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簡介

弧(hu)菌屬(shu)(Vibrio)中霍(huo)亂弧(hu)菌(V．cholerae)、引起一種烈(lie)性腸(chang)道傳染病，發病急、傳染性強(qiang)、病死率高，屬(shu)于國際檢疫傳染病。

霍亂弧菌包括兩個生物型：古典生物型（Classical biotype）和埃爾托生物型（EL-Tor bio-type）。這兩種型別(bie)(bie)除(chu)個別(bie)(bie)生(sheng)物(wu)學性(xing)狀稍(shao)有不同外，形態和(he)免疫學性(xing)基本相(xiang)同，在臨床(chuang)病理(li)及流行(xing)病學特(te)征上沒有本質的(de)差別(bie)(bie)。自1817年(nian)以來，全球共發生(sheng)了七(qi)(qi)次世界性(xing)大流行(xing)，前六次病原(yuan)是古典型霍亂弧菌，第七(qi)(qi)次病原(yuan)是埃爾(er)托型所致。

1992年10月在(zai)印度(du)東南部(bu)又發(fa)現(xian)了一(yi)個引起霍(huo)亂流行(xing)的新血(xue)清型菌(jun)株（0139），它引起的霍(huo)亂在(zai)臨床表現(xian)及(ji)傳播方式上與古典型霍(huo)亂完全相同，但不能被(bei)01群(qun)霍(huo)亂弧菌(jun)診斷(duan)血(xue)清所凝集，抗(kang)01群(qun)的抗(kang)血(xue)清對(dui)0139菌(jun)株無保護性免疫。在(zai)水中的存活(huo)時間(jian)較01群(qun)霍(huo)亂弧菌(jun)長，因而有(you)可(ke)能成為引起世界性霍(huo)亂流行(xing)的新菌(jun)株。

性狀

形態與培養特性

新從病人分離出古典(dian)型霍亂弧菌和ELtor弧菌比(bi)較(jiao)典(dian)型，為革蘭(lan)氏陰性(xing)菌，菌體(ti)彎曲呈弧狀或逗點狀，菌體(ti)一端有(you)單根鞭(bian)毛和菌毛，無莢(jia)膜(mo)與芽(ya)胞(bao)。經人工培(pei)養后，易失去弧形(xing)而呈桿(gan)狀。取霍亂病人米泔水(shui)樣糞便作活(huo)菌懸滴觀察，可見(jian)細菌運(yun)動(dong)(dong)極(ji)為活(huo)潑，呈流星穿梭運(yun)動(dong)(dong)。在液體(ti)培(pei)養基(ji)內常呈單個、成(cheng)對成(cheng)鏈狀，有(you)的相連呈S形(xing)，甚至螺旋狀。

營養要求不高，在PH8.8～9.0的(de)堿性蛋(dan)白(bai)胨(dong)水或平板(ban)中生長良好(hao)。因其他細菌(jun)在這一(yi)PH不易(yi)生長，故(gu)堿性蛋(dan)白(bai)胨(dong)水可作為(wei)選擇性增殖霍亂弧菌(jun)的(de)培(pei)養基。在堿性平板(ban)上菌(jun)落(luo)直徑為(wei)2mm,圓形，光滑，透明。

霍(huo)亂(luan)弧(hu)(hu)菌(jun)(jun)能(neng)(neng)還原硝(xiao)酸(suan)(suan)鹽(yan)為(wei)亞硝(xiao)酸(suan)(suan)鹽(yan)，靛(dian)基(ji)質反(fan)應(ying)陽性(xing)(xing)，當(dang)培(pei)養在(zai)含硝(xiao)酸(suan)(suan)鹽(yan)及色(se)氨酸(suan)(suan)的(de)(de)(de)培(pei)養基(ji)中，產(chan)生靛(dian)基(ji)質與亞硝(xiao)酸(suan)(suan)鹽(yan)，在(zai)濃(nong)硫(liu)酸(suan)(suan)存(cun)在(zai)時，生成紅色(se)，稱為(wei)霍(huo)亂(luan)紅反(fan)應(ying)，但其他非致病性(xing)(xing)弧(hu)(hu)菌(jun)(jun)亦有此反(fan)應(ying)，故(gu)不(bu)能(neng)(neng)憑此鑒(jian)定霍(huo)亂(luan)弧(hu)(hu)菌(jun)(jun)。EL Tor型(xing)(xing)霍(huo)亂(luan)弧(hu)(hu)菌(jun)(jun)與古典型(xing)(xing)霍(huo)亂(luan)弧(hu)(hu)菌(jun)(jun)生化反(fan)應(ying)有所(suo)不(bu)同(tong)。前者Vp陽性(xing)(xing)而后者為(wei)陰(yin)性(xing)(xing)。前者能(neng)(neng)產(chan)生強烈的(de)(de)(de)溶血(xue)(xue)(xue)素(su)，溶解羊紅細(xi)胞，在(zai)血(xue)(xue)(xue)平板上生長的(de)(de)(de)菌(jun)(jun)落周(zhou)圍出現明(ming)顯的(de)(de)(de)透(tou)明(ming)溶血(xue)(xue)(xue)環，古典型(xing)(xing)霍(huo)亂(luan)弧(hu)(hu)菌(jun)(jun)則不(bu)溶解羊紅細(xi)胞。個別(bie)EL Tor型(xing)(xing)霍(huo)亂(luan)弧(hu)(hu)菌(jun)(jun)株(zhu)亦不(bu)溶血(xue)(xue)(xue)。

