芒果视频下载

沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)是(shi)一種常(chang)見(jian)的(de)食源性(xing)致(zhi)病菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)。沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)鑒定的(de)傳(chuan)統(tong)方法(fa)主要(yao)是(shi)根據(ju)形態(tai)學特(te)征(zheng)(zheng)(zheng)、培(pei)養特(te)征(zheng)(zheng)(zheng)、生(sheng)(sheng)理生(sheng)(sheng)化特(te)征(zheng)(zheng)(zheng)、抗(kang)原特(te)征(zheng)(zheng)(zheng)、噬菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)體(ti)特(te)征(zheng)(zheng)(zheng)等(deng)。1885年沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)等(deng)在(zai)霍亂流(liu)行時分(fen)離到豬(zhu)霍亂沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)，故定名為沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)屬。沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)屬有(you)的(de)專對(dui)人(ren)(ren)(ren)(ren)類(lei)(lei)致(zhi)病，有(you)的(de)只(zhi)對(dui)動物(wu)致(zhi)病，也(ye)有(you)對(dui)人(ren)(ren)(ren)(ren)和動物(wu)都致(zhi)病。沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)病是(shi)指(zhi)由各種類(lei)(lei)型沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)所引(yin)起的(de)對(dui)人(ren)(ren)(ren)(ren)類(lei)(lei)、家畜以及野生(sheng)(sheng)禽獸(shou)不同(tong)形式的(de)總稱。感染沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)的(de)人(ren)(ren)(ren)(ren)或(huo)帶(dai)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)者的(de)糞(fen)便污染食品，可使人(ren)(ren)(ren)(ren)發生(sheng)(sheng)食物(wu)中毒(du)(du)。據(ju)統(tong)計(ji)在(zai)世界各國的(de)種類(lei)(lei)細菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)性(xing)食物(wu)中毒(du)(du)中，沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)引(yin)起的(de)食物(wu)中毒(du)(du)常(chang)列(lie)榜首。我國內陸地區也(ye)以沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)為首位。

簡介

沙門氏(shi)菌(jun)病(bing)的(de)(de)(de)(de)病(bing)原體。屬腸(chang)桿(gan)菌(jun)科，革蘭氏(shi)陰性腸(chang)道桿(gan)菌(jun)。已(yi)發現的(de)(de)(de)(de)近一千種（或(huo)菌(jun)株(zhu)）。按其抗原成分，可分為甲(jia)、乙(yi)、丙(bing)、丁(ding)、戊等(deng)基本菌(jun)組(zu)。其中與人體疾(ji)病(bing)有關的(de)(de)(de)(de)主要有甲(jia)組(zu)的(de)(de)(de)(de)副(fu)(fu)傷(shang)寒甲(jia)桿(gan)菌(jun)，乙(yi)組(zu)的(de)(de)(de)(de)副(fu)(fu)傷(shang)寒乙(yi)桿(gan)菌(jun)和鼠傷(shang)寒桿(gan)菌(jun)，丙(bing)組(zu)的(de)(de)(de)(de)副(fu)(fu)傷(shang)寒丙(bing)桿(gan)菌(jun)和豬(zhu)霍亂桿(gan)菌(jun)，丁(ding)組(zu)的(de)(de)(de)(de)傷(shang)寒桿(gan)菌(jun)和腸(chang)炎桿(gan)菌(jun)等(deng)。除傷(shang)寒桿(gan)菌(jun)、副(fu)(fu)傷(shang)寒甲(jia)桿(gan)菌(jun)和副(fu)(fu)傷(shang)寒乙(yi)桿(gan)菌(jun)引起人類(lei)(lei)的(de)(de)(de)(de)疾(ji)病(bing)外，大多數(shu)僅能引起家畜、鼠類(lei)(lei)和禽類(lei)(lei)等(deng)動物(wu)(wu)的(de)(de)(de)(de)疾(ji)病(bing)，但有時也可污(wu)染人類(lei)(lei)的(de)(de)(de)(de)食(shi)(shi)物(wu)(wu)而引起食(shi)(shi)物(wu)(wu)中毒(du)。

沙(sha)門氏(shi)菌在(zai)水(shui)中不易繁(fan)殖(zhi)，但可(ke)(ke)生存2-3周，冰箱中可(ke)(ke)生存3-4個(ge)月，在(zai)自然環(huan)境的糞便(bian)中可(ke)(ke)存活(huo)1-2個(ge)月。沙(sha)門氏(shi)菌最適(shi)繁(fan)殖(zhi)溫(wen)度為(wei)37℃，在(zai)20℃以上即(ji)能大量(liang)繁(fan)殖(zhi)，因此(ci)，低溫(wen)儲存食品(pin)是(shi)一(yi)項重要預防(fang)措施。

沙門氏菌屬

菌體(ti)大(da)小(xiao)（0.6～0.9)×（1～3)微米無芽胞，一般無莢膜(mo)，除雞白痢沙(sha)門氏(shi)菌和(he)雞傷(shang)寒沙(sha)門氏(shi)菌外，大(da)多(duo)有(you)(you)(you)周(zhou)身鞭毛。營養(yang)要求不(bu)高(gao)，分(fen)離(li)培養(yang)常(chang)采用腸(chang)道選(xuan)擇(ze)鑒別培養(yang)基。生(sheng)化(hua)反應對(dui)本屬菌的(de)鑒別具有(you)(you)(you)重要參考意義（見表）。不(bu)液化(hua)明(ming)膠，不(bu)分(fen)解(jie)尿(niao)素(su)，不(bu)產生(sheng)吲哚，不(bu)發酵(jiao)(jiao)乳糖和(he)蔗(zhe)糖，能發酵(jiao)(jiao)葡萄糖、甘(gan)露醇、麥芽糖和(he)衛(wei)芽糖，大(da)多(duo)產酸(suan)產氣，少數只(zhi)產酸(suan)不(bu)產氣。VP試驗陰性(xing)，有(you)(you)(you)賴氨酸(suan)脫羧酶(mei)。DNA的(de)G+C含量為50～53%。對(dui)熱抵抗(kang)力不(bu)強，在60℃15分(fen)鐘(zhong)可被殺(sha)死(si)。在水中存(cun)活2～3周(zhou)。在5%的(de)石(shi)炭(tan)酸(suan)中，5分(fen)鐘(zhong)死(si)亡。

