一、石蠟切片厚度一般為多少

石蠟切片厚度通常為4～7微(wei)米(mi)，切出一(yi)(yi)片(pian)接一(yi)(yi)片(pian)的蠟帶，用毛筆輕托(tuo)輕放在紙(zhi)上。這(zhe)個厚度通常可以(yi)滿足大(da)部分實驗室(shi)的需求。如果(guo)需要更(geng)薄的切片(pian)厚度，則可以(yi)使用微(wei)切機進行切割，厚度可達1-2微(wei)米(mi)，但這(zhe)種切片(pian)會更(geng)脆弱，操作難度更(geng)大(da)。

二、石蠟切片制作過程是什么

石蠟(la)切(qie)片的(de)制作步驟如下：

1、組織包埋

（1）乙醇脫水：組織經不(bu)同濃(nong)度的(de)乙醇溶液(ye)進行(xing)逐級脫水70％、80％、90％、95％、100％、100％，各級乙醇 40min（注(zhu)意：骨性及(ji)鈣(gai)化組織需在(zai)JYBL-Ⅱ脫鈣(gai)液(ye)中浸泡(pao)24h，待組織軟化后再進行(xing)乙醇脫水步驟）。

（2）透明：組織依次浸泡于三(san)個二(er)甲苯中，每缸各1h。

（3）浸蠟：組織依次浸泡于三個石(shi)蠟缸(gang)中(zhong)，每缸(gang)各1h。

（4）包埋：將液態(tai)的(de)(de)石蠟(la)倒入(ru)模具盒(he)中，再將浸好蠟(la)的(de)(de)組(zu)織塊(kuai)平放(fang)底(di)部(bu)，注(zhu)意切面方向朝(chao)下放(fang)置，待石蠟(la)凝固后去掉包埋框，完(wan)全冷卻變硬后再修整蠟(la)塊(kuai)，組(zu)織外圍(wei)的(de)(de)石蠟(la)保(bao)留適(shi)中以便切片。

2、切片與貼片

切片制作將預冷的蠟塊固定在石蠟切片機上，使石蠟塊的(de)切面與刀口成平(ping)行方向，刀的(de)傾斜(xie)度通常15℃，轉動(dong)輪(lun)轉推進器，調節切片厚度為4μm，切成厚度均勻的(de)切片。

左手持毛筆，右手旋動切片機轉把，切片帶出來之后，用毛筆輕輕托起，再用鑷子輕鑷蠟片，以正面放入展片箱中，其水溫45℃左右。待攤平整后撈片。貼附切片左手持載玻片之一端，垂直入水去附貼切片，右手用鑷子輔助推動，附貼至玻片上的三分之二處。切片貼附后，放在空氣中稍晾干，放置65℃烤(kao)片機上烤(kao)1h，再放置烘(hong)(hong)箱內烘(hong)(hong)烤(kao)2h。

3、石蠟切片脫蠟至水

依次將石蠟(la)切片放入二(er)(er)甲(jia)苯Ⅰ10min-二(er)(er)甲(jia)苯Ⅱ10min-二(er)(er)甲(jia)苯Ⅲ10min-無水(shui)乙醇Ⅰ5min-無水(shui)乙醇Ⅱ5min-90%酒(jiu)精(jing)(jing)5min-80%酒(jiu)精(jing)(jing)5min-70%酒(jiu)精(jing)(jing)5min-50%酒(jiu)精(jing)(jing)5min梯度脫蠟(la)。

4、HE染色

石蠟切片入蘇(su)木素染0.5-1分(fen)鐘(zhong)min，自來(lai)水(shui)(shui)漂(piao)(piao)洗(xi)，1%鹽(yan)酸(suan)酒精分(fen)化(hua)數秒(miao)，自來(lai)水(shui)(shui)漂(piao)(piao)洗(xi)，然后1%氨水(shui)(shui)水(shui)(shui)溶(rong)液返藍1min，流水(shui)(shui)沖(chong)洗(xi)數秒(miao)，放入伊紅染液中染色數秒(miao)，流水(shui)(shui)漂(piao)(piao)洗(xi)。

5、脫水封片

石蠟(la)切(qie)(qie)片(pian)(pian)依次放入(ru)75%乙醇(chun)2min-85%乙醇(chun)2min-無水乙醇(chun)5min-無水乙醇(chun)5min-二甲苯(ben)5min透明，將切(qie)(qie)片(pian)(pian)從二甲苯(ben)拿(na)出來(lai)中(zhong)性(xing)樹膠(jiao)封片(pian)(pian)。