抗原性

根(gen)據弧(hu)菌O抗(kang)原(yuan)不(bu)同，分成Ⅵ個(ge)血清(qing)群(qun)，第Ⅰ群(qun)包括(kuo)霍亂弧(hu)菌的兩個(ge)生物型(xing)。第Ⅰ群(qun)A、B、C三種抗(kang)原(yuan)成份可將霍亂弧(hu)菌分為三個(ge)血清(qing)型(xing)：含AC者(zhe)為原(yuan)型(xing)（又稱稻(dao)葉型(xing)），含AB者(zhe)為異(yi)型(xing)（又稱小川型(xing)），A、B、C均有者(zhe)稱中間型(xing)（彥島型(xing)）。

抵抗力

霍亂弧(hu)菌古典(dian)生物型對外環境抵抗力較(jiao)弱，EL-Tor生物型抵抗力較(jiao)強(qiang)，在河(he)水(shui)、井水(shui)、海水(shui)中可(ke)存活1～3周(zhou)，在鮮魚，貝殼類食物上存活1～2周(zhou)。

霍亂弧菌對熱，干燥，日光，化學消毒劑和酸均很敏感，耐低溫，耐堿。濕熱55℃，15分(fen)鐘，100℃，1～2分(fen)鐘，水中加0.5ppm氯(lv)15分(fen)鐘可被殺(sha)死。0.1%高錳酸鉀浸泡蔬菜、水果(guo)可達到消毒目的。在(zai)正常胃酸中僅生存4分(fen)鐘。

檢測方法

生化鑒定

能(neng)發酵葡萄(tao)糖(tang)(tang)(tang)(tang)、麥芽(ya)糖(tang)(tang)(tang)(tang)、甘露醇(chun)(chun)、蔗糖(tang)(tang)(tang)(tang)、半乳(ru)(ru)糖(tang)(tang)(tang)(tang)等產(chan)酸(suan)(suan)產(chan)氣，遲(chi)緩發酵乳(ru)(ru)糖(tang)(tang)(tang)(tang)。不分解(jie)阿拉伯糖(tang)(tang)(tang)(tang)、水楊素、衛矛醇(chun)(chun)、鼠李糖(tang)(tang)(tang)(tang)、木糖(tang)(tang)(tang)(tang)、側金(jin)盞(zhan)花醇(chun)(chun)和肌醇(chun)(chun)。氧化(hua)酶、明膠液化(hua)試(shi)驗陽性。V-P試(shi)驗大(da)(da)多(duo)數EL-Tor生物型(xing)陽性，而古典生物型(xing)大(da)(da)多(duo)為陰性。霍亂弧菌(jun)能(neng)分解(jie)色氨酸(suan)(suan)產(chan)生吲哚，同時能(neng)還原硝酸(suan)(suan)鹽(yan)(yan)為亞硝酸(suan)(suan)鹽(yan)(yan)。因(yin)此當霍亂弧菌(jun)培養(yang)在含硝酸(suan)(suan)鹽(yan)(yan)的蛋白(bai)胨(dong)水中，所(suo)產(chan)生的亞硝酸(suan)(suan)鹽(yan)(yan)與吲哚結合成亞硝基吲哚，滴(di)加濃(nong)硫酸(suan)(suan)即(ji)出現薔薇色，稱(cheng)為霍亂紅試(shi)驗陽性。

血清凝集法

根(gen)據弧(hu)菌(jun)O抗(kang)原不同，分成Ⅵ個(ge)血清(qing)群，第Ⅰ群包(bao)括霍亂弧(hu)菌(jun)的兩個(ge)生物型(xing)(xing)(xing)(xing)。第Ⅰ群A、B、C三種抗(kang)原成份可將(jiang)霍亂弧(hu)菌(jun)分為三個(ge)血清(qing)型(xing)(xing)(xing)(xing)：含AC者(zhe)為原型(xing)(xing)(xing)(xing)（又(you)稱稻葉型(xing)(xing)(xing)(xing)），含AB者(zhe)為異型(xing)(xing)(xing)(xing)（又(you)稱小川型(xing)(xing)(xing)(xing)），A、B、C均有者(zhe)稱中間(jian)型(xing)(xing)(xing)(xing)（彥島(dao)型(xing)(xing)(xing)(xing)）。

1992年(nian)10月在印度(du)東南(nan)部又(you)發現了一個引起(qi)霍(huo)(huo)亂流行的(de)(de)(de)新(xin)血(xue)清(qing)型(xing)菌(jun)株（0139），它引起(qi)的(de)(de)(de)霍(huo)(huo)亂在臨床(chuang)表(biao)現及傳播(bo)方(fang)式上與古典型(xing)霍(huo)(huo)亂完(wan)全相(xiang)同(tong)，但不(bu)能(neng)被01群霍(huo)(huo)亂弧菌(jun)診斷血(xue)清(qing)所凝(ning)集，抗(kang)01群的(de)(de)(de)抗(kang)血(xue)清(qing)對0139菌(jun)株無保護性(xing)免疫。在水中的(de)(de)(de)存活時(shi)間較01群霍(huo)(huo)亂弧菌(jun)長，因(yin)而(er)有(you)可能(neng)成為引起(qi)世(shi)界性(xing)霍(huo)(huo)亂流行的(de)(de)(de)新(xin)菌(jun)株，推(tui)薦使用天津(jin)生(sheng)物芯片生(sheng)產的(de)(de)(de)霍(huo)(huo)亂弧菌(jun)診斷血(xue)清(qing)。

