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肉毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)素(su)是由厭氧的肉毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)梭(suo)菌(jun)在生長繁殖過程中(zhong)(zhong)(zhong)產(chan)生的一種細菌(jun)外(wai)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)素(su),它能引起(qi)死(si)亡(wang)率極(ji)高的肉毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)中(zhong)(zhong)(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)。肉毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)梭(suo)菌(jun)及其毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)素(su)根據毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)素(su)抗原性的不(bu)同,將其分(fen)為(wei)(wei)A、B、C、D、E、F和G7個型(xing)。其中(zhong)(zhong)(zhong)A、B、E、F為(wei)(wei)人中(zhong)(zhong)(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)型(xing)別,C、D型(xing)為(wei)(wei)動(dong)物和家禽(qin)的中(zhong)(zhong)(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)型(xing)別。C型(xing)肉毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)梭(suo)菌(jun)在自然界廣泛分(fen)布(bu)。飲食污染有C型(xing)肉毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)梭(suo)菌(jun)特別是C型(xing)肉毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)素(su)的水源或草料的動(dong)物有可能發生C型(xing)肉毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)中(zhong)(zhong)(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)。動(dong)物中(zhong)(zhong)(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)后, 20小時左右甚至幾小時內(nei)即可致死(si),死(si)亡(wang)率極(ji)高,常常來不(bu)及用抗毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)素(su)進行特異性治療。
肉(rou)(rou)毒(du)中(zhong)(zhong)毒(du)發生(sheng)后,若不及時采取措施,則會引(yin)起(qi)其它食肉(rou)(rou)動物(wu)因食用中(zhong)(zhong)毒(du)動物(wu)尸體而死亡或攜帶肉(rou)(rou)毒(du)梭菌,造成(cheng)肉(rou)(rou)毒(du)梭菌在自然界(jie)中(zhong)(zhong)的(de)傳(chuan)播與潛伏,有可能引(yin)起(qi)范(fan)圍更(geng)廣(guang)、更(geng)嚴重(zhong)的(de)肉(rou)(rou)毒(du)中(zhong)(zhong)毒(du),并危害(hai)人類(lei)健(jian)康。用C型肉(rou)(rou)毒(du)類(lei)毒(du)素疫苗進行預(yu)防(fang)免疫是防(fang)止動物(wu)肉(rou)(rou)毒(du)中(zhong)(zhong)毒(du)的(de)最(zui)有效辦法之(zhi)一。
