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肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)素是由厭氧的肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)梭菌(jun)(jun)在(zai)生(sheng)長繁殖過(guo)程(cheng)中(zhong)(zhong)產生(sheng)的一種細(xi)菌(jun)(jun)外毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)素,它(ta)能引起死(si)亡(wang)率極高(gao)的肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)中(zhong)(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)。肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)梭菌(jun)(jun)及其(qi)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)素根據毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)素抗(kang)原性的不同,將其(qi)分為(wei)A、B、C、D、E、F和(he)G7個(ge)型(xing)。其(qi)中(zhong)(zhong)A、B、E、F為(wei)人中(zhong)(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)型(xing)別(bie),C、D型(xing)為(wei)動(dong)物(wu)和(he)家禽的中(zhong)(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)型(xing)別(bie)。C型(xing)肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)梭菌(jun)(jun)在(zai)自(zi)然(ran)界廣泛分布。飲食污(wu)染有C型(xing)肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)梭菌(jun)(jun)特(te)別(bie)是C型(xing)肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)素的水(shui)源或草料的動(dong)物(wu)有可能發生(sheng)C型(xing)肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)中(zhong)(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)。動(dong)物(wu)中(zhong)(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)后, 20小時左右甚至幾小時內即可致死(si),死(si)亡(wang)率極高(gao),常常來不及用抗(kang)毒(du)(du)(du)(du)(du)(du)素進行特(te)異性治療。
肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)中(zhong)毒(du)(du)(du)發生后,若不及(ji)時采取措(cuo)施,則會引起(qi)其它食(shi)肉(rou)(rou)動(dong)物(wu)因食(shi)用中(zhong)毒(du)(du)(du)動(dong)物(wu)尸體而死亡或攜(xie)帶肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)梭菌,造成(cheng)肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)梭菌在自然界中(zhong)的傳播與潛(qian)伏(fu),有(you)可能(neng)引起(qi)范(fan)圍(wei)更(geng)(geng)廣、更(geng)(geng)嚴重的肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)中(zhong)毒(du)(du)(du),并危害(hai)人類(lei)健康。用C型肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)類(lei)毒(du)(du)(du)素(su)疫(yi)苗(miao)進行預(yu)防(fang)免(mian)疫(yi)是(shi)防(fang)止動(dong)物(wu)肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)中(zhong)毒(du)(du)(du)的最有(you)效辦(ban)法(fa)之一。