本屬菌(jun)(jun)按生化(hua)反(fan)應分為(wei)4個亞(ya)(ya)屬。亞(ya)(ya)屬Ⅰ是生化(hua)反(fan)應典型的和最(zui)常(chang)見的沙(sha)(sha)門(men)(men)氏菌(jun)(jun)；亞(ya)(ya)屬Ⅱ和Ⅳ是生化(hua)反(fan)應不(bu)典型的沙(sha)(sha)門(men)(men)氏菌(jun)(jun)；亞(ya)(ya)屬Ⅲ是亞(ya)(ya)利桑那(nei)沙(sha)(sha)門(men)(men)氏菌(jun)(jun)。

沙(sha)門氏菌(jun)(jun)具有復雜的(de)抗(kang)原(yuan)結構，一般可分為(wei)菌(jun)(jun)體(O)抗(kang)原(yuan)、鞭毛(H)抗(kang)原(yuan)和表面(Vi)抗(kang)原(yuan)3種。

理化特性

生化反應很活(huo)潑，能(neng)分解多種糖類(lei)和(he)醇。

培養特性

1）需氧及兼(jian)性(xing)厭氧菌。

2）在(zai)普通瓊脂培養基上生長良好，培養24h后(hou)，形成中(zhong)等(deng)大(da)小、圓形、表面(mian)光滑、無色半透明、邊(bian)緣整齊的菌(jun)落，其(qi)菌(jun)落特征亦與大(da)腸桿菌(jun)相(xiang)似（無糞臭味(wei)）。

3）鑒別培(pei)養基(ji)（麥康凱、SS、伊紅美藍）：一般無色菌落。

4）三糖鐵(tie)瓊脂斜面(mian)：斜面(mian)為紅色，底(di)部變黑并產氣。

生化特性

1）發(fa)酵葡(pu)萄(tao)糖，麥芽糖，甘露醇和山(shan)梨(li)醇產氣；

2）不發酵乳糖、蔗糖和(he)側(ce)金盞花(hua)醇；

3）不產(chan)吲哚、V-P反應(ying)陰性；

4）不水(shui)解尿素(su)和對苯丙氨酸不脫氨。

傷(shang)(shang)寒(han)沙(sha)(sha)(sha)門氏菌(jun)(jun)、雞(ji)(ji)傷(shang)(shang)寒(han)沙(sha)(sha)(sha)門氏菌(jun)(jun)及一部分雞(ji)(ji)白(bai)痢沙(sha)(sha)(sha)門氏菌(jun)(jun)發酵糖不產氣，大多數雞(ji)(ji)白(bai)痢沙(sha)(sha)(sha)門氏菌(jun)(jun)不發酵麥芽糖；除(chu)雞(ji)(ji)白(bai)痢沙(sha)(sha)(sha)門氏菌(jun)(jun)、豬傷(shang)(shang)寒(han)沙(sha)(sha)(sha)門氏菌(jun)(jun)、甲型副傷(shang)(shang)寒(han)沙(sha)(sha)(sha)門氏菌(jun)(jun)、傷(shang)(shang)寒(han)沙(sha)(sha)(sha)門氏菌(jun)(jun)和仙臺沙(sha)(sha)(sha)門氏菌(jun)(jun)等(deng)外，均(jun)能(neng)利用枸櫞酸鹽(yan)。

血清學特性

沙門(men)氏菌(jun)(jun)具(ju)有復(fu)雜(za)的抗(kang)原結構，一般沙門(men)氏菌(jun)(jun)具(ju)有菌(jun)(jun)體(O)抗(kang)原、鞭毛(mao)(H)抗(kang)原和表面抗(kang)原(莢膜或包膜抗(kang)原)三種(zhong)抗(kang)原。

傳播途徑

肉的污染

肉及其制品的(de)沙門氏菌檢(jian)出率美國(guo)為20%-25%、英國(guo)為9.9%、日本檢(jian)查進口家禽的(de)污染率為10.3%，國(guo)內肉類沙門氏菌檢(jian)出率在1.1%-39.5%。

蛋的污染

中國(guo)蛋(dan)(dan)及其制品沙門氏菌檢(jian)出率(lv)為3.9%-43.7%，由于吃蛋(dan)(dan)引起鼠傷(shang)寒病的病例報告逐漸有增(zeng)加的趨(qu)勢。

環境污染

食品在加(jia)工、運輸、出售過程中(zhong)往往被沙(sha)門(men)氏菌污染。沙(sha)門(men)氏菌在糞便、土壤、食品、水(shui)中(zhong)可(ke)生(sheng)存5個月至2年之久。

傳播問題

恢復期患者和無癥狀的帶菌者也是常見(jian)的傳(chuan)染源(yuan)。

分布

廣泛分布于自然界，常(chang)常(chang)寄居在(zai)人和(he)動(dong)物體內，特別是家禽、家畜及寵物的(de)腸(chang)道中。主要污染(ran)的(de)食品(pin)有：肉和(he)肉制品(pin)、蛋(dan)和(he)蛋(dan)制品(pin)、奶和(he)奶制品(pin)等。由于沙門氏菌不分解蛋(dan)白質，食物被其(qi)污染(ran)后表面(mian)看起來似乎并(bing)沒有變(bian)化.

