沙門氏(shi)(shi)菌(jun)是一(yi)種(zhong)(zhong)常見的食(shi)源(yuan)性致病(bing)菌(jun)。沙門氏(shi)(shi)菌(jun)鑒(jian)定的傳(chuan)統方法主(zhu)要是根據(ju)形(xing)態學特(te)征(zheng)(zheng)、培養特(te)征(zheng)(zheng)、生理(li)生化特(te)征(zheng)(zheng)、抗原特(te)征(zheng)(zheng)、噬(shi)菌(jun)體特(te)征(zheng)(zheng)等(deng)。1885年(nian)沙門氏(shi)(shi)等(deng)在(zai)霍(huo)亂流行(xing)時分離(li)到豬霍(huo)亂沙門氏(shi)(shi)菌(jun),故定名(ming)為沙門氏(shi)(shi)菌(jun)屬(shu)。沙門氏(shi)(shi)菌(jun)屬(shu)有(you)(you)的專對(dui)(dui)人類致病(bing),有(you)(you)的只(zhi)對(dui)(dui)動(dong)物(wu)(wu)致病(bing),也有(you)(you)對(dui)(dui)人和動(dong)物(wu)(wu)都致病(bing)。沙門氏(shi)(shi)菌(jun)病(bing)是指由(you)各種(zhong)(zhong)類型沙門氏(shi)(shi)菌(jun)所引(yin)起的對(dui)(dui)人類、家畜以及野生禽(qin)獸不(bu)同形(xing)式(shi)的總稱。感染沙門氏(shi)(shi)菌(jun)的人或帶菌(jun)者的糞(fen)便污染食(shi)品,可使人發生食(shi)物(wu)(wu)中毒。據(ju)統計在(zai)世界各國(guo)的種(zhong)(zhong)類細菌(jun)性食(shi)物(wu)(wu)中毒中,沙門氏(shi)(shi)菌(jun)引(yin)起的食(shi)物(wu)(wu)中毒常列榜首。我國(guo)內陸地區也以沙門氏(shi)(shi)菌(jun)為首位。
沙(sha)門(men)氏菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)病的病原(yuan)體。屬腸桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)科,革(ge)蘭氏陰性腸道(dao)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)。已發現的近一千種(或菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)株)。按其抗原(yuan)成分,可分為甲(jia)(jia)、乙、丙(bing)、丁、戊等基(ji)本菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)組(zu)。其中(zhong)與人體疾病有關的主(zhu)要有甲(jia)(jia)組(zu)的副(fu)傷(shang)(shang)寒(han)(han)(han)(han)(han)甲(jia)(jia)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun),乙組(zu)的副(fu)傷(shang)(shang)寒(han)(han)(han)(han)(han)乙桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)和(he)鼠傷(shang)(shang)寒(han)(han)(han)(han)(han)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun),丙(bing)組(zu)的副(fu)傷(shang)(shang)寒(han)(han)(han)(han)(han)丙(bing)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)和(he)豬霍亂(luan)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun),丁組(zu)的傷(shang)(shang)寒(han)(han)(han)(han)(han)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)和(he)腸炎桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)等。除(chu)傷(shang)(shang)寒(han)(han)(han)(han)(han)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)、副(fu)傷(shang)(shang)寒(han)(han)(han)(han)(han)甲(jia)(jia)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)和(he)副(fu)傷(shang)(shang)寒(han)(han)(han)(han)(han)乙桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)引(yin)起人類的疾病外,大多數僅(jin)能引(yin)起家畜、鼠類和(he)禽類等動物的疾病,但有時也可污染人類的食物而引(yin)起食物中(zhong)毒。
沙(sha)門氏菌在水(shui)中不易繁(fan)殖,但可生存2-3周,冰(bing)箱(xiang)中可生存3-4個月,在自然環境的(de)糞便中可存活1-2個月。沙(sha)門氏菌最適繁(fan)殖溫(wen)度為37℃,在20℃以(yi)上即能大量繁(fan)殖,因此,低(di)溫(wen)儲(chu)存食品是一(yi)項重要(yao)預(yu)防措施。
