ba)細(xi)胞(bao)/ml,因(yin)此(ci)對(dui)(dui)沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)檢測(ce)來(lai)說,需要(yao)(yao)進(jin)行預增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)和(he)(he)選擇性(xing)(xing)(xing)增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun),總共約50h。rRNA探(tan)(tan)(tan)針(zhen)法(fa)(fa)比(bi)(bi)沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)ELISA法(fa)(fa)(酶(mei)聯免疫檢測(ce)法(fa)(fa))更耗時(shi),但(dan)二者成(cheng)(cheng)本相(xiang)近。食品(pin)(pin)細(xi)菌(jun)(jun)檢測(ce)法(fa)(fa)的(de)(de)(de)最(zui)新進(jin)展(zhan)是(shi)在化學(xue)擴(kuo)增(zeng)(zeng)體系(xi)方(fang)(fang)面的(de)(de)(de)發展(zhan),即聚(ju)合酶(mei)鏈反(fan)應(ying)(PCR),用(yong)(yong)(yong)該體系(xi)可(ke)(ke)(ke)對(dui)(dui)制(zhi)備好的(de)(de)(de)樣品(pin)(pin)進(jin)行細(xi)菌(jun)(jun)DNA擴(kuo)增(zeng)(zeng),以(yi)便更易于(yu)(yu)用(yong)(yong)(yong)諸如(ru)凝膠電泳法(fa)(fa)或(huo)比(bi)(bi)色(se)型ELISA法(fa)(fa)檢測(ce)。用(yong)(yong)(yong)于(yu)(yu)檢測(ce)沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)和(he)(he)其(qi)它以(yi)食物(wu)為(wei)(wei)載體的(de)(de)(de)病原的(de)(de)(de)PCR方(fang)(fang)法(fa)(fa)業已建立(li),其(qi)中(zhong)一(yi)(yi)些方(fang)(fang)法(fa)(fa)顯示了(le)(le)(le)極(ji)好的(de)(de)(de)敏感(gan)(gan)性(xing)(xing)(xing)。但(dan)該法(fa)(fa)較難自(zi)動化,且(qie)必需經(jing)選擇性(xing)(xing)(xing)增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)以(yi)稀(xi)釋可(ke)(ke)(ke)能(neng)(neng)干擾檢測(ce)反(fan)應(ying)的(de)(de)(de)某些成(cheng)(cheng)分(fen)(fen)。一(yi)(yi)個完整的(de)(de)(de)以(yi)PCR為(wei)(wei)基(ji)礎的(de)(de)(de)方(fang)(fang)法(fa)(fa),需要(yao)(yao)2天才能(neng)(neng)完成(cheng)(cheng),很大程度(du)上抵銷了(le)(le)(le)其(qi)高敏感(gan)(gan)性(xing)(xing)(xing)的(de)(de)(de)優(you)點(dian),但(dan)這種方(fang)(fang)法(fa)(fa)對(dui)(dui)那些含沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)較少或(huo)沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)“致傷”嚴(yan)重難以(yi)復蘇而(er)仍保(bao)(bao)有(you)(you)沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)rRNA的(de)(de)(de)樣品(pin)(pin)尤其(qi)有(you)(you)效。

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電腦病毒有著傳染性、破壞性、隱蔽性、潛伏性等顯著特點,能對個人或集體造成無法挽回的損傷。在過去的幾十年里,誕生的電腦病毒數不勝數,那么你知道最著名、最危險的電腦病毒是哪幾種嗎?本文中maiGOO小編就帶大家看一份電腦病毒排名榜單,一起來了解下熊貓燒香、沖擊波病毒、紅色代碼、CIH病毒等著名計算機病毒。
中國歷史十大瘟疫排名 中國最嚴重的瘟疫事件 中國史上大瘟疫盤點
中國自古以來就不斷發生瘟疫,有的小規模爆發,有的則影響數萬人的生命健康。那么,你知道中國最嚴重的瘟疫事件發生在什么時候嗎?本文中,買購小編帶來了一份中國歷史十大瘟疫事件名單,其中包括1932年的陜西霍亂、1967年的流腦疫情、1910年的東北鼠疫、2020年新冠疫情等。下面一起來詳細了解下。
世界十大恐怖病毒 世界病毒排名前十 世界上第一恐怖的病毒
當前因新型冠狀病毒感染肺炎疫情,全球各國都紛紛投入抗擊疫情的行動中,針對疫情疫苗也正處于臨床試驗階段。你知道至今為止世界上所爆發大規模病毒傳染事件嗎?接下來maigoo小編將為你盤點世界病毒排名前十,上榜的有馬爾堡病毒、埃博拉病毒、新型冠狀病毒、登革熱病毒、肝炎病毒、艾滋病、狂犬病毒、SARS冠狀病毒等,快跟隨小編一起來了解下吧。
人類史上十大最嚴重的瘟疫 歷史死亡最多的瘟疫 新冠肺炎上榜
世界各地自古以來就瘟疫不斷,有的小規模爆發,有的則導致數萬人失去生命。那么,你知道世界歷史死亡最多的瘟疫事件發生在什么時候嗎?本文中,買購小編帶來了一份人類歷史上十大瘟疫事件名單,其中包括1918年西班牙大流感、歐洲中世紀大瘟疫、新型冠狀病毒疫情、1917-1921年東歐/蘇俄斑疹傷寒等。下面一起來詳細了解下。
2022年霍亂疫情最嚴重的十個國家 全球暴發霍亂的國家有哪些
據世界衛生組織表示,由于氣候變化導致2022年世界各地暴發了“前所未有”規模更大、更致命的霍亂疫情,那么2022年全球暴發霍亂的國家有哪些?霍亂疫情最嚴重的國家是哪個?下面,MAIGOO小編為大家盤點2022年霍亂疫情最嚴重的十個國家,包括馬拉維、海地、阿富汗、敘利亞、菲律賓等國,一起來看看吧。
奧密克戎十大亞型毒株 最強奧密克戎變異株排名 國內流行有幾種毒株
奧密克戎是全球流行的病毒,我國多地已受其感染。如今疫情防控解除,奧密克戎肆意橫行,你知道現在的奧密克戎有幾種毒株類型嗎?下面買購小編就帶大家看看比較流行的奧密克戎亞型毒株有哪些。例如BA.5.2、BF.7,以及BQ.1.1、XBB、BA.2.76、BA.5.1.3等,都較具代表性,都是當下大規模流行的奧密克戎亞型毒株。