聚合酶鏈反應法

1,普通聚合酶鏈反應法

核酸擴(kuo)增(zeng)技術，即聚合酶(mei)鏈式反應（polymerase chainreaction，PCR），其(qi)基(ji)(ji)本原(yuan)(yuan)理是設計、合成兩條寡(gua)核苷酸，作(zuo)為引(yin)物，對(dui)應于待測病(bing)原(yuan)(yuan)微生(sheng)物某一段特異(yi)性(xing)序列的(de)(de)兩端，然(ran)后在(zai)體(ti)外模擬DNA體(ti)內(nei)復制(zhi)的(de)(de)過(guo)程反復擴(kuo)增(zeng)，使靶(ba)序列放大(da)(da)上萬倍甚(shen)至上百萬倍而被檢(jian)測出來(lai)。一般(ban)選擇霍亂腸(chang)毒素(cholera enterotoxin，CT)基(ji)(ji)因(yin)(yin)ctx的(de)(de)保守序列作(zuo)為靶(ba)基(ji)(ji)因(yin)(yin)。一些非(fei)產(chan)毒株(如環境來(lai)源(yuan)的(de)(de)菌(jun)株)有可(ke)能通過(guo)基(ji)(ji)因(yin)(yin)水平轉移獲得毒力(li)基(ji)(ji)因(yin)(yin)成為產(chan)毒株，若(ruo)僅檢(jian)測ctx基(ji)(ji)因(yin)(yin)容易造成漏(lou)檢(jian)。因(yin)(yin)此，霍亂弧(hu)菌(jun)的(de)(de)其(qi)他重要基(ji)(ji)因(yin)(yin)，如毒力(li)協同調節菌(jun)毛(mao)A基(ji)(ji)因(yin)(yin)(tcp A)、o抗原(yuan)(yuan)基(ji)(ji)因(yin)(yin)(rfb)、外膜蛋白基(ji)(ji)因(yin)(yin)(omp)以及毒力(li)表達調控基(ji)(ji)因(yin)(yin)(toxR)等也(ye)被選用為PcR的(de)(de)靶(ba)基(ji)(ji)因(yin)(yin)，這大(da)(da)大(da)(da)提高(gao)了(le)檢(jian)測的(de)(de)特異(yi)度(du).

2,多重PCR法

與常規PCR相比，多(duo)(duo)重PCR一(yi)次反應可檢測(ce)多(duo)(duo)個基(ji)因(yin)(yin)(yin)(yin)，節省了(le)時間和成(cheng)本。國內、外許(xu)多(duo)(duo)學者選用霍亂弧菌的(de)毒素基(ji)因(yin)(yin)(yin)(yin)ctx、tcp與其他基(ji)因(yin)(yin)(yin)(yin)如ompW、rfb、hly進(jin)行(xing)組合，作為共(gong)同(tong)的(de)靶基(ji)因(yin)(yin)(yin)(yin)，克服了(le)由于毒力基(ji)因(yin)(yin)(yin)(yin)特異度不夠高而造成(cheng)的(de)假陽性。多(duo)(duo)重PcR同(tong)時可準確區分(fen)不同(tong)血清型的(de)霍亂弧菌和快速鑒定其是否(fou)為產毒株，可謂一(yi)舉多(duo)(duo)得，大大提高了(le)檢測(ce)效率。

3.熒光定(ding)量PCR法

熒光定(ding)量(liang)PCR自動(dong)化程度高(gao)、特異性強、無交叉污染，在霍亂弧菌的(de)快速診斷(duan)中得到廣(guang)泛(fan)(fan)應(ying)用(yong)(yong)。尤其是近年來，隨著引物與(yu)探針的(de)設計更精(jing)確(que)、多(duo)通道熒光PCR儀(yi)的(de)開(kai)發與(yu)廣(guang)泛(fan)(fan)使用(yong)(yong)，多(duo)重熒光定(ding)量(liang)PCR技術(shu)日臻成熟，并以其高(gao)通量(liang)、低成本、高(gao)效(xiao)率等優(you)點而廣(guang)泛(fan)(fan)應(ying)用(yong)(yong)于(yu)病毒、細菌、真菌等多(duo)種(zhong)病原體的(de)快速檢測，成為(wei)應(ying)用(yong)(yong)的(de)熱點.

基因芯片

與PCR方法相比，基因(yin)芯片(pian)技術能同時獲得(de)更多病(bing)原(yuan)學、生物(wu)學方面(mian)(mian)的信息，從而更為全面(mian)(mian)地分(fen)析、掌(zhang)握(wo)病(bing)原(yuan)微生物(wu)的特征(zheng)。Vora等運(yun)用基因(yin)芯片(pian)技術對多種致病(bing)性弧菌(jun)的毒力、毒素(su)、耐(nai)藥基因(yin)及潛在的毒力基因(yin)進行全面(mian)(mian)分(fen)析，對掌(zhang)握(wo)這(zhe)些細菌(jun)的致病(bing)性及進行有效預(yu)防、控制(zhi)等具有重要意義。但(dan)基因(yin)芯片(pian)成(cheng)本(ben)較高，距(ju)離推廣應用尚(shang)需時間等待(dai)。

