一、石蠟切片厚度一般為多少

石蠟切片厚度(du)通(tong)常為4～7微米，切出(chu)一片接(jie)一片的(de)蠟帶(dai)，用毛筆輕托輕放在紙上(shang)。這(zhe)個(ge)厚度(du)通(tong)常可(ke)以(yi)滿足大(da)部(bu)分實(shi)驗室(shi)的(de)需求。如果需要更薄的(de)切片厚度(du)，則可(ke)以(yi)使用微切機進行切割(ge)，厚度(du)可(ke)達1-2微米，但(dan)這(zhe)種切片會更脆弱(ruo)，操作難度(du)更大(da)。

二、石蠟切片制作過程是什么

石蠟切片的制(zhi)作步驟如(ru)下：

1、組織包埋

（1）乙醇脫水：組(zu)織(zhi)經不同濃度(du)的乙醇溶液進行逐級(ji)脫水70％、80％、90％、95％、100％、100％，各(ge)級(ji)乙醇 40min（注意：骨性(xing)及鈣化(hua)組(zu)織(zhi)需在JYBL-Ⅱ脫鈣液中浸泡24h，待組(zu)織(zhi)軟化(hua)后(hou)再進行乙醇脫水步驟）。

（2）透明：組(zu)織依次(ci)浸泡于三個二甲苯中，每缸各1h。

（3）浸蠟：組織依次浸泡于(yu)三個(ge)石蠟缸(gang)中，每缸(gang)各1h。

（4）包埋：將液態的石(shi)蠟倒(dao)入模具(ju)盒中，再(zai)將浸好蠟的組(zu)織(zhi)塊平放底部(bu)，注意切面方向朝(chao)下放置，待石(shi)蠟凝(ning)固后去掉(diao)包埋框，完(wan)全冷(leng)卻變硬后再(zai)修整蠟塊，組(zu)織(zhi)外圍的石(shi)蠟保留(liu)適中以便(bian)切片。

2、切片與貼片

切片制作將預冷的蠟塊固定在石蠟切片機上，使石蠟塊的切面與(yu)刀口(kou)成(cheng)平行方向，刀的傾斜度(du)通常15℃，轉(zhuan)動輪轉(zhuan)推進器，調節切片厚(hou)度(du)為4μm，切成(cheng)厚(hou)度(du)均勻(yun)的切片。

左手持毛筆，右手旋動切片機轉把，切片帶出來之后，用毛筆輕輕托起，再用鑷子輕鑷蠟片，以正面放入展片箱中，其水溫45℃左右。待攤平整后撈片。貼附切片左手持載玻片之一端，垂直入水去附貼切片，右手用鑷子輔助推動，附貼至玻片上的三分之二處。切(qie)片(pian)貼附后，放(fang)在(zai)空氣中稍晾干，放(fang)置(zhi)(zhi)65℃烤片(pian)機上烤1h，再放(fang)置(zhi)(zhi)烘箱內烘烤2h。

3、石蠟切片脫蠟至水

依(yi)次將石蠟切(qie)片放入二(er)甲苯Ⅰ10min-二(er)甲苯Ⅱ10min-二(er)甲苯Ⅲ10min-無(wu)水乙醇Ⅰ5min-無(wu)水乙醇Ⅱ5min-90%酒(jiu)(jiu)精(jing)(jing)5min-80%酒(jiu)(jiu)精(jing)(jing)5min-70%酒(jiu)(jiu)精(jing)(jing)5min-50%酒(jiu)(jiu)精(jing)(jing)5min梯度脫(tuo)蠟。

4、HE染色

石蠟切(qie)片(pian)入蘇木素染(ran)(ran)0.5-1分鐘min，自來水(shui)漂(piao)洗，1%鹽酸酒(jiu)精分化(hua)數(shu)秒(miao)，自來水(shui)漂(piao)洗，然(ran)后1%氨(an)水(shui)水(shui)溶(rong)液返(fan)藍1min，流(liu)水(shui)沖洗數(shu)秒(miao)，放入伊紅(hong)染(ran)(ran)液中染(ran)(ran)色數(shu)秒(miao)，流(liu)水(shui)漂(piao)洗。

5、脫水封片

石蠟切(qie)片(pian)依(yi)次(ci)放入(ru)75%乙醇2min-85%乙醇2min-無(wu)(wu)水(shui)乙醇5min-無(wu)(wu)水(shui)乙醇5min-二(er)甲苯(ben)5min透明(ming)，將切(qie)片(pian)從二(er)甲苯(ben)拿(na)出來中(zhong)性(xing)樹(shu)膠封片(pian)。