一、石蠟切片厚度一般為多少

石蠟切片厚(hou)度(du)(du)通(tong)常(chang)(chang)為4～7微米，切出一片接一片的(de)蠟帶，用毛筆輕托輕放在紙上。這(zhe)個厚(hou)度(du)(du)通(tong)常(chang)(chang)可以滿足(zu)大部分實驗(yan)室的(de)需(xu)求。如果需(xu)要更薄(bo)的(de)切片厚(hou)度(du)(du)，則可以使用微切機進行切割(ge)，厚(hou)度(du)(du)可達(da)1-2微米，但這(zhe)種切片會更脆弱(ruo)，操作(zuo)難度(du)(du)更大。

二、石蠟切片制作過程是什么

石蠟切片的制作(zuo)步驟如(ru)下：

1、組織包埋

（1）乙醇脫水：組(zu)織經不同濃度的乙(yi)醇溶液進(jin)行(xing)逐(zhu)級(ji)脫水(shui)(shui)70％、80％、90％、95％、100％、100％，各(ge)級(ji)乙(yi)醇 40min（注意：骨性(xing)及鈣化組(zu)織需在(zai)JYBL-Ⅱ脫鈣液中浸泡24h，待(dai)組(zu)織軟化后再進(jin)行(xing)乙(yi)醇脫水(shui)(shui)步驟）。

（2）透明：組(zu)織依次浸泡于三(san)個二甲(jia)苯(ben)中，每缸各(ge)1h。

（3）浸蠟：組織依次(ci)浸泡(pao)于(yu)三個石蠟缸中(zhong)，每缸各1h。

（4）包埋：將(jiang)液態的石(shi)(shi)(shi)蠟(la)(la)(la)倒入模具盒中(zhong)(zhong)，再將(jiang)浸好蠟(la)(la)(la)的組(zu)織塊平放底部，注意切(qie)面方向朝下(xia)放置(zhi)，待(dai)石(shi)(shi)(shi)蠟(la)(la)(la)凝固后(hou)去掉包埋框，完全(quan)冷卻變硬后(hou)再修整蠟(la)(la)(la)塊，組(zu)織外圍的石(shi)(shi)(shi)蠟(la)(la)(la)保(bao)留(liu)適(shi)中(zhong)(zhong)以便切(qie)片。

2、切片與貼片

切片制作將預冷的蠟塊固定在石蠟切片機上，使石蠟塊的切面(mian)與(yu)刀口成平行方(fang)向(xiang)，刀的傾斜度通常(chang)15℃，轉動(dong)輪轉推進器(qi)，調節切片厚(hou)度為4μm，切成厚(hou)度均勻的切片。

左手持毛筆，右手旋動切片機轉把，切片帶出來之后，用毛筆輕輕托起，再用鑷子輕鑷蠟片，以正面放入展片箱中，其水溫45℃左右。待攤平整后撈片。貼附切片左手持載玻片之一端，垂直入水去附貼切片，右手用鑷子輔助推動，附貼至玻片上的三分之二處。切片(pian)(pian)貼(tie)附后，放(fang)在空氣中(zhong)稍晾干，放(fang)置65℃烤片(pian)(pian)機上(shang)烤1h，再(zai)放(fang)置烘(hong)箱內(nei)烘(hong)烤2h。

3、石蠟切片脫蠟至水

依(yi)次將石蠟(la)切片放入二(er)甲(jia)(jia)苯(ben)Ⅰ10min-二(er)甲(jia)(jia)苯(ben)Ⅱ10min-二(er)甲(jia)(jia)苯(ben)Ⅲ10min-無(wu)水乙醇Ⅰ5min-無(wu)水乙醇Ⅱ5min-90%酒(jiu)精5min-80%酒(jiu)精5min-70%酒(jiu)精5min-50%酒(jiu)精5min梯(ti)度(du)脫蠟(la)。

4、HE染色

石(shi)蠟切(qie)片(pian)入蘇木素染0.5-1分鐘min，自來(lai)水(shui)漂(piao)(piao)洗(xi)，1%鹽酸酒精分化數(shu)秒(miao)，自來(lai)水(shui)漂(piao)(piao)洗(xi)，然后1%氨水(shui)水(shui)溶液(ye)返藍1min，流水(shui)沖洗(xi)數(shu)秒(miao)，放入伊紅染液(ye)中染色數(shu)秒(miao)，流水(shui)漂(piao)(piao)洗(xi)。

5、脫水封片

石蠟切(qie)片(pian)(pian)依次放(fang)入(ru)75%乙醇(chun)2min-85%乙醇(chun)2min-無水乙醇(chun)5min-無水乙醇(chun)5min-二甲苯5min透明，將切(qie)片(pian)(pian)從二甲苯拿出(chu)來(lai)中(zhong)性(xing)樹膠封片(pian)(pian)。