一、石蠟切片厚度一般為多少

石蠟切片厚度通(tong)常為4～7微(wei)米，切(qie)(qie)(qie)出一(yi)片接一(yi)片的蠟帶，用毛筆輕(qing)托(tuo)輕(qing)放在紙上。這個(ge)厚度通(tong)常可(ke)以滿足大部分實驗室的需求。如果需要(yao)更薄的切(qie)(qie)(qie)片厚度，則可(ke)以使(shi)用微(wei)切(qie)(qie)(qie)機(ji)進行(xing)切(qie)(qie)(qie)割，厚度可(ke)達(da)1-2微(wei)米，但(dan)這種切(qie)(qie)(qie)片會更脆弱(ruo)，操作難度更大。

二、石蠟切片制作過程是什么

石蠟切(qie)片的制作(zuo)步驟如下：

1、組織包埋

（1）乙醇脫水：組織經不同(tong)濃度的乙醇溶(rong)液進行(xing)逐級脫(tuo)水70％、80％、90％、95％、100％、100％，各級乙醇 40min（注(zhu)意：骨性及(ji)鈣(gai)化組織需在JYBL-Ⅱ脫(tuo)鈣(gai)液中(zhong)浸泡(pao)24h，待組織軟化后再(zai)進行(xing)乙醇脫(tuo)水步驟）。

（2）透明：組織依次(ci)浸泡于三(san)個二甲苯中(zhong)，每缸(gang)各1h。

（3）浸蠟：組織依次浸泡于三個石蠟缸中，每缸各(ge)1h。

（4）包埋：將液態的(de)石(shi)蠟(la)(la)倒入模(mo)具盒中(zhong)，再將浸好蠟(la)(la)的(de)組(zu)織塊(kuai)平放底部，注意切面(mian)方(fang)向朝下(xia)放置，待石(shi)蠟(la)(la)凝固后去(qu)掉包(bao)埋框，完全冷卻變硬后再修整蠟(la)(la)塊(kuai)，組(zu)織外圍的(de)石(shi)蠟(la)(la)保(bao)留適中(zhong)以便切片。

2、切片與貼片

切片制作將預冷的蠟塊固定在石蠟切片機上，使石蠟塊的切面與刀口(kou)成(cheng)平行方向，刀的傾斜度(du)通常(chang)15℃，轉動輪轉推進器，調節切片厚(hou)度(du)為4μm，切成(cheng)厚(hou)度(du)均(jun)勻的切片。

左手持毛筆，右手旋動切片機轉把，切片帶出來之后，用毛筆輕輕托起，再用鑷子輕鑷蠟片，以正面放入展片箱中，其水溫45℃左右。待攤平整后撈片。貼附切片左手持載玻片之一端，垂直入水去附貼切片，右手用鑷子輔助推動，附貼至玻片上的三分之二處。切片貼(tie)附后，放在空氣(qi)中稍晾干，放置65℃烤(kao)(kao)片機上烤(kao)(kao)1h，再放置烘(hong)箱內烘(hong)烤(kao)(kao)2h。

3、石蠟切片脫蠟至水

依次將石蠟(la)切(qie)片放入(ru)二(er)甲(jia)苯(ben)Ⅰ10min-二(er)甲(jia)苯(ben)Ⅱ10min-二(er)甲(jia)苯(ben)Ⅲ10min-無(wu)水乙醇(chun)Ⅰ5min-無(wu)水乙醇(chun)Ⅱ5min-90%酒(jiu)精(jing)5min-80%酒(jiu)精(jing)5min-70%酒(jiu)精(jing)5min-50%酒(jiu)精(jing)5min梯度脫蠟(la)。

4、HE染色

石蠟切片入蘇木素染(ran)0.5-1分鐘min，自來水(shui)(shui)漂(piao)(piao)洗，1%鹽酸酒(jiu)精分化數秒，自來水(shui)(shui)漂(piao)(piao)洗，然(ran)后1%氨(an)水(shui)(shui)水(shui)(shui)溶(rong)液(ye)返藍1min，流水(shui)(shui)沖洗數秒，放入伊紅染(ran)液(ye)中染(ran)色數秒，流水(shui)(shui)漂(piao)(piao)洗。

5、脫水封片

石蠟切片(pian)依(yi)次放入75%乙醇(chun)2min-85%乙醇(chun)2min-無(wu)水乙醇(chun)5min-無(wu)水乙醇(chun)5min-二甲苯5min透(tou)明(ming)，將切片(pian)從(cong)二甲苯拿出來中(zhong)性樹膠封片(pian)。