一、石蠟切片厚度一般為多少

石蠟切片厚度通常(chang)為4～7微(wei)(wei)米，切出一(yi)片(pian)(pian)接一(yi)片(pian)(pian)的蠟帶，用(yong)毛筆輕托輕放在紙上(shang)。這個厚度通常(chang)可(ke)以(yi)滿足(zu)大部分實驗室的需(xu)求。如果需(xu)要更薄的切片(pian)(pian)厚度，則(ze)可(ke)以(yi)使(shi)用(yong)微(wei)(wei)切機進行切割，厚度可(ke)達1-2微(wei)(wei)米，但這種切片(pian)(pian)會更脆弱，操作難度更大。

二、石蠟切片制作過程是什么

石(shi)蠟(la)切片的制(zhi)作步驟如下：

1、組織包埋

（1）乙醇脫水：組織經(jing)不同濃(nong)度的(de)乙醇(chun)溶液進行逐(zhu)級脫(tuo)(tuo)水(shui)70％、80％、90％、95％、100％、100％，各級乙醇(chun) 40min（注意：骨性及(ji)鈣化組織需在JYBL-Ⅱ脫(tuo)(tuo)鈣液中浸泡24h，待組織軟化后(hou)再進行乙醇(chun)脫(tuo)(tuo)水(shui)步驟）。

（2）透明：組織依(yi)次(ci)浸泡于三個二甲苯中(zhong)，每缸(gang)各1h。

（3）浸蠟：組織依次浸泡于(yu)三(san)個石蠟缸中，每(mei)缸各1h。

（4）包埋：將液態的石蠟(la)倒入(ru)模具盒(he)中，再(zai)將浸好蠟(la)的組織塊平放底部，注意切(qie)面方向朝下放置，待石蠟(la)凝固后去掉包埋框，完全冷(leng)卻變(bian)硬后再(zai)修整蠟(la)塊，組織外圍的石蠟(la)保留適中以便(bian)切(qie)片。

2、切片與貼片

切片制作將預冷的蠟塊固定在石蠟切片機上，使石蠟塊的(de)(de)切(qie)面與(yu)刀(dao)口成平行(xing)方(fang)向，刀(dao)的(de)(de)傾斜度通常15℃，轉(zhuan)動輪轉(zhuan)推進器，調節切(qie)片(pian)厚度為4μm，切(qie)成厚度均(jun)勻的(de)(de)切(qie)片(pian)。

左手持毛筆，右手旋動切片機轉把，切片帶出來之后，用毛筆輕輕托起，再用鑷子輕鑷蠟片，以正面放入展片箱中，其水溫45℃左右。待攤平整后撈片。貼附切片左手持載玻片之一端，垂直入水去附貼切片，右手用鑷子輔助推動，附貼至玻片上的三分之二處。切(qie)片貼附后，放(fang)在空氣中(zhong)稍晾干，放(fang)置(zhi)(zhi)65℃烤片機上(shang)烤1h，再放(fang)置(zhi)(zhi)烘箱(xiang)內烘烤2h。

3、石蠟切片脫蠟至水

依次將石蠟切片(pian)放(fang)入二(er)(er)甲苯Ⅰ10min-二(er)(er)甲苯Ⅱ10min-二(er)(er)甲苯Ⅲ10min-無(wu)水乙(yi)醇Ⅰ5min-無(wu)水乙(yi)醇Ⅱ5min-90%酒(jiu)精5min-80%酒(jiu)精5min-70%酒(jiu)精5min-50%酒(jiu)精5min梯度脫(tuo)蠟。

4、HE染色

石蠟切片入蘇(su)木素染(ran)0.5-1分鐘(zhong)min，自來水(shui)(shui)(shui)漂洗，1%鹽酸酒精分化數秒(miao)，自來水(shui)(shui)(shui)漂洗，然后1%氨水(shui)(shui)(shui)水(shui)(shui)(shui)溶液(ye)返藍1min，流水(shui)(shui)(shui)沖洗數秒(miao)，放入伊紅染(ran)液(ye)中染(ran)色數秒(miao)，流水(shui)(shui)(shui)漂洗。

5、脫水封片

石蠟切片(pian)依次(ci)放(fang)入75%乙醇(chun)2min-85%乙醇(chun)2min-無水乙醇(chun)5min-無水乙醇(chun)5min-二甲苯5min透明，將切片(pian)從(cong)二甲苯拿出來中(zhong)性樹(shu)膠封片(pian)。