癥狀

人類在自然(ran)情況下是霍亂(luan)弧(hu)菌(jun)的唯一易感者(zhe)，主要通過(guo)污染的水源或飲食物經口(kou)傳(chuan)染。在一定條件下，霍亂(luan)弧(hu)菌(jun)進(jin)入小腸(chang)(chang)(chang)后，依靠(kao)鞭毛(mao)的運動，穿過(guo)粘(zhan)膜表(biao)面(mian)的粘(zhan)液層，可能藉菌(jun)毛(mao)作用(yong)(yong)粘(zhan)附于腸(chang)(chang)(chang)壁上(shang)(shang)皮細胞上(shang)(shang)，在腸(chang)(chang)(chang)粘(zhan)膜表(biao)面(mian)迅速繁(fan)殖(zhi)，經過(guo)短暫的潛伏期后便急驟發病。該菌(jun)不侵入腸(chang)(chang)(chang)上(shang)(shang)皮細胞和(he)腸(chang)(chang)(chang)腺(xian)，也不侵入血流，僅在局部(bu)繁(fan)殖(zhi)和(he)產生霍亂(luan)腸(chang)(chang)(chang)毒素，此毒素作用(yong)(yong)于粘(zhan)膜上(shang)(shang)皮細胞與(yu)腸(chang)(chang)(chang)腺(xian)使腸(chang)(chang)(chang)液過(guo)度分泌，從而患者(zhe)出現上(shang)(shang)吐下瀉，瀉出物呈(cheng)“米泔水樣”并含大量弧(hu)菌(jun)，此為本病典(dian)型的特(te)征(zheng)。

霍亂腸(chang)毒素本(ben)質是蛋(dan)白(bai)(bai)質，不(bu)耐熱(re)，56℃經30分鐘(zhong)，即可破(po)壞其(qi)活性(xing)。對(dui)蛋(dan)白(bai)(bai)酶(mei)敏感而對(dui)胰蛋(dan)白(bai)(bai)酶(mei)抵(di)抗。該毒素屬(shu)外毒素，具有很強(qiang)(qiang)的(de)抗原性(xing)。現已能(neng)將該毒素高(gao)度精制(zhi)成晶狀，仍(reng)保(bao)持極(ji)強(qiang)(qiang)的(de)生物學活性(xing)。

霍(huo)亂(luan)腸(chang)毒素致(zhi)病機理(li)如下(xia)：毒素由(you)(you)(you)A和(he)(he)B兩(liang)個亞(ya)單(dan)(dan)(dan)(dan)位(wei)(wei)組成，A亞(ya)單(dan)(dan)(dan)(dan)位(wei)(wei)又分為(wei)(wei)A1和(he)(he)A2兩(liang)個肽(tai)鏈(lian)，兩(liang)者依靠二硫(liu)鏈(lian)連接。A亞(ya)單(dan)(dan)(dan)(dan)位(wei)(wei)為(wei)(wei)毒性(xing)單(dan)(dan)(dan)(dan)位(wei)(wei)，其中(zhong)A1肽(tai)鏈(lian)具有酶活(huo)性(xing)，A2肽(tai)鏈(lian)與(yu)B亞(ya)單(dan)(dan)(dan)(dan)位(wei)(wei)結(jie)合參(can)與(yu)受(shou)(shou)體(ti)介導的(de)內(nei)吞作用中(zhong)的(de)轉位(wei)(wei)作用。B亞(ya)單(dan)(dan)(dan)(dan)位(wei)(wei)為(wei)(wei)結(jie)合單(dan)(dan)(dan)(dan)位(wei)(wei)，能(neng)特異地(di)識別腸(chang)上皮細(xi)胞(bao)(bao)上的(de)受(shou)(shou)體(ti)。1個毒素分子(zi)由(you)(you)(you)一個A亞(ya)單(dan)(dan)(dan)(dan)位(wei)(wei)和(he)(he)4℃6個B亞(ya)單(dan)(dan)(dan)(dan)位(wei)(wei)組成多聚體(ti)。霍(huo)亂(luan)腸(chang)毒素作用于腸(chang)細(xi)胞(bao)(bao)膜表面(mian)上的(de)受(shou)(shou)體(ti)（由(you)(you)(you)神經節苷脂GM1組成），其B亞(ya)單(dan)(dan)(dan)(dan)位(wei)(wei)與(yu)受(shou)(shou)體(ti)結(jie)合，使(shi)毒素分子(zi)變構(gou)，A精致(zhi)單(dan)(dan)(dan)(dan)位(wei)(wei)進入(ru)細(xi)胞(bao)(bao)，A1肽(tai)鏈(lian)活(huo)化，進而激(ji)活(huo)腺苷環化酶（AC），使(shi)三磷酸(suan)(suan)腺苷（ATP）轉化為(wei)(wei)環磷酸(suan)(suan)腺苷（cAMP），細(xi)胞(bao)(bao)內(nei)cAMP濃度增高，導致(zhi)腸(chang)粘膜細(xi)胞(bao)(bao)分泌(mi)功能(neng)大(da)為(wei)(wei)亢進，使(shi)大(da)量體(ti)液和(he)(he)電解質進入(ru)腸(chang)腔(qiang)而發(fa)生(sheng)劇烈吐瀉，由(you)(you)(you)于大(da)量脫水和(he)(he)失(shi)鹽，可發(fa)生(sheng)代謝性(xing)酸(suan)(suan)中(zhong)毒，血循(xun)環衰竭，甚(shen)至休克或死亡。