肉(rou)毒(du)毒(du)素(su)不耐熱，90℃2分(fen)鐘(zhong)可(ke)完全破(po)壞;不耐堿，溶(rong)(rong)解在pH11的堿性(xing)溶(rong)(rong)液(ye)中3分(fen)鐘(zhong)就可(ke)滅活。肉(rou)毒(du)毒(du)素(su)溶(rong)(rong)液(ye)加0.6%的福(fu)爾馬林37℃下作用一(yi)個(ge)月(yue)以上可(ke)失(shi)去毒(du)性(xing)，但(dan)仍保(bao)持抗原性(xing)和免疫(yi)原性(xing)，成為類毒(du)素(su)。本毒(du)素(su)對乙醇穩(wen)定(ding);但(dan)可(ke)被鹵(lu)素(su)滅活。粗制(zhi)毒(du)素(su)較精制(zhi)毒(du)素(su)穩(wen)定(ding)。毒(du)素(su)溶(rong)(rong)液(ye)在pH6.0，4℃下保(bao)存(cun)(cun)，效價可(ke)保(bao)持半年(nian)不變。凍干(gan)毒(du)素(su)在低溫條件下可(ke)長(chang)期保(bao)存(cun)(cun)，毒(du)性(xing)下降緩慢。
生化武(wu)器變成(cheng)美容秘方(fang)
據了解，“肉(rou)毒(du)毒(du)素”實際(ji)上是“肉(rou)毒(du)桿菌毒(du)素”的俗稱，又名“Botox”和“Myobloc”，是肉(rou)毒(du)桿菌在繁殖過(guo)程中分泌的毒(du)性蛋白質，具有很(hen)強的神(shen)經毒(du)性。
據(ju)介(jie)紹，肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素最早被(bei)用(yong)(yong)來(lai)作為生(sheng)化武器，它能(neng)(neng)破壞生(sheng)物(wu)的(de)(de)神經(jing)系統，使(shi)人出現(xian)頭暈、呼(hu)吸困難、肌肉(rou)(rou)乏力等癥狀；后來(lai)，它被(bei)醫(yi)學界(jie)用(yong)(yong)來(lai)治療面部痙攣和其(qi)他肌肉(rou)(rou)運動紊亂(luan)癥。在(zai)1986年，加拿大一位眼科教授(shou)發現(xian)肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素能(neng)(neng)讓患者眼部的(de)(de)皺紋消失(shi)，他向外界(jie)公布，引發了(le)美(mei)容(rong)史上的(de)(de)所謂“Botox革命(ming)”。此后，整(zheng)容(rong)界(jie)將它的(de)(de)功能(neng)(neng)擴大，比(bi)如(ru)用(yong)(yong)它瘦(shou)臉(lian)、塑小腿(tui)等。肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素具有很強(qiang)的(de)(de)毒(du)(du)(du)性，注射在(zai)人體是(shi)否安全(quan)？據(ju)一整(zheng)形醫(yi)院(yuan)的(de)(de)劉(liu)姓主(zhu)任醫(yi)師介(jie)紹，用(yong)(yong)于整(zheng)容(rong)的(de)(de)肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素比(bi)起生(sheng)化武器來(lai)，稀(xi)釋了(le)40萬倍(bei)。肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素能(neng)(neng)阻斷神經(jing)和肌肉(rou)(rou)之間的(de)(de)“信息傳導”，使(shi)過度收(shou)縮的(de)(de)肌肉(rou)(rou)放松(song)舒展，皺紋便隨之消失(shi)。
對于肉毒毒素在(zai)國(guo)(guo)內(nei)(nei)的使用歷(li)史，很多醫(yi)生表(biao)示具體開始(shi)的年(nian)份(fen)不太清楚，但(dan)在(zai)我國(guo)(guo)使用已有(you)10多年(nian)。資(zi)料顯(xian)示，我國(guo)(guo)是(shi)繼(ji)英國(guo)(guo)和美(mei)國(guo)(guo)之后(hou)第三個能自行生產(chan)這(zhe)種(zhong)美(mei)容用途產(chan)品(pin)的國(guo)(guo)家，并在(zai)1999年(nian)開始(shi)運用。據業內(nei)(nei)人士介紹，去年(nian)，國(guo)(guo)內(nei)(nei)部分肉毒毒素產(chan)品(pin)曾經因為(wei)提純(chun)過程出(chu)現問題而(er)影響產(chan)品(pin)質量，但(dan)是(shi)后(hou)來生產(chan)廠家很快就(jiu)改正了這(zhe)些問題。