感染癥

沙(sha)門氏菌感染(ran)(ran)癥為人畜共患(huan)感染(ran)(ran)性疾病，主要(yao)(yao)由(you)食(shi)用遭受污(wu)染(ran)(ran)的(de)食(shi)物導致(zhi)，是(shi)許多國家(jia)食(shi)物中(zhong)毒(du)的(de)重要(yao)(yao)病源。

癥狀

典型癥狀(zhuang)包(bao)括發熱、惡(e)心、嘔吐、腹瀉及腹部(bu)絞痛(tong)等(deng)癥狀(zhuang)，通常在發熱后72小時內會好(hao)轉(zhuan)。嬰兒、老年人、免(mian)疫功能低下的患者則可能因沙(sha)門氏(shi)菌進入血液而出現嚴(yan)重且危及生(sheng)命(ming)的菌血癥，少數(shu)還會合并(bing)腦膜炎或(huo)骨(gu)髓炎。

治療

一般沙(sha)門氏菌(jun)造(zao)成的腸胃炎不需要給予抗(kang)生(sheng)(sheng)素治(zhi)療(liao)；而(er)以(yi)補充(chong)水(shui)分與電解質(zhi)為主；但對于新生(sheng)(sheng)兒、免疫功能低(di)下(xia)患者及(ji)特(te)殊(shu)傷(shang)員；則(ze)需要視情(qing)況紿予抗(kang)生(sheng)(sheng)素治(zhi)療(liao)。

預防

1、餐前、便后、接觸食物(wu)前、接觸動物(wu)或生蛋后應(ying)仔(zi)細洗(xi)凈雙手。

2、處理生食和熟食的砧板要分開。

3、食物要熟透再(zai)吃(尤其是(shi)雞蛋與家禽類)。

4、非(fei)現做現吃(chi)的食(shi)物應以保鮮膜包覆(fu)后放進冰箱保存，再次食(shi)用前應加熱或煮熟。

5、撲滅并阻隔蒼蠅(ying)等病媒。被蒼蠅(ying)沾染、過期或(huo)腐敗的不潔食(shi)物均應丟棄(qi)，切勿食(shi)用。

6、水塔應(ying)經常清洗、消毒。

7、旅(lv)行或野營時的飲用水應煮沸并消毒。

8、如(ru)有(you)嘔吐、腹(fu)瀉或發熱等癥狀，應盡快就醫(yi)。

感染

沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)是(shi)美(mei)國(guo)食物中(zhong)毒致死(si)的(de)主(zhu)要(yao)(yao)原(yuan)因(yin)。美(mei)國(guo)人(ren)(ren)(ren)(ren)(ren)對這種病(bing)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)一(yi)點都(dou)不(bu)(bu)(bu)陌生(sheng)(sheng)(sheng)，每(mei)年全國(guo)大(da)(da)約報(bao)告40000例沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)感(gan)染(ran)(ran)(ran)(ran)病(bing)例。但(dan)實際的(de)感(gan)染(ran)(ran)(ran)(ran)人(ren)(ren)(ren)(ren)(ren)數可(ke)(ke)(ke)能要(yao)(yao)達20倍以上(shang)，因(yin)為(wei)許多輕型(xing)病(bing)人(ren)(ren)(ren)(ren)(ren)可(ke)(ke)(ke)能未(wei)確診，據不(bu)(bu)(bu)完全統計(ji)，每(mei)年大(da)(da)約有1000人(ren)(ren)(ren)(ren)(ren)死(si)于(yu)急性沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)感(gan)染(ran)(ran)(ran)(ran)。但(dan)是(shi)，以前各州爆發的(de)疫情幾(ji)乎(hu)都(dou)與人(ren)(ren)(ren)(ren)(ren)們吃(chi)(chi)了(le)染(ran)(ran)(ran)(ran)上(shang)沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)的(de)肉(rou)類、蛋(dan)類、乳類有關，但(dan)迄今為(wei)止，很(hen)少聽說吃(chi)(chi)蔬果(guo)大(da)(da)面積受沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)污染(ran)(ran)(ran)(ran)甚至在(zai)(zai)人(ren)(ren)(ren)(ren)(ren)群中(zhong)引發大(da)(da)疫情的(de)。對此，周(zhou)福(fu)生(sheng)(sheng)(sheng)教授解釋說，這可(ke)(ke)(ke)能是(shi)西(xi)(xi)紅(hong)柿在(zai)(zai)生(sheng)(sheng)(sheng)長的(de)過(guo)程中(zhong)，由(you)于(yu)空氣中(zhong)紫外線不(bu)(bu)(bu)夠強烈，植物在(zai)(zai)灌溉過(guo)程或(huo)因(yin)土壤中(zhong)含(han)有沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)，這樣(yang)才(cai)使西(xi)(xi)紅(hong)柿的(de)表皮(pi)上(shang)沾(zhan)染(ran)(ran)(ran)(ran)了(le)沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)，加(jia)上(shang)不(bu)(bu)(bu)少人(ren)(ren)(ren)(ren)(ren)有生(sheng)(sheng)(sheng)食西(xi)(xi)紅(hong)柿的(de)習(xi)慣，如果(guo)沒(mei)有清洗(xi)干凈(jing)，就完全有可(ke)(ke)(ke)能發生(sheng)(sheng)(sheng)沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)感(gan)染(ran)(ran)(ran)(ran)。不(bu)(bu)(bu)光是(shi)食用西(xi)(xi)紅(hong)柿，其他瓜果(guo)蔬菜(cai)也一(yi)樣(yang)。沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)主(zhu)要(yao)(yao)污染(ran)(ran)(ran)(ran)肉(rou)類食品(pin)，魚、禽、奶(nai)、蛋(dan)類食品(pin)也可(ke)(ke)(ke)受此菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)污染(ran)(ran)(ran)(ran)。沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)食物中(zhong)毒全年都(dou)可(ke)(ke)(ke)發生(sheng)(sheng)(sheng)，吃(chi)(chi)了(le)未(wei)煮透的(de)病(bing)、死(si)牲畜肉(rou)或(huo)在(zai)(zai)屠宰后(hou)其他環節污染(ran)(ran)(ran)(ran)的(de)牲畜肉(rou)是(shi)引起(qi)沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)食物中(zhong)毒的(de)最主(zhu)要(yao)(yao)原(yuan)因(yin)。有食品(pin)專家指出美(mei)國(guo)人(ren)(ren)(ren)(ren)(ren)吃(chi)(chi)雞蛋(dan)的(de)習(xi)慣與國(guo)人(ren)(ren)(ren)(ren)(ren)不(bu)(bu)(bu)同，他們喜歡吃(chi)(chi)半熟的(de)雞蛋(dan)甚至是(shi)生(sheng)(sheng)(sheng)雞蛋(dan)，所以一(yi)旦雞蛋(dan)里含(han)有沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)，感(gan)染(ran)(ran)(ran)(ran)的(de)幾(ji)率(lv)就比較高。“在(zai)(zai)國(guo)內，生(sheng)(sheng)(sheng)雞蛋(dan)里含(han)有沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)其實并(bing)不(bu)(bu)(bu)奇怪(guai)，只不(bu)(bu)(bu)過(guo)國(guo)人(ren)(ren)(ren)(ren)(ren)喜歡將(jiang)雞蛋(dan)煮熟吃(chi)(chi)，這樣(yang)就大(da)(da)大(da)(da)減(jian)少了(le)感(gan)染(ran)(ran)(ran)(ran)的(de)幾(ji)率(lv)。”