菌(jun)體(ti)大小(xiao)(0.6~0.9)×(1~3)微(wei)米無芽(ya)胞(bao),一(yi)般無莢膜,除雞(ji)白痢(li)沙門氏(shi)菌(jun)和雞(ji)傷(shang)寒沙門氏(shi)菌(jun)外,大多有(you)周身鞭毛。營養(yang)(yang)要(yao)求不(bu)(bu)高,分離培(pei)養(yang)(yang)常采用腸(chang)道選(xuan)擇鑒別(bie)培(pei)養(yang)(yang)基。生化反應對本屬菌(jun)的(de)鑒別(bie)具有(you)重(zhong)要(yao)參考意義(yi)(見表)。不(bu)(bu)液化明(ming)膠,不(bu)(bu)分解尿素,不(bu)(bu)產生吲(yin)哚,不(bu)(bu)發酵(jiao)乳(ru)糖和蔗糖,能(neng)發酵(jiao)葡萄糖、甘露醇、麥芽(ya)糖和衛芽(ya)糖,大多產酸(suan)產氣,少數只(zhi)產酸(suan)不(bu)(bu)產氣。VP試驗陰(yin)性(xing),有(you)賴氨酸(suan)脫羧酶(mei)。DNA的(de)G+C含量為50~53%。對熱(re)抵抗力不(bu)(bu)強,在60℃15分鐘可被(bei)殺(sha)死。在水(shui)中存活2~3周。在5%的(de)石炭酸(suan)中,5分鐘死亡。
本屬(shu)(shu)菌(jun)按生化反(fan)應(ying)(ying)分為4個亞(ya)屬(shu)(shu)。亞(ya)屬(shu)(shu)Ⅰ是生化反(fan)應(ying)(ying)典(dian)型的(de)和最常見的(de)沙門氏菌(jun);亞(ya)屬(shu)(shu)Ⅱ和Ⅳ是生化反(fan)應(ying)(ying)不(bu)典(dian)型的(de)沙門氏菌(jun);亞(ya)屬(shu)(shu)Ⅲ是亞(ya)利桑那沙門氏菌(jun)。
沙門氏(shi)菌具有復(fu)雜的抗原結構,一般(ban)可分為菌體(O)抗原、鞭毛(H)抗原和表(biao)面(Vi)抗原3種。
生(sheng)化反應很活潑,能(neng)分解多種糖類和醇。
1)需氧及(ji)兼性厭氧菌(jun)。
2)在(zai)普通瓊脂培養(yang)基上生長良好,培養(yang)24h后,形(xing)(xing)成(cheng)中等大(da)小(xiao)、圓形(xing)(xing)、表面(mian)光滑、無色(se)半(ban)透明、邊緣整齊的菌落,其菌落特(te)征亦與大(da)腸桿菌相(xiang)似(無糞臭味)。
3)鑒別培(pei)養基(麥康凱(kai)、SS、伊紅美藍):一般(ban)無色(se)菌落。
4)三(san)糖鐵瓊脂斜面(mian):斜面(mian)為紅色,底部變黑(hei)并產氣。
1)發酵葡萄糖,麥(mai)芽糖,甘露醇和(he)山(shan)梨醇產氣;
2)不(bu)發(fa)酵乳糖(tang)(tang)、蔗糖(tang)(tang)和側金盞花(hua)醇(chun);
3)不產(chan)吲哚、V-P反應陰性;
4)不(bu)水解尿素和對苯丙氨酸不(bu)脫(tuo)氨。
傷(shang)寒沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)氏(shi)菌(jun)(jun)(jun)、雞(ji)傷(shang)寒沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)氏(shi)菌(jun)(jun)(jun)及一部分雞(ji)白(bai)痢(li)(li)沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)氏(shi)菌(jun)(jun)(jun)發酵糖不(bu)產氣,大(da)多數(shu)雞(ji)白(bai)痢(li)(li)沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)氏(shi)菌(jun)(jun)(jun)不(bu)發酵麥芽糖;除雞(ji)白(bai)痢(li)(li)沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)氏(shi)菌(jun)(jun)(jun)、豬傷(shang)寒沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)氏(shi)菌(jun)(jun)(jun)、甲型副傷(shang)寒沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)氏(shi)菌(jun)(jun)(jun)、傷(shang)寒沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)氏(shi)菌(jun)(jun)(jun)和仙臺沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)氏(shi)菌(jun)(jun)(jun)等外,均能利(li)用枸櫞酸鹽。
沙(sha)門(men)氏(shi)菌具(ju)有復雜的抗原結構(gou),一(yi)般沙(sha)門(men)氏(shi)菌具(ju)有菌體(O)抗原、鞭毛(H)抗原和表面抗原(莢膜或(huo)包膜抗原)三種抗原。
肉(rou)及其制品的沙(sha)門氏(shi)菌(jun)檢(jian)出率美國為(wei)20%-25%、英國為(wei)9.9%、日本檢(jian)查進口家(jia)禽的污染(ran)率為(wei)10.3%,國內(nei)肉(rou)類(lei)沙(sha)門氏(shi)菌(jun)檢(jian)出率在1.1%-39.5%。
中國(guo)蛋及其制品沙門氏菌檢出率為3.9%-43.7%,由于吃蛋引起(qi)鼠傷寒病的病例報告逐漸(jian)有增加的趨勢。
食品在加工(gong)、運輸、出售過程(cheng)中(zhong)往(wang)往(wang)被沙門(men)氏菌(jun)污染。沙門(men)氏菌(jun)在糞便、土(tu)壤、食品、水(shui)中(zhong)可生(sheng)存5個月至2年之久。
恢(hui)復期患(huan)者和無癥狀的(de)帶菌者也是常見的(de)傳染(ran)源。
廣泛分布(bu)于自然界(jie),常(chang)常(chang)寄居(ju)在人(ren)和動物(wu)(wu)體內,特別(bie)是(shi)家禽、家畜及寵物(wu)(wu)的(de)腸道中(zhong)。主要污(wu)(wu)染的(de)食品有(you):肉和肉制(zhi)品、蛋(dan)和蛋(dan)制(zhi)品、奶和奶制(zhi)品等。由于沙(sha)門氏菌(jun)不分解(jie)蛋(dan)白(bai)質,食物(wu)(wu)被(bei)其污(wu)(wu)染后表面看(kan)起來似乎并沒有(you)變化.
