一、apoe基因檢測是什么意思

APOE基因檢測，又稱載脂蛋白E基因檢測，APOE是(shi)apolipoprotein E的縮寫，翻譯過來就是(shi)載(zai)脂(zhi)(zhi)蛋白(bai)E，它是(shi)一種多態(tai)(tai)性蛋白(bai)，參(can)與(yu)脂(zhi)(zhi)蛋白(bai)的轉化與(yu)代謝過程(cheng)，其基因可(ke)以調節許(xu)多生物學功能(neng)，與(yu)許(xu)多眼科疾病發病有關，對ApoE及(ji)(ji)其基因多態(tai)(tai)性的研究(jiu)是(shi)醫學研究(jiu)的熱點之一，探討兩者之間的內在聯系，對眼病的預防(fang)、診(zhen)斷及(ji)(ji)治(zhi)療(liao)具有重要的臨(lin)床應用價值(zhi)。

二、APOE基因檢測的意義

在臨床上(shang)通過(guo)APOE基因檢測(ce)主要是針對于載脂蛋白(bai)e基因的(de)檢測(ce)，一(yi)般(ban)可將患者分為E2、E3、E4三個(ge)表(biao)現型，每個(ge)表(biao)現型在不(bu)同的(de)疾病的(de)發生率上(shang)都有不(bu)同的(de)特點。

我國大多(duo)數人群屬于E3表現型，屬于相(xiang)(xiang)對較為均衡(heng)的類型。E4表現型患(huan)者(zhe)出現動(dong)脈(mo)粥樣硬(ying)化、冠狀(zhuang)動(dong)脈(mo)粥樣硬(ying)化性(xing)(xing)心(xin)臟(zang)病和癡呆(dai)的風險(xian)(xian)相(xiang)(xiang)對比較低，黃斑變(bian)性(xing)(xing)導致(zhi)視力損害的可能性(xing)(xing)相(xiang)(xiang)對較高。E2表現型患(huan)者(zhe)幾乎(hu)不太可能出現黃斑變(bian)性(xing)(xing)，但是出現癡呆(dai)和冠心(xin)病的風險(xian)(xian)相(xiang)(xiang)對反而過高。

三、APOE基因檢測的方法

APOE基因檢測既(ji)可(ke)以(yi)(yi)以(yi)(yi)VLDL為(wei)樣(yang)(yang)品(pin)，又可(ke)以(yi)(yi)直(zhi)接以(yi)(yi)血清(qing)（或血漿）為(wei)樣(yang)(yang)品(pin)，通過IEF電泳分析(xi)、雙向PAGE或結合免疫印跡法進(jin)行測定：

1、等電聚焦法（IEF）

由于三種主要ApoE異(yi)構(gou)體E2、E3和E4的(de)等電(dian)點（pⅠ）分別為5.89、6.02和6.68，E4比(bi)E3多一個(ge)正電(dian)荷(he)(he)，而(er)E2比(bi)E3少一個(ge)正電(dian)荷(he)(he)。因此(ci)，可應(ying)用1EF檢(jian)測這(zhe)些異(yi)構(gou)體間(jian)電(dian)荷(he)(he)差異(yi)而(er)確定不(bu)(bu)同(tong)ApoE表(biao)型。傳(chuan)統ApoE表(biao)型檢(jian)測方法(fa)(fa)多采用超速離(li)心法(fa)(fa)或化學沉淀法(fa)(fa)分離(li)VLDL，脫(tuo)脂(zhi)后(hou)進行(xing)IEF，然后(hou)進行(xing)染色(se)分析。這(zhe)種方法(fa)(fa)需(xu)要血清(qing)量較多，昂(ang)貴、費(fei)時，又需(xu)要大(da)型設備，不(bu)(bu)適合大(da)規模研究。ApoE異(yi)構(gou)體之間(jian)染色(se)程度之間(jian)差異(yi)及電(dian)泳(yong)(yong)過程中泳(yong)(yong)動距離(li)的(de)變異(yi)性也造成(cheng)結果的(de)不(bu)(bu)穩定性。

2、雙相電泳法（two-dimensional electrophoresis）

第一相應(ying)(ying)用(yong)(yong)IEF電(dian)泳將等電(dian)點不(bu)同(tong)的(de)蛋白質分(fen)離；第二相根據蛋白質分(fen)子量(liang)不(bu)同(tong)及濃度(du)的(de)差(cha)異(yi)，應(ying)(ying)用(yong)(yong)SDS-PAGE進(jin)行分(fen)離，由此確定ApoE表(biao)型。此技術能解(jie)決IEF遇到的(de)一些轉錄后修(xiu)飾的(de)問題(ti)，臨(lin)床標(biao)本用(yong)(yong)量(liang)也(ye)很少，并且可以同(tong)時(shi)進(jin)行定性和定量(liang)分(fen)析，但由于成本昂貴而且費時(shi)，有時(shi)也(ye)難以清晰地分(fen)辨表(biao)型，故臨(lin)床上應(ying)(ying)用(yong)(yong)較少。

3、免疫印跡法（immunoblotting）

血清(qing)脫脂后，經IEF電(dian)泳將(jiang)ApoE與(yu)(yu)其(qi)他蛋白(bai)質(zhi)分(fen)離，然(ran)后將(jiang)凝膠中蛋白(bai)質(zhi)轉移到硝酸纖(xian)維(wei)素（NC）膜上，用(yong)抗(kang)ApoE抗(kang)體作為(wei)一(yi)抗(kang)進行免(mian)疫印跡反應或(huo)采用(yong)直接的(de)(de)免(mian)疫固(gu)定法(fa)，即可靈(ling)敏而特(te)異地顯示(shi)出(chu)ApoE區(qu)帶的(de)(de)位置，從而確定ApoE表(biao)型(xing)。此方(fang)法(fa)利(li)用(yong)抗(kang)原(yuan)-抗(kang)體的(de)(de)特(te)異反應，排除了血清(qing)其(qi)他蛋白(bai)質(zhi)的(de)(de)干擾，不需超速離心分(fen)離VLDL，血清(qing)用(yong)量少，是國內外實驗(yan)室檢測ApoE表(biao)型(xing)常用(yong)的(de)(de)方(fang)法(fa)之(zhi)一(yi)。但此類方(fang)法(fa)亦存(cun)在一(yi)些缺點(dian)，如對于存(cun)在與(yu)(yu)普遍異構體具有相同電(dian)荷的(de)(de)罕見異構體標(biao)本，或(huo)在糖尿病等病理(li)狀(zhuang)態時，由于轉錄后修飾引起(qi)蛋白(bai)質(zhi)變化的(de)(de)標(biao)本檢測時，就會(hui)給出(chu)錯誤的(de)(de)結果。