對于其安(an)全(quan)性(xing)，不(bu)少醫生表示，肉毒毒素在美(mei)容方(fang)面的運用(yong)非(fei)常微量，不(bu)會對人體(ti)造成(cheng)影響，相對于其他(ta)除皺產品，它的作用(yong)和安(an)全(quan)性(xing)是無可(ke)替(ti)代的，是目前去除動力性(xing)皺紋最好(hao)的方(fang)法。
從1964年由(you)肉毒(du)桿(gan)菌中(zhong)分離出毒(du)素結晶至今已獲得七種（A，B，C，D，E，F和G）類(lei)型的毒(du)素，能引(yin)起人員中(zhong)毒(du)的主(zhu)要是A、B和E型毒(du)素，其中(zhong)以A型軍用意義最大，A型結晶毒(du)素是由(you)19種氨基酸組成的單一(yi)蛋(dan)白(bai)質，分子量為90～120萬(wan)，化(hua)學結構目前(qian)尚不清楚。
SDS-PAGE電(dian)泳結果(guo)顯(xian)示(shi)有分子量(liang)不同的(de)帶(dai),為構成C型肉(rou)毒(du)前(qian)體毒(du)素(su)(su)的(de)各亞基(ji)。其(qi)中分子量(liang)為100kD的(de)帶(dai)是神(shen)經(jing)(jing)毒(du)素(su)(su)的(de)重鏈,分子量(liang)為50kD的(de)帶(dai)是神(shen)經(jing)(jing)毒(du)素(su)(su)的(de)輕鏈,其(qi)它分子量(liang)不等的(de)帶(dai)為血(xue)凝(ning)(ning)素(su)(su)各亞單位和(he)非(fei)血(xue)凝(ning)(ning)素(su)(su)非(fei)毒(du)素(su)(su)成份(fen)。它們對保持C型肉(rou)毒(du)神(shen)經(jing)(jing)毒(du)素(su)(su)的(de)穩定和(he)毒(du)性作用的(de)發揮起(qi)主要作用。
肉毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素(su)通常是(shi)由神經毒(du)(du)(du)素(su)和(he)(he)血凝素(su)組(zu)成的(de)復合形式存在。A型肉毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素(su)的(de)純品是(shi)一種白色晶(jing)體粉(fen)末，易(yi)溶于(yu)水，但穩(wen)定性較(jiao)差(cha)。受熱、機械(xie)力(li)和(he)(he)氧的(de)作(zuo)用(yong)而降解。粉(fen)末狀的(de)毒(du)(du)(du)素(su)可長(chang)期貯存而不失活性，肉毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素(su)染毒(du)(du)(du)的(de)食物和(he)(he)水源(yuan)，一般其毒(du)(du)(du)性可保持數天乃(nai)至一周，肉毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素(su)不被胃腸液所破(po)壞(huai)，易(yi)經消化道中毒(du)(du)(du)。
A型(xing)肉(rou)(rou)毒(du)毒(du)素(su)的(de)(de)氣溶膠對人(ren)吸入的(de)(de)致(zhi)(zhi)(zhi)死(si)(si)量(liang)(liang)為(wei)(wei)(wei)0.3μg，LCt50為(wei)(wei)(wei)0.1～0.5mg·min/m3，靜脈注射致(zhi)(zhi)(zhi)死(si)(si)量(liang)(liang)為(wei)(wei)(wei)0.15～zaaz0.3μg，口服(fu)致(zhi)(zhi)(zhi)死(si)(si)劑量(liang)(liang)為(wei)(wei)(wei)8～10μg，該毒(du)素(su)對小鼠的(de)(de)毒(du)性(xing)LD50值約為(wei)(wei)(wei)3×10–5~3×10–4μg。