致病因素

霍亂弧(hu)菌(jun)產(chan)生腸毒(du)(du)素，是(shi)一種劇烈的致泄毒(du)(du)素。該(gai)毒(du)(du)素作(zuo)用于腸壁促使腸黏膜(mo)細(xi)胞極度(du)分泌從而使水和鹽過量排出(chu)，導致嚴(yan)重脫水虛脫；進而引(yin)起代謝性酸中(zhong)毒(du)(du)和急性腎功能衰竭。

所致疾病

引起(qi)烈性(xing)腸道傳(chuan)染病霍亂，為我國(guo)的(de)甲類法(fa)定傳(chuan)染病。在(zai)自(zi)然情(qing)況(kuang)下(xia)，人(ren)類是霍亂弧菌的(de)唯(wei)一易(yi)感者(zhe)。在(zai)地方性(xing)流行區，除病人(ren)外，無癥狀(zhuang)感染者(zhe)也(ye)是重要傳(chuan)染源。高比例(li)的(de)無癥狀(zhuang)攜帶者(zhe)有(you)利于疾病的(de)擴(kuo)散，根據衛生(sheng)狀(zhuang)況(kuang)，無癥狀(zhuang)攜帶者(zhe)和(he)病人(ren)的(de)比率(lv)波動在(zai)10:1～100:1之間(jian)。

傳播途徑主(zhu)要(yao)是通過污染(ran)(ran)的(de)水(shui)源或未煮熟(shu)的(de)食(shi)物(wu)(wu)如(ru)海產品、蔬菜經口攝入。居住擁擠，衛生狀況差，特別(bie)是公用水(shui)源是造(zao)成暴發流(liu)行的(de)重要(yao)因素(su)。人與人之間的(de)直接傳播不常見。在正常胃(wei)酸條件(jian)下，如(ru)以水(shui)為(wei)(wei)載體，需飲入大于1010個(ge)細菌(jun)方能(neng)(neng)引(yin)起感(gan)染(ran)(ran)；如(ru)以食(shi)物(wu)(wu)作為(wei)(wei)載體，由于食(shi)物(wu)(wu)高強(qiang)度的(de)緩(huan)沖能(neng)(neng)力，感(gan)染(ran)(ran)劑量可(ke)減少(shao)到102～104個(ge)細菌(jun)。任何能(neng)(neng)降低胃(wei)中(zhong)酸度的(de)藥(yao)物(wu)(wu)或其(qi)他原(yuan)因，都(dou)可(ke)使人對霍(huo)亂弧菌(jun)感(gan)染(ran)(ran)的(de)敏(min)感(gan)性增加。

病(bing)菌(jun)到達(da)小(xiao)(xiao)腸后(hou)，粘(zhan)附于腸粘(zhan)膜表(biao)面并迅速繁(fan)殖，不侵入腸上皮細胞和腸腺，細菌(jun)在繁(fan)殖過程(cheng)中產生(sheng)(sheng)腸毒素而致(zhi)(zhi)病(bing)。O1群(qun)(qun)霍亂(luan)弧(hu)(hu)菌(jun)感染(ran)可(ke)從無(wu)癥(zheng)狀或(huo)輕型(xing)(xing)腹瀉(xie)(xie)到嚴(yan)(yan)重(zhong)的(de)致(zhi)(zhi)死(si)性腹瀉(xie)(xie)。在古(gu)典生(sheng)(sheng)物(wu)型(xing)(xing)霍亂(luan)弧(hu)(hu)菌(jun)感染(ran)中，無(wu)癥(zheng)狀者可(ke)達(da)60%，在El Tor生(sheng)(sheng)物(wu)型(xing)(xing)感染(ran)中，無(wu)癥(zheng)狀者可(ke)達(da)75%。霍亂(luan)弧(hu)(hu)菌(jun)古(gu)典生(sheng)(sheng)物(wu)型(xing)(xing)所(suo)致(zhi)(zhi)疾病(bing)較El Tor生(sheng)(sheng)物(wu)型(xing)(xing)嚴(yan)(yan)重(zhong)。典型(xing)(xing)病(bing)例(li)一般在吞食(shi)細菌(jun)后(hou)2～3天突然出現劇烈腹瀉(xie)(xie)和嘔吐，多(duo)無(wu)腹痛，每(mei)天大(da)(da)便數次(ci)或(huo)數十次(ci)。在疾病(bing)最嚴(yan)(yan)重(zhong)時，每(mei)小(xiao)(xiao)時失(shi)水(shui)(shui)量可(ke)高(gao)(gao)達(da)1升，排出由粘(zhan)膜、上皮細胞和大(da)(da)量弧(hu)(hu)菌(jun)構成的(de)如米(mi)泔水(shui)(shui)樣的(de)腹瀉(xie)(xie)物(wu)。由于大(da)(da)量水(shui)(shui)分和電解質喪(sang)失(shi)而導致(zhi)(zhi)失(shi)水(shui)(shui)，代謝性酸中毒，低堿血癥(zheng)和低容(rong)量性休克及心力不齊和腎(shen)衰竭，如未經治療處理，病(bing)人(ren)可(ke)在12～24小(xiao)(xiao)時內死(si)亡，死(si)亡率高(gao)(gao)達(da)25%～60%，但若及時給(gei)病(bing)人(ren)補充液體及電解質，死(si)亡率可(ke)小(xiao)(xiao)于1%。O139群(qun)(qun)霍亂(luan)弧(hu)(hu)菌(jun)感染(ran)比O1群(qun)(qun)嚴(yan)(yan)重(zhong)，表(biao)現為嚴(yan)(yan)重(zhong)脫水(shui)(shui)和高(gao)(gao)死(si)亡率，且成人(ren)病(bing)例(li)所(suo)占(zhan)比例(li)較高(gao)(gao)，大(da)(da)于70%，而O1群(qun)(qun)霍亂(luan)弧(hu)(hu)菌(jun)流行高(gao)(gao)峰期，兒童病(bing)例(li)約占(zhan)60%。

