一、石蠟切片厚度一般為多少

石蠟切片厚度(du)(du)通常為4～7微(wei)米(mi)，切(qie)出一片接一片的蠟帶，用(yong)毛筆(bi)輕托輕放(fang)在(zai)紙(zhi)上。這個厚度(du)(du)通常可(ke)以滿足(zu)大(da)部分實驗室的需求。如(ru)果需要(yao)更(geng)薄的切(qie)片厚度(du)(du)，則可(ke)以使(shi)用(yong)微(wei)切(qie)機進行切(qie)割，厚度(du)(du)可(ke)達(da)1-2微(wei)米(mi)，但(dan)這種切(qie)片會更(geng)脆(cui)弱，操(cao)作難度(du)(du)更(geng)大(da)。

二、石蠟切片制作過程是什么

石蠟切(qie)片的(de)制作步(bu)驟如下(xia)：

1、組織包埋

（1）乙醇脫水：組織經不同(tong)濃(nong)度的乙醇(chun)(chun)(chun)溶(rong)液進行逐(zhu)級(ji)脫(tuo)(tuo)水70％、80％、90％、95％、100％、100％，各級(ji)乙醇(chun)(chun)(chun) 40min（注意(yi)：骨性及鈣化(hua)組織需在JYBL-Ⅱ脫(tuo)(tuo)鈣液中浸泡(pao)24h，待組織軟化(hua)后再(zai)進行乙醇(chun)(chun)(chun)脫(tuo)(tuo)水步驟）。

（2）透明：組織依次浸泡于三(san)個二甲苯中(zhong)，每缸各1h。

（3）浸蠟：組織依次浸泡于三個石蠟缸(gang)中，每缸(gang)各(ge)1h。

（4）包埋：將液態的(de)石(shi)(shi)蠟倒入模(mo)具盒中(zhong)，再將浸(jin)好(hao)蠟的(de)組織塊(kuai)平放(fang)底(di)部，注意切(qie)面方向朝下(xia)放(fang)置，待石(shi)(shi)蠟凝固后去掉(diao)包埋框，完(wan)全(quan)冷卻變(bian)硬后再修整蠟塊(kuai)，組織外(wai)圍的(de)石(shi)(shi)蠟保留(liu)適中(zhong)以便切(qie)片。

2、切片與貼片

切片制作將預冷的蠟塊固定在石蠟切片機上，使石蠟塊的(de)切(qie)面(mian)與刀口成(cheng)平行方向，刀的(de)傾斜度通(tong)常15℃，轉動輪(lun)轉推(tui)進器(qi)，調節切(qie)片厚度為4μm，切(qie)成(cheng)厚度均勻的(de)切(qie)片。

左手持毛筆，右手旋動切片機轉把，切片帶出來之后，用毛筆輕輕托起，再用鑷子輕鑷蠟片，以正面放入展片箱中，其水溫45℃左右。待攤平整后撈片。貼附切片左手持載玻片之一端，垂直入水去附貼切片，右手用鑷子輔助推動，附貼至玻片上的三分之二處。切片貼附后，放(fang)在空氣中稍(shao)晾干(gan)，放(fang)置65℃烤(kao)片機上烤(kao)1h，再放(fang)置烘(hong)箱內烘(hong)烤(kao)2h。

3、石蠟切片脫蠟至水

依(yi)次將石(shi)蠟切(qie)片(pian)放入二甲苯Ⅰ10min-二甲苯Ⅱ10min-二甲苯Ⅲ10min-無(wu)水乙醇(chun)Ⅰ5min-無(wu)水乙醇(chun)Ⅱ5min-90%酒(jiu)精5min-80%酒(jiu)精5min-70%酒(jiu)精5min-50%酒(jiu)精5min梯(ti)度脫(tuo)蠟。

4、HE染色

石蠟切片入(ru)(ru)蘇木素染(ran)0.5-1分鐘min，自(zi)來水(shui)(shui)漂(piao)洗，1%鹽酸酒精分化數秒，自(zi)來水(shui)(shui)漂(piao)洗，然后1%氨水(shui)(shui)水(shui)(shui)溶液返(fan)藍1min，流水(shui)(shui)沖洗數秒，放入(ru)(ru)伊紅染(ran)液中染(ran)色數秒，流水(shui)(shui)漂(piao)洗。

5、脫水封片

石蠟切(qie)(qie)片(pian)(pian)依次放入(ru)75%乙(yi)(yi)醇(chun)2min-85%乙(yi)(yi)醇(chun)2min-無水(shui)乙(yi)(yi)醇(chun)5min-無水(shui)乙(yi)(yi)醇(chun)5min-二甲苯5min透明，將切(qie)(qie)片(pian)(pian)從二甲苯拿(na)出來中性樹膠封片(pian)(pian)。