野外(wai)試驗表明，由于大(da)規模施放方法尚(shang)未解決，肉(rou)(rou)毒(du)毒(du)素(su)通(tong)過呼吸道中(zhong)毒(du)的(de)(de)致(zhi)(zhi)(zhi)死(si)(si)效(xiao)應，并(bing)不比等量(liang)(liang)神(shen)經性(xing)毒(du)劑大(da)。當前以(yi)污(wu)染食(shi)物和(he)水源通(tong)過消化道染毒(du)為(wei)(wei)(wei)其主要的(de)(de)中(zhong)毒(du)途徑。另據報道，美軍利用肉(rou)(rou)毒(du)毒(du)素(su)污(wu)染小型(xing)武器的(de)(de)彈(dan)頭，以(yi)增強殺傷效(xiao)應，現已生產這種武器。平時主要是攝入被肉(rou)(rou)毒(du)毒(du)素(su)污(wu)染的(de)(de)肉(rou)(rou)類和(he)罐頭等食(shi)品(pin)而(er)中(zhong)毒(du)，死(si)(si)亡率大(da)約為(wei)(wei)(wei)25～50%。
業(ye)已闡(chan)明，在體內(nei)肉毒毒素特異性(xing)的(de)(de)(de)與膽(dan)(dan)堿(jian)能(neng)(neng)神經(jing)(jing)末梢突觸前(qian)(qian)膜的(de)(de)(de)表面受體相結合(he)，然后由于(yu)吸(xi)附性(xing)胞(bao)飲(yin)而(er)內(nei)轉進(jin)(jin)入細(xi)(xi)胞(bao)內(nei)稱為(wei)毒素的(de)(de)(de)內(nei)轉（internalization），使囊泡(pao)不能(neng)(neng)再與突觸前(qian)(qian)膜融合(he)，從而(er)有效地阻(zu)抑了膽(dan)(dan)堿(jian)能(neng)(neng)神經(jing)(jing)介質——乙酰膽(dan)(dan)堿(jian)的(de)(de)(de)釋(shi)(shi)放(fang)。與此同時，毒素與突觸前(qian)(qian)膜結合(he)，還阻(zu)塞了神經(jing)(jing)細(xi)(xi)胞(bao)膜的(de)(de)(de)鈣離(li)子通道(dao)，從而(er)干擾了細(xi)(xi)胞(bao)外鈣離(li)子進(jin)(jin)入神經(jing)(jing)細(xi)(xi)胞(bao)內(nei)以觸發胞(bao)吐和釋(shi)(shi)放(fang)乙酰膽(dan)(dan)堿(jian)的(de)(de)(de)能(neng)(neng)力。乙酰膽(dan)(dan)堿(jian)釋(shi)(shi)放(fang)的(de)(de)(de)抑制，有效地阻(zu)斷了膽(dan)(dan)堿(jian)能(neng)(neng)神經(jing)(jing)傳導的(de)(de)(de)生理功能(neng)(neng)，尤其是(shi)神經(jing)(jing)一肌(ji)肉接頭(tou)部位(wei)特別敏(min)感，引起全身隨意(yi)肌(ji)松(song)弛麻痹，呼吸(xi)肌(ji)麻痹是(shi)致死的(de)(de)(de)主(zhu)要原因。
肉毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素經消化道吸收中毒(du)(du)(du)，一般經過12～72小時的潛伏(fu)期(qi)，開始出(chu)現全身中毒(du)(du)(du)癥狀。
早(zao)期癥狀(zhuang)(zhuang)有惡(e)心(xin)、嘔吐(tu)及腹瀉等，繼(ji)之出現頭痛、頭昏、眩暈、軟弱無力，中(zhong)(zhong)毒的重(zhong)要特征為視力紊亂：復視、斜(xie)視、瞳孔散大、視力模糊，同(tong)時伴有眼(yan)球震顫，這是眼(yan)內外肌麻痹(bi)的結果。嚴重(zhong)病人有吞噬(shi)、咀嚼、語(yu)言、呼(hu)(hu)(hu)吸等困難，排痰及抬頭困難，共(gong)濟失(shi)(shi)調等，神志清楚。癥狀(zhuang)(zhuang)繼(ji)續發(fa)展則(ze)出現進行性呼(hu)(hu)(hu)吸困難，全身肌肉松弛性麻痹(bi)。繼(ji)則(ze)脈搏(bo)加快，血壓下降(jiang)，短時間抽(chou)搐，意識喪失(shi)(shi)，最終(zhong)因呼(hu)(hu)(hu)吸衰竭(jie)、心(xin)力衰竭(jie)或(huo)繼(ji)發(fa)肺炎等而死(si)亡(wang)。通過呼(hu)(hu)(hu)吸道吸入(ru)中(zhong)(zhong)毒，一般癥狀(zhuang)(zhuang)發(fa)展迅速且嚴重(zhong)。其他途徑中(zhong)(zhong)毒的臨床癥狀(zhuang)(zhuang)，因毒劑的劑量(liang)不(bu)同(tong)而異。病人恢復較(jiao)緩(huan)慢，視覺(jue)障礙恢復特慢，有時需數月之久(jiu)。