肉毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素(su)不耐(nai)熱，90℃2分鐘(zhong)可(ke)(ke)完全破壞(huai);不耐(nai)堿，溶解在pH11的堿性(xing)溶液中3分鐘(zhong)就可(ke)(ke)滅(mie)活。肉毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素(su)溶液加(jia)0.6%的福爾馬林(lin)37℃下(xia)作用一(yi)個(ge)月以(yi)上可(ke)(ke)失(shi)去(qu)毒(du)(du)(du)性(xing)，但仍保持抗原性(xing)和(he)免疫原性(xing)，成為類毒(du)(du)(du)素(su)。本毒(du)(du)(du)素(su)對(dui)乙醇穩(wen)定;但可(ke)(ke)被鹵素(su)滅(mie)活。粗(cu)制毒(du)(du)(du)素(su)較精制毒(du)(du)(du)素(su)穩(wen)定。毒(du)(du)(du)素(su)溶液在pH6.0，4℃下(xia)保存(cun)，效(xiao)價可(ke)(ke)保持半年不變。凍干毒(du)(du)(du)素(su)在低溫(wen)條(tiao)件下(xia)可(ke)(ke)長期保存(cun)，毒(du)(du)(du)性(xing)下(xia)降緩慢。
生化武器變成美容秘方
據了解，“肉(rou)(rou)毒毒素(su)”實際(ji)上是“肉(rou)(rou)毒桿菌毒素(su)”的(de)(de)俗稱，又名(ming)“Botox”和“Myobloc”，是肉(rou)(rou)毒桿菌在繁殖過程中(zhong)分泌的(de)(de)毒性蛋白質，具有(you)很(hen)強的(de)(de)神(shen)經(jing)毒性。
據介(jie)紹(shao)，肉(rou)毒(du)(du)毒(du)(du)素(su)(su)最早(zao)被(bei)用來(lai)作為生(sheng)(sheng)化(hua)武器，它能(neng)破壞生(sheng)(sheng)物的(de)(de)神經系統，使人出現(xian)頭暈、呼吸(xi)困難、肌肉(rou)乏力等癥狀；后(hou)來(lai)，它被(bei)醫(yi)(yi)學(xue)界用來(lai)治療面部(bu)痙攣和其(qi)他肌肉(rou)運(yun)動紊亂癥。在(zai)1986年(nian)，加拿大一位眼(yan)科教授發現(xian)肉(rou)毒(du)(du)毒(du)(du)素(su)(su)能(neng)讓患者眼(yan)部(bu)的(de)(de)皺(zhou)紋消失(shi)，他向外界公布，引發了美容(rong)史上的(de)(de)所謂(wei)“Botox革命”。此后(hou)，整(zheng)容(rong)界將它的(de)(de)功能(neng)擴大，比(bi)如用它瘦臉、塑小腿等。肉(rou)毒(du)(du)毒(du)(du)素(su)(su)具有很(hen)強的(de)(de)毒(du)(du)性，注射在(zai)人體是否安(an)全？據一整(zheng)形(xing)醫(yi)(yi)院的(de)(de)劉(liu)姓主任(ren)醫(yi)(yi)師介(jie)紹(shao)，用于整(zheng)容(rong)的(de)(de)肉(rou)毒(du)(du)毒(du)(du)素(su)(su)比(bi)起(qi)生(sheng)(sheng)化(hua)武器來(lai)，稀釋了40萬倍。肉(rou)毒(du)(du)毒(du)(du)素(su)(su)能(neng)阻斷神經和肌肉(rou)之間的(de)(de)“信(xin)息傳導”，使過度收(shou)縮的(de)(de)肌肉(rou)放松舒展，皺(zhou)紋便隨之消失(shi)。
