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肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)(su)是由(you)厭氧的(de)(de)肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)梭菌(jun)(jun)在生長繁殖(zhi)過程中(zhong)(zhong)(zhong)產生的(de)(de)一種細菌(jun)(jun)外毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)(su),它能(neng)引(yin)起(qi)死亡(wang)率極高的(de)(de)肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)中(zhong)(zhong)(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)。肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)梭菌(jun)(jun)及(ji)其(qi)毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)(su)根(gen)據毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)(su)抗原(yuan)性的(de)(de)不(bu)同(tong),將其(qi)分為(wei)A、B、C、D、E、F和(he)G7個型(xing)(xing)。其(qi)中(zhong)(zhong)(zhong)A、B、E、F為(wei)人中(zhong)(zhong)(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)型(xing)(xing)別(bie)(bie),C、D型(xing)(xing)為(wei)動(dong)物(wu)和(he)家禽的(de)(de)中(zhong)(zhong)(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)型(xing)(xing)別(bie)(bie)。C型(xing)(xing)肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)梭菌(jun)(jun)在自(zi)然界廣泛分布。飲食(shi)污(wu)染有C型(xing)(xing)肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)梭菌(jun)(jun)特別(bie)(bie)是C型(xing)(xing)肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)(su)的(de)(de)水源(yuan)或草料的(de)(de)動(dong)物(wu)有可(ke)能(neng)發生C型(xing)(xing)肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)中(zhong)(zhong)(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)。動(dong)物(wu)中(zhong)(zhong)(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)后, 20小時(shi)(shi)左右(you)甚至幾小時(shi)(shi)內即可(ke)致(zhi)死,死亡(wang)率極高,常常來不(bu)及(ji)用抗毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)(su)進(jin)行特異(yi)性治療。
