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液相色譜儀操作流程是什么 液相色譜儀操作注意事項有哪些

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:液相色譜儀引入了氣相色譜儀的理論,技術上采用了高壓輸液泵、高效固定相、梯度洗脫技術和高靈敏度檢測器,具有高壓、高速、高效、高靈敏度、高選擇性和應用范圍廣等特點。接下來本文將簡單介紹液相色譜儀操作流程是什么以及液相色譜儀操作注意事項有哪些,一起到文中來看看吧!

一、液相色譜儀操作流程是什么 ?

生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流程是(shi)什(shen)么呢(ni)?一起來看看吧!

首先先對流(liu)動相(xiang)進行過(guo)濾,根據需(xu)要(yao)選擇(ze)不同的濾膜(mo),一般為有機系和水系,常用的孔徑為0.20um和0.45um。然后對抽濾后的流(liu)動相(xiang)進行超聲脫氣10-20分鐘。一般情(qing)況下,流(liu)動相(xiang)沖洗20-30分鐘后,儀器方(fang)可穩定(ding),最(zui)重(zhong)要(yao)的是儀器基線走后,方(fang)可進樣測(ce)試。

二、液相色譜儀操作注意事項有哪些

1、流動相(xiang)必(bi)須用(yong)HPLC級(ji)的試劑,使用(yong)前(qian)過濾除(chu)去其(qi)中的顆粒(li)性雜(za)質(zhi)和其(qi)他(ta)物質(zhi)。

2、流動(dong)相過濾后(hou)要用(yong)超聲波脫氣,脫氣后(hou)應該恢復到室溫后(hou)使用(yong)。

3、不能用(yong)純乙(yi)腈(jing)作(zuo)為(wei)流動相,這樣會(hui)使單(dan)向(xiang)閥粘住而導致泵不進(jin)液。

4、使用(yong)(yong)緩沖溶(rong)液時,做完樣品后(hou)應立即(ji)用(yong)(yong)去(qu)離子(zi)水沖洗管路及(ji)柱子(zi)一小時,然后(hou)用(yong)(yong)甲醇(chun)沖洗40分(fen)鐘以(yi)上,以(yi)充分(fen)洗去(qu)離子(zi)。對于柱塞桿外部(bu),做完樣品后(hou)也必須(xu)用(yong)(yong)去(qu)離子(zi)水沖洗。

5、長(chang)時間不用(yong)儀器,應該(gai)將柱子取下(xia)用(yong)堵頭封好保存(cun),注意(yi)不能用(yong)純水(shui)保存(cun)柱子,而應該(gai)用(yong)有機相,因為純水(shui)易長(chang)霉。

6、每(mei)次做(zuo)完樣品后應該用(yong)溶解樣品的溶劑(ji)清洗進樣器。

7、C18柱絕(jue)對不能進蛋白樣品,血樣、生物樣品。

8、堵塞導致壓(ya)力太大,按預柱→混(hun)合器(qi)中的(de)過濾器(qi)→管路過濾器(qi)→單(dan)向閥(fa)檢查(cha)并清(qing)洗。

9、氣泡(pao)會致(zhi)使壓力(li)不穩,重現性差,所以在使用過程中要盡量避免(mian)產生氣泡(pao)。

10、如(ru)果進(jin)液管內(nei)不進(jin)液體時(shi),要(yao)使用注(zhu)射器吸液:通常在輸(shu)液前(qian)要(yao)進(jin)行流動相的(de)清洗。

11、要(yao)注意柱子的pH值范圍,不得注射(she)強(qiang)酸(suan)強(qiang)堿的樣(yang)品(pin),特別是堿性樣(yang)品(pin)。

12、更換(huan)流(liu)動相時應該先將(jiang)吸濾頭部分放(fang)入(ru)燒杯中(zhong)邊(bian)振動邊(bian)靖洗(xi),然后插入(ru)新的流(liu)動相中(zhong)。更換(huan)無互溶性的流(liu)動相時要用異丙(bing)醇(chun)過渡一下(xia)。

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