一、液相色譜儀操作流程是什么 ?
生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流程是(shi)什(shen)么呢(ni)?一起來看看吧!
首先先對流(liu)動相(xiang)進行過(guo)濾,根據需(xu)要(yao)選擇(ze)不同的濾膜(mo),一般為有機系和水系,常用的孔徑為0.20um和0.45um。然后對抽濾后的流(liu)動相(xiang)進行超聲脫氣10-20分鐘。一般情(qing)況下,流(liu)動相(xiang)沖洗20-30分鐘后,儀器方(fang)可穩定(ding),最(zui)重(zhong)要(yao)的是儀器基線走后,方(fang)可進樣測(ce)試。
二、液相色譜儀操作注意事項有哪些
1、流動相(xiang)必(bi)須用(yong)HPLC級(ji)的試劑,使用(yong)前(qian)過濾除(chu)去其(qi)中的顆粒(li)性雜(za)質(zhi)和其(qi)他(ta)物質(zhi)。
2、流動(dong)相過濾后(hou)要用(yong)超聲波脫氣,脫氣后(hou)應該恢復到室溫后(hou)使用(yong)。
3、不能用(yong)純乙(yi)腈(jing)作(zuo)為(wei)流動相,這樣會(hui)使單(dan)向(xiang)閥粘住而導致泵不進(jin)液。
4、使用(yong)(yong)緩沖溶(rong)液時,做完樣品后(hou)應立即(ji)用(yong)(yong)去(qu)離子(zi)水沖洗管路及(ji)柱子(zi)一小時,然后(hou)用(yong)(yong)甲醇(chun)沖洗40分(fen)鐘以(yi)上,以(yi)充分(fen)洗去(qu)離子(zi)。對于柱塞桿外部(bu),做完樣品后(hou)也必須(xu)用(yong)(yong)去(qu)離子(zi)水沖洗。
5、長(chang)時間不用(yong)儀器,應該(gai)將柱子取下(xia)用(yong)堵頭封好保存(cun),注意(yi)不能用(yong)純水(shui)保存(cun)柱子,而應該(gai)用(yong)有機相,因為純水(shui)易長(chang)霉。
6、每(mei)次做(zuo)完樣品后應該用(yong)溶解樣品的溶劑(ji)清洗進樣器。
7、C18柱絕(jue)對不能進蛋白樣品,血樣、生物樣品。
8、堵塞導致壓(ya)力太大,按預柱→混(hun)合器(qi)中的(de)過濾器(qi)→管路過濾器(qi)→單(dan)向閥(fa)檢查(cha)并清(qing)洗。
9、氣泡(pao)會致(zhi)使壓力(li)不穩,重現性差,所以在使用過程中要盡量避免(mian)產生氣泡(pao)。
10、如(ru)果進(jin)液管內(nei)不進(jin)液體時(shi),要(yao)使用注(zhu)射器吸液:通常在輸(shu)液前(qian)要(yao)進(jin)行流動相的(de)清洗。
11、要(yao)注意柱子的pH值范圍,不得注射(she)強(qiang)酸(suan)強(qiang)堿的樣(yang)品(pin),特別是堿性樣(yang)品(pin)。
12、更換(huan)流(liu)動相時應該先將(jiang)吸濾頭部分放(fang)入(ru)燒杯中(zhong)邊(bian)振動邊(bian)靖洗(xi),然后插入(ru)新的流(liu)動相中(zhong)。更換(huan)無互溶性的流(liu)動相時要用異丙(bing)醇(chun)過渡一下(xia)。