一、apoe基因檢測是什么意思

APOE基因檢測，又稱載脂蛋白E基因檢測，APOE是apolipoprotein E的(de)縮(suo)寫，翻譯過來(lai)就(jiu)是載脂蛋(dan)白E，它是一(yi)種多(duo)態(tai)性蛋(dan)白，參與脂蛋(dan)白的(de)轉化與代謝過程，其基因(yin)可以調節(jie)許(xu)多(duo)生物學功能，與許(xu)多(duo)眼(yan)科疾(ji)病(bing)發病(bing)有關，對ApoE及其基因(yin)多(duo)態(tai)性的(de)研究(jiu)是醫學研究(jiu)的(de)熱點之一(yi)，探討兩者之間的(de)內在聯系，對眼(yan)病(bing)的(de)預防、診斷及治療具有重(zhong)要的(de)臨床應用(yong)價值。

二、APOE基因檢測的意義

在臨(lin)床上通過APOE基(ji)(ji)因(yin)檢(jian)測(ce)主要(yao)是針對于(yu)載脂蛋白e基(ji)(ji)因(yin)的(de)檢(jian)測(ce)，一般可將患(huan)者分為E2、E3、E4三個(ge)(ge)表現型(xing)，每個(ge)(ge)表現型(xing)在不(bu)同的(de)疾病的(de)發生(sheng)率上都有不(bu)同的(de)特(te)點(dian)。

我國(guo)大多數人群屬于E3表現(xian)型(xing)，屬于相(xiang)對(dui)(dui)(dui)較(jiao)為均衡的(de)類型(xing)。E4表現(xian)型(xing)患者(zhe)出現(xian)動脈粥樣(yang)硬(ying)化、冠(guan)狀(zhuang)動脈粥樣(yang)硬(ying)化性(xing)心(xin)臟(zang)病和(he)癡呆的(de)風險(xian)相(xiang)對(dui)(dui)(dui)比(bi)較(jiao)低(di)，黃斑變性(xing)導致視力(li)損害的(de)可能(neng)性(xing)相(xiang)對(dui)(dui)(dui)較(jiao)高。E2表現(xian)型(xing)患者(zhe)幾乎(hu)不太可能(neng)出現(xian)黃斑變性(xing)，但是(shi)出現(xian)癡呆和(he)冠(guan)心(xin)病的(de)風險(xian)相(xiang)對(dui)(dui)(dui)反而過高。

三、APOE基因檢測的方法

APOE基因檢測既可(ke)以以VLDL為樣(yang)品(pin)，又(you)可(ke)以直接以血(xue)清（或血(xue)漿）為樣(yang)品(pin)，通過IEF電泳分析、雙(shuang)向PAGE或結合(he)免疫印跡(ji)法進(jin)行測定：

1、等電聚焦法（IEF）

由于三(san)種(zhong)主要(yao)ApoE異(yi)(yi)構(gou)(gou)體E2、E3和E4的等電(dian)點（pⅠ）分別為5.89、6.02和6.68，E4比E3多(duo)一(yi)個正電(dian)荷，而(er)E2比E3少一(yi)個正電(dian)荷。因此，可應用1EF檢測這些異(yi)(yi)構(gou)(gou)體間(jian)電(dian)荷差異(yi)(yi)而(er)確定不同ApoE表(biao)型。傳統ApoE表(biao)型檢測方(fang)法多(duo)采用超速(su)離心法或化學(xue)沉淀法分離VLDL，脫脂(zhi)后(hou)進(jin)行IEF，然(ran)后(hou)進(jin)行染色(se)分析。這種(zhong)方(fang)法需要(yao)血清量較多(duo)，昂貴(gui)、費(fei)時，又需要(yao)大型設備(bei)，不適(shi)合大規模研究。ApoE異(yi)(yi)構(gou)(gou)體之(zhi)間(jian)染色(se)程度(du)之(zhi)間(jian)差異(yi)(yi)及電(dian)泳過程中泳動距離的變異(yi)(yi)性也造成(cheng)結果的不穩定性。

2、雙相電泳法（two-dimensional electrophoresis）

第(di)(di)一(yi)相應(ying)用(yong)IEF電泳將等電點(dian)不(bu)同的(de)蛋(dan)白質(zhi)(zhi)分(fen)離；第(di)(di)二相根(gen)據蛋(dan)白質(zhi)(zhi)分(fen)子量(liang)(liang)不(bu)同及濃度的(de)差異，應(ying)用(yong)SDS-PAGE進行(xing)分(fen)離，由(you)此確定ApoE表(biao)型(xing)。此技術能解決IEF遇到的(de)一(yi)些轉(zhuan)錄(lu)后修飾的(de)問題，臨(lin)(lin)床(chuang)標本用(yong)量(liang)(liang)也(ye)很少(shao)，并且可(ke)以同時(shi)(shi)進行(xing)定性和定量(liang)(liang)分(fen)析，但由(you)于成本昂(ang)貴而且費時(shi)(shi)，有(you)時(shi)(shi)也(ye)難以清晰(xi)地(di)分(fen)辨表(biao)型(xing)，故臨(lin)(lin)床(chuang)上應(ying)用(yong)較少(shao)。

3、免疫印跡法（immunoblotting）

血清(qing)脫脂后，經IEF電泳將ApoE與(yu)其(qi)(qi)他蛋(dan)白質(zhi)分離(li)，然后將凝膠中蛋(dan)白質(zhi)轉移到硝酸纖維素（NC）膜上，用(yong)(yong)(yong)抗ApoE抗體(ti)作(zuo)為一(yi)(yi)抗進行免疫(yi)印跡反應或(huo)采用(yong)(yong)(yong)直接(jie)的免疫(yi)固定法，即(ji)可靈敏而特異(yi)地顯(xian)示出ApoE區帶(dai)的位置，從(cong)而確(que)定ApoE表型。此方法利(li)用(yong)(yong)(yong)抗原-抗體(ti)的特異(yi)反應，排除了血清(qing)其(qi)(qi)他蛋(dan)白質(zhi)的干擾，不需超速離(li)心分離(li)VLDL，血清(qing)用(yong)(yong)(yong)量少，是(shi)國內外(wai)實驗室(shi)檢測(ce)(ce)ApoE表型常用(yong)(yong)(yong)的方法之(zhi)一(yi)(yi)。但(dan)此類方法亦存在一(yi)(yi)些(xie)缺點，如(ru)對(dui)于(yu)存在與(yu)普遍異(yi)構體(ti)具(ju)有相同電荷的罕見異(yi)構體(ti)標本，或(huo)在糖(tang)尿病等病理狀(zhuang)態時，由(you)于(yu)轉錄后修飾引起蛋(dan)白質(zhi)變化的標本檢測(ce)(ce)時，就(jiu)會給(gei)出錯(cuo)誤(wu)的結果。