沙門(men)氏菌(jun)感染(ran)癥為人畜共(gong)患感染(ran)性(xing)疾病,主要(yao)由(you)食用遭受污染(ran)的食物導(dao)致(zhi),是許多國家食物中毒的重要(yao)病源。
典型癥狀包(bao)括發熱(re)(re)、惡(e)心、嘔吐、腹瀉及腹部絞痛等癥狀,通常在發熱(re)(re)后72小時內會(hui)(hui)好(hao)轉。嬰(ying)兒、老(lao)年人、免疫(yi)功能低下(xia)的(de)患者則可能因沙(sha)門(men)氏菌(jun)進入血(xue)液而出現嚴重且(qie)危及生命的(de)菌(jun)血(xue)癥,少數還會(hui)(hui)合(he)并腦(nao)膜炎(yan)或(huo)骨髓炎(yan)。
一(yi)般沙門(men)氏(shi)菌造(zao)成的腸胃炎不需要給予抗(kang)生素(su)治(zhi)療;而以補充水分與電解質(zhi)為主(zhu);但(dan)對于新(xin)生兒(er)、免疫功能低(di)下患者及特殊傷員;則需要視情況紿予抗(kang)生素(su)治(zhi)療。
1、餐前、便后、接(jie)觸(chu)(chu)食物前、接(jie)觸(chu)(chu)動物或生蛋后應仔細洗(xi)凈雙手。
2、處理生食(shi)和熟食(shi)的砧板(ban)要分開(kai)。
3、食物要熟透再吃(尤其是雞蛋與家禽類(lei))。
4、非現做現吃的食物應以保鮮膜包(bao)覆后放(fang)進冰箱(xiang)保存(cun),再次(ci)食用前應加熱或煮熟(shu)。
5、撲滅并阻隔蒼(cang)蠅(ying)等病媒。被蒼(cang)蠅(ying)沾染(ran)、過期或腐敗的不潔食(shi)物均應丟棄,切勿食(shi)用。
6、水塔(ta)應經(jing)常清洗(xi)、消毒。
7、旅行或野營時的飲用水應煮沸并消毒。
8、如有嘔吐、腹瀉或發(fa)熱等癥狀,應盡快就醫。
沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)是美國(guo)食(shi)(shi)(shi)(shi)物中毒致死(si)的(de)(de)主要(yao)原因(yin)。美國(guo)人(ren)(ren)對(dui)這種(zhong)病菌(jun)(jun)一點(dian)都不(bu)(bu)(bu)(bu)陌生(sheng)(sheng),每年(nian)全(quan)(quan)國(guo)大(da)約(yue)報告40000例(li)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)感(gan)染(ran)(ran)(ran)(ran)病例(li)。但(dan)實際的(de)(de)感(gan)染(ran)(ran)(ran)(ran)人(ren)(ren)數(shu)可(ke)(ke)能(neng)要(yao)達20倍以(yi)上(shang)(shang),因(yin)為許多輕(qing)型病人(ren)(ren)可(ke)(ke)能(neng)未確診(zhen),據不(bu)(bu)(bu)(bu)完(wan)(wan)全(quan)(quan)統(tong)計,每年(nian)大(da)約(yue)有(you)1000人(ren)(ren)死(si)于急性沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)感(gan)染(ran)(ran)(ran)(ran)。但(dan)是,以(yi)前各州爆發(fa)的(de)(de)疫情幾乎都與人(ren)(ren)們吃(chi)(chi)了(le)染(ran)(ran)(ran)(ran)上(shang)(shang)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)的(de)(de)肉類(lei)、蛋(dan)類(lei)、乳類(lei)有(you)關,但(dan)迄今為止,很少聽說吃(chi)(chi)蔬(shu)果大(da)面積受(shou)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)污染(ran)(ran)(ran)(ran)甚至在人(ren)(ren)群中引發(fa)大(da)疫情的(de)(de)。對(dui)此(ci),周福生(sheng)(sheng)教授解釋(shi)說,這可(ke)(ke)能(neng)是西紅(hong)柿(shi)在生(sheng)(sheng)長(chang)的(de)(de)過(guo)(guo)程(cheng)中,由于空氣中紫(zi)外線不(bu)(bu)(bu)(bu)夠強烈(lie),植物在灌溉過(guo)(guo)程(cheng)或因(yin)土壤(rang)中含有(you)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun),這樣才(cai)使西紅(hong)柿(shi)的(de)(de)表皮(pi)上(shang)(shang)沾(zhan)染(ran)(ran)(ran)(ran)了(le)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun),加(jia)上(shang)(shang)不(bu)(bu)(bu)(bu)少人(ren)(ren)有(you)生(sheng)(sheng)食(shi)(shi)(shi)(shi)西紅(hong)柿(shi)的(de)(de)習(xi)慣,如(ru)果沒有(you)清洗干凈(jing),就完(wan)(wan)全(quan)(quan)有(you)可(ke)(ke)能(neng)發(fa)生(sheng)(sheng)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)感(gan)染(ran)(ran)(ran)(ran)。不(bu)(bu)(bu)(bu)光(guang)是食(shi)(shi)(shi)(shi)用西紅(hong)柿(shi),其他瓜(gua)果蔬(shu)菜(cai)也一樣。沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)主要(yao)污染(ran)(ran)(ran)(ran)肉類(lei)食(shi)(shi)(shi)(shi)品(pin),魚、禽(qin)、奶、蛋(dan)類(lei)食(shi)(shi)(shi)(shi)品(pin)也可(ke)(ke)受(shou)此(ci)菌(jun)(jun)污染(ran)(ran)(ran)(ran)。沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)食(shi)(shi)(shi)(shi)物中毒全(quan)(quan)年(nian)都可(ke)(ke)發(fa)生(sheng)(sheng),吃(chi)(chi)了(le)未煮(zhu)透的(de)(de)病、死(si)牲(sheng)畜(chu)(chu)肉或在屠宰后其他環節污染(ran)(ran)(ran)(ran)的(de)(de)牲(sheng)畜(chu)(chu)肉是引起(qi)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)食(shi)(shi)(shi)(shi)物中毒的(de)(de)最(zui)主要(yao)原因(yin)。有(you)食(shi)(shi)(shi)(shi)品(pin)專家指出(chu)美國(guo)人(ren)(ren)吃(chi)(chi)雞(ji)蛋(dan)的(de)(de)習(xi)慣與國(guo)人(ren)(ren)不(bu)(bu)(bu)(bu)同,他們喜歡吃(chi)(chi)半熟的(de)(de)雞(ji)蛋(dan)甚至是生(sheng)(sheng)雞(ji)蛋(dan),所以(yi)一旦雞(ji)蛋(dan)里(li)(li)含有(you)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun),感(gan)染(ran)(ran)(ran)(ran)的(de)(de)幾率就比較高(gao)。“在國(guo)內,生(sheng)(sheng)雞(ji)蛋(dan)里(li)(li)含有(you)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)其實并不(bu)(bu)(bu)(bu)奇怪(guai),只(zhi)不(bu)(bu)(bu)(bu)過(guo)(guo)國(guo)人(ren)(ren)喜歡將雞(ji)蛋(dan)煮(zhu)熟吃(chi)(chi),這樣就大(da)大(da)減少了(le)感(gan)染(ran)(ran)(ran)(ran)的(de)(de)幾率。”
