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高效液相色譜儀有什么特點 高效液相色譜儀原理是什么

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。接下來本文將簡單介紹高效液相色譜儀有什么特點以及高效液相色譜儀原理是什么,一起到文中來看看吧!

一、高效液相色譜儀有什么特點

高(gao)效(xiao)液相色譜儀的(de)顯著特(te)征(zheng)是高(gao)壓、高(gao)速、高(gao)效(xiao)、高(gao)靈(ling)敏度、高(gao)選擇性和(he)應用范圍廣等。

1、高壓

高(gao)(gao)效液(ye)相色(se)譜儀為了獲得高(gao)(gao)柱效,使用的固定相粒徑(jing)很(hen)(hen)小(<10um),液(ye)體流動(dong)相高(gao)(gao)速(su)通(tong)過(guo)時(shi),產(chan)生很(hen)(hen)高(gao)(gao)的壓力,工作(zuo)壓力范圍為1.5×107~3.5×107Pa。

2、高速

由于釆用(yong)了高壓,流動相流速快(kuai),所需(xu)的分(fen)析(xi)時(shi)間比經典液相柱色譜(pu)儀(yi)少得多。

3、高效

高效液相色譜儀的柱(zhu)效能約3萬(wan)塔板/米,氣相色譜儀(yi)的柱(zhu)效能約2000塔板/米。

4、高靈敏度

由于采用了高靈(ling)敏度的(de)檢(jian)測(ce)器(qi),最小(xiao)檢(jian)測(ce)量(liang)可達10-9g,甚至(zhi)10-11g,而所需樣品量(liang)很(hen)少。

5、高選擇性

可以通過控制流(liu)動相改(gai)善分離過程(cheng)的選擇性。

6、應用范圍廣

高效液(ye)相(xiang)色譜儀可(ke)用(yong)于(yu)高沸(fei)點、熱穩定性(xing)(xing)差以及(ji)具有生理活性(xing)(xing)物(wu)質的(de)分(fen)析。一般來說,沸(fei)點在(zai)450℃以下,相(xiang)對分(fen)子質量(liang)小于(yu)450的(de)有機物(wu)可(ke)用(yong)氣相(xiang)色譜儀分(fen)析,但這(zhe)些物(wu)質只占(zhan)有機物(wu)的(de)15%~20%,其余(yu)的(de)80%~85%有機物(wu)原(yuan)則上可(ke)采用(yong)高效液(ye)相(xiang)色譜儀分(fen)析。

二、高效液相色譜儀原理是什么

高效液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)儀(yi)(HPLC)是應用高效液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)原理,主(zhu)要用于(yu)分(fen)析高沸點不(bu)易揮發的(de)、受熱不(bu)穩定(ding)(ding)的(de)和分(fen)子量大(da)的(de)有機化合物的(de)儀(yi)器(qi)(qi)設備。它由儲(chu)液(ye)器(qi)(qi)、泵、進樣器(qi)(qi)、色譜(pu)(pu)柱(zhu)、檢測(ce)器(qi)(qi)、記(ji)錄儀(yi)等幾部(bu)分(fen)組(zu)成(cheng)(cheng)。儲(chu)液(ye)器(qi)(qi)中(zhong)的(de)流(liu)(liu)動(dong)(dong)相(xiang)(xiang)(xiang)被高壓泵打入系統,樣品(pin)溶(rong)液(ye)經進樣器(qi)(qi)進入流(liu)(liu)動(dong)(dong)相(xiang)(xiang)(xiang),被流(liu)(liu)動(dong)(dong)相(xiang)(xiang)(xiang)載(zai)入色譜(pu)(pu)柱(zhu)(固(gu)定(ding)(ding)相(xiang)(xiang)(xiang))內,由于(yu)樣品(pin)溶(rong)液(ye)中(zhong)的(de)各組(zu)分(fen)在兩(liang)相(xiang)(xiang)(xiang)中(zhong)具有不(bu)同的(de)分(fen)配系數(shu)(shu),在兩(liang)相(xiang)(xiang)(xiang)中(zhong)做相(xiang)(xiang)(xiang)對運(yun)動(dong)(dong)時,經過反(fan)復多次(ci)的(de)吸(xi)附(fu)-解(jie)吸(xi)的(de)分(fen)配過程,各組(zu)分(fen)在移動(dong)(dong)速度上(shang)產生較大(da)的(de)差(cha)別,被分(fen)離成(cheng)(cheng)單個(ge)組(zu)分(fen)依(yi)次(ci)從柱(zhu)內流(liu)(liu)出(chu),通過檢測(ce)器(qi)(qi)時,樣品(pin)濃(nong)度被轉換成(cheng)(cheng)電信號傳(chuan)送到(dao)記(ji)錄儀(yi),數(shu)(shu)據以(yi)圖譜(pu)(pu)形式打印出(chu)來(lai)。

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