一、什么是探針
探針是(shi)電測試的接觸媒介,為高端(duan)精(jing)密(mi)型電子(zi)五金(jin)元器件。
二、探針是干什么用的
探針(zhen)是一小段單(dan)鏈DNA或者(zhe)RNA片段(大約是20到500bp),用(yong)于檢測(ce)與其互(hu)補的(de)(de)核酸(suan)序列(lie)。雙鏈DNA加(jia)熱變性成為(wei)單(dan)鏈,隨后用(yong)放射性同位素(通常用(yong)磷-32)、熒(ying)光染料或者(zhe)酶(mei)(如辣根過氧化物(wu)酶(mei))標記(ji)成為(wei)探針(zhen)。磷-32通常被摻(chan)入組成DNA的(de)(de)四種核苷酸(suan)之一的(de)(de)磷酸(suan)基團中,而(er)熒(ying)光染料和酶(mei)與核酸(suan)序列(lie)以共價(jia)鍵相連。
當將探(tan)(tan)針(zhen)與樣品雜(za)(za)交(jiao)時,探(tan)(tan)針(zhen)和與其互補的(de)核(he)酸(DNA或(huo)RNA)序(xu)列通過氫鍵緊密相連,隨后(hou),未(wei)被雜(za)(za)交(jiao)的(de)多余探(tan)(tan)針(zhen)被洗去。最后(hou),根據探(tan)(tan)針(zhen)的(de)標(biao)記物種類,可進行放射自顯影、熒光發光、酶聯化(hua)學(xue)發光等方法來判(pan)斷樣品中是否,或(huo)者何位置含有被測序(xu)列(即與探(tan)(tan)針(zhen)互補的(de)序(xu)列)。
三、探針和引物的區別
1、兩者的用途不同:
(1)引物設計的(de)用(yong)(yong)途:用(yong)(yong)于PCR擴增技術。
(2)探針設計的用(yong)途:用(yong)于標記待定(ding)的核苷酸片斷,用(yong)與(yu)特異性地、定(ding)量(liang)地檢測核酸的量(liang)。
2、兩者的實質不同:
(1)引物設(she)計的實質(zhi):一小段單鏈DNA或RNA,在核(he)酸合成反應時,作為每個多(duo)核(he)苷酸鏈進行延伸的出(chu)發點而(er)起作用的多(duo)核(he)苷酸鏈。
(2)探針設計的(de)實質(zhi):在紫外-可見-近(jin)紅外區有特(te)征熒(ying)(ying)光,并且其熒(ying)(ying)光性(xing)質(zhi)(激發(fa)和發(fa)射波長、強(qiang)度、壽(shou)命、偏振等(deng))可隨所處環(huan)境(jing)的(de)性(xing)質(zhi),如極性(xing)、折射率、粘(zhan)度等(deng)改(gai)變(bian)而靈敏地改(gai)變(bian)的(de)一類熒(ying)(ying)光性(xing)分子(zi)。