由沙門氏菌(jun)(jun)引起的食(shi)品(pin)(pin)中(zhong)毒(du)癥狀主要(yao)有惡心、嘔(ou)吐、腹痛、頭痛、畏(wei)寒和(he)腹瀉等,還伴有乏力(li)、肌肉酸痛、視覺模糊、中(zhong)等程度發熱、躁動不(bu)安和(he)嗜睡,延續時(shi)間2~3d,平均致(zhi)死率(lv)為4.1%。其主要(yao)原因是由于攝入了含有大量沙門氏菌(jun)(jun)屬的非寄主專一性菌(jun)(jun)種(zhong)或(huo)血清型(xing)的食(shi)品(pin)(pin)所(suo)引起的。在攝入含毒(du)食(shi)品(pin)(pin)之后.癥狀一般(ban)在12~14h內出(chu)現,有些潛伏期較長。
防止沙門氏菌(jun)污染食品;控(kong)制食品中沙門氏菌(jun)的繁殖;加熱以(yi)徹底殺滅(mie)病原菌(jun)。
沙門氏菌(jun)不耐(nai)高溫,食物的(de)中心溫度達70℃以上,持續5分鐘一般(ban)(ban)都(dou)(dou)可以殺(sha)死包括沙門氏菌(jun)等常見食源性致病菌(jun)。家庭中一般(ban)(ban)的(de)熱處理(li)烹調方式都(dou)(dou)可有效殺(sha)滅該菌(jun)。
稱取25g(mL)樣(yang)(yang)品(pin)放(fang)入(ru)盛有225 mL BPW的(de)無(wu)菌(jun)均(jun)(jun)質(zhi)杯中(zhong)(zhong),以8000 r/min~10 000 r/min均(jun)(jun)質(zhi)1min~2min,或(huo)置于盛有225 mL BPW的(de)無(wu)菌(jun)均(jun)(jun)質(zhi)袋中(zhong)(zhong),用拍擊式均(jun)(jun)質(zhi)器拍打1min~2min。若(ruo)樣(yang)(yang)品(pin)為液態,不需要均(jun)(jun)質(zhi),振蕩(dang)混勻。如需測定pH值,用1mol/mL無(wu)菌(jun)NaOH或(huo)HCl調(diao)pH至(zhi)(zhi)6.8±0.2。無(wu)菌(jun)操作(zuo)將樣(yang)(yang)品(pin)轉(zhuan)至(zhi)(zhi)500mL錐形(xing)瓶中(zhong)(zhong),如使(shi)用均(jun)(jun)質(zhi)袋,可直接進行培養(yang),于36 ℃±1℃培養(yang)8h~18h。
如為(wei)冷凍產(chan)品,應在(zai)45℃以(yi)下不(bu)超過(guo)(guo)15min,或2℃~5℃不(bu)超過(guo)(guo)18h解(jie)凍。
輕輕搖動培(pei)(pei)養過的樣品混合物,移取(qu)1mL,轉種于(yu)(yu)10mL TTB內,于(yu)(yu)42℃±1℃培(pei)(pei)養18h~24h。同時(shi),另取(qu)1mL,轉種于(yu)(yu)10 mL SC內,于(yu)(yu)36℃±1℃培(pei)(pei)養18h~24h。
分別用接(jie)種環取增菌液1環,劃(hua)線接(jie)種于一個BS瓊脂(zhi)(zhi)平(ping)(ping)板(ban)(ban)(ban)(ban)和一個XLD瓊脂(zhi)(zhi)平(ping)(ping)板(ban)(ban)(ban)(ban)(或HE瓊脂(zhi)(zhi)平(ping)(ping)板(ban)(ban)(ban)(ban)或沙(sha)門氏(shi)菌屬(shu)顯色培養基平(ping)(ping)板(ban)(ban)(ban)(ban))。于36℃±1℃分別培養18h~24h(XLD瓊脂(zhi)(zhi)平(ping)(ping)板(ban)(ban)(ban)(ban)、HE瓊脂(zhi)(zhi)平(ping)(ping)板(ban)(ban)(ban)(ban)、沙(sha)門氏(shi)菌屬(shu)顯色培養基平(ping)(ping)板(ban)(ban)(ban)(ban))或40h~48h (BS瓊脂(zhi)(zhi)平(ping)(ping)板(ban)(ban)(ban)(ban)),觀察各(ge)個平(ping)(ping)板(ban)(ban)(ban)(ban)上生長(chang)的菌落(luo),各(ge)個平(ping)(ping)板(ban)(ban)(ban)(ban)上的菌落(luo)特征見表1。
表 1 沙門氏菌(jun)屬(shu)在(zai)不同選擇性瓊脂平板上的(de)菌(jun)落特征
選擇性瓊(qiong)脂平板 沙門氏菌(jun)
BS 瓊脂 菌(jun)落為黑色(se)(se)有(you)金屬(shu)光澤、棕(zong)(zong)褐色(se)(se)或(huo)灰(hui)色(se)(se),菌(jun)落周圍(wei)(wei)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)可(ke)呈黑色(se)(se)或(huo)棕(zong)(zong)色(se)(se);有(you)些(xie)菌(jun)株(zhu)形成灰(hui)綠色(se)(se)的菌(jun)落,周圍(wei)(wei)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)不(bu)變。
HE 瓊(qiong)脂(zhi) 藍綠色或藍色,多(duo)數菌(jun)落中(zhong)心(xin)黑(hei)(hei)色或幾(ji)(ji)乎全(quan)黑(hei)(hei)色;有些菌(jun)株為黃(huang)色,中(zhong)心(xin)黑(hei)(hei)色或幾(ji)(ji)乎全(quan)黑(hei)(hei)色。
XLD 瓊脂 菌(jun)落呈(cheng)粉紅(hong)色,帶(dai)或不帶(dai)黑(hei)色中(zhong)心(xin),有(you)些菌(jun)株可呈(cheng)現大的(de)(de)帶(dai)光澤的(de)(de)黑(hei)色中(zhong)心(xin),或呈(cheng)現全部黑(hei)色的(de)(de)菌(jun)落;有(you)些菌(jun)株為黃色菌(jun)落,帶(dai)或不帶(dai)黑(hei)色中(zhong)心(xin)。
沙門氏菌屬顯色培養 按照顯色培養基的說明(ming)進行判定。