對(dui)于肉毒毒素在(zai)國(guo)(guo)內(nei)的使用歷史，很(hen)多醫生表(biao)示具體開始的年份不太清(qing)楚(chu)，但(dan)在(zai)我國(guo)(guo)使用已(yi)有10多年。資料顯(xian)示，我國(guo)(guo)是(shi)繼英(ying)國(guo)(guo)和美國(guo)(guo)之后第三(san)個(ge)能自行(xing)生產(chan)(chan)這種美容用途產(chan)(chan)品(pin)的國(guo)(guo)家(jia)，并(bing)在(zai)1999年開始運用。據業內(nei)人士介(jie)紹，去(qu)年，國(guo)(guo)內(nei)部分肉毒毒素產(chan)(chan)品(pin)曾(ceng)經(jing)因為提純過程(cheng)出現問題(ti)而影響(xiang)產(chan)(chan)品(pin)質量，但(dan)是(shi)后來生產(chan)(chan)廠家(jia)很(hen)快(kuai)就改正了這些問題(ti)。
對于(yu)其安全(quan)(quan)性，不少醫生表示，肉(rou)毒毒素(su)在(zai)美容方面的(de)運用非常微量，不會對人(ren)體造成影響，相對于(yu)其他(ta)除皺(zhou)產品，它(ta)的(de)作用和安全(quan)(quan)性是(shi)(shi)無可替代(dai)的(de)，是(shi)(shi)目前(qian)去除動力性皺(zhou)紋最好的(de)方法(fa)。
從1964年由(you)肉毒(du)(du)桿菌中分離出毒(du)(du)素(su)結晶(jing)至今已獲(huo)得(de)七種(zhong)（A，B，C，D，E，F和G）類型的毒(du)(du)素(su)，能(neng)引起人員中毒(du)(du)的主(zhu)要(yao)是A、B和E型毒(du)(du)素(su)，其中以A型軍用意義最大，A型結晶(jing)毒(du)(du)素(su)是由(you)19種(zhong)氨(an)基酸組成的單一蛋白(bai)質，分子量為90～120萬，化學(xue)結構目前尚不清(qing)楚。
SDS-PAGE電(dian)泳結果顯示有分(fen)(fen)子(zi)量(liang)不同的(de)帶(dai),為構成C型肉毒(du)(du)前體(ti)毒(du)(du)素(su)(su)(su)的(de)各亞(ya)基(ji)。其中分(fen)(fen)子(zi)量(liang)為100kD的(de)帶(dai)是神(shen)經(jing)毒(du)(du)素(su)(su)(su)的(de)重鏈,分(fen)(fen)子(zi)量(liang)為50kD的(de)帶(dai)是神(shen)經(jing)毒(du)(du)素(su)(su)(su)的(de)輕鏈,其它分(fen)(fen)子(zi)量(liang)不等的(de)帶(dai)為血凝素(su)(su)(su)各亞(ya)單位和非血凝素(su)(su)(su)非毒(du)(du)素(su)(su)(su)成份(fen)。它們對(dui)保持C型肉毒(du)(du)神(shen)經(jing)毒(du)(du)素(su)(su)(su)的(de)穩定和毒(du)(du)性作用的(de)發揮(hui)起主要作用。
肉(rou)(rou)毒(du)毒(du)素(su)通常(chang)是(shi)由神經(jing)毒(du)素(su)和血凝素(su)組成的(de)復合形式(shi)存(cun)在。A型肉(rou)(rou)毒(du)毒(du)素(su)的(de)純品(pin)是(shi)一種白色晶體粉(fen)(fen)末，易溶于水(shui)，但穩定性較差。受熱、機械力和氧的(de)作用而降解(jie)。粉(fen)(fen)末狀的(de)毒(du)素(su)可(ke)長期貯存(cun)而不失活性，肉(rou)(rou)毒(du)毒(du)素(su)染毒(du)的(de)食物和水(shui)源，一般其(qi)毒(du)性可(ke)保持數天乃至一周，肉(rou)(rou)毒(du)毒(du)素(su)不被胃腸液(ye)所破壞，易經(jing)消(xiao)化道中毒(du)。