癥狀及原因

由沙(sha)門氏(shi)菌引起的(de)(de)食(shi)品中毒(du)癥狀主要有惡(e)心、嘔吐、腹痛、頭痛、畏寒和(he)腹瀉等，還(huan)伴有乏(fa)力、肌肉酸痛、視覺模糊、中等程(cheng)度發(fa)熱、躁動不安和(he)嗜(shi)睡，延續時間(jian)2～3d，平均致死率為4．1%。其主要原因是由于攝(she)入了含有大量沙(sha)門氏(shi)菌屬的(de)(de)非(fei)寄主專一性菌種或血清型的(de)(de)食(shi)品所引起的(de)(de)。在攝(she)入含毒(du)食(shi)品之后．癥狀一般在12～14h內出現，有些潛伏期較長。

預防措施

防止沙(sha)門氏菌(jun)污(wu)染食品；控(kong)制食品中沙(sha)門氏菌(jun)的(de)繁殖；加熱(re)以徹底殺滅病原菌(jun)。

沙門氏(shi)菌(jun)不(bu)耐高溫，食(shi)物的中心溫度達70℃以(yi)上，持續5分鐘一(yi)(yi)般(ban)都可(ke)以(yi)殺(sha)死包括沙門氏(shi)菌(jun)等(deng)常見(jian)食(shi)源(yuan)性致病菌(jun)。家庭中一(yi)(yi)般(ban)的熱(re)處理(li)烹(peng)調(diao)方式都可(ke)有效殺(sha)滅該(gai)菌(jun)。

檢測方法

前增菌

稱(cheng)取25g（mL）樣品放入盛有225 mL BPW的無菌均(jun)(jun)質(zhi)(zhi)杯(bei)中(zhong)，以(yi)8000 r/min～10 000 r/min均(jun)(jun)質(zhi)(zhi)1min～2min，或置于盛有225 mL BPW的無菌均(jun)(jun)質(zhi)(zhi)袋(dai)中(zhong)，用(yong)拍擊式均(jun)(jun)質(zhi)(zhi)器拍打1min～2min。若(ruo)樣品為液態，不(bu)需要均(jun)(jun)質(zhi)(zhi)，振蕩混勻。如需測(ce)定pH值，用(yong)1mol/mL無菌NaOH或HCl調pH至6.8±0.2。無菌操作將樣品轉至500mL錐形瓶中(zhong)，如使用(yong)均(jun)(jun)質(zhi)(zhi)袋(dai)，可直接進行培養，于36 ℃±1℃培養8h～18h。

如(ru)為冷(leng)凍產品，應在(zai)45℃以下不超(chao)過15min，或2℃～5℃不超(chao)過18h解凍。

增菌

輕輕搖動培養(yang)(yang)過的樣品混(hun)合物，移取1mL，轉種于(yu)10mL TTB內(nei)，于(yu)42℃±1℃培養(yang)(yang)18h～24h。同時，另取1mL，轉種于(yu)10 mL SC內(nei)，于(yu)36℃±1℃培養(yang)(yang)18h～24h。

分離

分別(bie)用接種(zhong)環取增菌(jun)液1環，劃(hua)線接種(zhong)于一(yi)個(ge)(ge)BS瓊(qiong)(qiong)脂平(ping)板(ban)(ban)和(he)一(yi)個(ge)(ge)XLD瓊(qiong)(qiong)脂平(ping)板(ban)(ban)（或HE瓊(qiong)(qiong)脂平(ping)板(ban)(ban)或沙(sha)門(men)氏菌(jun)屬顯(xian)色培(pei)養(yang)基(ji)平(ping)板(ban)(ban)）。于36℃±1℃分別(bie)培(pei)養(yang)18h～24h（XLD瓊(qiong)(qiong)脂平(ping)板(ban)(ban)、HE瓊(qiong)(qiong)脂平(ping)板(ban)(ban)、沙(sha)門(men)氏菌(jun)屬顯(xian)色培(pei)養(yang)基(ji)平(ping)板(ban)(ban)）或40h～48h （BS瓊(qiong)(qiong)脂平(ping)板(ban)(ban)），觀察各個(ge)(ge)平(ping)板(ban)(ban)上(shang)生長(chang)的菌(jun)落，各個(ge)(ge)平(ping)板(ban)(ban)上(shang)的菌(jun)落特(te)征見表(biao)1。

