一、什么是探針
探針是電測試的接觸(chu)媒介,為(wei)高端精密(mi)型電子五金元器(qi)件(jian)。
二、探針是干什么用的
探(tan)針(zhen)是(shi)一小(xiao)段(duan)單(dan)鏈DNA或(huo)者RNA片段(duan)(大(da)約是(shi)20到(dao)500bp),用于檢(jian)測(ce)與其互補的(de)核酸(suan)序(xu)列。雙鏈DNA加(jia)熱變性成為(wei)單(dan)鏈,隨后用放射性同(tong)位素(通常用磷-32)、熒光染料或(huo)者酶(如辣根過氧化物(wu)酶)標記成為(wei)探(tan)針(zhen)。磷-32通常被摻入組成DNA的(de)四(si)種(zhong)核苷酸(suan)之一的(de)磷酸(suan)基(ji)團中,而熒光染料和酶與核酸(suan)序(xu)列以共價鍵相連(lian)。
當將探(tan)(tan)針(zhen)與樣品雜(za)交時,探(tan)(tan)針(zhen)和(he)與其互(hu)補(bu)(bu)的核酸(suan)(DNA或(huo)RNA)序(xu)(xu)列(lie)通過氫鍵緊密相(xiang)連(lian),隨后(hou),未被雜(za)交的多余探(tan)(tan)針(zhen)被洗去。最后(hou),根據探(tan)(tan)針(zhen)的標記物(wu)種類,可進行放射(she)自顯影、熒(ying)光發(fa)光、酶(mei)聯化學發(fa)光等方(fang)法來判斷樣品中是否,或(huo)者何位置(zhi)含有被測序(xu)(xu)列(lie)(即與探(tan)(tan)針(zhen)互(hu)補(bu)(bu)的序(xu)(xu)列(lie))。
三、探針和引物的區別
1、兩者的用途不同:
(1)引物設計的用(yong)途:用(yong)于PCR擴增技(ji)術。
(2)探(tan)針設計的用途:用于(yu)標記待定的核苷酸片斷,用與(yu)特(te)異性地、定量地檢測(ce)核酸的量。
2、兩者的實質不同:
(1)引物設計的(de)實質:一小(xiao)段單鏈DNA或RNA,在核(he)酸(suan)合(he)成反應時,作為每個(ge)多核(he)苷酸(suan)鏈進行延(yan)伸(shen)的(de)出發點而起作用的(de)多核(he)苷酸(suan)鏈。
(2)探針設(she)計的實質(zhi):在紫外-可(ke)見-近紅外區有特征熒光(guang),并且其熒光(guang)性質(zhi)(激發(fa)和發(fa)射波長、強度、壽命(ming)、偏(pian)振等(deng))可(ke)隨所(suo)處(chu)環境的性質(zhi),如極(ji)性、折射率、粘度等(deng)改變(bian)而靈敏地改變(bian)的一(yi)類熒光(guang)性分子。