A型(xing)肉毒(du)(du)毒(du)(du)素(su)的(de)(de)(de)氣溶膠對人(ren)吸入的(de)(de)(de)致(zhi)(zhi)死(si)(si)量為(wei)(wei)0.3μg，LCt50為(wei)(wei)0.1～0.5mg·min/m3，靜脈(mo)注射致(zhi)(zhi)死(si)(si)量為(wei)(wei)0.15～zaaz0.3μg，口服致(zhi)(zhi)死(si)(si)劑量為(wei)(wei)8～10μg，該毒(du)(du)素(su)對小鼠的(de)(de)(de)毒(du)(du)性(xing)LD50值(zhi)約為(wei)(wei)3×10–5~3×10–4μg。野外(wai)試驗(yan)表明(ming)，由于大(da)規模施放方法尚未解(jie)決(jue)，肉毒(du)(du)毒(du)(du)素(su)通(tong)過(guo)呼吸道(dao)中毒(du)(du)的(de)(de)(de)致(zhi)(zhi)死(si)(si)效(xiao)應，并(bing)不比等量神經性(xing)毒(du)(du)劑大(da)。當前以污(wu)染食物(wu)和水源通(tong)過(guo)消化道(dao)染毒(du)(du)為(wei)(wei)其主要(yao)的(de)(de)(de)中毒(du)(du)途徑。另據報道(dao)，美軍利用肉毒(du)(du)毒(du)(du)素(su)污(wu)染小型(xing)武器的(de)(de)(de)彈頭，以增強殺(sha)傷效(xiao)應，現已生產這種(zhong)武器。平時主要(yao)是攝入被肉毒(du)(du)毒(du)(du)素(su)污(wu)染的(de)(de)(de)肉類(lei)和罐頭等食品而中毒(du)(du)，死(si)(si)亡率大(da)約為(wei)(wei)25～50%。
業已闡(chan)明，在體(ti)內(nei)肉毒毒素(su)特異性的(de)與(yu)膽(dan)(dan)(dan)堿能神(shen)經(jing)(jing)末梢突(tu)觸(chu)前膜的(de)表(biao)面(mian)受體(ti)相結(jie)合，然后由(you)于(yu)吸(xi)附性胞(bao)(bao)(bao)(bao)飲而(er)內(nei)轉進入細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)內(nei)稱為(wei)毒素(su)的(de)內(nei)轉（internalization），使(shi)囊泡不(bu)能再與(yu)突(tu)觸(chu)前膜融合，從(cong)而(er)有(you)(you)效地阻(zu)抑了(le)(le)膽(dan)(dan)(dan)堿能神(shen)經(jing)(jing)介質——乙酰(xian)膽(dan)(dan)(dan)堿的(de)釋放(fang)。與(yu)此同時，毒素(su)與(yu)突(tu)觸(chu)前膜結(jie)合，還(huan)阻(zu)塞(sai)了(le)(le)神(shen)經(jing)(jing)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)膜的(de)鈣(gai)離子(zi)通道，從(cong)而(er)干擾了(le)(le)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)外鈣(gai)離子(zi)進入神(shen)經(jing)(jing)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)內(nei)以觸(chu)發胞(bao)(bao)(bao)(bao)吐和釋放(fang)乙酰(xian)膽(dan)(dan)(dan)堿的(de)能力。乙酰(xian)膽(dan)(dan)(dan)堿釋放(fang)的(de)抑制，有(you)(you)效地阻(zu)斷(duan)了(le)(le)膽(dan)(dan)(dan)堿能神(shen)經(jing)(jing)傳(chuan)導(dao)的(de)生理功能，尤(you)其(qi)是神(shen)經(jing)(jing)一(yi)肌(ji)肉接頭(tou)部位特別(bie)敏感，引(yin)起(qi)全身隨意肌(ji)松弛麻痹，呼(hu)吸(xi)肌(ji)麻痹是致死的(de)主要原因。
肉(rou)毒(du)(du)毒(du)(du)素(su)經(jing)消化(hua)道吸收中毒(du)(du)，一(yi)般(ban)經(jing)過12～72小時的潛(qian)伏期(qi)，開始出(chu)現(xian)全身(shen)中毒(du)(du)癥狀。
