一、高效液相色譜儀和液相色譜儀的定義和作用

高(gao)效液相色譜儀（HPLC）和液相色譜儀（LC）都是使用(yong)液體移(yi)動相將樣(yang)品分(fen)離(li)(li)開(kai)來的(de)(de)儀器。HPLC是在LC的(de)(de)基礎(chu)上發展而來的(de)(de)，在分(fen)離(li)(li)性能、分(fen)析效率、檢測靈敏度等(deng)方面均有所提高(gao)。HPLC主要應用(yong)于有機化(hua)學、生化(hua)、藥學、環境分(fen)析等(deng)領域。

二、高效液相色譜儀和液相色譜儀的區別

雖然高效(xiao)液相色譜儀(yi)和液相色譜儀(yi)都屬于液相色譜儀(yi)類(lei)別，但它們在分(fen)離(li)性(xing)能、分(fen)析效(xiao)率(lv)、檢測靈敏度等方面均有所不同：

1、分離性能的區別

HPLC的分離性能(neng)比LC更好，分離效率更高，分離劑更多樣(yang)化。HPLC在(zai)柱(zhu)子(zi)填充材(cai)料和柱(zhu)子(zi)直徑等方(fang)面具有更多變化的選擇(ze)，可根(gen)據(ju)不同的樣(yang)品和要求設計出不同的柱(zhu)子(zi)，從而實(shi)現更好的分離效果。

2、分析效率的區別

HPLC擁有更快(kuai)的分析速度和更快(kuai)的洗脫速度，可以更快(kuai)地得(de)到(dao)分離(li)和檢(jian)測結果。此(ci)外，HPLC中使用的柱子通常較長，能夠保證更高的峰(feng)分辨率和更好的分析效率。

3、檢測靈敏度的區別

HPLC的流動相(xiang)(xiang)流速(su)更(geng)快，反相(xiang)(xiang)柱(zhu)分(fen)離更(geng)好，它能夠在較短的時間內，更(geng)準確地(di)檢(jian)測出細微的化學物質(zhi)，與(yu)LC相(xiang)(xiang)比，更(geng)適用于高靈敏度分(fen)析(xi)和有機化合物的分(fen)析(xi)。

三、高效液相色譜儀的分類有哪些

高(gao)(gao)效液(ye)(ye)相色(se)(se)譜儀主要有三類：正相高(gao)(gao)效液(ye)(ye)相色(se)(se)譜儀、反相高(gao)(gao)效液(ye)(ye)相色(se)(se)譜儀和超高(gao)(gao)效液(ye)(ye)相色(se)(se)譜儀（超高(gao)(gao)效液(ye)(ye)相色(se)(se)譜儀）。

1、盡管有名稱，正(zheng)相(xiang)高效(xiao)液相(xiang)色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)儀(yi)并(bing)不是最常用(yong)的高效(xiao)液相(xiang)色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)儀(yi)方法。正(zheng)相(xiang)高效(xiao)液相(xiang)色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)儀(yi)使用(yong)非極(ji)(ji)性溶劑作為流動(dong)相(xiang)，硅膠顆粒(li)作為固定相(xiang)。在(zai)常規高效(xiao)液相(xiang)色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)儀(yi)中(zhong)，與非極(ji)(ji)性化(hua)合物(wu)相(xiang)比，極(ji)(ji)性化(hua)合物(wu)在(zai)固定相(xiang)中(zhong)會更長時間地粘附(fu)在(zai)極(ji)(ji)性有機硅上。因此，非極(ji)(ji)性化(hua)合物(wu)在(zai)正(zheng)常高效(xiao)液相(xiang)色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)儀(yi)中(zhong)的洗脫(tuo)速度更快。孔徑一般在(zai)3微(wei)米左右。

2、反相(xiang)高效液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)是最常見的(de)高效液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)類型。在反相(xiang)高效液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)中，固定(ding)相(xiang)被(bei)烴鏈(lian)（通常長(chang)8-18個碳(tan)）改性，導致色(se)譜(pu)柱變(bian)為非極性。也(ye)使用極性溶劑。在反相(xiang)高效液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)中，樣品中的(de)極性分子會與溶劑產生強(qiang)烈的(de)吸引力，從而使它們更快地洗脫(tuo)。它們也(ye)不會與非極性固定(ding)相(xiang)相(xiang)互作用。非極性化合物會與固定(ding)相(xiang)產生范德華力和分散相(xiang)互作用，因(yin)此它們的(de)洗脫(tuo)速度較慢。

3、與高(gao)效液相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)(yi)相(xiang)(xiang)比，超高(gao)效液相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)(yi)運(yun)行速度(du)更快、使用(yong)的(de)(de)(de)溶劑(ji)更少(shao)且分(fen)(fen)(fen)(fen)辨率更高(gao)。色譜(pu)柱也(ye)更小(xiao)(xiao)，固定(ding)相(xiang)(xiang)顆(ke)粒的(de)(de)(de)尺(chi)寸要(yao)小(xiao)(xiao)得多(duo)。較小(xiao)(xiao)的(de)(de)(de)孔(kong)（亞(ya)2微米(mi)）促(cu)進了分(fen)(fen)(fen)(fen)子更好的(de)(de)(de)分(fen)(fen)(fen)(fen)離(li)和分(fen)(fen)(fen)(fen)辨率。較短(duan)的(de)(de)(de)色譜(pu)柱還可以進行快速檢測。然而，超高(gao)效液相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)(yi)不能用(yong)于(yu)干燥或未(wei)過濾的(de)(de)(de)樣品(pin)，因(yin)為較小(xiao)(xiao)的(de)(de)(de)孔(kong)會堵塞(sai)，這是一個昂貴(gui)且耗時的(de)(de)(de)修復過程。