表 1 沙門氏菌屬在不同(tong)選擇性瓊脂平板(ban)上(shang)的菌落特征

選(xuan)擇性瓊(qiong)脂平(ping)板 沙門氏菌(jun)

BS 瓊脂 菌(jun)落(luo)為黑色(se)有(you)(you)金屬(shu)光澤、棕褐色(se)或(huo)灰色(se)，菌(jun)落(luo)周(zhou)圍培(pei)養基(ji)可呈黑色(se)或(huo)棕色(se)；有(you)(you)些菌(jun)株(zhu)形成灰綠色(se)的菌(jun)落(luo)，周(zhou)圍培(pei)養基(ji)不變。

HE 瓊(qiong)脂 藍綠色或(huo)藍色，多數菌(jun)落中心(xin)黑(hei)色或(huo)幾乎全(quan)黑(hei)色；有些菌(jun)株為(wei)黃色，中心(xin)黑(hei)色或(huo)幾乎全(quan)黑(hei)色。

XLD 瓊脂 菌落呈(cheng)粉(fen)紅色(se)，帶或不帶黑(hei)色(se)中心，有(you)些(xie)菌株可呈(cheng)現(xian)大(da)的(de)(de)帶光澤的(de)(de)黑(hei)色(se)中心，或呈(cheng)現(xian)全部黑(hei)色(se)的(de)(de)菌落；有(you)些(xie)菌株為黃色(se)菌落，帶或不帶黑(hei)色(se)中心。

沙(sha)門氏菌(jun)屬顯(xian)色(se)培養 按照顯(xian)色(se)培養基的說(shuo)明進行判(pan)定(ding)。

自19世紀后(hou)期，沙(sha)(sha)(sha)門(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)首(shou)次被(bei)鑒定(ding)為(wei)(wei)(wei)人(ren)(ren)類的(de)(de)(de)(de)(de)(de)一(yi)種(zhong)病(bing)原以來，檢測方法(fa)(fa)(fa)學都是(shi)建(jian)立(li)在(zai)采取感染(ran)病(bing)人(ren)(ren)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)糞(fen)便(bian)或(huo)血液作為(wei)(wei)(wei)臨(lin)床(chuang)(chuang)病(bing)料(liao)(liao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)基(ji)礎上。此(ci)后(hou)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)60年(nian)間(jian)，用(yong)(yong)(yong)于從食(shi)(shi)(shi)品(pin)(pin)(pin)中(zhong)(zhong)分離沙(sha)(sha)(sha)門(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)方法(fa)(fa)(fa)實質上與那(nei)些用(yong)(yong)(yong)于臨(lin)床(chuang)(chuang)病(bing)料(liao)(liao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)方法(fa)(fa)(fa)是(shi)相(xiang)同的(de)(de)(de)(de)(de)(de)。但至少有三(san)個因素限制了(le)用(yong)(yong)(yong)于臨(lin)床(chuang)(chuang)病(bing)料(liao)(liao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)方法(fa)(fa)(fa)應用(yong)(yong)(yong)在(zai)食(shi)(shi)(shi)品(pin)(pin)(pin)分析(xi)(xi)上。第(di)一(yi)，通常，沙(sha)(sha)(sha)門(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)含量(liang)水平(ping)在(zai)污染(ran)食(shi)(shi)(shi)品(pin)(pin)(pin)中(zhong)(zhong)比有感染(ran)病(bing)人(ren)(ren)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)病(bing)料(liao)(liao)中(zhong)(zhong)要(yao)低很多(duo)；第(di)二(er)，食(shi)(shi)(shi)品(pin)(pin)(pin)本身的(de)(de)(de)(de)(de)(de)性(xing)(xing)質會干(gan)擾病(bing)原的(de)(de)(de)(de)(de)(de)檢測，例如，某些食(shi)(shi)(shi)品(pin)(pin)(pin)中(zhong)(zhong)固有菌(jun)(jun)(jun)群可能(neng)處(chu)在(zai)一(yi)個很高的(de)(de)(de)(de)(de)(de)水平(ping)，從而影響特(te)定(ding)細菌(jun)(jun)(jun)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)選(xuan)擇性(xing)(xing)分離和鑒定(ding)；第(di)三(san)，與臨(lin)床(chuang)(chuang)病(bing)料(liao)(liao)不(bu)同的(de)(de)(de)(de)(de)(de)是(shi)，經過加工的(de)(de)(de)(de)(de)(de)食(shi)(shi)(shi)品(pin)(pin)(pin)，由(you)于加熱、干(gan)燥、高含鹽量(liang)、酸和冷凍(dong)等因素的(de)(de)(de)(de)(de)(de)作用(yong)(yong)(yong)，其中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)沙(sha)(sha)(sha)門(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)受(shou)到了(le)尚不(bu)致命的(de)(de)(de)(de)(de)(de)損(sun)傷或(huo)稱(cheng)“致傷”。這就(jiu)形成了(le)一(yi)個具(ju)有不(bu)同生長特(te)性(xing)(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)細菌(jun)(jun)(jun)群。這種(zhong)現象對(dui)(dui)那(nei)些希(xi)望從食(shi)(shi)(shi)物(wu)樣(yang)品(pin)(pin)(pin)中(zhong)(zhong)分離出沙(sha)(sha)(sha)門(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)食(shi)(shi)(shi)品(pin)(pin)(pin)分析(xi)(xi)家來說(shuo)有很大影響，因為(wei)(wei)(wei)在(zai)選(xuan)擇培養基(ji)上直接培養“致傷”的(de)(de)(de)(de)(de)(de)沙(sha)(sha)(sha)門(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)通常是(shi)以細菌(jun)(jun)(jun)死亡和試驗失敗而告終。為(wei)(wei)(wei)克服這些困難，人(ren)(ren)們(men)建(jian)立(li)了(le)一(yi)種(zhong)簡(jian)單的(de)(de)(de)(de)(de)(de)微(wei)生物(wu)增殖步驟，專門(men)針對(dui)(dui)以食(shi)(shi)(shi)品(pin)(pin)(pin)為(wei)(wei)(wei)傳播載體(ti)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)病(bing)原。雖然這些方法(fa)(fa)(fa)本身證明是(shi)可靠(kao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)，但卻(que)很費力(li)、耗(hao)時(shi)，需(xu)要(yao)4～7天(tian)才能(neng)完成。因此(ci)，在(zai)需(xu)要(yao)及(ji)時(shi)、快(kuai)速評價(jia)食(shi)(shi)(shi)品(pin)(pin)(pin)中(zhong)(zhong)微(wei)生物(wu)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)安全性(xing)(xing)時(shi)，通常不(bu)被(bei)采用(yong)(yong)(yong)。隨著DNA和抗體(ti)技術的(de)(de)(de)(de)(de)(de)發(fa)展，近10～15年(nian)間(jian)發(fa)展了(le)無數改(gai)進的(de)(de)(de)(de)(de)(de)方法(fa)(fa)(fa)，其中(zhong)(zhong)許多(duo)可以在(zai)48h內檢出沙(sha)(sha)(sha)門(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)，這些方法(fa)(fa)(fa)通稱(cheng)為(wei)(wei)(wei)快(kuai)速檢測。

