一、核酸檢測操作流程有哪些
目前,全國大部分城市都提供了核酸檢測,那么,核酸檢測要經過哪些步驟呢?下面一起了解下核酸檢測操作流程有哪些:
1、采集分泌物
首先(xian),醫務人員會使(shi)用咽拭(shi)子擦拭(shi)受檢者(zhe)鼻腔或(huo)者(zhe)喉嚨(long)扁桃(tao)體處,采集唾液分泌(mi)物,這個過程其實蠻疼(teng)的。
2、進行留樣
將人(ren)體分泌物(wu)采集出來以后,咽拭(shi)子(zi)浸(jin)到(dao)保存液中(zhong),將管子(zi)蓋(gai)子(zi)旋好進(jin)行留樣。
3、樣本送檢
然(ran)后,將樣本裝入到干凈的密封(feng)袋中封(feng)好,送到相關部分進行檢(jian)測。
4、核酸提取
相關部門將送來的樣本,送到指(zhi)定(ding)實驗(yan)(yan)室做(zuo)核酸提取實驗(yan)(yan)。
5、熒光PCR核酸檢測
核酸(suan)提取出來以后(hou),再使用(yong)熒光PCR進(jin)行檢測使用(yong),檢測是否有擴增反應,也就(jiu)是判斷陰性還(huan)是陽性。
6、出核酸檢測報告
最后,根(gen)據(ju)核酸(suan)(suan)檢測(ce)的熒光PCR反應結(jie)果,得出(chu)核酸(suan)(suan)檢測(ce)報告,本人查詢(xun)結(jie)果即可。
二、核酸檢測的原理是什么
檢測新(xin)型冠狀病毒特異序列的(de)方法最(zui)常見的(de)是熒光定(ding)量PCR(聚(ju)合(he)酶鏈式(shi)反(fan)(fan)應(ying)(ying)(ying))。因(yin)PCR反(fan)(fan)應(ying)(ying)(ying)模板僅為DNA,因(yin)此在進行PCR反(fan)(fan)應(ying)(ying)(ying)前,應(ying)(ying)(ying)將(jiang)新(xin)型冠狀病毒核酸(RNA)逆轉錄為DNA。在PCR反(fan)(fan)應(ying)(ying)(ying)體系中(zhong),包含一對特異性引物(wu)以(yi)及(ji)一個Taqman探針,該探針為一段(duan)特異性寡核苷酸序列,兩端分(fen)別(bie)標(biao)記(ji)了報告(gao)熒光基(ji)(ji)團(tuan)和淬滅熒光基(ji)(ji)團(tuan)。探針完整時(shi),報告(gao)基(ji)(ji)團(tuan)發(fa)射的(de)熒光信號被淬滅基(ji)(ji)團(tuan)吸收;如反(fan)(fan)應(ying)(ying)(ying)體系存在靶序列,PCR反(fan)(fan)應(ying)(ying)(ying)時(shi)探針與(yu)模板結合(he),DNA聚(ju)合(he)酶沿模板利用(yong)酶的(de)外切酶活(huo)性將(jiang)探針酶切降解,報告(gao)基(ji)(ji)團(tuan)與(yu)淬滅基(ji)(ji)團(tuan)分(fen)離,發(fa)出熒光。
每擴(kuo)增一條DNA鏈,就有一個熒光分子產(chan)生(sheng)。熒光定(ding)量PCR儀能夠(gou)監測出熒光到達預先設定(ding)閾(yu)值(zhi)的(de)循環數(Ct值(zhi))與病毒核酸(suan)(suan)濃度(du)有關,病毒核酸(suan)(suan)濃度(du)越高(gao),Ct值(zhi)越小。不同生(sheng)產(chan)企業(ye)的(de)產(chan)品會依據自身產(chan)品的(de)性(xing)能確定(ding)本(ben)產(chan)品的(de)陽性(xing)判斷值(zhi)。