肉(rou)(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)中(zhong)毒(du)(du)(du)(du)發生后(hou),若不(bu)及時采取措施(shi),則(ze)會引起(qi)其它食肉(rou)(rou)(rou)動(dong)物(wu)因食用中(zhong)毒(du)(du)(du)(du)動(dong)物(wu)尸體而死亡(wang)或攜帶肉(rou)(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)梭菌,造(zao)成肉(rou)(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)梭菌在(zai)自然界中(zhong)的傳播與潛伏,有(you)可能引起(qi)范圍更(geng)廣、更(geng)嚴重的肉(rou)(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)中(zhong)毒(du)(du)(du)(du),并危害人類(lei)(lei)健康。用C型肉(rou)(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)類(lei)(lei)毒(du)(du)(du)(du)素疫(yi)苗進行(xing)預防(fang)免(mian)疫(yi)是防(fang)止動(dong)物(wu)肉(rou)(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)中(zhong)毒(du)(du)(du)(du)的最有(you)效辦法(fa)之一。
肉毒(du)(du)毒(du)(du)素(su)(su)(su)不耐熱，90℃2分鐘可(ke)完(wan)全破壞;不耐堿，溶解在pH11的堿性(xing)溶液中(zhong)3分鐘就可(ke)滅活。肉毒(du)(du)毒(du)(du)素(su)(su)(su)溶液加0.6%的福(fu)爾馬林37℃下作用(yong)一個月以上可(ke)失去毒(du)(du)性(xing)，但仍保(bao)(bao)持抗原性(xing)和免疫(yi)原性(xing)，成(cheng)為(wei)類毒(du)(du)素(su)(su)(su)。本(ben)毒(du)(du)素(su)(su)(su)對乙(yi)醇穩定(ding);但可(ke)被鹵素(su)(su)(su)滅活。粗制毒(du)(du)素(su)(su)(su)較精制毒(du)(du)素(su)(su)(su)穩定(ding)。毒(du)(du)素(su)(su)(su)溶液在pH6.0，4℃下保(bao)(bao)存(cun)，效價可(ke)保(bao)(bao)持半年不變。凍干毒(du)(du)素(su)(su)(su)在低(di)溫條件下可(ke)長期保(bao)(bao)存(cun)，毒(du)(du)性(xing)下降緩慢。
生化武器(qi)變成美容秘方(fang)
據了解，“肉毒(du)毒(du)素”實際上是“肉毒(du)桿菌毒(du)素”的(de)俗稱(cheng)，又名“Botox”和“Myobloc”，是肉毒(du)桿菌在(zai)繁殖過程中分泌的(de)毒(du)性蛋白質，具有很強的(de)神經毒(du)性。
據介紹，肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素最(zui)早被用(yong)來(lai)(lai)作為生化武器(qi)，它能破壞生物的神經(jing)系統，使(shi)(shi)人出(chu)現頭暈(yun)、呼(hu)吸困難、肌(ji)肉(rou)(rou)乏(fa)力等(deng)癥狀；后來(lai)(lai)，它被醫(yi)學(xue)界用(yong)來(lai)(lai)治(zhi)療(liao)面部痙攣(luan)和(he)其他肌(ji)肉(rou)(rou)運動紊亂癥。在1986年，加拿大一(yi)位眼(yan)科(ke)教(jiao)授(shou)發現肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素能讓患者眼(yan)部的皺(zhou)紋(wen)消失(shi)，他向外(wai)界公布，引發了(le)美容(rong)史上的所謂“Botox革(ge)命”。此后，整(zheng)容(rong)界將它的功能擴大，比如用(yong)它瘦臉、塑(su)小(xiao)腿等(deng)。肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素具有很(hen)強(qiang)的毒(du)(du)(du)性，注射(she)在人體(ti)是(shi)否安全(quan)？據一(yi)整(zheng)形(xing)醫(yi)院的劉姓(xing)主任醫(yi)師(shi)介紹，用(yong)于(yu)整(zheng)容(rong)的肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素比起生化武器(qi)來(lai)(lai)，稀釋了(le)40萬倍(bei)。肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素能阻斷(duan)神經(jing)和(he)肌(ji)肉(rou)(rou)之(zhi)(zhi)間的“信息傳導”，使(shi)(shi)過(guo)度收縮的肌(ji)肉(rou)(rou)放松舒展，皺(zhou)紋(wen)便隨之(zhi)(zhi)消失(shi)。
