一、什么是探針
探針是電測試的接觸(chu)媒介(jie),為高端精密型電子五金(jin)元器件。
二、探針是干什么用的
探針是(shi)一(yi)(yi)小(xiao)段(duan)單(dan)(dan)鏈(lian)DNA或(huo)者RNA片段(duan)(大約是(shi)20到500bp),用于檢測與其互補的(de)核酸(suan)(suan)序(xu)列(lie)。雙鏈(lian)DNA加熱變(bian)性成為單(dan)(dan)鏈(lian),隨(sui)后用放射性同(tong)位(wei)素(通常用磷-32)、熒(ying)光染(ran)料或(huo)者酶(如辣根過氧化(hua)物酶)標記成為探針。磷-32通常被摻入(ru)組成DNA的(de)四(si)種核苷(gan)酸(suan)(suan)之一(yi)(yi)的(de)磷酸(suan)(suan)基團(tuan)中,而熒(ying)光染(ran)料和酶與核酸(suan)(suan)序(xu)列(lie)以共價鍵相連。
當將探針(zhen)與樣品(pin)雜交時,探針(zhen)和與其互(hu)補的(de)核(he)酸(DNA或(huo)(huo)RNA)序列(lie)通過氫鍵緊密相連,隨后,未被雜交的(de)多余探針(zhen)被洗去。最后,根據探針(zhen)的(de)標記物(wu)種(zhong)類,可進(jin)行放射(she)自顯影、熒光發光、酶聯化學發光等方(fang)法(fa)來判斷樣品(pin)中是否,或(huo)(huo)者何位置含有(you)被測序列(lie)(即與探針(zhen)互(hu)補的(de)序列(lie))。
三、探針和引物的區別
1、兩者的用途不同:
(1)引物設計的(de)用途:用于PCR擴增技術。
(2)探針設(she)計的用(yong)途:用(yong)于(yu)標記(ji)待定(ding)的核(he)苷酸片斷(duan),用(yong)與特異(yi)性地(di)、定(ding)量(liang)地(di)檢測核(he)酸的量(liang)。
2、兩者的實質不同:
(1)引(yin)物(wu)設計的實質:一小段(duan)單鏈DNA或RNA,在(zai)核(he)酸合成反(fan)應時(shi),作為每個多(duo)(duo)核(he)苷(gan)酸鏈進行延(yan)伸的出發點而(er)起作用的多(duo)(duo)核(he)苷(gan)酸鏈。
(2)探針設計的(de)實(shi)質(zhi):在紫外-可見-近紅外區有特征熒(ying)光,并(bing)且(qie)其(qi)熒(ying)光性(xing)(xing)質(zhi)(激發和發射波長、強度(du)、壽命、偏振等)可隨所處環(huan)境的(de)性(xing)(xing)質(zhi),如極性(xing)(xing)、折射率、粘度(du)等改(gai)變(bian)而靈敏地(di)改(gai)變(bian)的(de)一類熒(ying)光性(xing)(xing)分子。