病愈后一些(xie)患(huan)者(zhe)(zhe)可短(duan)期帶菌，一般不超過3～4周，真正(zheng)的(de)慢性(xing)帶菌者(zhe)(zhe)罕見。病菌主要存在于膽囊中(zhong)。

免疫性

患過(guo)霍亂的(de)(de)人(ren)可(ke)獲得牢固的(de)(de)免疫(yi)(yi)力，再感染(ran)者少見(jian)。病(bing)人(ren)在發病(bing)數日，血液中即(ji)可(ke)出現特異性抗體，7℃14天抗體滴(di)度達高峰，隨后(hou)(hou)逐漸下降至較低水平，但能持續約3個月之外。病(bing)后(hou)(hou)小腸內可(ke)出現分泌(mi)型lgA。體液抗體與(yu)免疫(yi)(yi)的(de)(de)關系(xi)尚不清楚(chu)，一般(ban)認為局部SlgA可(ke)在腸粘膜與(yu)病(bing)菌(jun)之間形(xing)成(cheng)免疫(yi)(yi)屏障，有阻斷(duan)粘附和中和毒素的(de)(de)作用。

診斷

由(you)于(yu)霍亂流(liu)行迅(xun)速(su)(su)，且在流(liu)行期間發病(bing)率及死亡率均高，危害極大(da)，因此早期迅(xun)速(su)(su)和(he)正確的診斷(duan)，對治療和(he)預防(fang)本病(bing)的蔓延有重大(da)意義。

直接鏡檢

采取病人“米(mi)泔水樣”大(da)便或(huo)嘔吐(tu)物。鏡檢（涂片染(ran)色(se)及懸滴法檢查）觀(guan)察細菌形(xing)態，動力特征(zheng)。

細菌分離培養

可將材(cai)料接種至堿性蛋白(bai)胨水37℃培(pei)養6～8小時后，取生(sheng)長(chang)物(wu)作(zuo)形態(tai)觀察，并轉種于堿性平板作(zuo)分離培(pei)養，取可疑菌落作(zuo)玻片凝(ning)集，陽性者再作(zuo)生(sheng)化反應(ying)及生(sheng)物(wu)型別鑒定(ding)試驗。

特異性制動試驗

取檢材或新鮮堿性蛋白胨水培養物(wu)一滴，置于載玻(bo)片(pian)上，再加霍亂弧菌多(duo)價診斷血(xue)清，加蓋(gai)玻(bo)片(pian)，用暗(an)視野鏡觀察(cha)，3分鐘內運動被抑制的(de)即為陽(yang)性，此(ci)法優點(dian)是(shi)快(kuai)速而特異操作簡便，但必須有數量較多(duo)的(de)弧菌才檢出。

免疫熒光試驗

除一般(ban)免疫熒(ying)光法(fa)外，還可用熒(ying)光菌球(qiu)法(fa)檢查。

特征

霍亂弧菌所致的(de)霍亂，為(wei)烈性腸道傳染病，曾在(zai)世界上發生過幾次大流行，至今仍(reng)未平(ping)息，因此，霍亂被列為(wei)國境檢疫的(de)傳染病。

霍亂(luan)(luan)弧(hu)菌有兩(liang)個生物型(xing)，一為古(gu)典生物型(xing)，一為愛爾(er)托生物型(xing)，這兩(liang)個生物型(xing)在形態及血清(qing)學(xue)性狀方面幾(ji)乎相同，可作第四組霍亂(luan)(luan)噬菌體裂解試驗，多粘菌素B敏感試驗，雞紅細胞凝集(ji)試驗，V-P(服-潑)二(er)氏(shi)試驗等試驗加(jia)以鑒(jian)別(bie)：

本菌(jun)(jun)是需氧菌(jun)(jun)，營養(yang)(yang)要(yao)求不高，在(zai)普通培養(yang)(yang)基上生(sheng)長(chang)良好。霍亂(luan)弧菌(jun)(jun)具有耐堿(jian)性，故常(chang)用(yong)(yong)堿(jian)性(pH值8.4～9.2)培養(yang)(yang)基選(xuan)擇性分(fen)(fen)離培養(yang)(yang)本菌(jun)(jun)。在(zai)堿(jian)性瓊脂平板上生(sheng)長(chang)后，呈水滴樣光(guang)滑型(xing)菌(jun)(jun)落，而在(zai)堿(jian)性蛋(dan)白胨(dong)液體培養(yang)(yang)基中(zhong)，生(sheng)長(chang)迅速(su)，培養(yang)(yang)6～8小時即可(ke)(ke)形成菌(jun)(jun)膜，利(li)用(yong)(yong)這(zhe)一特點，可(ke)(ke)以(yi)作快速(su)增菌(jun)(jun)，進行鑒(jian)定。在(zai)慶(qing)大霉素瓊脂平板上，生(sheng)長(chang)快，8～10小時能(neng)(neng)生(sheng)長(chang)出小菌(jun)(jun)落，可(ke)(ke)供(gong)鑒(jian)定用(yong)(yong)。霍亂(luan)弧菌(jun)(jun)能(neng)(neng)分(fen)(fen)解蔗(zhe)糖、甘露醇，產(chan)酸不產(chan)氣，不能(neng)(neng)分(fen)(fen)解阿拉伯膠(jiao)糖。