對于肉毒毒素在(zai)國(guo)(guo)內的使用(yong)歷史，很(hen)多(duo)醫生(sheng)表示具體(ti)開始的年份不太清楚，但在(zai)我(wo)國(guo)(guo)使用(yong)已有(you)10多(duo)年。資料顯(xian)示，我(wo)國(guo)(guo)是繼英國(guo)(guo)和美(mei)國(guo)(guo)之后(hou)第(di)三個(ge)能(neng)自行生(sheng)產這種美(mei)容用(yong)途產品(pin)(pin)的國(guo)(guo)家，并(bing)在(zai)1999年開始運用(yong)。據業內人士(shi)介紹，去年，國(guo)(guo)內部(bu)分肉毒毒素產品(pin)(pin)曾經(jing)因為提純過程出現問題(ti)而影(ying)響產品(pin)(pin)質量，但是后(hou)來生(sheng)產廠家很(hen)快就改正了這些問題(ti)。
對(dui)于其(qi)安全(quan)性(xing)(xing)，不少醫生表(biao)示，肉毒毒素在美容方面的(de)運用(yong)非(fei)常微量，不會對(dui)人(ren)體造成影(ying)響(xiang)，相對(dui)于其(qi)他除皺產品，它的(de)作用(yong)和(he)安全(quan)性(xing)(xing)是無可(ke)替代的(de)，是目前去除動力性(xing)(xing)皺紋最好的(de)方法。
從1964年由(you)肉毒(du)桿菌中分(fen)離出毒(du)素(su)結晶(jing)(jing)至今已獲得七種（A，B，C，D，E，F和(he)G）類型(xing)(xing)的毒(du)素(su)，能引起人員中毒(du)的主要(yao)是A、B和(he)E型(xing)(xing)毒(du)素(su)，其中以A型(xing)(xing)軍用意義最大，A型(xing)(xing)結晶(jing)(jing)毒(du)素(su)是由(you)19種氨(an)基酸組成的單一蛋白(bai)質，分(fen)子量為90～120萬，化學(xue)結構目前尚(shang)不清楚。
SDS-PAGE電泳結(jie)果(guo)顯示有分(fen)子(zi)量(liang)不(bu)同的帶,為構成C型肉(rou)毒(du)前體毒(du)素(su)的各亞(ya)基。其(qi)中分(fen)子(zi)量(liang)為100kD的帶是神經毒(du)素(su)的重鏈,分(fen)子(zi)量(liang)為50kD的帶是神經毒(du)素(su)的輕(qing)鏈,其(qi)它(ta)分(fen)子(zi)量(liang)不(bu)等的帶為血凝素(su)各亞(ya)單(dan)位和非血凝素(su)非毒(du)素(su)成份(fen)。它(ta)們對(dui)保持(chi)C型肉(rou)毒(du)神經毒(du)素(su)的穩定和毒(du)性(xing)作(zuo)用的發揮起主要(yao)作(zuo)用。
肉(rou)毒(du)毒(du)素通常是由神經毒(du)素和血凝素組(zu)成的(de)(de)復合形式存在。A型肉(rou)毒(du)毒(du)素的(de)(de)純品是一種(zhong)白色晶體粉末(mo)，易(yi)溶于水，但穩定性(xing)較差。受(shou)熱、機(ji)械(xie)力和氧的(de)(de)作用而降解。粉末(mo)狀(zhuang)的(de)(de)毒(du)素可(ke)長期貯存而不失活性(xing)，肉(rou)毒(du)毒(du)素染毒(du)的(de)(de)食物(wu)和水源，一般其毒(du)性(xing)可(ke)保持數天(tian)乃(nai)至一周，肉(rou)毒(du)毒(du)素不被胃腸(chang)液所破壞，易(yi)經消化道中毒(du)。