抗體檢測

利用(yong)抗(kang)原-抗(kang)體(ti)(ti)(ti)反應(ying)的(de)顯著特(te)異性(xing)，來進行細菌(jun)的(de)鑒(jian)別和血(xue)清學定(ding)型(xing)，已有半個多世(shi)紀的(de)歷史。細菌(jun)菌(jun)體(ti)(ti)(ti)或鞭毛(mao)抗(kang)原的(de)特(te)異性(xing)抗(kang)體(ti)(ti)(ti)的(de)存在，使得人(ren)們可以(yi)(yi)建立一(yi)些快速方(fang)(fang)(fang)(fang)法(fa)來檢(jian)測(ce)以(yi)(yi)食品為載(zai)體(ti)(ti)(ti)的(de)病原。已經建立的(de)沙門氏菌(jun)免疫(yi)(yi)學檢(jian)測(ce)方(fang)(fang)(fang)(fang)法(fa)有許多種(zhong)，大致可分(fen)為以(yi)(yi)酶(mei)標抗(kang)體(ti)(ti)(ti)（ELISA)，熒光抗(kang)體(ti)(ti)(ti)染色(se)(se)（免疫(yi)(yi)熒光法(fa)），同位素標記抗(kang)體(ti)(ti)(ti)（放射(she)免疫(yi)(yi)試(shi)驗）為基礎(chu)(chu)的(de)方(fang)(fang)(fang)(fang)法(fa)及其(qi)它多種(zhong)以(yi)(yi)抗(kang)體(ti)(ti)(ti)為基礎(chu)(chu)，利用(yong)乳膠(jiao)凝集、免疫(yi)(yi)傳感器、免疫(yi)(yi)擴散(san)及免疫(yi)(yi)色(se)(se)譜(pu)技術的(de)方(fang)(fang)(fang)(fang)法(fa)。但(dan)常規中最廣泛(fan)采用(yong)的(de)是(shi)以(yi)(yi)雙位點ELISA技術即(ji)夾(jia)心(xin)ELISA為基礎(chu)(chu)的(de)方(fang)(fang)(fang)(fang)法(fa)。此(ci)法(fa)改進后(hou)用(yong)有放射(she)活性(xing)的(de)同位素替代標記抗(kang)體(ti)(ti)(ti)，概(gai)括地說(shuo)，是(shi)指(zhi)以(yi)(yi)固定(ding)在固體(ti)(ti)(ti)基質上(shang)的(de)“捕(bu)捉”抗(kang)體(ti)(ti)(ti)來捕(bu)捉目(mu)標抗(kang)原，經洗滌(di)除去(qu)未結合的(de)成(cheng)(cheng)分(fen)，加入第二(er)種(zhong)酶(mei)標抗(kang)體(ti)(ti)(ti)，此(ci)者結合在捕(bu)捉到的(de)抗(kang)原的(de)不同位點上(shang)，第二(er)次(ci)洗滌(di)后(hou)加入酶(mei)作用(yong)基質，并令(ling)其(qi)與顏色(se)(se)成(cheng)(cheng)分(fen)反應(ying)，然后(hou)用(yong)分(fen)光光度法(fa)即(ji)很容易檢(jian)測(ce)到目(mu)標抗(kang)原。采用(yong)微量(liang)滴定(ding)板作為固態(tai)基質使反應(ying)形式(shi)標準化，并促成(cheng)(cheng)其(qi)自動(dong)化。

