一、高效液相色譜儀和液相色譜儀的定義和作用
高效(xiao)液相色(se)譜(pu)儀(yi)(HPLC)和(he)液相色(se)譜(pu)儀(yi)(LC)都是(shi)(shi)使用液體移動相將(jiang)樣(yang)品分(fen)離開來的(de)儀(yi)器。HPLC是(shi)(shi)在LC的(de)基(ji)礎上(shang)發展(zhan)而來的(de),在分(fen)離性能、分(fen)析(xi)效(xiao)率、檢(jian)測靈(ling)敏度(du)等方面均有(you)所提高。HPLC主要應用于有(you)機化(hua)學、生(sheng)化(hua)、藥(yao)學、環境分(fen)析(xi)等領域。
二、高效液相色譜儀和液相色譜儀的區別
雖然高效液相(xiang)色譜(pu)儀和(he)液相(xiang)色譜(pu)儀都(dou)屬(shu)于(yu)液相(xiang)色譜(pu)儀類別,但它們在(zai)分離(li)性(xing)能、分析效率、檢(jian)測靈(ling)敏(min)度等方面均有所不同:
1、分離性能的區別
HPLC的(de)(de)(de)分(fen)離性(xing)能比LC更好,分(fen)離效率(lv)更高(gao),分(fen)離劑(ji)更多樣化(hua)。HPLC在柱(zhu)子填充材料和(he)柱(zhu)子直徑等方面具(ju)有(you)更多變化(hua)的(de)(de)(de)選擇,可(ke)根據不同的(de)(de)(de)樣品(pin)和(he)要(yao)求(qiu)設計出(chu)不同的(de)(de)(de)柱(zhu)子,從而實現更好的(de)(de)(de)分(fen)離效果。
2、分析效率的區別
HPLC擁有更(geng)快的(de)(de)(de)分析速(su)度(du)和更(geng)快的(de)(de)(de)洗脫速(su)度(du),可以更(geng)快地得(de)到分離和檢測結果。此外,HPLC中使用的(de)(de)(de)柱子通常(chang)較(jiao)長,能(neng)夠保證更(geng)高的(de)(de)(de)峰分辨(bian)率和更(geng)好的(de)(de)(de)分析效率。
3、檢測靈敏度的區別
HPLC的流動相流速更(geng)快,反相柱分(fen)(fen)離(li)更(geng)好(hao),它(ta)能夠在較短(duan)的時(shi)間(jian)內,更(geng)準確(que)地檢測出細微(wei)的化學物質(zhi),與(yu)LC相比,更(geng)適用(yong)于(yu)高(gao)靈敏(min)度分(fen)(fen)析和(he)有(you)機化合物的分(fen)(fen)析。
三、高效液相色譜儀的分類有哪些
高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)色譜(pu)(pu)儀(yi)主(zhu)要有(you)三類:正相(xiang)高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)色譜(pu)(pu)儀(yi)、反相(xiang)高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)色譜(pu)(pu)儀(yi)和超高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)色譜(pu)(pu)儀(yi)(超高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)色譜(pu)(pu)儀(yi))。
1、盡管有名(ming)稱,正相(xiang)(xiang)高(gao)效(xiao)液相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)儀并不(bu)是最常(chang)用的高(gao)效(xiao)液相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)儀方法。正相(xiang)(xiang)高(gao)效(xiao)液相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)儀使用非極(ji)性溶劑作(zuo)為(wei)流動相(xiang)(xiang),硅膠(jiao)顆粒作(zuo)為(wei)固定(ding)相(xiang)(xiang)。在(zai)常(chang)規高(gao)效(xiao)液相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)儀中,與非極(ji)性化(hua)合物(wu)相(xiang)(xiang)比,極(ji)性化(hua)合物(wu)在(zai)固定(ding)相(xiang)(xiang)中會更(geng)長(chang)時間地粘(zhan)附在(zai)極(ji)性有機硅上。因此,非極(ji)性化(hua)合物(wu)在(zai)正常(chang)高(gao)效(xiao)液相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)儀中的洗脫速度更(geng)快(kuai)。孔(kong)徑一般在(zai)3微米(mi)左(zuo)右。
2、反(fan)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)高(gao)效液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)儀是(shi)最常(chang)見的(de)高(gao)效液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)儀類型。在反(fan)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)高(gao)效液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)儀中,固(gu)(gu)定(ding)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)被烴鏈(通常(chang)長8-18個碳)改(gai)性(xing)(xing),導致色譜(pu)(pu)柱(zhu)變為非(fei)極(ji)性(xing)(xing)。也(ye)使用極(ji)性(xing)(xing)溶劑。在反(fan)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)高(gao)效液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)儀中,樣品中的(de)極(ji)性(xing)(xing)分子會(hui)與溶劑產生強烈的(de)吸引力(li),從而使它們(men)更快地洗脫。它們(men)也(ye)不會(hui)與非(fei)極(ji)性(xing)(xing)固(gu)(gu)定(ding)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)互作用。非(fei)極(ji)性(xing)(xing)化合物會(hui)與固(gu)(gu)定(ding)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)產生范德華(hua)力(li)和分散(san)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)互作用,因此(ci)它們(men)的(de)洗脫速度較慢。
3、與高(gao)效液相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)相(xiang)(xiang)比,超(chao)高(gao)效液相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)運行速度更快、使用的(de)(de)溶劑(ji)更少且分辨率更高(gao)。色譜(pu)柱也(ye)更小(xiao),固(gu)定相(xiang)(xiang)顆粒的(de)(de)尺寸要小(xiao)得多。較(jiao)小(xiao)的(de)(de)孔(亞2微(wei)米)促進了分子更好的(de)(de)分離和分辨率。較(jiao)短的(de)(de)色譜(pu)柱還可以(yi)進行快速檢(jian)測。然而(er),超(chao)高(gao)效液相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)不能(neng)用于(yu)干燥或未過(guo)濾的(de)(de)樣(yang)品,因為較(jiao)小(xiao)的(de)(de)孔會堵(du)塞,這是一個昂貴且耗時的(de)(de)修復過(guo)程。