A型肉(rou)毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素(su)(su)的氣溶膠對人(ren)吸入的致死(si)量為(wei)0.3μg，LCt50為(wei)0.1～0.5mg·min/m3，靜(jing)脈(mo)注(zhu)射致死(si)量為(wei)0.15～zaaz0.3μg，口服(fu)致死(si)劑量為(wei)8～10μg，該(gai)毒(du)(du)(du)素(su)(su)對小鼠的毒(du)(du)(du)性LD50值約為(wei)3×10–5~3×10–4μg。野外試驗(yan)表明，由于大(da)規模施放方(fang)法尚未解決，肉(rou)毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素(su)(su)通過呼吸道中毒(du)(du)(du)的致死(si)效(xiao)應(ying)，并(bing)不(bu)比等量神(shen)經性毒(du)(du)(du)劑大(da)。當前(qian)以污染(ran)食物(wu)和(he)水源通過消化道染(ran)毒(du)(du)(du)為(wei)其(qi)主要(yao)的中毒(du)(du)(du)途徑。另據報(bao)道，美軍利(li)用(yong)肉(rou)毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素(su)(su)污染(ran)小型武器的彈頭，以增強殺傷效(xiao)應(ying)，現已(yi)生產這種武器。平時主要(yao)是攝入被(bei)肉(rou)毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素(su)(su)污染(ran)的肉(rou)類和(he)罐(guan)頭等食品而(er)中毒(du)(du)(du)，死(si)亡率(lv)大(da)約為(wei)25～50%。
業已闡明，在體內(nei)(nei)肉(rou)毒毒素(su)特異性的(de)(de)與膽堿(jian)能神(shen)(shen)經末(mo)梢(shao)突觸(chu)前(qian)(qian)膜(mo)的(de)(de)表面受體相結(jie)合，然后由于吸附性胞(bao)(bao)飲(yin)而內(nei)(nei)轉(zhuan)進(jin)(jin)入細(xi)胞(bao)(bao)內(nei)(nei)稱為毒素(su)的(de)(de)內(nei)(nei)轉(zhuan)（internalization），使囊泡不能再與突觸(chu)前(qian)(qian)膜(mo)融合，從而有效地(di)阻抑了(le)(le)膽堿(jian)能神(shen)(shen)經介質——乙酰膽堿(jian)的(de)(de)釋(shi)放(fang)(fang)。與此(ci)同時(shi)，毒素(su)與突觸(chu)前(qian)(qian)膜(mo)結(jie)合，還阻塞了(le)(le)神(shen)(shen)經細(xi)胞(bao)(bao)膜(mo)的(de)(de)鈣(gai)離子通道(dao)，從而干擾(rao)了(le)(le)細(xi)胞(bao)(bao)外鈣(gai)離子進(jin)(jin)入神(shen)(shen)經細(xi)胞(bao)(bao)內(nei)(nei)以觸(chu)發胞(bao)(bao)吐和釋(shi)放(fang)(fang)乙酰膽堿(jian)的(de)(de)能力。乙酰膽堿(jian)釋(shi)放(fang)(fang)的(de)(de)抑制，有效地(di)阻斷(duan)了(le)(le)膽堿(jian)能神(shen)(shen)經傳導的(de)(de)生理功(gong)能，尤其是(shi)(shi)神(shen)(shen)經一肌(ji)肉(rou)接頭(tou)部位特別敏(min)感，引起全身隨意(yi)肌(ji)松弛麻(ma)痹，呼(hu)吸肌(ji)麻(ma)痹是(shi)(shi)致死的(de)(de)主要(yao)原因。
肉(rou)毒毒素經(jing)消化道吸收中毒，一般經(jing)過12～72小時的(de)潛伏期，開始出現全身中毒癥狀。
早期癥狀(zhuang)有惡心、嘔(ou)吐及(ji)腹瀉(xie)等，繼(ji)(ji)之出現(xian)頭痛、頭昏、眩暈(yun)、軟弱無(wu)力(li)，中毒(du)(du)的(de)重(zhong)要特征(zheng)為(wei)視(shi)(shi)力(li)紊(wen)亂：復(fu)(fu)視(shi)(shi)、斜視(shi)(shi)、瞳孔散大、視(shi)(shi)力(li)模(mo)糊(hu)，同時(shi)伴(ban)有眼球震顫，這是眼內(nei)外肌麻痹(bi)的(de)結果。嚴重(zhong)病人(ren)有吞(tun)噬(shi)、咀嚼、語言(yan)、呼(hu)吸(xi)等困難(nan)，排痰及(ji)抬頭困難(nan)，共濟失(shi)調等，神志清(qing)楚。