早期(qi)癥(zheng)狀有(you)(you)(you)惡(e)心(xin)、嘔吐及腹瀉等(deng)，繼(ji)之出現頭(tou)痛、頭(tou)昏、眩暈(yun)、軟弱無力(li)，中毒(du)(du)的(de)重要特征為視(shi)(shi)力(li)紊亂(luan)：復(fu)(fu)視(shi)(shi)、斜視(shi)(shi)、瞳孔散大、視(shi)(shi)力(li)模(mo)糊，同時伴有(you)(you)(you)眼球(qiu)震顫(zhan)，這是(shi)眼內外肌麻(ma)痹(bi)的(de)結果。嚴重病人有(you)(you)(you)吞噬(shi)、咀嚼、語言、呼(hu)吸等(deng)困難(nan)，排痰及抬頭(tou)困難(nan)，共濟失調等(deng)，神志清楚(chu)。癥(zheng)狀繼(ji)續發(fa)(fa)展(zhan)(zhan)則(ze)(ze)出現進行性呼(hu)吸困難(nan)，全身肌肉松弛性麻(ma)痹(bi)。繼(ji)則(ze)(ze)脈搏加快，血壓下降(jiang)，短(duan)時間抽(chou)搐，意(yi)識喪失，最(zui)終因(yin)呼(hu)吸衰竭、心(xin)力(li)衰竭或繼(ji)發(fa)(fa)肺炎等(deng)而(er)死亡(wang)。通(tong)過呼(hu)吸道吸入(ru)中毒(du)(du)，一般癥(zheng)狀發(fa)(fa)展(zhan)(zhan)迅速(su)且嚴重。其他途徑中毒(du)(du)的(de)臨(lin)床(chuang)癥(zheng)狀，因(yin)毒(du)(du)劑的(de)劑量(liang)不(bu)同而(er)異。病人恢復(fu)(fu)較(jiao)緩慢，視(shi)(shi)覺障礙(ai)恢復(fu)(fu)特慢，有(you)(you)(you)時需(xu)數月之久。
肉(rou)毒(du)抗毒(du)素對(dui)本病(bing)有特效，必(bi)須盡(jin)早給予，根據病(bing)情輕重，靜肌(ji)或(huo)(huo)肌(ji)肉(rou)注射(she)(she)(she)1～2萬單(dan)位，必(bi)要(yao)時(shi)可重復注射(she)(she)(she)。盡(jin)早進行催(cui)吐、洗胃、導瀉、灌腸，以排出尚未(wei)吸收的毒(du)劑。及時(shi)肌(ji)肉(rou)或(huo)(huo)皮(pi)下注射(she)(she)(she)新(xin)斯的明、乙酰膽堿、毛果云香堿及鈣制劑等(deng)，可顯著(zhu)減(jian)輕中毒(du)癥狀，呼(hu)(hu)吸困難者(zhe)，給氧(yang)及人工呼(hu)(hu)吸，必(bi)要(yao)時(shi)行氣管切開術。
吞咽困難者用鼻(bi)飼(si)或靜滴葡萄(tao)糖生理鹽水(shui)，發生肺炎等(deng)繼發感(gan)染時給與適宜的抗(kang)生素。患者必須(xu)臥(wo)床休息(xi)、保溫、加強護(hu)理。
肉毒桿(gan)菌毒素/BOTULINUM TOXIN
這(zhe)種(zhong)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)(su)(su)起源于肉(rou)毒(du)(du)(du)(du)梭菌(jun)，它(ta)能(neng)引(yin)起肉(rou)毒(du)(du)(du)(du)中(zhong)毒(du)(du)(du)(du)。純粹的(de)(de)肉(rou)毒(du)(du)(du)(du)桿(gan)菌(jun)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)(su)(su)是已知毒(du)(du)(du)(du)性最(zui)強的(de)(de)物質，并且是生化(hua)(hua)恐(kong)怖(bu)分子希望使(shi)用(yong)的(de)(de)一(yi)(yi)(yi)種(zhong)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)(su)(su)。4克未稀釋(shi)的(de)(de)粉末--一(yi)(yi)(yi)枚五分鎳幣的(de)(de)重量--足以(yi)使(shi)1億人喪(sang)命。美(mei)國食品藥物管理局2002年4月批(pi)準肉(rou)毒(du)(du)(du)(du)桿(gan)菌(jun)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)(su)(su)可用(yong)于化(hua)(hua)妝品中(zhong)。用(yong)于化(hua)(hua)妝品的(de)(de)肉(rou)毒(du)(du)(du)(du)桿(gan)菌(jun)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)(su)(su)變體，比(bi)如肉(rou)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)(su)(su)，目的(de)(de)是使(shi)神經遞質負責觸發肌(ji)肉(rou)收縮，有效麻痹注射的(de)(de)區域，抑制(zhi)皺紋的(de)(de)出(chu)(chu)現。