霍(huo)亂(luan)(luan)弧菌在(zai)未(wei)經處理的糞便中，可存(cun)(cun)活(huo)(huo)(huo)數天(tian)(tian)；在(zai)冰箱內(nei)的牛奶、鮮(xian)(xian)肉和魚蝦(xia)水(shui)產品中存(cun)(cun)活(huo)(huo)(huo)時(shi)間分(fen)別(bie)為(wei)2～4周(zhou)、1周(zhou)和1～3周(zhou)；在(zai)室溫(wen)下存(cun)(cun)放的新鮮(xian)(xian)蔬菜中，可存(cun)(cun)活(huo)(huo)(huo)1～5天(tian)(tian)；在(zai)砧板和布(bu)上可存(cun)(cun)活(huo)(huo)(huo)相當(dang)長(chang)時(shi)間；在(zai)玻璃、瓷器、塑料和金屬(shu)上存(cun)(cun)活(huo)(huo)(huo)時(shi)間不(bu)超過2天(tian)(tian)。霍(huo)亂(luan)(luan)弧菌古典(dian)生(sheng)(sheng)物型在(zai)外界環境中生(sheng)(sheng)存(cun)(cun)能(neng)力不(bu)強，而(er)愛(ai)爾(er)托生(sheng)(sheng)物型抵(di)抗力較強，在(zai)河水(shui)、井水(shui)、池塘水(shui)和海水(shui)中可存(cun)(cun)活(huo)(huo)(huo)1～3周(zhou)，甚至更長(chang)，有時(shi)在(zai)局部自(zi)然水(shui)中也能(neng)越冬。愛(ai)爾(er)托生(sheng)(sheng)物型弧菌可粘附于(yu)海洋(yang)甲(jia)殼類生(sheng)(sheng)物表面，分(fen)泌(mi)甲(jia)殼酶(mei)，分(fen)解甲(jia)殼作(zuo)為(wei)營養而(er)長(chang)期存(cun)(cun)活(huo)(huo)(huo)，如(ru)愛(ai)爾(er)托生(sheng)(sheng)物型弧菌被(bei)人(ren)工飼(si)養的泥鰍、鱔魚吞食后，可在(zai)其體內(nei)生(sheng)(sheng)長(chang)繁(fan)殖(zhi)，然后排入水(shui)中。

霍亂弧菌(jun)對熱(re)、干燥、日光及一般消毒劑(ji)均很敏感，經干燥2小(xiao)時或加熱(re)55℃10分鐘即可(ke)死(si)亡，煮沸(fei)立即死(si)亡；對酸(suan)(suan)敏感，在(zai)正常(chang)胃酸(suan)(suan)中僅能存活4分鐘，接觸1∶5000～1∶10000鹽酸(suan)(suan)或硫酸(suan)(suan)、1∶2000～1∶3000升(sheng)汞或1∶500000高(gao)錳酸(suan)(suan)鉀，數分鐘即被殺滅，在(zai)0.1%漂白粉(fen)中10分鐘內即可(ke)死(si)亡。氯化鈉(na)的濃度高(gao)于4%或蔗糖濃度在(zai)5%以上(shang)的食物(wu)、香(xiang)料、醋及酒等，均不利于霍亂弧菌(jun)的生存。

發病機制

正常胃(wei)酸可(ke)殺滅霍亂(luan)弧菌(jun)，當(dang)胃(wei)酸分泌缺(que)乏或低(di)下，或入侵(qin)的(de)霍亂(luan)弧菌(jun)數量較(jiao)多(duo)，未(wei)被殺滅的(de)弧菌(jun)就進入小(xiao)腸(chang)(chang)，在堿性腸(chang)(chang)液內迅速繁殖，并通過粘液對(dui)細菌(jun)的(de)趨化吸(xi)引作(zuo)用、細菌(jun)鞭毛活動及弧菌(jun)粘蛋白溶解酶(mei)和(he)粘附(fu)素等的(de)作(zuo)用，粘附(fu)于小(xiao)腸(chang)(chang)粘膜的(de)上皮細胞表面，并在此(ci)大量繁殖。

