一、石蠟切片厚度一般為多少

石蠟切片厚(hou)(hou)(hou)度通常為4～7微米，切(qie)(qie)出一片接一片的蠟(la)帶，用毛(mao)筆輕托輕放在紙上。這(zhe)個厚(hou)(hou)(hou)度通常可(ke)以滿足大部(bu)分(fen)實驗室的需求。如果需要更(geng)薄(bo)的切(qie)(qie)片厚(hou)(hou)(hou)度，則(ze)可(ke)以使用微切(qie)(qie)機進(jin)行切(qie)(qie)割，厚(hou)(hou)(hou)度可(ke)達1-2微米，但(dan)這(zhe)種切(qie)(qie)片會更(geng)脆弱，操作難度更(geng)大。

二、石蠟切片制作過程是什么

石蠟切片的制作步驟(zou)如下：

1、組織包埋

（1）乙醇脫水：組織經不同濃度的乙(yi)醇溶液進(jin)行逐級(ji)(ji)脫(tuo)水70％、80％、90％、95％、100％、100％，各(ge)級(ji)(ji)乙(yi)醇 40min（注(zhu)意：骨性及鈣(gai)化(hua)組織需在JYBL-Ⅱ脫(tuo)鈣(gai)液中浸泡24h，待(dai)組織軟化(hua)后再進(jin)行乙(yi)醇脫(tuo)水步驟）。

（2）透明：組織依次(ci)浸泡于三個二甲苯中，每(mei)缸各(ge)1h。

（3）浸蠟：組織依次(ci)浸泡于三個石蠟缸中，每缸各1h。

（4）包埋：將液態(tai)的石蠟倒入(ru)模具(ju)盒中，再將浸好蠟的組(zu)織(zhi)塊平放底部，注意切(qie)面方向朝下放置(zhi)，待石蠟凝固后去掉包埋框(kuang)，完全冷(leng)卻(que)變硬后再修整蠟塊，組(zu)織(zhi)外(wai)圍的石蠟保留(liu)適中以(yi)便切(qie)片(pian)。

2、切片與貼片

切片制作將預冷的蠟塊固定在石蠟切片機上，使石蠟塊的(de)切(qie)(qie)(qie)面與刀(dao)口成(cheng)(cheng)平行方向，刀(dao)的(de)傾(qing)斜度通常15℃，轉(zhuan)動輪轉(zhuan)推進器，調節切(qie)(qie)(qie)片(pian)(pian)厚度為(wei)4μm，切(qie)(qie)(qie)成(cheng)(cheng)厚度均勻的(de)切(qie)(qie)(qie)片(pian)(pian)。

左手持毛筆，右手旋動切片機轉把，切片帶出來之后，用毛筆輕輕托起，再用鑷子輕鑷蠟片，以正面放入展片箱中，其水溫45℃左右。待攤平整后撈片。貼附切片左手持載玻片之一端，垂直入水去附貼切片，右手用鑷子輔助推動，附貼至玻片上的三分之二處。切片(pian)貼附后，放(fang)(fang)在空氣中(zhong)稍晾干(gan)，放(fang)(fang)置(zhi)65℃烤片(pian)機上烤1h，再放(fang)(fang)置(zhi)烘(hong)箱內烘(hong)烤2h。

3、石蠟切片脫蠟至水

依次將石蠟(la)切片放入二甲苯Ⅰ10min-二甲苯Ⅱ10min-二甲苯Ⅲ10min-無(wu)水(shui)乙醇Ⅰ5min-無(wu)水(shui)乙醇Ⅱ5min-90%酒(jiu)精(jing)5min-80%酒(jiu)精(jing)5min-70%酒(jiu)精(jing)5min-50%酒(jiu)精(jing)5min梯度脫(tuo)蠟(la)。

4、HE染色

石(shi)蠟切片入蘇木素染(ran)0.5-1分鐘min，自來水漂洗，1%鹽(yan)酸(suan)酒精分化數秒，自來水漂洗，然后1%氨(an)水水溶液返藍(lan)1min，流水沖洗數秒，放入伊(yi)紅染(ran)液中(zhong)染(ran)色數秒，流水漂洗。

5、脫水封片

石蠟切(qie)片(pian)依次(ci)放入75%乙(yi)醇(chun)2min-85%乙(yi)醇(chun)2min-無(wu)水乙(yi)醇(chun)5min-無(wu)水乙(yi)醇(chun)5min-二甲苯5min透明，將切(qie)片(pian)從(cong)二甲苯拿出來中性樹膠封片(pian)。