肉毒(du)(du)抗毒(du)(du)素對本病有特效，必須(xu)盡早給予(yu)，根據病情輕重(zhong)，靜肌或肌肉注射1～2萬單位，必要時(shi)可重(zhong)復注射。盡早進行(xing)催吐、洗(xi)胃(wei)、導瀉、灌(guan)腸，以排出(chu)尚未(wei)吸收(shou)的(de)毒(du)(du)劑(ji)。及時(shi)肌肉或皮下注射新斯的(de)明(ming)、乙酰膽堿(jian)、毛果云香堿(jian)及鈣制(zhi)劑(ji)等，可顯(xian)著(zhu)減(jian)輕中毒(du)(du)癥(zheng)狀(zhuang)，呼(hu)吸困難者，給氧及人工呼(hu)吸，必要時(shi)行(xing)氣管切開術。
吞咽困難者用鼻飼或靜滴(di)葡萄糖(tang)生(sheng)(sheng)理鹽水，發生(sheng)(sheng)肺炎等繼發感染時給與適宜的抗生(sheng)(sheng)素(su)。患者必須臥床(chuang)休(xiu)息、保(bao)溫、加強護理。
肉毒桿(gan)菌毒素/BOTULINUM TOXIN
這(zhe)種(zhong)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)(su)起源于(yu)肉(rou)(rou)(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)梭菌(jun)(jun)，它能(neng)引起肉(rou)(rou)(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)中毒(du)(du)(du)(du)。純粹的(de)(de)肉(rou)(rou)(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)桿菌(jun)(jun)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)(su)是(shi)已知(zhi)毒(du)(du)(du)(du)性(xing)最強的(de)(de)物質(zhi)，并(bing)且是(shi)生(sheng)化(hua)恐(kong)怖(bu)分(fen)子希望使用(yong)的(de)(de)一種(zhong)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)(su)。4克未稀釋的(de)(de)粉末--一枚五分(fen)鎳幣的(de)(de)重量--足以使1億人喪命。美國(guo)食品(pin)(pin)藥物管理(li)局2002年(nian)4月批準肉(rou)(rou)(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)桿菌(jun)(jun)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)(su)可用(yong)于(yu)化(hua)妝(zhuang)品(pin)(pin)中。用(yong)于(yu)化(hua)妝(zhuang)品(pin)(pin)的(de)(de)肉(rou)(rou)(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)桿菌(jun)(jun)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)(su)變體，比(bi)如肉(rou)(rou)(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)(su)，目的(de)(de)是(shi)使神(shen)經遞質(zhi)負責觸發(fa)肌肉(rou)(rou)(rou)(rou)收縮，有效麻痹注射的(de)(de)區域，抑制皺紋的(de)(de)出現(xian)(xian)。通常，把數量從(cong)0.5～1.0毫升不等(deng)的(de)(de)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)(su)溶液(ye)--大約一茶匙(chi)--注射到(dao)臉部(bu)的(de)(de)每一個區域。神(shen)經運動紊亂的(de)(de)人會發(fa)作(zuo)并(bing)出現(xian)(xian)呼吸困難。