此菌產生強烈的外毒素，即霍亂腸毒素，由A亞單位和B亞單位組成。B亞單位與該處粘膜上皮細胞表面受體——神經節苷脂結合，A、B兩種亞單位解離，A亞單位穿過細胞膜進入細胞內，激活腺苷酸環化酶(AC)，使細胞內三磷酸腺苷(ATP)轉化為環磷酸腺苷(cAMP)，使細胞內環磷酸腺苷含量提高，促使一系列酶反應(ying)加速進(jin)行(xing)，導致(zhi)空腸(chang)到(dao)回腸(chang)部腺細胞分(fen)泌(mi)(mi)功(gong)能亢進(jin)，引(yin)起大(da)(da)量液體及(ji)血(xue)漿中的鈉(na)、鉀(jia)、氯等離子進(jin)入腸(chang)腔(qiang)，由(you)(you)于(yu)(yu)(yu)分(fen)泌(mi)(mi)功(gong)能超過腸(chang)道再吸收能力，從(cong)而造(zao)成嚴重的腹瀉(xie)及(ji)嘔吐(tu)；由(you)(you)于(yu)(yu)(yu)膽汁分(fen)泌(mi)(mi)減(jian)(jian)少，且腸(chang)腔(qiang)中有(you)大(da)(da)量水(shui)、粘液及(ji)電(dian)解質，故排瀉(xie)物(wu)呈白色“米(mi)泔(gan)水(shui)”樣；由(you)(you)于(yu)(yu)(yu)劇(ju)烈吐(tu)瀉(xie)，導致(zhi)脫水(shui)和電(dian)解質丟失，引(yin)起缺(que)(que)鉀(jia)、缺(que)(que)鈉(na)及(ji)肌肉痙攣(luan)；由(you)(you)于(yu)(yu)(yu)碳酸氫根(gen)離子丟失，酸性(xing)(xing)代謝(xie)(xie)物(wu)在體內(nei)(nei)蓄積，引(yin)起代謝(xie)(xie)性(xing)(xing)酸中毒；由(you)(you)于(yu)(yu)(yu)有(you)效血(xue)容量急劇(ju)減(jian)(jian)少，血(xue)液濃縮，導致(zhi)尿量減(jian)(jian)少、血(xue)壓(ya)下降(jiang)，甚(shen)至休(xiu)克；由(you)(you)于(yu)(yu)(yu)腎(shen)缺(que)(que)血(xue)、缺(que)(que)氧，細胞內(nei)(nei)缺(que)(que)鉀(jia)，導致(zhi)腎(shen)小管上皮細胞變性(xing)(xing)、壞死，造(zao)成急性(xing)(xing)腎(shen)功(gong)能衰竭。

主(zhu)要病變(bian)(bian)均(jun)(jun)由嚴(yan)重脫水引起，臨床(chuang)可見(jian)指紋皺縮，皮(pi)下組織及(ji)肌(ji)肉干(gan)癟。心、肝、脾等(deng)臟(zang)器(qi)均(jun)(jun)見(jian)縮小。內(nei)臟(zang)漿膜(mo)(mo)無光澤。腸(chang)(chang)腔(qiang)高(gao)度擴(kuo)張(zhang)、腸(chang)(chang)內(nei)充(chong)(chong)滿泔(gan)水樣液體，腸(chang)(chang)粘膜(mo)(mo)松弛(chi)，但粘膜(mo)(mo)上皮(pi)完整，無潰瘍。膽囊(nang)內(nei)充(chong)(chong)滿粘稠(chou)膽汁。腎小球及(ji)間質(zhi)的毛(mao)細管擴(kuo)張(zhang)，腎小管腫(zhong)脹、變(bian)(bian)性(xing)及(ji)壞死。其他(ta)臟(zang)器(qi)也有出血(xue)、變(bian)(bian)性(xing)等(deng)變(bian)(bian)化(hua)。

防治原則

必(bi)須貫徹預防(fang)為主的方針(zhen)，作好對外(wai)交往及入(ru)口的檢疫(yi)工作，嚴(yan)防(fang)本菌傳入(ru)，此外(wai)應加(jia)強(qiang)水、糞管理(li)，注意飲食衛生(sheng)。對病人要嚴(yan)格隔離，必(bi)要時實行疫(yi)區封鎖，以免疾病擴散蔓延。

人(ren)群(qun)的(de)(de)菌(jun)苗預防(fang)(fang)接(jie)種(zhong)(zhong)，可獲良好效果，現用(yong)加(jia)熱或化學藥(yao)品(pin)殺死(si)的(de)(de)古典型(xing)霍亂(luan)(luan)菌(jun)苗皮下接(jie)種(zhong)(zhong)，能降(jiang)低(di)發(fa)病率。這種(zhong)(zhong)苗菌(jun)對EL-Tor型(xing)霍亂(luan)(luan)弧菌(jun)感染也有保(bao)護(hu)作用(yong)，但持續時(shi)間短，僅(jin)3-6個月。目前有新型(xing)的(de)(de)口服rBS/WC疫苗（重組B亞單位/霍亂(luan)(luan)菌(jun)體疫苗）可用(yong)于(yu)(yu)預防(fang)(fang)霍亂(luan)(luan)，2000年WHO關于(yu)(yu)霍亂(luan)(luan)疫苗的(de)(de)意見(jian)書提出，“應考慮對有罹患霍亂(luan)(luan)危險性(xing)的(de)(de)人(ren)群(qun)使用(yong)rBS/WC疫苗”。該疫苗對霍亂(luan)(luan)的(de)(de)保(bao)護(hu)期為3年，國(guo)內有上海聯(lian)合賽(sai)爾生物(wu)工程(cheng)有限公司生產rBS/WC疫苗。

治(zhi)療主要(yao)為及時補充(chong)液體和電解質及應用抗菌藥(yao)物如鏈霉(mei)素(su)(su)、氯霉(mei)素(su)(su)、強(qiang)力霉(mei)素(su)(su)、復方SMZ-TMP等。