1996年(nian),馬伊琍(li)與保劍峰、陳龍、高(gao)曙光、張雅(ya)琳(lin)共同出演了(le)電視劇《真空愛(ai)(ai)情記錄》,講述了(le)一群大學畢業生(sheng)為了(le)工作和(he)愛(ai)(ai)情奮斗的故事。
1998年(nian),馬(ma)伊琍畢業于上(shang)海戲劇學院,畢業后參演(yan)了第(di)一部(bu)改編自陜西駐滬(hu)作(zuo)家李春平(ping)同名小(xiao)說的(de)電影(ying)《玻璃(li)是透明的(de)》,飾演(yan)“小(xiao)丫子”。同年(nian),其出演(yan)了第(di)一部(bu)古裝電影(ying)《孔乙己》。
2000年,通過出演(yan)《黑洞》提(ti)升了表演(yan)事業(ye)。同(tong)年,在電視劇《前世今生》中飾演(yan)美貌且氣質(zhi)超(chao)凡(fan)的秦婉(wan)瑩(ying)。
2001年,出演電視劇《白天睡(shui)覺的女人》中(zhong)的李秀。同年,在(zai)電影(ying)(ying)《西(xi)施(shi)眼》中(zhong)飾(shi)演施(shi)雨,該(gai)片在(zai)2002年美國(guo)夏(xia)威夷國(guo)際電影(ying)(ying)節中(zhong)獲評(ping)審團(tuan)大將及亞洲最佳(jia)電影(ying)(ying)。
2002年,因(yin)出演(yan)電視劇《還(huan)珠格(ge)格(ge)Ⅲ之天上(shang)人間(jian)》中的紫薇一(yi)角而被大眾所熟知。
2004年,出(chu)演了由(you)黃磊指導的《天一生水》,在(zai)劇中飾演一個混血姑娘明妮(ni)。
2005年(nian),在張黎(li)導(dao)演的電(dian)視劇《錦衣衛(wei)》中出演了傾國(guo)美人客印月。
2006年,參演(yan)的(de)《喬家大院》在(zai)央視熱(re)播,其(qi)扮演(yan)的(de)“江雪(xue)瑛(ying)”收獲(huo)了(le)更多的(de)觀眾和粉(fen)絲。
2007年,因出演由趙寶剛指(zhi)導(dao)的青春勵志電(dian)視劇《奮(fen)斗》而名聲驟(zou)起,同(tong)年6月底(di),馬(ma)伊琍簽約了(le)內地影視巨(ju)擎橙天娛樂(le)。
2008年(nian),因拍攝電(dian)視(shi)劇《為誰心動》無悔剃光了頭。同(tong)年(nian),其(qi)憑借影片《江北(bei)好人》,戰勝了李冰冰、范冰冰兩位候選人,成(cheng)為了長春(chun)電(dian)影節影后。
2009年,馬伊琍(li)與佟大(da)為共同(tong)出(chu)(chu)演了電(dian)視(shi)(shi)劇《婚姻保衛戰》。同(tong)年,出(chu)(chu)演的(de)首(shou)部反(fan)映豫商故事(shi)的(de)電(dian)視(shi)(shi)劇《經緯天(tian)地(di)》在CCTV-8播出(chu)(chu),這也是她繼(ji)《喬家大(da)院》之后首(shou)次(ci)登陸央視(shi)(shi),劇中扮(ban)演尚(shang)達志(zhi)的(de)妻(qi)子順兒。
2010年,與涂松(song)巖合(he)作(zuo)主(zhu)演都市題材電視劇《雙(shuang)城生活》,她(ta)在(zai)劇中塑造的(de)北京大妞(niu)郝京妮,受到了網(wang)友(you)的(de)普遍好評。憑借該劇,馬伊琍獲得國(guo)劇盛典2011年度最佳女(nv)演員(yuan)。
2013年年初,馬(ma)伊琍與杜淳、劉莉(li)莉(li)、陳思(si)斯等合作出演電視劇《青春期撞上更年期2》,此外,還客串了電影《不二神探》,并(bing)且徹底顛覆(fu)以往的形象痛罵文章(zhang),成為(wei)了影片一大(da)看點。
2013年,首當制片人的(de)馬(ma)伊琍與首次(ci)當導演的(de)丈夫文章合作了(le)電視劇《小爸爸》。
2015年,出(chu)演(yan)了公路(lu)犯罪片《未擇(ze)之路(lu)》。11月7日,在電視(shi)劇(ju)《北上廣不(bu)相信眼淚》中飾演(yan)潘蕓,憑該劇(ju)獲得第(di)19屆華鼎(ding)獎中國百強(qiang)電視(shi)劇(ju)最佳女(nv)主(zhu)角。
2016年9月,與陳建斌合(he)作主演都市幽默劇(ju)《中(zhong)國式(shi)關系》,飾(shi)演美(mei)女建筑設(she)計師江一楠。
2017年,主演(yan)文章執導的諜戰劇(ju)《剃(ti)刀邊緣》,劇(ju)中(zhong)飾(shi)演(yan)關海丹。同年參演(yan)《建(jian)軍(jun)大業》,飾(shi)演(yan)向(xiang)警予角色。