癥狀(zhuang)繼(ji)(ji)續發(fa)展則(ze)出現(xian)進行性呼(hu)吸(xi)困難(nan)，全身(shen)肌肉松弛性麻痹(bi)。繼(ji)(ji)則(ze)脈搏(bo)加快，血壓下降，短時(shi)間抽搐，意識喪失(shi)，最終因呼(hu)吸(xi)衰竭(jie)、心力(li)衰竭(jie)或繼(ji)(ji)發(fa)肺炎(yan)等而死亡。通過呼(hu)吸(xi)道吸(xi)入中毒(du)(du)，一般癥狀(zhuang)發(fa)展迅速(su)且嚴重(zhong)。其他途(tu)徑中毒(du)(du)的(de)臨床癥狀(zhuang)，因毒(du)(du)劑的(de)劑量不同而異。病人(ren)恢(hui)復(fu)(fu)較緩(huan)慢，視(shi)(shi)覺障礙恢(hui)復(fu)(fu)特慢，有時(shi)需數月(yue)之久。
肉毒抗(kang)毒素對本(ben)病有特(te)效，必須盡早(zao)給(gei)予，根(gen)據病情輕重(zhong)，靜肌(ji)(ji)或肌(ji)(ji)肉注射1～2萬單位，必要時(shi)可重(zhong)復注射。盡早(zao)進行催吐、洗胃、導瀉(xie)、灌腸，以排出尚未吸收的毒劑(ji)。及時(shi)肌(ji)(ji)肉或皮下(xia)注射新(xin)斯的明、乙酰(xian)膽堿、毛果云香堿及鈣制劑(ji)等，可顯著(zhu)減(jian)輕中毒癥狀，呼吸困難者，給(gei)氧及人工(gong)呼吸，必要時(shi)行氣管切開(kai)術。
吞咽困難者(zhe)用鼻飼(si)或靜滴葡萄(tao)糖生(sheng)理鹽水，發(fa)生(sheng)肺炎等繼發(fa)感(gan)染(ran)時給與適宜(yi)的抗生(sheng)素。患(huan)者(zhe)必須臥床休息(xi)、保溫(wen)、加強護理。
肉毒(du)桿菌(jun)毒(du)素/BOTULINUM TOXIN
這(zhe)種(zhong)毒(du)(du)素(su)(su)起(qi)源(yuan)于(yu)肉(rou)毒(du)(du)梭菌(jun)(jun)，它能引起(qi)肉(rou)毒(du)(du)中毒(du)(du)。純粹的(de)(de)(de)(de)肉(rou)毒(du)(du)桿菌(jun)(jun)毒(du)(du)素(su)(su)是(shi)已知毒(du)(du)性(xing)最強(qiang)的(de)(de)(de)(de)物(wu)質，并(bing)且(qie)是(shi)生化恐怖(bu)分子希望使(shi)用的(de)(de)(de)(de)一(yi)種(zhong)毒(du)(du)素(su)(su)。4克未稀釋的(de)(de)(de)(de)粉(fen)末--一(yi)枚五分鎳幣的(de)(de)(de)(de)重量(liang)(liang)--足以使(shi)1億(yi)人喪命(ming)。美國食品(pin)藥物(wu)管(guan)理局(ju)2002年(nian)4月批準肉(rou)毒(du)(du)桿菌(jun)(jun)毒(du)(du)素(su)(su)可用于(yu)化妝(zhuang)(zhuang)品(pin)中。用于(yu)化妝(zhuang)(zhuang)品(pin)的(de)(de)(de)(de)肉(rou)毒(du)(du)桿菌(jun)(jun)毒(du)(du)素(su)(su)變(bian)體(ti)，比如(ru)肉(rou)毒(du)(du)素(su)(su)，目的(de)(de)(de)(de)是(shi)使(shi)神(shen)經遞質負(fu)責(ze)觸發肌(ji)肉(rou)收縮，有效麻痹注射的(de)(de)(de)(de)區域，抑(yi)制皺(zhou)紋的(de)(de)(de)(de)出現。通常，把數(shu)量(liang)(liang)從0.5～1.0毫升不(bu)等的(de)(de)(de)(de)毒(du)(du)素(su)(su)溶液(ye)--大(da)約一(yi)茶匙--注射到(dao)臉部的(de)(de)(de)(de)每(mei)一(yi)個區域。神(shen)經運(yun)動(dong)紊亂的(de)(de)(de)(de)人會發作并(bing)出現呼吸困難(nan)。美發師(shi)等對這(zhe)種(zhong)用于(yu)化妝(zhuang)(zhuang)品(pin)的(de)(de)(de)(de)毒(du)(du)素(su)(su)變(bian)體(ti)的(de)(de)(de)(de)使(shi)用增加了其被致命(ming)性(xing)誤用的(de)(de)(de)(de)可能性(xing)。比 肉(rou)毒(du)(du)素(su)(su)更易引起(qi)肉(rou)毒(du)(du)中毒(du)(du)的(de)(de)(de)(de)非法肉(rou)毒(du)(du)素(su)(su)仿制品(pin)，不(bu)時(shi)地充(chong)斥市(shi)場并(bing)每(mei)年(nian)致死(si)30人。