自(zi)19世紀后期,沙(sha)門(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)(jun)首次(ci)被(bei)鑒定(ding)為(wei)(wei)(wei)人類的(de)(de)(de)(de)(de)(de)一(yi)(yi)種(zhong)病(bing)(bing)原(yuan)以(yi)(yi)來,檢(jian)測(ce)(ce)方(fang)法(fa)學(xue)都是(shi)(shi)建立(li)在(zai)采取感(gan)染病(bing)(bing)人的(de)(de)(de)(de)(de)(de)糞便或血液作為(wei)(wei)(wei)臨(lin)(lin)床(chuang)(chuang)病(bing)(bing)料(liao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)基礎(chu)上(shang)。此后的(de)(de)(de)(de)(de)(de)60年(nian)間,用于(yu)(yu)從食(shi)(shi)(shi)(shi)品中(zhong)(zhong)分(fen)離(li)沙(sha)門(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)(jun)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)法(fa)實質上(shang)與(yu)那(nei)(nei)些(xie)用于(yu)(yu)臨(lin)(lin)床(chuang)(chuang)病(bing)(bing)料(liao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)法(fa)是(shi)(shi)相同的(de)(de)(de)(de)(de)(de)。但(dan)(dan)至少有(you)三個因素限制了(le)用于(yu)(yu)臨(lin)(lin)床(chuang)(chuang)病(bing)(bing)料(liao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)法(fa)應用在(zai)食(shi)(shi)(shi)(shi)品分(fen)析上(shang)。第一(yi)(yi),通常(chang),沙(sha)門(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)(jun)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)含量(liang)水(shui)平在(zai)污染食(shi)(shi)(shi)(shi)品中(zhong)(zhong)比(bi)有(you)感(gan)染病(bing)(bing)人的(de)(de)(de)(de)(de)(de)病(bing)(bing)料(liao)中(zhong)(zhong)要(yao)(yao)低很(hen)(hen)(hen)多(duo);第二,食(shi)(shi)(shi)(shi)品本身的(de)(de)(de)(de)(de)(de)性(xing)質會干擾病(bing)(bing)原(yuan)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)檢(jian)測(ce)(ce),例如,某些(xie)食(shi)(shi)(shi)(shi)品中(zhong)(zhong)固有(you)菌(jun)(jun)(jun)群(qun)可能處在(zai)一(yi)(yi)個很(hen)(hen)(hen)高的(de)(de)(de)(de)(de)(de)水(shui)平,從而影(ying)(ying)響(xiang)特(te)定(ding)細(xi)菌(jun)(jun)(jun)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)選擇性(xing)分(fen)離(li)和(he)鑒定(ding);第三,與(yu)臨(lin)(lin)床(chuang)(chuang)病(bing)(bing)料(liao)不(bu)同的(de)(de)(de)(de)(de)(de)是(shi)(shi),經(jing)過(guo)加工的(de)(de)(de)(de)(de)(de)食(shi)(shi)(shi)(shi)品,由(you)于(yu)(yu)加熱、干燥、高含鹽量(liang)、酸和(he)冷凍等因素的(de)(de)(de)(de)(de)(de)作用,其中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)沙(sha)門(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)(jun)受到了(le)尚(shang)不(bu)致(zhi)(zhi)命(ming)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)損傷(shang)(shang)或稱“致(zhi)(zhi)傷(shang)(shang)”。這(zhe)(zhe)就形成了(le)一(yi)(yi)個具有(you)不(bu)同生長(chang)特(te)性(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)細(xi)菌(jun)(jun)(jun)群(qun)。這(zhe)(zhe)種(zhong)現象(xiang)對(dui)那(nei)(nei)些(xie)希望從食(shi)(shi)(shi)(shi)物(wu)樣品中(zhong)(zhong)分(fen)離(li)出沙(sha)門(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)(jun)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)食(shi)(shi)(shi)(shi)品分(fen)析家來說有(you)很(hen)(hen)(hen)大影(ying)(ying)響(xiang),因為(wei)(wei)(wei)在(zai)選擇培養基上(shang)直接培養“致(zhi)(zhi)傷(shang)(shang)”的(de)(de)(de)(de)(de)(de)沙(sha)門(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)(jun)通常(chang)是(shi)(shi)以(yi)(yi)細(xi)菌(jun)(jun)(jun)死亡和(he)試(shi)驗失敗而告終。為(wei)(wei)(wei)克服這(zhe)(zhe)些(xie)困難(nan),人們建立(li)了(le)一(yi)(yi)種(zhong)簡單的(de)(de)(de)(de)(de)(de)微(wei)生物(wu)增(zeng)殖步驟,專(zhuan)門(men)(men)針(zhen)對(dui)以(yi)(yi)食(shi)(shi)(shi)(shi)品為(wei)(wei)(wei)傳播載體的(de)(de)(de)(de)(de)(de)病(bing)(bing)原(yuan)。雖然(ran)這(zhe)(zhe)些(xie)方(fang)法(fa)本身證明(ming)是(shi)(shi)可靠的(de)(de)(de)(de)(de)(de),但(dan)(dan)卻很(hen)(hen)(hen)費力(li)、耗時,需要(yao)(yao)4~7天才能完成。因此,在(zai)需要(yao)(yao)及時、快(kuai)速(su)評(ping)價食(shi)(shi)(shi)(shi)品中(zhong)(zhong)微(wei)生物(wu)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)安全性(xing)時,通常(chang)不(bu)被(bei)采用。隨著DNA和(he)抗(kang)體技術的(de)(de)(de)(de)(de)(de)發(fa)展,近(jin)10~15年(nian)間發(fa)展了(le)無數改進(jin)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)法(fa),其中(zhong)(zhong)許多(duo)可以(yi)(yi)在(zai)48h內檢(jian)出沙(sha)門(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)(jun),這(zhe)(zhe)些(xie)方(fang)法(fa)通稱為(wei)(wei)(wei)快(kuai)速(su)檢(jian)測(ce)(ce)。
