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液相色譜儀操作流程是什么 液相色譜儀操作注意事項有哪些

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:液相色譜儀引入了氣相色譜儀的理論,技術上采用了高壓輸液泵、高效固定相、梯度洗脫技術和高靈敏度檢測器,具有高壓、高速、高效、高靈敏度、高選擇性和應用范圍廣等特點。接下來本文將簡單介紹液相色譜儀操作流程是什么以及液相色譜儀操作注意事項有哪些,一起到文中來看看吧!

一、液相色譜儀操作流程是什么 ?

生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流程是什么(me)呢?一起來(lai)看(kan)(kan)看(kan)(kan)吧!

首先先對流動相(xiang)進行過濾(lv),根據需要(yao)選擇不同的濾(lv)膜,一(yi)(yi)般為有(you)機系和水(shui)系,常用的孔徑為0.20um和0.45um。然后對抽(chou)濾(lv)后的流動相(xiang)進行超(chao)聲脫氣10-20分(fen)鐘。一(yi)(yi)般情況(kuang)下,流動相(xiang)沖洗20-30分(fen)鐘后,儀(yi)器方(fang)可穩定,最重要(yao)的是儀(yi)器基線走(zou)后,方(fang)可進樣測試。

二、液相色譜儀操作注意事項有哪些

1、流動相必須用HPLC級的試劑,使用前過濾除去其(qi)中的顆(ke)粒(li)性雜質(zhi)和其(qi)他物質(zhi)。

2、流動相過濾后(hou)要用超聲波脫氣,脫氣后(hou)應該恢復到室(shi)溫后(hou)使用。

3、不能用純乙腈(jing)作為(wei)流動(dong)相(xiang),這樣會使單(dan)向閥粘住而導致(zhi)泵不進液。

4、使(shi)用(yong)(yong)緩沖(chong)溶液時,做完樣(yang)品后(hou)應立(li)即用(yong)(yong)去(qu)離(li)子(zi)水沖(chong)洗管路及柱子(zi)一(yi)小(xiao)時,然(ran)后(hou)用(yong)(yong)甲醇沖(chong)洗40分(fen)鐘以上,以充分(fen)洗去(qu)離(li)子(zi)。對于柱塞桿外部,做完樣(yang)品后(hou)也必須用(yong)(yong)去(qu)離(li)子(zi)水沖(chong)洗。

5、長(chang)時(shi)間不用儀器,應(ying)該將柱(zhu)子取下用堵頭封好保(bao)存(cun),注意不能用純水(shui)保(bao)存(cun)柱(zhu)子,而(er)應(ying)該用有機相,因為(wei)純水(shui)易長(chang)霉。

6、每(mei)次做完樣品(pin)后應該用溶(rong)解樣品(pin)的溶(rong)劑清洗進樣器。

7、C18柱絕對不能(neng)進蛋白樣(yang)品(pin),血(xue)樣(yang)、生物(wu)樣(yang)品(pin)。

8、堵塞導致壓(ya)力太(tai)大(da),按預柱(zhu)→混合器中(zhong)的過(guo)濾器→管路過(guo)濾器→單向閥檢查并清洗。

9、氣(qi)泡會(hui)致使(shi)(shi)壓(ya)力不穩,重現性差,所(suo)以在使(shi)(shi)用過(guo)程(cheng)中要盡量避免產生氣(qi)泡。

10、如果進液(ye)管內(nei)不進液(ye)體(ti)時,要使(shi)用注射器吸液(ye):通常在輸(shu)液(ye)前要進行流動相的(de)清洗。

11、要(yao)注意柱(zhu)子的pH值(zhi)范圍,不(bu)得注射強酸強堿的樣品,特(te)別是堿性樣品。

12、更(geng)換流動(dong)(dong)相(xiang)(xiang)時應該(gai)先將吸濾(lv)頭部(bu)分放入(ru)燒(shao)杯中邊振動(dong)(dong)邊靖(jing)洗,然(ran)后插入(ru)新的(de)(de)流動(dong)(dong)相(xiang)(xiang)中。更(geng)換無互溶(rong)性(xing)的(de)(de)流動(dong)(dong)相(xiang)(xiang)時要用異丙醇過渡一(yi)下(xia)。

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