1985年以(yi)來，有2,871人死于肉毒桿菌(jun)毒素(su)的使用。
2009年(nian)4月，國(guo)家批準肉(rou)毒(du)毒(du)素用(yong)于美(mei)容 僅用(yong)于去(qu)除皺眉紋。
獲批準(zhun)進入正規(gui)醫院(yuan)(yuan)整形美容(rong)科(ke)和皮膚科(ke)的(de)肉毒毒素，僅(jin)(jin)僅(jin)(jin)適用(yong)(yong)于(yu)去(qu)除(chu)皺眉紋(wen)，而(er)且(qie)屬于(yu)特殊管理的(de)毒麻藥品，須經嚴格(ge)的(de)處(chu)方限制才(cai)能購買和使用(yong)(yong)。此外，藥品監管部門(men)還做出“只能在(zai)有處(chu)方權的(de)醫生監護下注(zhu)射(she)使用(yong)(yong)”，“不能在(zai)藥店或美容(rong)院(yuan)(yuan)銷售”等諸多嚴格(ge)的(de)限制規(gui)定。
中(zhong)華醫(yi)學會整形外(wai)科分會副主(zhu)委祁佐(zuo)良昨天說，此前多(duo)年，肉(rou)毒(du)毒(du)素雖然(ran)已在中(zhong)國眾(zhong)多(duo)整形美容醫(yi)院中(zhong)被(bei)廣泛應用于除(chu)皺、瘦(shou)臉，但一直(zhi)未經國家藥監局批準，處于尷尬的“非(fei)法”狀態。
肉毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素(su)中毒(du)(du)(du)的(de)(de)臨(lin)(lin)床診斷(duan)主要依據臨(lin)(lin)床體癥(zheng)和主述(shu)分析。實驗室檢(jian)測肉毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素(su)及定(ding)型對(dui)確(que)診和治療具(ju)有(you)重(zhong)要意義，預防中毒(du)(du)(du)最重(zhong)要的(de)(de)是(shi)加強監測。到(dao)(dao)目前(qian)為止經(jing)典的(de)(de)小鼠(shu)致死及中和試(shi)驗仍是(shi)最敏(min)(min)感、最可信的(de)(de)肉毒(du)(du)(du)檢(jian)測方(fang)法，該(gai)(gai)方(fang)法經(jing)過不(bu)(bu)斷(duan)完善，甚至(zhi)可以對(dui)很微量的(de)(de)毒(du)(du)(du)素(su)作到(dao)(dao)定(ding)量檢(jian)測。但(dan)該(gai)(gai)方(fang)法比(bi)較繁瑣和耗(hao)時，不(bu)(bu)易(yi)推(tui)廣，因此人們不(bu)(bu)斷(duan)探(tan)索一些更簡便(bian)、快捷、靈敏(min)(min)的(de)(de)新(xin)方(fang)法。
免(mian)疫血清學(xue)方法的(de)優勢是(shi)可以直接(jie)從病人(ren)的(de)食物、糞(fen)便、嘔吐物及血清等臨(lin)床(chuang)樣品(pin)中檢測出(chu)肉毒毒素，用血清學(xue)方法測定(ding)肉毒毒素主要(yao)有放射(she)免(mian)疫技術(RIA)、反(fan)向間接(jie)血凝法(RPHA)、反(fan)向乳膠凝集實驗(yan)(yan)(RPLA)、酶聯(lian)免(mian)疫吸附實驗(yan)(yan)(ELISA)及其擴展(zhan)的(de)酶聯(lian)凝集實驗(yan)(yan)(ELCA)等。
聚合酶鏈反應(PCR)技(ji)術是近年來(lai)發展的(de)一類快速診(zhen)斷及(ji)定型肉毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素的(de)實驗方法。其步驟主要是將(jiang)檢樣(糞便、內臟(zang)、胃腸內容物、食物等(deng))的(de)研碎物或離心沉渣接種于厭氧(yang)庖(pao)肉培養基進(jin)行增菌及(ji)產毒(du)(du)(du)培養。然后將(jiang)菌體裂解，提取DNA模板(ban)以作PCR試驗，通過電泳圖譜判斷是否存在肉毒(du)(du)(du)梭(suo)菌。