利(li)用(yong)(yong)(yong)抗(kang)(kang)(kang)原-抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)反應(ying)的(de)顯著特(te)(te)異性,來(lai)進(jin)行細菌(jun)的(de)鑒(jian)別和血清學定型,已有半個(ge)多世紀的(de)歷(li)史(shi)。細菌(jun)菌(jun)體(ti)(ti)(ti)或鞭毛抗(kang)(kang)(kang)原的(de)特(te)(te)異性抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)的(de)存在(zai),使(shi)(shi)得人們(men)可以(yi)(yi)建(jian)立一些快速(su)方法(fa)來(lai)檢測以(yi)(yi)食品為(wei)(wei)(wei)載(zai)體(ti)(ti)(ti)的(de)病(bing)原。已經(jing)(jing)建(jian)立的(de)沙門氏菌(jun)免(mian)疫(yi)(yi)學檢測方法(fa)有許多種(zhong),大(da)致可分(fen)為(wei)(wei)(wei)以(yi)(yi)酶標(biao)(biao)(biao)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ELISA),熒光抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)染色(免(mian)疫(yi)(yi)熒光法(fa)),同位素標(biao)(biao)(biao)記抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(放(fang)射(she)免(mian)疫(yi)(yi)試驗)為(wei)(wei)(wei)基(ji)礎(chu)的(de)方法(fa)及(ji)其它多種(zhong)以(yi)(yi)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)為(wei)(wei)(wei)基(ji)礎(chu),利(li)用(yong)(yong)(yong)乳膠凝集、免(mian)疫(yi)(yi)傳(chuan)感器(qi)、免(mian)疫(yi)(yi)擴散及(ji)免(mian)疫(yi)(yi)色譜(pu)技術的(de)方法(fa)。但常規中(zhong)最廣泛采用(yong)(yong)(yong)的(de)是以(yi)(yi)雙位點ELISA技術即夾心ELISA為(wei)(wei)(wei)基(ji)礎(chu)的(de)方法(fa)。此(ci)法(fa)改進(jin)后(hou)用(yong)(yong)(yong)有放(fang)射(she)活性的(de)同位素替代標(biao)(biao)(biao)記抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti),概括地說,是指以(yi)(yi)固(gu)定在(zai)固(gu)體(ti)(ti)(ti)基(ji)質(zhi)上(shang)的(de)“捕(bu)捉(zhuo)”抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)來(lai)捕(bu)捉(zhuo)目標(biao)(biao)(biao)抗(kang)(kang)(kang)原,經(jing)(jing)洗滌除去未結合的(de)成分(fen),加入第二(er)種(zhong)酶標(biao)(biao)(biao)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti),此(ci)者結合在(zai)捕(bu)捉(zhuo)到的(de)抗(kang)(kang)(kang)原的(de)不同位點上(shang),第二(er)次洗滌后(hou)加入酶作用(yong)(yong)(yong)基(ji)質(zhi),并(bing)令其與顏色成分(fen)反應(ying),然后(hou)用(yong)(yong)(yong)分(fen)光光度法(fa)即很容易檢測到目標(biao)(biao)(biao)抗(kang)(kang)(kang)原。采用(yong)(yong)(yong)微(wei)量(liang)滴定板(ban)作為(wei)(wei)(wei)固(gu)態基(ji)質(zhi)使(shi)(shi)反應(ying)形式標(biao)(biao)(biao)準化,并(bing)促(cu)成其自動化。
黎兆(zhao)滾等人首次在(zai)(zai)國(guo)內口(kou)岸(an)系統應用(yong)(yong)(yong)微(wei)量板ELISA法(fa)(fa)(fa)(Salmonelletest1)對(dui)進(jin)(jin)(jin)出(chu)(chu)口(kou)動物(wu)產品(pin)(pin)(魚粉、肉(rou)骨粉等)進(jin)(jin)(jin)行(xing)(xing)沙(sha)(sha)門氏菌(jun)(jun)(jun)(jun)檢(jian)(jian)(jian)測。該法(fa)(fa)(fa)采用(yong)(yong)(yong)預(yu)先包(bao)被(bei)了(le)沙(sha)(sha)門氏菌(jun)(jun)(jun)(jun)(A-E群(qun))單克隆抗體的(de)(de)(de)(de)(de)(de)微(wei)量板,加入經(jing)(jing)增菌(jun)(jun)(jun)(jun)處(chu)理(li)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)樣(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin),反應后再加入一(yi)定(ding)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)指示劑,作(zuo)(zuo)用(yong)(yong)(yong)畢(bi)后用(yong)(yong)(yong)酶(mei)標儀測定(ding)OD值來判定(ding)結(jie)果(guo)。食物(wu)樣(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)經(jing)(jing)適(shi)當的(de)(de)(de)(de)(de)(de)增菌(jun)(jun)(jun)(jun)處(chu)理(li),也可(ke)(ke)用(yong)(yong)(yong)此法(fa)(fa)(fa)進(jin)(jin)(jin)行(xing)(xing)沙(sha)(sha)門氏菌(jun)(jun)(jun)(jun)檢(jian)(jian)(jian)測。ELISA法(fa)(fa)(fa)檢(jian)(jian)(jian)出(chu)(chu)沙(sha)(sha)門氏菌(jun)(jun)(jun)(jun)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)極限范圍在(zai)(zai)105~106個(ge)細(xi)胞/ml,因此,要(yao)(yao)得出(chu)(chu)可(ke)(ke)靠的(de)(de)(de)(de)(de)(de)結(jie)果(guo),食物(wu)樣(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)首先必(bi)需(xu)進(jin)(jin)(jin)行(xing)(xing)預(yu)增菌(jun)(jun)(jun)(jun)、選(xuan)擇(ze)性(xing)增菌(jun)(jun)(jun)(jun),通常還(huan)要(yao)(yao)在(zai)(zai)含有D-甘露糖(tang)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)肉(rou)湯(M肉(rou)湯)中(zhong)(zhong)進(jin)(jin)(jin)行(xing)(xing)后增菌(jun)(jun)(jun)(jun),以促進(jin)(jin)(jin)鞭毛(mao)發育(yu)。