美發(fa)師(shi)等(deng)對這(zhe)種(zhong)用(yong)于(yu)化(hua)妝(zhuang)品(pin)(pin)的(de)(de)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)(su)變體的(de)(de)使用(yong)增加了其被致(zhi)命性(xing)誤用(yong)的(de)(de)可能(neng)性(xing)。比(bi) 肉(rou)(rou)(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)(su)更易引起肉(rou)(rou)(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)中毒(du)(du)(du)(du)的(de)(de)非法肉(rou)(rou)(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)(su)仿制品(pin)(pin)，不時地充斥市場并(bing)每年(nian)致(zhi)死30人。
1985年以來，有2,871人死于肉(rou)毒(du)桿(gan)菌毒(du)素的(de)使用。
2009年4月，國家批準(zhun)肉(rou)毒(du)毒(du)素用(yong)于美(mei)容 僅(jin)用(yong)于去除皺眉紋(wen)。
獲批準進(jin)入正規醫(yi)院整形美(mei)容科和(he)皮膚科的(de)(de)(de)肉毒毒素，僅(jin)(jin)僅(jin)(jin)適用于(yu)去除皺眉紋，而(er)且屬(shu)于(yu)特殊管理的(de)(de)(de)毒麻藥(yao)品，須(xu)經嚴(yan)格的(de)(de)(de)處方限制才(cai)能(neng)購買和(he)使用。此外，藥(yao)品監(jian)管部門還做出(chu)“只能(neng)在(zai)有處方權(quan)的(de)(de)(de)醫(yi)生監(jian)護下注(zhu)射(she)使用”，“不能(neng)在(zai)藥(yao)店或美(mei)容院銷售”等諸(zhu)多嚴(yan)格的(de)(de)(de)限制規定。
中華醫學會(hui)整形外科(ke)分會(hui)副主委(wei)祁佐良昨(zuo)天說，此(ci)前(qian)多(duo)(duo)年，肉毒毒素雖(sui)然已(yi)在中國(guo)眾多(duo)(duo)整形美容醫院中被廣泛應用于(yu)除(chu)皺、瘦臉，但一直未經(jing)國(guo)家(jia)藥監局批準(zhun)，處(chu)于(yu)尷尬的(de)“非法(fa)”狀態。
肉毒毒素(su)(su)(su)中毒的臨(lin)床診斷(duan)主要依據臨(lin)床體(ti)癥(zheng)和主述分析。實驗室檢(jian)測肉毒毒素(su)(su)(su)及(ji)定(ding)型(xing)對確診和治療具有(you)重要意義，預防中毒最(zui)(zui)重要的是加強監(jian)測。到(dao)目前為止經典的小鼠致死及(ji)中和試驗仍是最(zui)(zui)敏感、最(zui)(zui)可(ke)(ke)信的肉毒檢(jian)測方法(fa)，該(gai)方法(fa)經過不(bu)斷(duan)完善，甚至可(ke)(ke)以對很微(wei)量的毒素(su)(su)(su)作到(dao)定(ding)量檢(jian)測。但該(gai)方法(fa)比較繁瑣和耗(hao)時，不(bu)易推廣，因此人(ren)們不(bu)斷(duan)探索一些更簡便、快捷、靈敏的新方法(fa)。
免疫(yi)(yi)血(xue)清學(xue)方(fang)法(fa)的優勢是(shi)可以直接(jie)從病人(ren)的食(shi)物、糞便、嘔吐物及血(xue)清等臨床樣(yang)品中檢測(ce)(ce)出肉毒(du)(du)毒(du)(du)素(su)，用(yong)血(xue)清學(xue)方(fang)法(fa)測(ce)(ce)定肉毒(du)(du)毒(du)(du)素(su)主要有放射免疫(yi)(yi)技術(RIA)、反(fan)向(xiang)間接(jie)血(xue)凝(ning)法(fa)(RPHA)、反(fan)向(xiang)乳膠凝(ning)集實(shi)驗(yan)(RPLA)、酶聯(lian)免疫(yi)(yi)吸附實(shi)驗(yan)(ELISA)及其擴展的酶聯(lian)凝(ning)集實(shi)驗(yan)(ELCA)等。