類毒(du)(du)素(su)疫(yi)(yi)苗(miao)：傳統BoNT類毒(du)(du)素(su)疫(yi)(yi)苗(miao)因(yin)存在一定的(de)副作用(yong)，臨床使用(yong)受到(dao)了(le)限制。利用(yong)分子(zi)生物(wu)學方法脫毒(du)(du)構建的(de)全長BoNT突變(bian)體(ti)疫(yi)(yi)苗(miao)，可(ke)以(yi)有(you)效地刺激機(ji)體(ti)產生高(gao)效免疫(yi)(yi)保護(hu)抗(kang)體(ti)，作為新一代類疫(yi)(yi)苗(miao)具有(you)良好的(de)開發潛力(li)。
Hc亞單位(wei)疫(yi)(yi)苗：最理想(xiang)的亞單位(wei)疫(yi)(yi)苗應該(gai)是無毒的最小蛋白片(pian)段(duan)，并且能顯著引(yin)起機(ji)體保(bao)護性免疫(yi)(yi)應答。
短(duan)(duan)肽疫(yi)(yi)苗：隨(sui)著噬菌體展示肽庫、重疊肽合成(cheng)(cheng)、計算(suan)機模(mo)擬預測表(biao)位(wei)等技術(shu)的(de)發展，識別鑒定特異性(xing)短(duan)(duan)肽片段(duan)作(zuo)為候選疫(yi)(yi)苗可以被快速準(zhun)確(que)地(di)完成(cheng)(cheng)。通過比(bi)較不同(tong)的(de)研(yan)究報道發現，某些肽段(duan)表(biao)位(wei)可以在不同(tong)型的(de)毒素間引起交叉反應，據此構(gou)建的(de)多(duo)肽疫(yi)(yi)苗可 刺(ci)激獲(huo)得較好的(de)免(mian)疫(yi)(yi)效果，但仍然需(xu)要對這些表(biao)位(wei)進(jin)行驗(yan)證。
DNA疫苗：通常用(yong) BoNT重組DNA免疫動物后(hou)表達蛋白，進而刺激免疫系統產生抗體或T細胞介導的(de)免疫應答。
去皺紋
1) 技術原理
口輪匝肌與皮膚(fu)緊密連接，收(shou)(shou)縮時直接牽動皮膚(fu)，和動力性(xing)皺紋的(de)形成有關(guan)。而肉(rou)(rou)毒(du)毒(du)素是一種生物毒(du)素類肌肉(rou)(rou)松弛(chi)劑，它通過(guo)抑制(zhi)乙酰(xian)膽堿(jian)的(de)釋(shi)放，阻斷神經肌肉(rou)(rou)傳導(dao)，導(dao)致肌肉(rou)(rou)松弛(chi)性(xing)麻痹，從而抑制(zhi)肌肉(rou)(rou)的(de)收(shou)(shou)縮，以達(da)到(dao)去除皺紋的(de)目(mu)的(de)。
2) 適應人群和禁忌人群
① 適(shi)應人群：適(shi)用于口(kou)周肌(ji)肉收縮(suo)過多導致的動力(li)性皺紋，要(yao)求(qiu)使用肉毒毒素者。
② 禁忌人群
a. 重癥肌無力、多發性(xing)(xing)硬(ying)化(hua)癥、先天性(xing)(xing)上瞼下垂等(deng)神(shen)經肌肉病(bing)變(bian)。
b. 對肉毒毒素制品(pin)中任何成分或人血(xue)白蛋白過(guo)敏(min)(min)者或過(guo)敏(min)(min)體質(zhi)者。
c. 有心、肝、肺(fei)(fei)、腎等(deng)臟器(qi)疾病，體質非常(chang)瘦弱者(zhe)、活(huo)動性肺(fei)(fei)結核(he)、血(xue)液病、結締組織病、妊娠(shen)婦女和兒童應慎用。
d. 2周內(nei)有使用(yong)與肉(rou)毒毒素相(xiang)互(hu)作(zuo)用(yong)的藥物(wu)(wu)，如氨基糖苷類抗生(sheng)素及(ji)青霉(mei)胺、奎寧(ning)、環孢素、嗎啡、鈣(gai)離子傳導(dao)阻滯劑等，因(yin)這些藥物(wu)(wu)可(ke)增加肉(rou)毒毒素的毒性(xing)。
3) 技術方法
① 注(zhu)射部位皮膚消毒。
② 設計和標記注(zhu)射點。
③ 將藥物注射(she)到標記部(bu)位。
4) 風險(xian)和(he)并發癥
① 口周局部腫脹、瘀斑(ban)。