總的(de)(de)(de)(de)(de)(de)來說(shuo),標準(zhun)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)ELISA法(fa)(fa)(fa)樣(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)制(zhi)備(bei),約(yue)(yue)需(xu)要(yao)(yao)經(jing)(jing)過(guo)(guo)40~48h的(de)(de)(de)(de)(de)(de)孵育(yu)才能完成(cheng)。黎兆(zhao)滾等人的(de)(de)(de)(de)(de)(de)微(wei)量板ELISA法(fa)(fa)(fa)(Salmonellatest1)樣(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)制(zhi)備(bei)過(guo)(guo)程(cheng)分三步,共耗(hao)時(shi)24h:①選(xuan)用(yong)(yong)(yong)營養(yang)肉(rou)湯進(jin)(jin)(jin)行(xing)(xing)預(yu)增菌(jun)(jun)(jun)(jun)(6h),使(shi)(shi)“致(zhi)傷”、冷凍的(de)(de)(de)(de)(de)(de)沙(sha)(sha)門氏菌(jun)(jun)(jun)(jun)復蘇。②使(shi)(shi)用(yong)(yong)(yong)選(xuan)擇(ze)性(xing)培(pei)養(yang)基RV進(jin)(jin)(jin)行(xing)(xing)增菌(jun)(jun)(jun)(jun)(14h),使(shi)(shi)沙(sha)(sha)門氏菌(jun)(jun)(jun)(jun)大量繁殖,同時(shi)抑制(zhi)其(qi)它雜(za)菌(jun)(jun)(jun)(jun)生長。③使(shi)(shi)用(yong)(yong)(yong)營養(yang)肉(rou)湯(蛋白胨水(shui))進(jin)(jin)(jin)行(xing)(xing)后增菌(jun)(jun)(jun)(jun)(4h),使(shi)(shi)沙(sha)(sha)門氏菌(jun)(jun)(jun)(jun)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)數量大大增加。比上(shang)(shang)述(shu)標準(zhun)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)ELISA法(fa)(fa)(fa)樣(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)制(zhi)備(bei)過(guo)(guo)程(cheng)縮短(duan)了(le)一(yi)半(ban)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)時(shi)間(jian)。ELISA方(fang)(fang)法(fa)(fa)(fa)本身,則僅需(xu)要(yao)(yao)大約(yue)(yue)2h而已(其(qi)中(zhong)(zhong)30min是(shi)操(cao)作(zuo)(zuo)時(shi)間(jian),90min是(shi)孵育(yu)時(shi)間(jian))。相(xiang)比之下(xia),黎兆(zhao)滾等人的(de)(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)(fang)法(fa)(fa)(fa)可(ke)(ke)在(zai)(zai)27h內完成(cheng),比上(shang)(shang)述(shu)方(fang)(fang)法(fa)(fa)(fa)縮短(duan)了(le)一(yi)半(ban)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)時(shi)間(jian),頗值得推廣應用(yong)(yong)(yong)。最新式的(de)(de)(de)(de)(de)(de)沙(sha)(sha)門氏菌(jun)(jun)(jun)(jun)免(mian)疫(yi)學檢(jian)(jian)(jian)測法(fa)(fa)(fa),利用(yong)(yong)(yong)經(jing)(jing)特異(yi)性(xing)抗體敏化的(de)(de)(de)(de)(de)(de)免(mian)疫(yi)色譜卡片(pian)(pian)為基礎。幾滴(di)樣(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)加到卡片(pian)(pian)上(shang)(shang),結(jie)果(guo)可(ke)(ke)以直接用(yong)(yong)(yong)肉(rou)眼(yan)讀(du)出(chu)(chu)。免(mian)疫(yi)色譜卡片(pian)(pian)極易操(cao)作(zuo)(zuo),且由于無需(xu)要(yao)(yao)特殊設備(bei),很(hen)適(shi)合(he)小(xiao)型實驗室使(shi)(shi)用(yong)(yong)(yong)。盡管(guan)卡片(pian)(pian)檢(jian)(jian)(jian)測法(fa)(fa)(fa)與ELISA法(fa)(fa)(fa)一(yi)樣(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)需(xu)要(yao)(yao)對(dui)樣(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)進(jin)(jin)(jin)行(xing)(xing)增菌(jun)(jun)(jun)(jun)處(chu)理(li),但它(卡片(pian)(pian)法(fa)(fa)(fa))本身通常需(xu)時(shi)不超過(guo)(guo)10min,如果(guo)采用(yong)(yong)(yong)黎兆(zhao)滾等人的(de)(de)(de)(de)(de)(de)樣(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)制(zhi)備(bei)法(fa)(fa)(fa),則可(ke)(ke)使(shi)(shi)操(cao)作(zuo)(zuo)時(shi)間(jian)更為縮短(duan)。
細(xi)胞核(he)(he)酸(suan)(suan)DNA和RNA是(shi)唯(wei)一(yi)(yi)(yi)一(yi)(yi)(yi)類可(ke)以攜帶信息的(de)(de)(de)大分(fen)子。由于(yu)(yu)所有(you)的(de)(de)(de)細(xi)胞都含(han)有(you)這(zhe)種分(fen)子,可(ke)以利用(yong)(yong)它作為(wei)檢(jian)測(ce)的(de)(de)(de)標(biao)(biao)靶(ba)。標(biao)(biao)靶(ba)通常是(shi)一(yi)(yi)(yi)個(ge)(ge)特異性核(he)(he)酸(suan)(suan)序列,它可(ke)通過(guo)以補(bu)體(ti)核(he)(he)酸(suan)(suan)分(fen)子作為(wei)探針來(lai)檢(jian)出(chu)。與(yu)免(mian)疫學(xue)方(fang)(fang)法(fa)(fa)相(xiang)(xiang)(xiang)似,探針也需(xu)要(yao)加附適(shi)當的(de)(de)(de)標(biao)(biao)記,如放(fang)(fang)射(she)性同(tong)位素(su)、酶或發(fa)(fa)光的(de)(de)(de)標(biao)(biao)識(shi)物(wu)。