聚合酶鏈反應(PCR)技術是近(jin)年來發展的一(yi)類快速診(zhen)斷及定型肉毒(du)毒(du)素(su)的實驗(yan)方法。其(qi)步驟主要是將檢樣(糞便、內(nei)臟、胃腸內(nei)容(rong)物(wu)、食(shi)物(wu)等(deng))的研(yan)碎物(wu)或離心沉渣接種(zhong)于厭(yan)氧庖肉培養基(ji)進(jin)行增菌及產毒(du)培養。然(ran)后將菌體裂解，提取DNA模板以(yi)作PCR試驗(yan)，通過電泳圖譜判斷是否(fou)存在肉毒(du)梭菌。
類(lei)毒素疫(yi)苗：傳統(tong)BoNT類(lei)毒素疫(yi)苗因存在一(yi)定的(de)副作用，臨床使(shi)用受到了限制。利(li)用分(fen)子生物學方(fang)法脫毒構建的(de)全長BoNT突(tu)變體(ti)疫(yi)苗，可以(yi)有效地刺(ci)激(ji)機體(ti)產生高(gao)效免疫(yi)保護抗體(ti)，作為新一(yi)代(dai)類(lei)疫(yi)苗具有良好的(de)開(kai)發(fa)潛力。
Hc亞單(dan)位(wei)疫苗：最(zui)理(li)想的(de)亞單(dan)位(wei)疫苗應(ying)該是無毒的(de)最(zui)小蛋白片段，并且能顯著引起(qi)機體保護性免疫應(ying)答。
短(duan)肽(tai)疫(yi)(yi)苗(miao)：隨著噬菌體展(zhan)(zhan)示肽(tai)庫、重疊肽(tai)合成(cheng)、計算機模擬預測(ce)表(biao)位(wei)等技術的(de)發(fa)展(zhan)(zhan)，識別鑒(jian)定特異(yi)性短(duan)肽(tai)片(pian)段作為候選疫(yi)(yi)苗(miao)可(ke)以被快(kuai)速(su)準確(que)地完(wan)成(cheng)。通(tong)過比較(jiao)不同的(de)研究(jiu)報道發(fa)現，某些(xie)肽(tai)段表(biao)位(wei)可(ke)以在(zai)不同型的(de)毒素間引起(qi)交(jiao)叉反應，據此構(gou)建(jian)的(de)多肽(tai)疫(yi)(yi)苗(miao)可(ke) 刺(ci)激獲得較(jiao)好的(de)免疫(yi)(yi)效果(guo)，但仍然需要對(dui)這(zhe)些(xie)表(biao)位(wei)進(jin)行(xing)驗證。
DNA疫(yi)(yi)苗：通常用 BoNT重組DNA免疫(yi)(yi)動物后表達(da)蛋(dan)白(bai)，進而刺激免疫(yi)(yi)系統產生抗體或(huo)T細胞(bao)介導的免疫(yi)(yi)應(ying)答。
去皺紋
1) 技術原理
口輪匝肌(ji)與皮膚(fu)緊密(mi)連(lian)接，收縮時直接牽動(dong)皮膚(fu)，和動(dong)力(li)性(xing)皺(zhou)紋的(de)(de)(de)形成有關。而肉(rou)毒(du)毒(du)素是一(yi)種生(sheng)物毒(du)素類肌(ji)肉(rou)松弛(chi)劑，它通過抑制(zhi)乙酰膽(dan)堿的(de)(de)(de)釋放(fang)，阻斷神經肌(ji)肉(rou)傳導，導致(zhi)肌(ji)肉(rou)松弛(chi)性(xing)麻痹，從而抑制(zhi)肌(ji)肉(rou)的(de)(de)(de)收縮，以達到(dao)去除(chu)皺(zhou)紋的(de)(de)(de)目的(de)(de)(de)。
2) 適應人(ren)群和禁忌(ji)人(ren)群
① 適應人群：適用(yong)于(yu)口(kou)周肌(ji)肉(rou)收縮過多導致(zhi)的動力(li)性皺紋，要求使用(yong)肉(rou)毒毒素者。
② 禁忌人群
a. 重癥肌(ji)(ji)無力、多發性硬(ying)化癥、先(xian)天性上瞼(jian)下垂等神經肌(ji)(ji)肉(rou)病變(bian)。
b. 對肉毒毒素制品中任何成(cheng)分(fen)或人血白(bai)蛋白(bai)過敏(min)者或過敏(min)體(ti)質者。
c. 有(you)心、肝、肺(fei)、腎等臟器疾病，體質(zhi)非常瘦弱者、活(huo)動性(xing)肺(fei)結(jie)核(he)、血液(ye)病、結(jie)締組織病、妊娠(shen)婦女和(he)兒童應慎用(yong)。
d. 2周內有(you)使用與(yu)肉毒毒素(su)(su)(su)相互(hu)作用的藥物(wu)，如(ru)氨基糖苷類抗(kang)生素(su)(su)(su)及青霉(mei)胺、奎寧、環孢素(su)(su)(su)、嗎(ma)啡、鈣離子傳導阻(zu)滯劑等，因這些(xie)藥物(wu)可增加肉毒毒素(su)(su)(su)的毒性。
3) 技術方法
① 注射(she)部位(wei)皮(pi)膚消毒(du)。
