一、液相色譜儀操作流程是什么 ?
生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流程是什么(me)呢?一起來(lai)看(kan)(kan)看(kan)(kan)吧!
首先先對流動相(xiang)進行過濾(lv),根據需要(yao)選擇不同的濾(lv)膜,一(yi)(yi)般為有(you)機系和水(shui)系,常用的孔徑為0.20um和0.45um。然后對抽(chou)濾(lv)后的流動相(xiang)進行超(chao)聲脫氣10-20分(fen)鐘。一(yi)(yi)般情況(kuang)下,流動相(xiang)沖洗20-30分(fen)鐘后,儀(yi)器方(fang)可穩定,最重要(yao)的是儀(yi)器基線走(zou)后,方(fang)可進樣測試。
二、液相色譜儀操作注意事項有哪些
1、流動相必須用HPLC級的試劑,使用前過濾除去其(qi)中的顆(ke)粒(li)性雜質(zhi)和其(qi)他物質(zhi)。
2、流動相過濾后(hou)要用超聲波脫氣,脫氣后(hou)應該恢復到室(shi)溫后(hou)使用。
3、不能用純乙腈(jing)作為(wei)流動(dong)相(xiang),這樣會使單(dan)向閥粘住而導致(zhi)泵不進液。
4、使(shi)用(yong)(yong)緩沖(chong)溶液時,做完樣(yang)品后(hou)應立(li)即用(yong)(yong)去(qu)離(li)子(zi)水沖(chong)洗管路及柱子(zi)一(yi)小(xiao)時,然(ran)后(hou)用(yong)(yong)甲醇沖(chong)洗40分(fen)鐘以上,以充分(fen)洗去(qu)離(li)子(zi)。對于柱塞桿外部,做完樣(yang)品后(hou)也必須用(yong)(yong)去(qu)離(li)子(zi)水沖(chong)洗。
5、長(chang)時(shi)間不用儀器,應(ying)該將柱(zhu)子取下用堵頭封好保(bao)存(cun),注意不能用純水(shui)保(bao)存(cun)柱(zhu)子,而(er)應(ying)該用有機相,因為(wei)純水(shui)易長(chang)霉。
6、每(mei)次做完樣品(pin)后應該用溶(rong)解樣品(pin)的溶(rong)劑清洗進樣器。
7、C18柱絕對不能(neng)進蛋白樣(yang)品(pin),血(xue)樣(yang)、生物(wu)樣(yang)品(pin)。
8、堵塞導致壓(ya)力太(tai)大(da),按預柱(zhu)→混合器中(zhong)的過(guo)濾器→管路過(guo)濾器→單向閥檢查并清洗。
9、氣(qi)泡會(hui)致使(shi)(shi)壓(ya)力不穩,重現性差,所(suo)以在使(shi)(shi)用過(guo)程(cheng)中要盡量避免產生氣(qi)泡。
10、如果進液(ye)管內(nei)不進液(ye)體(ti)時,要使(shi)用注射器吸液(ye):通常在輸(shu)液(ye)前要進行流動相的(de)清洗。
11、要(yao)注意柱(zhu)子的pH值(zhi)范圍,不(bu)得注射強酸強堿的樣品,特(te)別是堿性樣品。
12、更(geng)換流動(dong)(dong)相(xiang)(xiang)時應該(gai)先將吸濾(lv)頭部(bu)分放入(ru)燒(shao)杯中邊振動(dong)(dong)邊靖(jing)洗,然(ran)后插入(ru)新的(de)(de)流動(dong)(dong)相(xiang)(xiang)中。更(geng)換無互溶(rong)性(xing)的(de)(de)流動(dong)(dong)相(xiang)(xiang)時要用異丙醇過渡一(yi)下(xia)。