通常(chang)，把(ba)數(shu)量從(cong)0.5～1.0毫升不等的(de)(de)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)(su)(su)溶(rong)液(ye)--大約一(yi)(yi)(yi)茶(cha)匙--注射到臉(lian)部的(de)(de)每一(yi)(yi)(yi)個區域。神經運動紊(wen)亂的(de)(de)人會發作并出(chu)(chu)現呼吸困難。美(mei)發師等對這(zhe)種(zhong)用(yong)于化(hua)(hua)妝品的(de)(de)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)(su)(su)變體的(de)(de)使(shi)用(yong)增(zeng)加了其被致命性誤用(yong)的(de)(de)可能(neng)性。比(bi) 肉(rou)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)(su)(su)更易(yi)引(yin)起肉(rou)毒(du)(du)(du)(du)中(zhong)毒(du)(du)(du)(du)的(de)(de)非法肉(rou)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)(su)(su)仿制(zhi)品，不時(shi)地充斥市場(chang)并每年致死30人。
1985年以(yi)來，有2,871人死于肉毒桿菌(jun)毒素的(de)使(shi)用。
2009年4月，國家(jia)批準肉毒毒素用于美容 僅用于去除皺(zhou)眉紋。
獲(huo)批準進入正規醫院(yuan)整形(xing)美容科和皮膚科的肉毒毒素(su)，僅僅適(shi)用于去除(chu)皺眉紋，而(er)且屬于特(te)殊管理的毒麻(ma)藥品(pin)，須經嚴格(ge)的處(chu)方限制才能(neng)(neng)購買(mai)和使(shi)用。此外(wai)，藥品(pin)監管部(bu)門還做出“只(zhi)能(neng)(neng)在(zai)有處(chu)方權的醫生(sheng)監護下注射使(shi)用”，“不能(neng)(neng)在(zai)藥店或(huo)美容院(yuan)銷售”等諸多嚴格(ge)的限制規定(ding)。
中(zhong)華醫學會整形外科分會副(fu)主委祁佐良昨天說，此(ci)前多年，肉毒毒素雖(sui)然已在(zai)中(zhong)國眾多整形美容醫院中(zhong)被廣泛應用于(yu)除皺、瘦臉，但一直未經國家藥監(jian)局批準，處于(yu)尷(gan)尬的“非法”狀態。
肉毒(du)毒(du)素(su)(su)中(zhong)毒(du)的(de)臨(lin)床診斷主要依據臨(lin)床體癥(zheng)和(he)(he)(he)主述分析(xi)。實驗(yan)室(shi)檢測肉毒(du)毒(du)素(su)(su)及(ji)定(ding)型對確(que)診和(he)(he)(he)治(zhi)療具有(you)重要意(yi)義(yi)，預防中(zhong)毒(du)最重要的(de)是加強監測。到目前(qian)為止經(jing)典的(de)小(xiao)鼠致死及(ji)中(zhong)和(he)(he)(he)試(shi)驗(yan)仍是最敏(min)感、最可(ke)信的(de)肉毒(du)檢測方法，該方法經(jing)過不(bu)斷完善(shan)，甚至可(ke)以對很微量的(de)毒(du)素(su)(su)作到定(ding)量檢測。但(dan)該方法比較(jiao)繁瑣和(he)(he)(he)耗時，不(bu)易推廣，因此人們不(bu)斷探索一些更簡便、快捷、靈(ling)敏(min)的(de)新方法。
免疫血清(qing)學方法的優勢是可以(yi)直接(jie)從病人(ren)的食物、糞便、嘔吐物及(ji)血清(qing)等臨床(chuang)樣(yang)品中檢(jian)測出肉毒(du)毒(du)素，用血清(qing)學方法測定肉毒(du)毒(du)素主(zhu)要有放射免疫技術(RIA)、反(fan)向(xiang)間接(jie)血凝法(RPHA)、反(fan)向(xiang)乳膠凝集(ji)(ji)實驗(RPLA)、酶聯(lian)免疫吸附(fu)實驗(ELISA)及(ji)其擴展的酶聯(lian)凝集(ji)(ji)實驗(ELCA)等。
