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液相色譜儀操作流程是什么 液相色譜儀操作注意事項有哪些

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:液相色譜儀引入了氣相色譜儀的理論,技術上采用了高壓輸液泵、高效固定相、梯度洗脫技術和高靈敏度檢測器,具有高壓、高速、高效、高靈敏度、高選擇性和應用范圍廣等特點。接下來本文將簡單介紹液相色譜儀操作流程是什么以及液相色譜儀操作注意事項有哪些,一起到文中來看看吧!

一、液相色譜儀操作流程是什么 ?

生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流(liu)程(cheng)是什么呢(ni)?一(yi)起來(lai)看看吧!

首先(xian)先(xian)對流(liu)動(dong)相(xiang)進行過濾(lv),根據需要選(xuan)擇不(bu)同的(de)濾(lv)膜,一般為有機(ji)系和水系,常用的(de)孔徑為0.20um和0.45um。然(ran)后對抽濾(lv)后的(de)流(liu)動(dong)相(xiang)進行超聲脫氣(qi)10-20分(fen)(fen)鐘(zhong)。一般情況下,流(liu)動(dong)相(xiang)沖(chong)洗20-30分(fen)(fen)鐘(zhong)后,儀器方(fang)可穩(wen)定(ding),最重要的(de)是儀器基線走后,方(fang)可進樣測試。

二、液相色譜儀操作注意事項有哪些

1、流(liu)動相必須用HPLC級的試劑,使用前過濾(lv)除去其中(zhong)的顆粒性雜質和其他物質。

2、流動(dong)相過濾后要(yao)用超聲波(bo)脫氣,脫氣后應該恢復到室溫后使(shi)用。

3、不能(neng)用純乙(yi)腈作(zuo)為(wei)流動(dong)相,這樣會使單向閥粘住而導致泵不進液。

4、使(shi)用(yong)緩沖溶(rong)液時,做完樣品后(hou)應立即用(yong)去離子水沖洗(xi)管路及柱子一小時,然(ran)后(hou)用(yong)甲醇(chun)沖洗(xi)40分(fen)鐘以(yi)上,以(yi)充分(fen)洗(xi)去離子。對于柱塞桿外部,做完樣品后(hou)也必須(xu)用(yong)去離子水沖洗(xi)。

5、長時(shi)間不用儀器(qi),應該(gai)將(jiang)柱(zhu)子取下用堵頭(tou)封好保存,注意(yi)不能用純水(shui)保存柱(zhu)子,而(er)應該(gai)用有機相,因(yin)為(wei)純水(shui)易長霉。

6、每次做(zuo)完樣品后應該用溶解樣品的溶劑清洗進樣器。

7、C18柱絕對(dui)不能進蛋白(bai)樣(yang)品,血樣(yang)、生物(wu)樣(yang)品。

8、堵塞(sai)導(dao)致壓(ya)力太大,按(an)預(yu)柱(zhu)→混(hun)合器中(zhong)的過(guo)濾(lv)器→管路(lu)過(guo)濾(lv)器→單向閥(fa)檢(jian)查并清洗。

9、氣(qi)泡會致(zhi)使壓力不穩,重現性差,所以在使用過程中要盡(jin)量(liang)避免產生氣(qi)泡。

10、如果進(jin)(jin)液(ye)管內不進(jin)(jin)液(ye)體時,要使用注射(she)器(qi)吸液(ye):通常在(zai)輸液(ye)前要進(jin)(jin)行流動相的(de)清洗。

11、要注(zhu)(zhu)意柱(zhu)子的pH值范圍(wei),不得注(zhu)(zhu)射強酸強堿的樣品,特(te)別是堿性樣品。

12、更換流動相時應該先將吸(xi)濾頭部(bu)分放(fang)入燒杯中邊(bian)振動邊(bian)靖(jing)洗,然后插入新的(de)流動相中。更換無(wu)互溶性的(de)流動相時要(yao)用異丙醇(chun)過渡一下。

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