1996年，馬伊琍與保劍峰、陳(chen)龍、高(gao)曙光、張雅琳(lin)共同出演了(le)電視(shi)劇《真空愛情記錄》，講(jiang)述(shu)了(le)一群(qun)大學(xue)畢業生為了(le)工作和愛情奮斗的故事。
1998年(nian)，馬伊琍(li)畢(bi)業于上海戲(xi)劇學院，畢(bi)業后參(can)演(yan)了第一(yi)部(bu)改(gai)編(bian)自陜西駐滬作家李春(chun)平同(tong)名小說的(de)電影(ying)《玻(bo)璃是(shi)透(tou)明的(de)》，飾演(yan)“小丫子”。同(tong)年(nian)，其(qi)出(chu)演(yan)了第一(yi)部(bu)古裝電影(ying)《孔乙己》。
2000年(nian)，通過(guo)出演《黑洞》提(ti)升了表(biao)演事業。同年(nian)，在(zai)電(dian)視劇(ju)《前世(shi)今生》中飾(shi)演美貌(mao)且氣質超凡的秦婉瑩。
2001年，出(chu)演電(dian)視劇《白天睡覺的(de)女人》中的(de)李(li)秀。同(tong)年，在(zai)電(dian)影(ying)《西施(shi)(shi)眼》中飾演施(shi)(shi)雨(yu)，該(gai)片(pian)在(zai)2002年美國夏威夷國際電(dian)影(ying)節中獲評(ping)審(shen)團大將及亞洲最(zui)佳電(dian)影(ying)。
2002年(nian)，因出演電視(shi)劇《還珠格格Ⅲ之天上(shang)人間(jian)》中(zhong)的紫薇一角而被(bei)大眾所熟知。
2004年，出演了由黃磊指(zhi)導的《天一生水》，在劇中飾演一個混血姑娘(niang)明妮。
2005年，在張黎導演的電視劇《錦衣衛》中出演了傾國美(mei)人客印月。
2006年，參演(yan)的《喬家大院》在央視熱播，其扮演(yan)的“江(jiang)雪瑛(ying)”收(shou)獲了(le)更多的觀眾(zhong)和(he)粉絲。
2007年(nian)，因出演由趙寶剛指導的(de)青春勵志(zhi)電視劇(ju)《奮斗》而名聲驟起(qi)，同年(nian)6月底，馬(ma)伊琍簽(qian)約了內地影視巨擎橙(cheng)天娛樂(le)。
2008年，因(yin)拍攝電(dian)視(shi)劇《為誰(shui)心動》無悔(hui)剃(ti)光了頭。同年，其憑借影片(pian)《江北好(hao)人》，戰勝了李冰(bing)冰(bing)、范冰(bing)冰(bing)兩位候選人，成為了長春電(dian)影節影后。
2009年，馬伊琍(li)與(yu)佟大(da)為共(gong)同(tong)出演(yan)了電視劇(ju)《婚姻保衛戰》。同(tong)年，出演(yan)的首部反映豫商故事的電視劇(ju)《經(jing)緯天地》在CCTV-8播出，這也(ye)是她(ta)繼《喬家大(da)院》之后首次登陸央視，劇(ju)中扮演(yan)尚達志的妻(qi)子順兒(er)。
2010年(nian)，與涂松巖合作主(zhu)演都(dou)市題材(cai)電(dian)視(shi)劇《雙城生活》，她在劇中塑造的(de)(de)北京(jing)大妞(niu)郝京(jing)妮(ni)，受到了網友(you)的(de)(de)普(pu)遍好評。憑借該(gai)劇，馬伊琍獲得國劇盛典(dian)2011年(nian)度最佳(jia)女演員。
2013年年初，馬(ma)伊(yi)琍與杜淳(chun)、劉莉莉、陳思斯等合(he)作出演電(dian)視劇《青春期(qi)撞上更年期(qi)2》，此(ci)外，還(huan)客(ke)串了(le)電(dian)影(ying)《不二神探》，并且徹(che)底顛覆以往(wang)的形象痛罵文章，成為了(le)影(ying)片(pian)一大看點。
2013年，首當(dang)制片人的(de)馬(ma)伊琍與(yu)首次當(dang)導(dao)演(yan)的(de)丈夫文(wen)章合作了電視劇(ju)《小爸(ba)爸(ba)》。
2015年，出演了公(gong)路犯罪(zui)片《未擇之路》。11月(yue)7日(ri)，在電(dian)視劇(ju)《北(bei)上廣不相信眼(yan)淚》中(zhong)飾(shi)演潘(pan)蕓，憑該劇(ju)獲得第19屆(jie)華鼎獎中(zhong)國百強電(dian)視劇(ju)最佳(jia)女主角(jiao)。
2016年(nian)9月(yue)，與陳建(jian)斌(bin)合(he)作主(zhu)演(yan)都(dou)市幽默劇(ju)《中國(guo)式(shi)關系》，飾演(yan)美女建(jian)筑設(she)計師江一楠。
2017年(nian)，主演文章執導的諜戰劇(ju)《剃刀(dao)邊緣》，劇(ju)中飾演關(guan)海丹。同年(nian)參演《建軍大(da)業》，飾演向警予角色。
一笑易歡
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