② 注射部位麻木、頭痛、緊繃感、鄰近部位皺紋(wen)加(jia)深(shen)。
③ 閉唇、進食、刷(shua)牙困難等顯著副反應。
④ 笑容(rong)不對(dui)稱或(huo)言(yan)語障礙(B、P等輔音(yin)發(fa)音(yin)困難)、唇部感受減弱等。
⑤ 上唇內翻、外(wai)翻或暫(zan)時性下垂：是由(you)于(yu)注(zhu)射點距離口(kou)輪匝肌過高導致(zhi)。
5) 療程和恢復時間(jian)
肉毒毒素注射效(xiao)果維持時間(jian)一般為3-6個(ge)月，皺紋復發后可再(zai)次注射，間(jian)隔時間(jian)在(zai)6個(ge)月左右(you)為宜。但(dan)不宜短期(qi)內反復注射。
進行完(wan)注射后，馬(ma)上就可(ke)以進行正(zheng)常的(de)(de)工(gong)作和(he)學(xue)習，只要遵守醫(yi)生要求的(de)(de)注意事項(xiang)，術后不需要恢復期。
6) 注意事項
① 術前(qian)注意(yi)事項
a. 治(zhi)療前(qian)兩周(zhou)內不要服用可能會改變凝血狀態的藥(yao)物(wu)，如阿(a)司匹林、抗(kang)凝藥(yao)、維生素E和β受體(ti)阻滯劑等(deng);
b. 治療前卸(xie)掉彩(cai)妝，清潔面部;
c. 任(ren)何有活動性感(gan)染的部位需(xu)治(zhi)療感(gan)染后才能(neng)注射。
② 術(shu)后注意事項
a. 術后嚴格遵守醫囑;
b. 注射后2-3小時內不要(yao)按摩治(zhi)療部(bu)位;
c. 注射后(hou)3-4小(xiao)時最好保持頭部直立;
d. 在注射(she)后2-3小時內應該(gai)不斷(duan)收縮注射(she)的(de)肌(ji)(ji)肉，因為毒素(su)選(xuan)擇性地與運動的(de)肌(ji)(ji)肉結(jie)合(he);
e. 若不良反應持續一周以(yi)上需盡(jin)快聯系醫(yi)生。
肉毒毒素(su)小(xiao)劑(ji)量(liang)局部注釋能夠有(you)(you)效地抑(yi)制胞吐，又不(bu)引起強烈免疫反應等主(zhu)(zhu)要副作(zuo)用(yong)，故其在多(duo)種人類疾(ji)病治(zhi)療(liao)中(zhong)的(de)應用(yong)得到快(kuai)速發展(zhan)。毒素(su)注射可(ke)以(yi)反復多(duo)次，如果抗(kang)體產生，可(ke)以(yi)換用(yong)別(bie)的(de)血清(qing)型毒素(su)繼續此(ci)治(zhi)療(liao)。現在主(zhu)(zhu)要應用(yong)的(de)是BontA，已經投入(ru)商業化生產，別(bie)的(de)血清(qing)型毒素(su)正在實驗(yan)中(zhong)，比較有(you)(you)前景的(de)候選(xuan)毒素(su)是C型毒素(su)。BontA的(de)作(zuo)用(yong)可(ke)以(yi)被鈣離子濃(nong)度升高逆轉，其余血清(qing)型毒素(su)由于(yu)其作(zuo)用(yong)不(bu)能被逆轉，應該在治(zhi)療(liao)中(zhong)更加(jia)有(you)(you)效，但事實發現，它(ta)們(men)的(de)有(you)(you)效持(chi)續時間都較短(duan)。
肉毒毒素(su)在疾病治療中的應用主要包括三方面：
肌肉(rou)過度收縮(suo)等神(shen)經肌肉(rou)紊(wen)亂癥(zheng)狀，例(li)如肌纖維肌顫搐、磨牙癥(zheng)、肛(gang)裂(lie)、肛(gang)門(men)痙(jing)(jing)攣、陰道痙(jing)(jing)攣、遲緩不(bu)能、食道痙(jing)(jing)攣等，以及整形、神(shen)經外(wai)科手術(shu)后的肌肉(rou)松(song)弛階段；
腺(xian)體分泌過多(duo)癥(zheng)狀(zhuang)，例(li)如多(duo)汗癥(zheng)、鼻炎、流(liu)涎癥(zheng)、鱷魚淚(lei)綜合(he)征等；
疼(teng)痛(tong)(tong)癥狀(zhuang)，例(li)如緊張性(xing)頭(tou)痛(tong)(tong)、偏頭(tou)痛(tong)(tong)、頸源性(xing)頭(tou)痛(tong)(tong)、肌筋膜(mo)疼(teng)痛(tong)(tong)、慢性(xing)腰背(bei)痛(tong)(tong)、“網球肘”等。
