一、什么是探針
探針是電測試的(de)接(jie)觸媒介,為高(gao)端(duan)精密型電子五金元器件。
二、探針是干什么用的
探(tan)針(zhen)(zhen)是一小段(duan)單(dan)鏈(lian)DNA或者RNA片段(duan)(大約是20到500bp),用于檢測與其互補(bu)的核(he)酸序列。雙鏈(lian)DNA加熱變性成(cheng)為(wei)單(dan)鏈(lian),隨(sui)后用放射性同位素(通(tong)常(chang)用磷(lin)-32)、熒(ying)光染料或者酶(如辣(la)根(gen)過氧化物酶)標記成(cheng)為(wei)探(tan)針(zhen)(zhen)。磷(lin)-32通(tong)常(chang)被(bei)摻入組成(cheng)DNA的四種核(he)苷酸之一的磷(lin)酸基團中(zhong),而熒(ying)光染料和酶與核(he)酸序列以(yi)共價鍵相連。
當將探(tan)(tan)針(zhen)(zhen)與樣(yang)品雜交時,探(tan)(tan)針(zhen)(zhen)和(he)與其互(hu)補的(de)(de)核酸(DNA或RNA)序列通過氫鍵緊密相(xiang)連,隨后(hou),未被(bei)雜交的(de)(de)多余探(tan)(tan)針(zhen)(zhen)被(bei)洗去。最后(hou),根據探(tan)(tan)針(zhen)(zhen)的(de)(de)標記物(wu)種類,可進行放射(she)自(zi)顯影、熒光發光、酶聯化學(xue)發光等(deng)方法(fa)來(lai)判斷樣(yang)品中是否,或者何位置含有(you)被(bei)測序列(即與探(tan)(tan)針(zhen)(zhen)互(hu)補的(de)(de)序列)。
三、探針和引物的區別
1、兩者的用途不同:
(1)引物設計的(de)用途:用于PCR擴增技(ji)術。
(2)探針設(she)計(ji)的用(yong)途:用(yong)于標記待(dai)定(ding)(ding)的核苷酸片斷,用(yong)與特異性(xing)地、定(ding)(ding)量地檢測核酸的量。
2、兩者的實質不同:
(1)引(yin)物設計的(de)實(shi)質:一小段(duan)單鏈DNA或RNA,在核酸(suan)(suan)合成(cheng)反應(ying)時,作為每(mei)個多核苷(gan)酸(suan)(suan)鏈進(jin)行(xing)延伸的(de)出發點而起作用(yong)的(de)多核苷(gan)酸(suan)(suan)鏈。
(2)探針設計的實質(zhi):在紫外-可(ke)見-近紅外區有特征熒(ying)光(guang)(guang),并(bing)且其(qi)熒(ying)光(guang)(guang)性質(zhi)(激發和發射(she)波長、強度、壽命、偏振(zhen)等)可(ke)隨所處環境的性質(zhi),如極性、折射(she)率、粘度等改變而靈敏地改變的一類熒(ying)光(guang)(guang)性分子。