聚合(he)酶鏈(lian)反應(PCR)技術(shu)是近年來發(fa)展的(de)一類快速診斷及(ji)定型(xing)肉毒(du)(du)毒(du)(du)素的(de)實驗方(fang)法。其步驟主要是將(jiang)檢樣(糞便、內臟、胃腸內容物(wu)、食物(wu)等(deng))的(de)研碎物(wu)或離心沉渣接種于(yu)厭(yan)氧庖肉培養基進行增菌及(ji)產(chan)毒(du)(du)培養。然后將(jiang)菌體裂解，提取DNA模板以作PCR試驗，通過電泳(yong)圖譜判斷是否存在肉毒(du)(du)梭菌。
類毒素疫(yi)苗(miao)：傳統BoNT類毒素疫(yi)苗(miao)因存在一(yi)定的(de)副作用，臨(lin)床使用受到了限制(zhi)。利用分子(zi)生物學(xue)方法脫毒構建的(de)全長BoNT突變體(ti)疫(yi)苗(miao)，可(ke)以(yi)有效地刺激機體(ti)產生高(gao)效免疫(yi)保護抗體(ti)，作為新一(yi)代類疫(yi)苗(miao)具有良好的(de)開發(fa)潛力。
Hc亞單位疫(yi)苗：最理想的亞單位疫(yi)苗應(ying)該是無(wu)毒的最小蛋白片段，并且能(neng)顯(xian)著引(yin)起機體(ti)保護性(xing)免疫(yi)應(ying)答。
短肽(tai)疫(yi)苗：隨著(zhu)噬菌體展示肽(tai)庫、重疊(die)肽(tai)合成、計算機(ji)模(mo)擬預測(ce)表位(wei)等(deng)技(ji)術的發展，識(shi)別鑒定(ding)特異性短肽(tai)片段作為候選疫(yi)苗可以被快速準確(que)地完成。通過(guo)比較不同(tong)的研究報道發現(xian)，某(mou)些(xie)肽(tai)段表位(wei)可以在不同(tong)型的毒素間(jian)引起交叉(cha)反應(ying)，據此構(gou)建(jian)的多肽(tai)疫(yi)苗可 刺激獲(huo)得較好的免疫(yi)效(xiao)果，但仍然(ran)需要對(dui)這(zhe)些(xie)表位(wei)進行(xing)驗(yan)證。
DNA疫苗：通常(chang)用(yong) BoNT重組DNA免(mian)疫動物(wu)后表達蛋白，進(jin)而刺激免(mian)疫系統產生抗(kang)體或T細胞介導(dao)的(de)免(mian)疫應答。
去皺紋
1) 技術原理
口輪(lun)匝肌(ji)與(yu)皮膚緊密(mi)連接，收縮時直接牽動皮膚，和動力性皺紋的(de)(de)形成有關。而(er)肉(rou)(rou)毒毒素是一(yi)種生物(wu)毒素類肌(ji)肉(rou)(rou)松弛(chi)劑，它通過抑(yi)制乙酰(xian)膽堿(jian)的(de)(de)釋放，阻斷神經肌(ji)肉(rou)(rou)傳導(dao)，導(dao)致肌(ji)肉(rou)(rou)松弛(chi)性麻痹，從而(er)抑(yi)制肌(ji)肉(rou)(rou)的(de)(de)收縮，以(yi)達到去除皺紋的(de)(de)目(mu)的(de)(de)。
2) 適應人(ren)群和禁(jin)忌人(ren)群
① 適(shi)應人群(qun)：適(shi)用于口周(zhou)肌肉收(shou)縮過(guo)多導致的動力(li)性皺紋，要求(qiu)使(shi)用肉毒毒素者。
② 禁忌人群
a. 重(zhong)癥肌無力、多發性(xing)硬化癥、先天性(xing)上瞼下垂等神經(jing)肌肉病變。
b. 對肉毒毒素制品中任(ren)何成分(fen)或(huo)人血白(bai)蛋白(bai)過敏(min)(min)者(zhe)或(huo)過敏(min)(min)體質(zhi)者(zhe)。
c. 有心、肝、肺(fei)、腎等臟器疾病(bing)，體質非常瘦弱者、活(huo)動性(xing)肺(fei)結核(he)、血液(ye)病(bing)、結締組織(zhi)病(bing)、妊娠婦(fu)女和兒童應慎用(yong)。
d. 2周內有(you)使用(yong)與肉毒(du)毒(du)素相互(hu)作用(yong)的藥物(wu)，如(ru)氨基糖苷類抗生素及青霉胺、奎寧、環孢素、嗎啡、鈣離子傳導阻滯劑等，因這(zhe)些(xie)藥物(wu)可增(zeng)加肉毒(du)毒(du)素的毒(du)性(xing)。
3) 技術方法
① 注射(she)部位(wei)皮膚消毒。
② 設計和標記(ji)注(zhu)射點。
③ 將藥(yao)物注(zhu)射到標記部位(wei)。
4) 風險(xian)和并發癥
① 口(kou)周局(ju)部腫脹(zhang)、瘀斑。
② 注射部(bu)位麻木、頭(tou)痛、緊繃感、鄰近部(bu)位皺紋加深(shen)。
