一、石蠟切片厚度一般為多少

石蠟切片厚(hou)(hou)(hou)度(du)通常為4～7微米，切出(chu)一片(pian)接一片(pian)的(de)蠟帶，用(yong)毛筆輕(qing)托輕(qing)放在紙上。這(zhe)個厚(hou)(hou)(hou)度(du)通常可以滿足(zu)大(da)部分實(shi)驗室的(de)需求。如果需要更(geng)薄的(de)切片(pian)厚(hou)(hou)(hou)度(du)，則可以使(shi)用(yong)微切機(ji)進(jin)行切割，厚(hou)(hou)(hou)度(du)可達1-2微米，但這(zhe)種切片(pian)會更(geng)脆(cui)弱，操作難度(du)更(geng)大(da)。

二、石蠟切片制作過程是什么

石(shi)蠟切(qie)片的制作(zuo)步驟如(ru)下(xia)：

1、組織包埋

（1）乙醇脫水：組(zu)織(zhi)經不同濃(nong)度的乙(yi)醇溶(rong)液進(jin)(jin)行逐級脫水70％、80％、90％、95％、100％、100％，各級乙(yi)醇 40min（注(zhu)意：骨性及鈣(gai)化組(zu)織(zhi)需在JYBL-Ⅱ脫鈣(gai)液中浸(jin)泡24h，待組(zu)織(zhi)軟(ruan)化后(hou)再進(jin)(jin)行乙(yi)醇脫水步(bu)驟）。

（2）透明：組織(zhi)依次浸泡于三個二甲苯中，每缸各1h。

（3）浸蠟：組織依次浸泡于三(san)個石蠟(la)缸中，每缸各(ge)1h。

（4）包埋：將液態(tai)的(de)石(shi)蠟(la)(la)倒入模(mo)具盒中，再(zai)(zai)將浸好蠟(la)(la)的(de)組(zu)織塊平放(fang)底部，注意切(qie)面(mian)方(fang)向朝下(xia)放(fang)置，待(dai)石(shi)蠟(la)(la)凝固后(hou)去(qu)掉包(bao)埋框，完(wan)全冷卻變硬后(hou)再(zai)(zai)修(xiu)整蠟(la)(la)塊，組(zu)織外圍(wei)的(de)石(shi)蠟(la)(la)保留適(shi)中以便切(qie)片。

2、切片與貼片

切片制作將預冷的蠟塊固定在石蠟切片機上，使石蠟塊的切面與刀(dao)口成(cheng)平行(xing)方向，刀(dao)的傾斜度(du)通常15℃，轉(zhuan)動(dong)輪轉(zhuan)推進器，調節切片厚度(du)為4μm，切成(cheng)厚度(du)均勻的切片。

左手持毛筆，右手旋動切片機轉把，切片帶出來之后，用毛筆輕輕托起，再用鑷子輕鑷蠟片，以正面放入展片箱中，其水溫45℃左右。待攤平整后撈片。貼附切片左手持載玻片之一端，垂直入水去附貼切片，右手用鑷子輔助推動，附貼至玻片上的三分之二處。切片貼附后，放在空氣中稍(shao)晾干，放置(zhi)(zhi)65℃烤(kao)片機上烤(kao)1h，再放置(zhi)(zhi)烘箱(xiang)內烘烤(kao)2h。

3、石蠟切片脫蠟至水

依(yi)次將石蠟(la)切片放入二(er)甲(jia)(jia)(jia)苯(ben)(ben)Ⅰ10min-二(er)甲(jia)(jia)(jia)苯(ben)(ben)Ⅱ10min-二(er)甲(jia)(jia)(jia)苯(ben)(ben)Ⅲ10min-無水(shui)乙醇(chun)Ⅰ5min-無水(shui)乙醇(chun)Ⅱ5min-90%酒(jiu)(jiu)精(jing)5min-80%酒(jiu)(jiu)精(jing)5min-70%酒(jiu)(jiu)精(jing)5min-50%酒(jiu)(jiu)精(jing)5min梯度脫(tuo)蠟(la)。

4、HE染色

石(shi)蠟切片入(ru)蘇木素染(ran)0.5-1分鐘min，自(zi)(zi)來(lai)水(shui)(shui)(shui)漂(piao)洗(xi)，1%鹽酸酒精分化數秒，自(zi)(zi)來(lai)水(shui)(shui)(shui)漂(piao)洗(xi)，然后1%氨水(shui)(shui)(shui)水(shui)(shui)(shui)溶(rong)液(ye)返藍1min，流水(shui)(shui)(shui)沖(chong)洗(xi)數秒，放入(ru)伊紅(hong)染(ran)液(ye)中染(ran)色數秒，流水(shui)(shui)(shui)漂(piao)洗(xi)。

5、脫水封片

石蠟切(qie)片依次放(fang)入75%乙(yi)醇(chun)2min-85%乙(yi)醇(chun)2min-無水乙(yi)醇(chun)5min-無水乙(yi)醇(chun)5min-二甲苯5min透明，將切(qie)片從二甲苯拿出來(lai)中性樹膠(jiao)封片。