② 設計和(he)標記注(zhu)射點。
③ 將藥(yao)物注射到標記(ji)部位。
4) 風(feng)險和(he)并發癥
① 口周局部(bu)腫脹、瘀斑。
② 注射部位麻(ma)木、頭痛、緊繃感、鄰近部位皺紋加深。
③ 閉(bi)唇、進(jin)食(shi)、刷牙困難等顯著(zhu)副反應。
④ 笑容不對(dui)稱或(huo)言語障礙(B、P等輔音(yin)發音(yin)困難)、唇部感受減弱等。
⑤ 上(shang)唇內(nei)翻、外翻或暫時性下垂：是(shi)由(you)于注射點距離口輪匝肌過高導致。
5) 療(liao)程和恢復時間(jian)
肉毒毒素注(zhu)射效(xiao)果維持時間一般為(wei)3-6個(ge)月(yue)，皺紋復(fu)發(fa)后可再次(ci)注(zhu)射，間隔(ge)時間在6個(ge)月(yue)左(zuo)右為(wei)宜。但不宜短(duan)期(qi)內反復(fu)注(zhu)射。
進(jin)行完注射后(hou)，馬(ma)上就可以進(jin)行正常的(de)工作和學習，只要遵守醫生要求的(de)注意事項，術后(hou)不需要恢復期。
6) 注意事項
① 術前注(zhu)意(yi)事項
a. 治療前兩(liang)周內不要服用可能會(hui)改變凝(ning)血狀(zhuang)態的藥(yao)物，如阿司匹林、抗凝(ning)藥(yao)、維(wei)生素E和β受體阻滯劑等(deng);
b. 治(zhi)療(liao)前卸(xie)掉彩妝，清潔面部;
c. 任何有活動性感(gan)染的部位(wei)需治療感(gan)染后(hou)才能注射。
② 術后注意(yi)事項
a. 術(shu)后嚴格遵守醫(yi)囑(zhu);
b. 注(zhu)射后2-3小時(shi)內不要按摩(mo)治療部位;
c. 注射后3-4小(xiao)時最好保持頭部直立;
d. 在注射后2-3小時內應該(gai)不斷(duan)收縮(suo)注射的(de)肌肉，因為毒素選(xuan)擇(ze)性地與運動的(de)肌肉結合;
e. 若不良反應持續(xu)一周以上需盡快聯系醫(yi)生。
肉毒(du)毒(du)素(su)小劑量局部注釋(shi)能(neng)夠(gou)有效地抑(yi)制(zhi)胞吐，又不(bu)引起強烈免疫(yi)反(fan)(fan)應(ying)(ying)等主要副(fu)作(zuo)用(yong)，故其在多種人類疾病治療(liao)中的應(ying)(ying)用(yong)得到快(kuai)速發展。毒(du)素(su)注射(she)可(ke)以(yi)(yi)反(fan)(fan)復(fu)多次(ci)，如果抗體產生，可(ke)以(yi)(yi)換用(yong)別(bie)的血(xue)清(qing)型(xing)(xing)毒(du)素(su)繼續(xu)此治療(liao)。現(xian)(xian)在主要應(ying)(ying)用(yong)的是BontA，已經投入商業化(hua)生產，別(bie)的血(xue)清(qing)型(xing)(xing)毒(du)素(su)正在實驗(yan)中，比(bi)較(jiao)有前景的候選毒(du)素(su)是C型(xing)(xing)毒(du)素(su)。BontA的作(zuo)用(yong)可(ke)以(yi)(yi)被鈣(gai)離子濃度升高逆轉(zhuan)(zhuan)，其余血(xue)清(qing)型(xing)(xing)毒(du)素(su)由于其作(zuo)用(yong)不(bu)能(neng)被逆轉(zhuan)(zhuan)，應(ying)(ying)該(gai)在治療(liao)中更加有效，但(dan)事實發現(xian)(xian)，它們的有效持續(xu)時間(jian)都較(jiao)短。
肉毒(du)毒(du)素在疾病治療中的應用主要包括(kuo)三方面：
肌肉過度收縮(suo)等(deng)神經(jing)肌肉紊亂癥狀，例如肌纖維肌顫(zhan)搐、磨牙癥、肛(gang)裂、肛(gang)門痙攣(luan)、陰(yin)道(dao)痙攣(luan)、遲緩不(bu)能、食道(dao)痙攣(luan)等(deng)，以及(ji)整形、神經(jing)外科手術后的(de)肌肉松弛階段；
腺體分泌過多癥狀，例如多汗癥、鼻(bi)炎(yan)、流涎癥、鱷魚淚綜(zong)合(he)征等；
疼痛(tong)(tong)癥狀，例如(ru)緊張(zhang)性(xing)頭痛(tong)(tong)、偏(pian)頭痛(tong)(tong)、頸源(yuan)性(xing)頭痛(tong)(tong)、肌筋膜疼痛(tong)(tong)、慢性(xing)腰(yao)背痛(tong)(tong)、“網球肘”等。