Fitts等(deng)人在(zai)食(shi)品(pin)(pin)(pin)沙(sha)門氏(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)檢(jian)測(ce)中引入(ru)了第一(yi)(yi)(yi)代DNA—RNA雜(za)(za)交技術,此(ci)法(fa)(fa)應(ying)(ying)用(yong)(yong)的(de)(de)(de)探針含(han)有(you)用(yong)(yong)放(fang)(fang)射(she)性同(tong)位素(su)標(biao)(biao)記的(de)(de)(de)傷寒(han)沙(sha)門氏(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)DNA片(pian)段,其敏(min)感性高,經(jing)大約(yue)48h的(de)(de)(de)增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun)步(bu)驟后,檢(jian)測(ce)極限(xian)可(ke)達108個(ge)(ge)細(xi)菌(jun)(jun)(jun)/ml,但由于(yu)(yu)要(yao)使(shi)用(yong)(yong)放(fang)(fang)射(she)性同(tong)位素(su),只能(neng)在(zai)專門的(de)(de)(de)實驗室應(ying)(ying)用(yong)(yong),此(ci)方(fang)(fang)法(fa)(fa)的(de)(de)(de)優(you)點都被抵消了。為(wei)此(ci),以核(he)(he)酸(suan)(suan)雜(za)(za)交為(wei)基(ji)礎的(de)(de)(de)第二代技術—比色(se)(se)計已發(fa)(fa)展(zhan)起來(lai)。這(zhe)種方(fang)(fang)法(fa)(fa)依賴于(yu)(yu)沙(sha)門氏(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)核(he)(he)糖體(ti)RNA(rRNA)—核(he)(he)糖體(ti)發(fa)(fa)育(yu)過(guo)程中儲存的(de)(de)(de)核(he)(he)酸(suan)(suan)成(cheng)分(fen)的(de)(de)(de)檢(jian)測(ce)。核(he)(he)糖體(ti)是(shi)細(xi)胞蛋白(bai)質合(he)成(cheng)器的(de)(de)(de)一(yi)(yi)(yi)部分(fen),每個(ge)(ge)細(xi)菌(jun)(jun)(jun)細(xi)胞中存在(zai)5000~20000個(ge)(ge)復(fu)制(zhi)體(ti),而相(xiang)(xiang)(xiang)比之下染色(se)(se)體(ti)DNA復(fu)制(zhi)體(ti)僅2~10個(ge)(ge)。這(zhe)種天然富含(han)rRNA標(biao)(biao)靶(ba)序列的(de)(de)(de)情況(kuang)使(shi)得(de)用(yong)(yong)無輻(fu)射(she)計檢(jian)測(ce)成(cheng)為(wei)可(ke)能(neng),同(tong)時又(you)保持了與(yu)放(fang)(fang)射(she)性同(tong)位素(su)方(fang)(fang)法(fa)(fa)相(xiang)(xiang)(xiang)當或更(geng)高的(de)(de)(de)敏(min)感性。其另(ling)一(yi)(yi)(yi)優(you)點是(shi)由于(yu)(yu)rRNA為(wei)單鏈(lian)(而DNA為(wei)雙鏈(lian)),雜(za)(za)交前無需(xu)經(jing)過(guo)變(bian)性步(bu)驟。要(yao)得(de)到(dao)陽(yang)性結果,此(ci)法(fa)(fa)需(xu)要(yao)105個(ge)(ge)靶(ba)細(xi)胞/ml,因此(ci)對沙(sha)門氏(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)檢(jian)測(ce)來(lai)說(shuo),需(xu)要(yao)進(jin)(jin)行(xing)預(yu)增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun)和選(xuan)擇性增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun),總共約(yue)50h。rRNA探針法(fa)(fa)比沙(sha)門氏(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)ELISA法(fa)(fa)(酶聯免(mian)疫檢(jian)測(ce)法(fa)(fa))更(geng)耗時,但二者(zhe)成(cheng)本相(xiang)(xiang)(xiang)近。食(shi)品(pin)(pin)(pin)細(xi)菌(jun)(jun)(jun)檢(jian)測(ce)法(fa)(fa)的(de)(de)(de)最(zui)新進(jin)(jin)展(zhan)是(shi)在(zai)化(hua)學(xue)擴增(zeng)(zeng)體(ti)系方(fang)(fang)面的(de)(de)(de)發(fa)(fa)展(zhan),即聚(ju)合(he)酶鏈(lian)反(fan)應(ying)(ying)(PCR),用(yong)(yong)該(gai)體(ti)系可(ke)對制(zhi)備好(hao)的(de)(de)(de)樣品(pin)(pin)(pin)進(jin)(jin)行(xing)細(xi)菌(jun)(jun)(jun)DNA擴增(zeng)(zeng),以便(bian)更(geng)易于(yu)(yu)用(yong)(yong)諸如凝膠電(dian)泳法(fa)(fa)或比色(se)(se)型(xing)ELISA法(fa)(fa)檢(jian)測(ce)。用(yong)(yong)于(yu)(yu)檢(jian)測(ce)沙(sha)門氏(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)和其它以食(shi)物(wu)為(wei)載體(ti)的(de)(de)(de)病(bing)原(yuan)的(de)(de)(de)PCR方(fang)(fang)法(fa)(fa)業已建立,其中一(yi)(yi)(yi)些方(fang)(fang)法(fa)(fa)顯(xian)示了極好(hao)的(de)(de)(de)敏(min)感性。但該(gai)法(fa)(fa)較難自動化(hua),且(qie)必需(xu)經(jing)選(xuan)擇性增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun)以稀釋(shi)可(ke)能(neng)干擾(rao)檢(jian)測(ce)反(fan)應(ying)(ying)的(de)(de)(de)某些成(cheng)分(fen)。一(yi)(yi)(yi)個(ge)(ge)完整的(de)(de)(de)以PCR為(wei)基(ji)礎的(de)(de)(de)方(fang)(fang)法(fa)(fa),需(xu)要(yao)2天才能(neng)完成(cheng),很大程度上抵銷(xiao)了其高敏(min)感性的(de)(de)(de)優(you)點,但這(zhe)種方(fang)(fang)法(fa)(fa)對那些含(han)沙(sha)門氏(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)較少或沙(sha)門氏(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)“致傷”嚴重難以復(fu)蘇而仍保有(you)沙(sha)門氏(shi)(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)rRNA的(de)(de)(de)樣品(pin)(pin)(pin)尤其有(you)效。