一、apoe基因檢測是什么意思

APOE基因檢測，又稱載脂蛋白E基因檢測，APOE是(shi)(shi)(shi)apolipoprotein E的(de)縮(suo)寫，翻譯過來就是(shi)(shi)(shi)載脂蛋白(bai)E，它(ta)是(shi)(shi)(shi)一(yi)(yi)種多(duo)態性(xing)蛋白(bai)，參與(yu)脂蛋白(bai)的(de)轉化與(yu)代謝(xie)過程，其基因可以調節許(xu)多(duo)生物學功能，與(yu)許(xu)多(duo)眼科疾病(bing)發病(bing)有(you)關，對ApoE及其基因多(duo)態性(xing)的(de)研(yan)究(jiu)是(shi)(shi)(shi)醫學研(yan)究(jiu)的(de)熱點之一(yi)(yi)，探(tan)討兩(liang)者之間的(de)內在(zai)聯系，對眼病(bing)的(de)預防、診(zhen)斷及治療具有(you)重要的(de)臨床應用價值。

二、APOE基因檢測的意義

在臨床上(shang)通過APOE基(ji)因檢測主要是針對于(yu)載脂蛋白e基(ji)因的檢測，一般可將患者分為E2、E3、E4三(san)個(ge)表(biao)現型(xing)，每(mei)個(ge)表(biao)現型(xing)在不同(tong)的疾病的發生率上(shang)都有不同(tong)的特點。

我(wo)國(guo)大多(duo)數(shu)人群屬(shu)于(yu)E3表(biao)現型(xing)，屬(shu)于(yu)相(xiang)(xiang)對較為(wei)均衡(heng)的(de)類型(xing)。E4表(biao)現型(xing)患者出(chu)(chu)(chu)現動(dong)脈粥樣(yang)硬化(hua)、冠(guan)狀動(dong)脈粥樣(yang)硬化(hua)性(xing)心臟(zang)病(bing)(bing)和(he)癡呆(dai)的(de)風(feng)險相(xiang)(xiang)對比(bi)較低，黃(huang)斑變性(xing)導致視力(li)損害的(de)可能性(xing)相(xiang)(xiang)對較高。E2表(biao)現型(xing)患者幾乎不太可能出(chu)(chu)(chu)現黃(huang)斑變性(xing)，但是出(chu)(chu)(chu)現癡呆(dai)和(he)冠(guan)心病(bing)(bing)的(de)風(feng)險相(xiang)(xiang)對反而(er)過高。

三、APOE基因檢測的方法

APOE基因檢測既(ji)可以(yi)(yi)以(yi)(yi)VLDL為(wei)樣品，又可以(yi)(yi)直接(jie)以(yi)(yi)血清（或血漿）為(wei)樣品，通過IEF電泳分(fen)析、雙向PAGE或結合免疫印跡法進行測定：

1、等電聚焦法（IEF）

由(you)于三種主要ApoE異構體(ti)E2、E3和E4的等電(dian)點（pⅠ）分(fen)別為5.89、6.02和6.68，E4比(bi)E3多(duo)(duo)一(yi)個正(zheng)(zheng)電(dian)荷(he)，而E2比(bi)E3少一(yi)個正(zheng)(zheng)電(dian)荷(he)。因此，可(ke)應用(yong)1EF檢測這些異構體(ti)間電(dian)荷(he)差異而確定(ding)(ding)不同ApoE表型。傳統(tong)ApoE表型檢測方法多(duo)(duo)采用(yong)超速離心(xin)法或化學沉淀(dian)法分(fen)離VLDL，脫(tuo)脂后進(jin)行(xing)(xing)IEF，然后進(jin)行(xing)(xing)染(ran)色分(fen)析(xi)。這種方法需要血清量較(jiao)多(duo)(duo)，昂貴(gui)、費時，又需要大(da)型設備，不適合大(da)規模研究(jiu)。ApoE異構體(ti)之間染(ran)色程(cheng)度之間差異及電(dian)泳過(guo)程(cheng)中泳動距離的變異性也造成(cheng)結(jie)果的不穩(wen)定(ding)(ding)性。

2、雙相電泳法（two-dimensional electrophoresis）

第一相(xiang)應(ying)用(yong)IEF電泳將等電點不(bu)同(tong)的(de)蛋(dan)白(bai)質分(fen)(fen)離；第二(er)相(xiang)根據蛋(dan)白(bai)質分(fen)(fen)子量不(bu)同(tong)及(ji)濃度的(de)差異，應(ying)用(yong)SDS-PAGE進行分(fen)(fen)離，由此確定ApoE表(biao)型。此技術能解決IEF遇到(dao)的(de)一些轉錄(lu)后(hou)修(xiu)飾的(de)問題，臨(lin)床(chuang)標本(ben)用(yong)量也很少(shao)，并且(qie)可(ke)以同(tong)時(shi)進行定性和(he)定量分(fen)(fen)析，但由于(yu)成本(ben)昂貴(gui)而且(qie)費時(shi)，有時(shi)也難(nan)以清晰地分(fen)(fen)辨(bian)表(biao)型，故臨(lin)床(chuang)上應(ying)用(yong)較少(shao)。

3、免疫印跡法（immunoblotting）

血(xue)清脫脂后(hou)，經(jing)IEF電(dian)泳將(jiang)ApoE與其他(ta)蛋(dan)(dan)白質(zhi)分離，然后(hou)將(jiang)凝膠中(zhong)蛋(dan)(dan)白質(zhi)轉移到硝酸纖維素（NC）膜上，用抗(kang)ApoE抗(kang)體(ti)(ti)作為一(yi)抗(kang)進行(xing)免(mian)疫印跡反應(ying)或采用直接的(de)免(mian)疫固定法(fa)，即可靈敏而特異地(di)顯示出ApoE區帶的(de)位置，從而確(que)定ApoE表型。此方(fang)法(fa)利(li)用抗(kang)原-抗(kang)體(ti)(ti)的(de)特異反應(ying)，排除了血(xue)清其他(ta)蛋(dan)(dan)白質(zhi)的(de)干擾，不需超速離心分離VLDL，血(xue)清用量(liang)少，是國(guo)內外實驗室(shi)檢(jian)測ApoE表型常(chang)用的(de)方(fang)法(fa)之一(yi)。但此類(lei)方(fang)法(fa)亦存在一(yi)些缺點，如對于(yu)(yu)存在與普遍異構體(ti)(ti)具有相同電(dian)荷的(de)罕見異構體(ti)(ti)標本，或在糖尿病等病理(li)狀(zhuang)態時，由于(yu)(yu)轉錄后(hou)修飾引起(qi)蛋(dan)(dan)白質(zhi)變化的(de)標本檢(jian)測時，就會給出錯誤的(de)結果(guo)。