一、液相色譜儀操作流程是什么 ?
生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流(liu)程(cheng)是什么呢(ni)?一(yi)起來(lai)看看吧!
首先(xian)先(xian)對流(liu)動(dong)相(xiang)進行過濾(lv),根據需要選(xuan)擇不(bu)同的(de)濾(lv)膜,一般為有機(ji)系和水系,常用的(de)孔徑為0.20um和0.45um。然(ran)后對抽濾(lv)后的(de)流(liu)動(dong)相(xiang)進行超聲脫氣(qi)10-20分(fen)(fen)鐘(zhong)。一般情況下,流(liu)動(dong)相(xiang)沖(chong)洗20-30分(fen)(fen)鐘(zhong)后,儀器方(fang)可穩(wen)定(ding),最重要的(de)是儀器基線走后,方(fang)可進樣測試。
二、液相色譜儀操作注意事項有哪些
1、流(liu)動相必須用HPLC級的試劑,使用前過濾(lv)除去其中(zhong)的顆粒性雜質和其他物質。
2、流動(dong)相過濾后要(yao)用超聲波(bo)脫氣,脫氣后應該恢復到室溫后使(shi)用。
3、不能(neng)用純乙(yi)腈作(zuo)為(wei)流動(dong)相,這樣會使單向閥粘住而導致泵不進液。
4、使(shi)用(yong)緩沖溶(rong)液時,做完樣品后(hou)應立即用(yong)去離子水沖洗(xi)管路及柱子一小時,然(ran)后(hou)用(yong)甲醇(chun)沖洗(xi)40分(fen)鐘以(yi)上,以(yi)充分(fen)洗(xi)去離子。對于柱塞桿外部,做完樣品后(hou)也必須(xu)用(yong)去離子水沖洗(xi)。
5、長時(shi)間不用儀器(qi),應該(gai)將(jiang)柱(zhu)子取下用堵頭(tou)封好保存,注意(yi)不能用純水(shui)保存柱(zhu)子,而(er)應該(gai)用有機相,因(yin)為(wei)純水(shui)易長霉。
6、每次做(zuo)完樣品后應該用溶解樣品的溶劑清洗進樣器。
7、C18柱絕對(dui)不能進蛋白(bai)樣(yang)品,血樣(yang)、生物(wu)樣(yang)品。
8、堵塞(sai)導(dao)致壓(ya)力太大,按(an)預(yu)柱(zhu)→混(hun)合器中(zhong)的過(guo)濾(lv)器→管路(lu)過(guo)濾(lv)器→單向閥(fa)檢(jian)查并清洗。
9、氣(qi)泡會致(zhi)使壓力不穩,重現性差,所以在使用過程中要盡(jin)量(liang)避免產生氣(qi)泡。
10、如果進(jin)(jin)液(ye)管內不進(jin)(jin)液(ye)體時,要使用注射(she)器(qi)吸液(ye):通常在(zai)輸液(ye)前要進(jin)(jin)行流動相的(de)清洗。
11、要注(zhu)(zhu)意柱(zhu)子的pH值范圍(wei),不得注(zhu)(zhu)射強酸強堿的樣品,特(te)別是堿性樣品。
12、更換流動相時應該先將吸(xi)濾頭部(bu)分放(fang)入燒杯中邊(bian)振動邊(bian)靖(jing)洗,然后插入新的(de)流動相中。更換無(wu)互溶性的(de)流動相時要(yao)用異丙醇(chun)過渡一下。