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高效液相色譜儀有什么特點 高效液相色譜儀原理是什么

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。接下來本文將簡單介紹高效液相色譜儀有什么特點以及高效液相色譜儀原理是什么,一起到文中來看看吧!

一、高效液相色譜儀有什么特點

高(gao)(gao)效液相色譜(pu)儀的顯著特征是高(gao)(gao)壓、高(gao)(gao)速、高(gao)(gao)效、高(gao)(gao)靈敏度、高(gao)(gao)選(xuan)擇性(xing)和(he)應(ying)用范圍廣等。

1、高壓

高(gao)(gao)效(xiao)液相色譜儀(yi)為了獲得高(gao)(gao)柱效(xiao),使(shi)用的固定(ding)相粒徑很小(<10um),液體流(liu)動相高(gao)(gao)速通過時(shi),產(chan)生很高(gao)(gao)的壓力,工作壓力范圍(wei)為1.5×107~3.5×107Pa。

2、高速

由(you)于釆用了高壓,流動相流速快,所需的(de)分(fen)析(xi)時間比經典液相柱(zhu)色譜儀少得(de)多。

3、高效

高效液相色譜儀的柱(zhu)效能約3萬塔板(ban)/米,氣相(xiang)色譜儀的柱(zhu)效能約2000塔板(ban)/米。

4、高靈敏度

由于采用了高(gao)靈(ling)敏(min)度(du)的檢測器(qi),最小檢測量可達10-9g,甚(shen)至10-11g,而所需樣品量很(hen)少。

5、高選擇性

可以通過控(kong)制(zhi)流動(dong)相改(gai)善分(fen)離過程(cheng)的選擇性。

6、應用范圍廣

高(gao)效液相色(se)(se)譜(pu)儀(yi)可用于(yu)高(gao)沸(fei)點、熱穩定性(xing)差以(yi)(yi)及具有(you)生理活性(xing)物(wu)質(zhi)的分析(xi)。一(yi)般(ban)來說,沸(fei)點在450℃以(yi)(yi)下,相對分子質(zhi)量小于(yu)450的有(you)機物(wu)可用氣(qi)相色(se)(se)譜(pu)儀(yi)分析(xi),但這些(xie)物(wu)質(zhi)只占(zhan)有(you)機物(wu)的15%~20%,其余的80%~85%有(you)機物(wu)原(yuan)則上(shang)可采用高(gao)效液相色(se)(se)譜(pu)儀(yi)分析(xi)。

二、高效液相色譜儀原理是什么

高(gao)(gao)效液(ye)(ye)相(xiang)色(se)譜儀(yi)(yi)(yi)(yi)(HPLC)是應用高(gao)(gao)效液(ye)(ye)相(xiang)色(se)譜原理,主要(yao)用于分(fen)(fen)析(xi)高(gao)(gao)沸點(dian)不易(yi)揮(hui)發的(de)(de)、受熱不穩定(ding)的(de)(de)和分(fen)(fen)子量大的(de)(de)有(you)機化合物的(de)(de)儀(yi)(yi)(yi)(yi)器設備。它由儲(chu)液(ye)(ye)器、泵、進(jin)樣(yang)(yang)器、色(se)譜柱(zhu)、檢測(ce)器、記錄(lu)(lu)儀(yi)(yi)(yi)(yi)等幾部(bu)分(fen)(fen)組成。儲(chu)液(ye)(ye)器中(zhong)的(de)(de)流(liu)(liu)動(dong)相(xiang)被高(gao)(gao)壓(ya)泵打入系統,樣(yang)(yang)品(pin)(pin)溶(rong)液(ye)(ye)經進(jin)樣(yang)(yang)器進(jin)入流(liu)(liu)動(dong)相(xiang),被流(liu)(liu)動(dong)相(xiang)載入色(se)譜柱(zhu)(固定(ding)相(xiang))內(nei),由于樣(yang)(yang)品(pin)(pin)溶(rong)液(ye)(ye)中(zhong)的(de)(de)各組分(fen)(fen)在(zai)兩(liang)相(xiang)中(zhong)具有(you)不同(tong)的(de)(de)分(fen)(fen)配系數,在(zai)兩(liang)相(xiang)中(zhong)做相(xiang)對運動(dong)時,經過反復多(duo)次(ci)的(de)(de)吸附-解吸的(de)(de)分(fen)(fen)配過程,各組分(fen)(fen)在(zai)移動(dong)速度(du)上產生較大的(de)(de)差(cha)別,被分(fen)(fen)離成單個(ge)組分(fen)(fen)依次(ci)從柱(zhu)內(nei)流(liu)(liu)出,通過檢測(ce)器時,樣(yang)(yang)品(pin)(pin)濃度(du)被轉換成電(dian)信號傳送(song)到記錄(lu)(lu)儀(yi)(yi)(yi)(yi),數據以(yi)圖譜形式打印出來。

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