黎(li)(li)兆(zhao)滾等(deng)(deng)人(ren)首次在國內口岸(an)系統應用(yong)微(wei)量板(ban)ELISA法(fa)(fa)(Salmonelletest1)對進(jin)(jin)(jin)出口動物產(chan)品(pin)(pin)（魚(yu)粉(fen)、肉(rou)(rou)骨粉(fen)等(deng)(deng)）進(jin)(jin)(jin)行(xing)沙(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)檢測(ce)。該法(fa)(fa)采用(yong)預先(xian)包被了沙(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)（A-E群）單(dan)克隆抗體的(de)(de)微(wei)量板(ban)，加(jia)入經增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)處理(li)的(de)(de)樣品(pin)(pin)，反(fan)應后(hou)(hou)再加(jia)入一(yi)(yi)定的(de)(de)指示劑，作用(yong)畢后(hou)(hou)用(yong)酶標(biao)(biao)儀(yi)測(ce)定OD值來(lai)判定結果(guo)(guo)。食物樣品(pin)(pin)經適當的(de)(de)增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)處理(li)，也可(ke)用(yong)此(ci)法(fa)(fa)進(jin)(jin)(jin)行(xing)沙(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)檢測(ce)。ELISA法(fa)(fa)檢出沙(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)的(de)(de)極(ji)(ji)限范圍在105～106個(ge)細胞(bao)/ml，因此(ci)，要(yao)得出可(ke)靠的(de)(de)結果(guo)(guo)，食物樣品(pin)(pin)首先(xian)必需(xu)進(jin)(jin)(jin)行(xing)預增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)、選(xuan)擇(ze)性(xing)增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)，通常(chang)還要(yao)在含(han)有D-甘露糖的(de)(de)肉(rou)(rou)湯（M肉(rou)(rou)湯）中(zhong)進(jin)(jin)(jin)行(xing)后(hou)(hou)增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)，以促進(jin)(jin)(jin)鞭毛(mao)發育。總的(de)(de)來(lai)說(shuo)，標(biao)(biao)準的(de)(de)ELISA法(fa)(fa)樣品(pin)(pin)的(de)(de)制備(bei)(bei)(bei)，約(yue)需(xu)要(yao)經過40～48h的(de)(de)孵(fu)育才能完(wan)成。黎(li)(li)兆(zhao)滾等(deng)(deng)人(ren)的(de)(de)微(wei)量板(ban)ELISA法(fa)(fa)（Salmonellatest1)樣品(pin)(pin)制備(bei)(bei)(bei)過程分三(san)步，共耗時(shi)(shi)24h：①選(xuan)用(yong)營養肉(rou)(rou)湯進(jin)(jin)(jin)行(xing)預增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)（6h），使(shi)(shi)“致傷(shang)”、冷凍的(de)(de)沙(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)復蘇。②使(shi)(shi)用(yong)選(xuan)擇(ze)性(xing)培養基RV進(jin)(jin)(jin)行(xing)增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)（14h），使(shi)(shi)沙(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)大量繁(fan)殖，同時(shi)(shi)抑(yi)制其它雜菌(jun)(jun)生長。③使(shi)(shi)用(yong)營養肉(rou)(rou)湯（蛋(dan)白胨水）進(jin)(jin)(jin)行(xing)后(hou)(hou)增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)（4h），使(shi)(shi)沙(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)的(de)(de)數量大大增(zeng)(zeng)加(jia)。比上(shang)(shang)述(shu)標(biao)(biao)準的(de)(de)ELISA法(fa)(fa)樣品(pin)(pin)制備(bei)(bei)(bei)過程縮短(duan)了一(yi)(yi)半的(de)(de)時(shi)(shi)間。ELISA方(fang)法(fa)(fa)本(ben)身，則僅(jin)需(xu)要(yao)大約(yue)2h而已（其中(zhong)30min是操作時(shi)(shi)間，90min是孵(fu)育時(shi)(shi)間）。相比之(zhi)下(xia)，黎(li)(li)兆(zhao)滾等(deng)(deng)人(ren)的(de)(de)方(fang)法(fa)(fa)可(ke)在27h內完(wan)成，比上(shang)(shang)述(shu)方(fang)法(fa)(fa)縮短(duan)了一(yi)(yi)半的(de)(de)時(shi)(shi)間，頗(po)值得推廣應用(yong)。最新式的(de)(de)沙(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)免(mian)疫學檢測(ce)法(fa)(fa)，利用(yong)經特異性(xing)抗體敏化的(de)(de)免(mian)疫色(se)譜(pu)卡(ka)(ka)(ka)片(pian)(pian)為(wei)基礎(chu)。幾滴樣品(pin)(pin)加(jia)到卡(ka)(ka)(ka)片(pian)(pian)上(shang)(shang)，結果(guo)(guo)可(ke)以直(zhi)接用(yong)肉(rou)(rou)眼讀出。免(mian)疫色(se)譜(pu)卡(ka)(ka)(ka)片(pian)(pian)極(ji)(ji)易(yi)操作，且由于(yu)無需(xu)要(yao)特殊設備(bei)(bei)(bei)，很適合小型(xing)實(shi)驗室使(shi)(shi)用(yong)。盡管(guan)卡(ka)(ka)(ka)片(pian)(pian)檢測(ce)法(fa)(fa)與ELISA法(fa)(fa)一(yi)(yi)樣需(xu)要(yao)對樣品(pin)(pin)進(jin)(jin)(jin)行(xing)增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)處理(li)，但(dan)它（卡(ka)(ka)(ka)片(pian)(pian)法(fa)(fa)）本(ben)身通常(chang)需(xu)時(shi)(shi)不超過10min，如果(guo)(guo)采用(yong)黎(li)(li)兆(zhao)滾等(deng)(deng)人(ren)的(de)(de)樣品(pin)(pin)制備(bei)(bei)(bei)法(fa)(fa)，則可(ke)使(shi)(shi)操作時(shi)(shi)間更為(wei)縮短(duan)。