③ 閉唇、進食、刷牙(ya)困(kun)難等顯(xian)著副反應(ying)。
④ 笑(xiao)容不對稱或言(yan)語(yu)障(zhang)礙(B、P等輔(fu)音(yin)(yin)發音(yin)(yin)困難)、唇部感受減(jian)弱等。
⑤ 上唇內翻、外翻或(huo)暫(zan)時(shi)性下垂：是由于注射(she)點距(ju)離口輪匝(za)肌過高導致。
5) 療程和恢(hui)復時間
肉(rou)毒毒素注(zhu)(zhu)射(she)(she)效果維持(chi)時間一般為3-6個月，皺紋復發后可再次注(zhu)(zhu)射(she)(she)，間隔時間在6個月左右為宜(yi)。但(dan)不(bu)宜(yi)短期內反(fan)復注(zhu)(zhu)射(she)(she)。
進行(xing)完注射(she)后，馬(ma)上就可以(yi)進行(xing)正(zheng)常的(de)工作和學(xue)習(xi)，只(zhi)要遵(zun)守醫生要求的(de)注意(yi)事(shi)項(xiang)，術后不需(xu)要恢復期。
6) 注意事項
① 術前注意(yi)事(shi)項(xiang)
a. 治療前兩周內不要服用可能會改變凝血狀態的(de)藥物，如阿司匹林、抗凝藥、維生素E和β受(shou)體阻(zu)滯劑等;
b. 治(zhi)療前卸掉彩(cai)妝，清潔面部;
c. 任何有活動性感(gan)染(ran)的部位需治療感(gan)染(ran)后才(cai)能注射。
② 術后注意事(shi)項
a. 術后嚴格(ge)遵守(shou)醫囑;
b. 注射后2-3小時(shi)內不要按(an)摩治療部位;
c. 注射后3-4小時最好保持(chi)頭(tou)部直立;
d. 在注射(she)后2-3小時內應該不斷收(shou)縮注射(she)的肌肉(rou)，因為(wei)毒素選擇性地(di)與(yu)運(yun)動的肌肉(rou)結合(he);
e. 若不(bu)良(liang)反應持續一(yi)周以上需盡快聯系醫生。
肉毒(du)毒(du)素小劑(ji)量局部注釋(shi)能夠有效(xiao)(xiao)地抑制胞吐，又不引起強(qiang)烈免疫反應等主要(yao)副作(zuo)用(yong)，故其(qi)在(zai)多種人類疾病(bing)治療(liao)中(zhong)的應用(yong)得到快速發(fa)展。毒(du)素注射可以(yi)反復多次，如果(guo)抗(kang)體產生(sheng)，可以(yi)換(huan)用(yong)別(bie)的血(xue)清(qing)型(xing)(xing)(xing)毒(du)素繼續(xu)此治療(liao)。現在(zai)主要(yao)應用(yong)的是BontA，已經投入(ru)商(shang)業(ye)化生(sheng)產，別(bie)的血(xue)清(qing)型(xing)(xing)(xing)毒(du)素正在(zai)實(shi)驗中(zhong)，比較有前景的候選毒(du)素是C型(xing)(xing)(xing)毒(du)素。BontA的作(zuo)用(yong)可以(yi)被鈣離子濃度升高(gao)逆(ni)轉(zhuan)，其(qi)余血(xue)清(qing)型(xing)(xing)(xing)毒(du)素由于其(qi)作(zuo)用(yong)不能被逆(ni)轉(zhuan)，應該在(zai)治療(liao)中(zhong)更加(jia)有效(xiao)(xiao)，但(dan)事實(shi)發(fa)現，它們的有效(xiao)(xiao)持續(xu)時(shi)間都較短(duan)。
肉毒(du)毒(du)素在疾病治療中的應(ying)用主要(yao)包括三方(fang)面：
肌(ji)肉(rou)過度收(shou)縮等神經肌(ji)肉(rou)紊亂癥狀，例如肌(ji)纖維肌(ji)顫搐、磨牙癥、肛裂、肛門痙(jing)攣、陰道(dao)痙(jing)攣、遲緩不能、食道(dao)痙(jing)攣等，以(yi)及整形、神經外科手術后(hou)的肌(ji)肉(rou)松弛階段；
腺(xian)體分泌過多(duo)癥狀，例如(ru)多(duo)汗(han)癥、鼻(bi)炎、流涎癥、鱷(e)魚淚綜(zong)合征(zheng)等；
疼(teng)痛(tong)(tong)(tong)癥狀，例如緊張性(xing)頭痛(tong)(tong)(tong)、偏頭痛(tong)(tong)(tong)、頸源性(xing)頭痛(tong)(tong)(tong)、肌筋膜疼(teng)痛(tong)(tong)(tong)、慢(man)性(xing)腰背痛(tong)(tong)(tong)、“網球(qiu)肘(zhou)”等。
