一、apoe基因檢測是什么意思

APOE基因檢測，又稱載脂蛋白E基因檢測，APOE是(shi)apolipoprotein E的縮寫，翻(fan)譯(yi)過來就是(shi)載脂蛋白E，它是(shi)一(yi)(yi)種(zhong)多(duo)態性(xing)蛋白，參與脂蛋白的轉化與代謝過程(cheng)，其(qi)基(ji)(ji)因可以調節許多(duo)生物(wu)學(xue)功能，與許多(duo)眼(yan)科疾病發病有關(guan)，對(dui)ApoE及(ji)其(qi)基(ji)(ji)因多(duo)態性(xing)的研究是(shi)醫學(xue)研究的熱點之一(yi)(yi)，探討兩(liang)者(zhe)之間的內在(zai)聯(lian)系，對(dui)眼(yan)病的預防、診(zhen)斷及(ji)治療具有重要的臨(lin)床(chuang)應(ying)用(yong)價(jia)值(zhi)。

二、APOE基因檢測的意義

在(zai)(zai)臨床上通(tong)過APOE基因(yin)檢測主要是針對于載脂(zhi)蛋白(bai)e基因(yin)的(de)檢測，一般可將(jiang)患者(zhe)分(fen)為E2、E3、E4三(san)個表現(xian)型，每個表現(xian)型在(zai)(zai)不同(tong)的(de)疾病(bing)的(de)發生率上都有(you)不同(tong)的(de)特點。

我國大多數人群屬(shu)于E3表現(xian)(xian)型，屬(shu)于相對(dui)(dui)較(jiao)為均衡(heng)的(de)類型。E4表現(xian)(xian)型患者出(chu)現(xian)(xian)動(dong)脈粥樣(yang)硬(ying)化、冠狀動(dong)脈粥樣(yang)硬(ying)化性(xing)心臟病和癡呆的(de)風(feng)險相對(dui)(dui)比較(jiao)低，黃(huang)斑(ban)變(bian)性(xing)導(dao)致視(shi)力損害的(de)可能(neng)性(xing)相對(dui)(dui)較(jiao)高。E2表現(xian)(xian)型患者幾乎不太可能(neng)出(chu)現(xian)(xian)黃(huang)斑(ban)變(bian)性(xing)，但是出(chu)現(xian)(xian)癡呆和冠心病的(de)風(feng)險相對(dui)(dui)反而過(guo)高。

三、APOE基因檢測的方法

APOE基因檢測既可以(yi)以(yi)VLDL為樣(yang)品(pin)，又可以(yi)直接以(yi)血(xue)清（或(huo)(huo)血(xue)漿）為樣(yang)品(pin)，通過(guo)IEF電泳分析、雙向(xiang)PAGE或(huo)(huo)結合免疫印跡法進行測定(ding)：

1、等電聚焦法（IEF）

由于三種(zhong)主要(yao)ApoE異(yi)構(gou)體E2、E3和(he)E4的等電(dian)點（pⅠ）分別為5.89、6.02和(he)6.68，E4比E3多(duo)一個正電(dian)荷(he)(he)，而E2比E3少一個正電(dian)荷(he)(he)。因此，可(ke)應(ying)用(yong)1EF檢測這些異(yi)構(gou)體間電(dian)荷(he)(he)差異(yi)而確定(ding)不(bu)(bu)同ApoE表(biao)(biao)型(xing)。傳統(tong)ApoE表(biao)(biao)型(xing)檢測方(fang)法多(duo)采用(yong)超(chao)速離(li)(li)心(xin)法或(huo)化學沉淀法分離(li)(li)VLDL，脫(tuo)脂后(hou)進行(xing)IEF，然(ran)后(hou)進行(xing)染色分析。這種(zhong)方(fang)法需要(yao)血清量較多(duo)，昂貴、費時，又(you)需要(yao)大型(xing)設(she)備(bei)，不(bu)(bu)適合大規模研究。ApoE異(yi)構(gou)體之間染色程度(du)之間差異(yi)及(ji)電(dian)泳(yong)過程中泳(yong)動(dong)距(ju)離(li)(li)的變(bian)異(yi)性也造成結果的不(bu)(bu)穩(wen)定(ding)性。

2、雙相電泳法（two-dimensional electrophoresis）

第(di)一相(xiang)應(ying)用(yong)IEF電泳將(jiang)等電點不同(tong)的蛋白(bai)質分(fen)離(li)；第(di)二相(xiang)根據蛋白(bai)質分(fen)子量(liang)不同(tong)及濃度的差異，應(ying)用(yong)SDS-PAGE進行分(fen)離(li)，由(you)此(ci)確定(ding)(ding)ApoE表型(xing)。此(ci)技術(shu)能(neng)解決IEF遇(yu)到的一些(xie)轉錄后修(xiu)飾的問題，臨床(chuang)標(biao)本用(yong)量(liang)也很少(shao)，并且可以同(tong)時(shi)(shi)進行定(ding)(ding)性和定(ding)(ding)量(liang)分(fen)析，但由(you)于成本昂貴而且費時(shi)(shi)，有(you)時(shi)(shi)也難(nan)以清晰地分(fen)辨表型(xing)，故臨床(chuang)上應(ying)用(yong)較少(shao)。

3、免疫印跡法（immunoblotting）

血(xue)清脫脂后，經IEF電(dian)泳將ApoE與(yu)其(qi)他(ta)蛋白質(zhi)(zhi)分離(li)(li)，然后將凝膠中蛋白質(zhi)(zhi)轉(zhuan)移到硝(xiao)酸纖(xian)維素（NC）膜上，用抗ApoE抗體(ti)(ti)作為(wei)一抗進行免(mian)疫印跡(ji)反(fan)(fan)應(ying)或(huo)(huo)采用直(zhi)接(jie)的免(mian)疫固定法(fa)，即可靈(ling)敏(min)而特異地顯示出ApoE區帶的位置，從而確定ApoE表(biao)(biao)型(xing)。此方法(fa)利用抗原-抗體(ti)(ti)的特異反(fan)(fan)應(ying)，排除了(le)血(xue)清其(qi)他(ta)蛋白質(zhi)(zhi)的干擾，不(bu)需超速離(li)(li)心(xin)分離(li)(li)VLDL，血(xue)清用量少，是國內外實驗室檢測(ce)ApoE表(biao)(biao)型(xing)常用的方法(fa)之一。但此類(lei)方法(fa)亦存(cun)在(zai)一些缺點，如(ru)對于存(cun)在(zai)與(yu)普遍異構體(ti)(ti)具有相同(tong)電(dian)荷的罕見異構體(ti)(ti)標本(ben)(ben)，或(huo)(huo)在(zai)糖尿病等病理(li)狀態(tai)時，由于轉(zhuan)錄(lu)后修飾引(yin)起蛋白質(zhi)(zhi)變(bian)化的標本(ben)(ben)檢測(ce)時，就會給出錯誤的結(jie)果。