核酸法

細(xi)胞(bao)核(he)酸DNA和RNA是(shi)(shi)唯一(yi)一(yi)類可(ke)以攜帶信(xin)息(xi)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)大(da)(da)(da)分子。由于(yu)(yu)所有(you)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)細(xi)胞(bao)都(dou)含(han)有(you)這(zhe)(zhe)種分子，可(ke)以利用(yong)(yong)它作為(wei)(wei)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)標(biao)(biao)(biao)靶(ba)(ba)(ba)。標(biao)(biao)(biao)靶(ba)(ba)(ba)通常是(shi)(shi)一(yi)個特異性(xing)(xing)(xing)核(he)酸序列，它可(ke)通過(guo)以補體(ti)(ti)核(he)酸分子作為(wei)(wei)探(tan)針來(lai)(lai)檢(jian)(jian)出。與(yu)免疫學(xue)方(fang)法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)相(xiang)似(si)，探(tan)針也需(xu)(xu)(xu)(xu)要(yao)加附適當(dang)(dang)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)標(biao)(biao)(biao)記，如放(fang)(fang)射性(xing)(xing)(xing)同位(wei)素、酶(mei)或(huo)(huo)發光(guang)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)標(biao)(biao)(biao)識(shi)物(wu)(wu)。Fitts等人在(zai)(zai)食(shi)(shi)品沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)中(zhong)引入了(le)第一(yi)代(dai)DNA—RNA雜交(jiao)技(ji)術，此法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)應(ying)(ying)用(yong)(yong)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)探(tan)針含(han)有(you)用(yong)(yong)放(fang)(fang)射性(xing)(xing)(xing)同位(wei)素標(biao)(biao)(biao)記的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)傷寒沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)DNA片(pian)段，其(qi)(qi)敏(min)感(gan)性(xing)(xing)(xing)高，經(jing)(jing)大(da)(da)(da)約48h的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)增(zeng)(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun)步驟后，檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)極限(xian)可(ke)達108個細(xi)菌(jun)(jun)(jun)/ml，但由于(yu)(yu)要(yao)使用(yong)(yong)放(fang)(fang)射性(xing)(xing)(xing)同位(wei)素，只(zhi)能在(zai)(zai)專門(men)(men)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)實驗室應(ying)(ying)用(yong)(yong)，此方(fang)法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)優點(dian)都(dou)被抵(di)消(xiao)了(le)。為(wei)(wei)此，以核(he)酸雜交(jiao)為(wei)(wei)基礎(chu)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)第二(er)代(dai)技(ji)術—比色計已發展起來(lai)(lai)。這(zhe)(zhe)種方(fang)法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)依賴于(yu)(yu)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)核(he)糖(tang)(tang)體(ti)(ti)RNA(rRNA)—核(he)糖(tang)(tang)體(ti)(ti)發育過(guo)程中(zhong)儲存(cun)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)核(he)酸成分的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)。核(he)糖(tang)(tang)體(ti)(ti)是(shi)(shi)細(xi)胞(bao)蛋白質合成器的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)一(yi)部分，每(mei)個細(xi)菌(jun)(jun)(jun)細(xi)胞(bao)中(zhong)存(cun)在(zai)(zai)5000～20000個復制(zhi)體(ti)(ti)，而相(xiang)比之(zhi)下染色體(ti)(ti)DNA復制(zhi)體(ti)(ti)僅2～10個。這(zhe)(zhe)種天(tian)然富含(han)rRNA標(biao)(biao)(biao)靶(ba)(ba)(ba)序列的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)情況使得用(yong)(yong)無輻射計檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)成為(wei)(wei)可(ke)能，同時又保(bao)(bao)持了(le)與(yu)放(fang)(fang)射性(xing)(xing)(xing)同位(wei)素方(fang)法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)相(xiang)當(dang)(dang)或(huo)(huo)更(geng)高的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)敏(min)感(gan)性(xing)(xing)(xing)。其(qi)(qi)另一(yi)優點(dian)是(shi)(shi)由于(yu)(yu)rRNA為(wei)(wei)單鏈(lian)（而DNA為(wei)(wei)雙鏈(lian)），雜交(jiao)前無需(xu)(xu)(xu)(xu)經(jing)(jing)過(guo)變性(xing)(xing)(xing)步驟。要(yao)得到陽性(xing)(xing)(xing)結果(guo)，此法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)需(xu)(xu)(xu)(xu)要(yao)105個靶(ba)(ba)(ba)細(xi)胞(bao)/ml，因(yin)此對(dui)(dui)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)來(lai)(lai)說，需(xu)(xu)(xu)(xu)要(yao)進(jin)行預增(zeng)(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun)和選擇性(xing)(xing)(xing)增(zeng)(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun)，總共約50h。rRNA探(tan)針法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)比沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)ELISA法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)（酶(mei)聯免疫檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)）更(geng)耗時，但二(er)者成本(ben)相(xiang)近。食(shi)(shi)品細(xi)菌(jun)(jun)(jun)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)最新進(jin)展是(shi)(shi)在(zai)(zai)化學(xue)擴增(zeng)(zeng)(zeng)體(ti)(ti)系方(fang)面(mian)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)發展，即(ji)聚(ju)合酶(mei)鏈(lian)反(fan)應(ying)(ying)(PCR)，用(yong)(yong)該體(ti)(ti)系可(ke)對(dui)(dui)制(zhi)備好的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)樣(yang)品進(jin)行細(xi)菌(jun)(jun)(jun)DNA擴增(zeng)(zeng)(zeng)，以便(bian)更(geng)易于(yu)(yu)用(yong)(yong)諸如凝膠(jiao)電泳法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)或(huo)(huo)比色型ELISA法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)。用(yong)(yong)于(yu)(yu)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)和其(qi)(qi)它以食(shi)(shi)物(wu)(wu)為(wei)(wei)載體(ti)(ti)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)病原的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)PCR方(fang)法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)業(ye)已建立，其(qi)(qi)中(zhong)一(yi)些(xie)方(fang)法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)顯示了(le)極好的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)敏(min)感(gan)性(xing)(xing)(xing)。但該法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)較難自(zi)動化，且必需(xu)(xu)(xu)(xu)經(jing)(jing)選擇性(xing)(xing)(xing)增(zeng)(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun)以稀釋(shi)可(ke)能干擾(rao)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)反(fan)應(ying)(ying)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)某些(xie)成分。一(yi)個完整的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)以PCR為(wei)(wei)基礎(chu)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)，需(xu)(xu)(xu)(xu)要(yao)2天(tian)才能完成，很(hen)大(da)(da)(da)程度上抵(di)銷(xiao)了(le)其(qi)(qi)高敏(min)感(gan)性(xing)(xing)(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)優點(dian)，但這(zhe)(zhe)種方(fang)法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)對(dui)(dui)那些(xie)含(han)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)較少或(huo)(huo)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)“致傷”嚴重難以復蘇而仍保(bao)(bao)有(you)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)rRNA的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)樣(yang)品尤其(qi)(qi)有(you)效(xiao)。