一、什么是探針
探針是電測試的(de)接觸媒介,為高端精密型電子(zi)五金元器件。
二、探針是干什么用的
探針是(shi)一小(xiao)段單鏈(lian)DNA或者RNA片段(大(da)約是(shi)20到500bp),用(yong)(yong)于檢測與其互補的(de)核(he)(he)酸(suan)序(xu)列(lie)。雙鏈(lian)DNA加熱變性(xing)成為單鏈(lian),隨后用(yong)(yong)放(fang)射性(xing)同位素(su)(通常用(yong)(yong)磷-32)、熒光(guang)染料或者酶(如辣根(gen)過氧(yang)化物酶)標記成為探針。磷-32通常被摻入組成DNA的(de)四種核(he)(he)苷酸(suan)之(zhi)一的(de)磷酸(suan)基(ji)團中,而熒光(guang)染料和(he)酶與核(he)(he)酸(suan)序(xu)列(lie)以共價鍵相連。
當(dang)將探(tan)針(zhen)與(yu)樣品雜交時,探(tan)針(zhen)和與(yu)其互補(bu)的核酸(DNA或RNA)序(xu)(xu)(xu)列通過氫鍵(jian)緊密相連,隨后,未被雜交的多余探(tan)針(zhen)被洗去。最后,根(gen)據探(tan)針(zhen)的標記(ji)物種(zhong)類(lei),可進行放射自顯影、熒光(guang)發(fa)光(guang)、酶聯化學發(fa)光(guang)等方法來判斷樣品中是否,或者何位置含有(you)被測序(xu)(xu)(xu)列(即(ji)與(yu)探(tan)針(zhen)互補(bu)的序(xu)(xu)(xu)列)。
三、探針和引物的區別
1、兩者的用途不同:
(1)引物設計的用途:用于(yu)PCR擴增技術。
(2)探針(zhen)設計(ji)的(de)用途:用于標記待(dai)定的(de)核苷酸(suan)片斷,用與特異性地、定量地檢測核酸(suan)的(de)量。
2、兩者的實質不同:
(1)引(yin)物設計的實質(zhi):一(yi)小(xiao)段單鏈(lian)DNA或RNA,在核(he)(he)酸(suan)合成反應時,作為每個多(duo)核(he)(he)苷酸(suan)鏈(lian)進行延伸的出(chu)發點而(er)起作用的多(duo)核(he)(he)苷酸(suan)鏈(lian)。
(2)探(tan)針設計的實質:在紫(zi)外-可見-近紅(hong)外區有特(te)征熒光(guang),并且其熒光(guang)性(xing)質(激發(fa)和發(fa)射(she)波長、強(qiang)度、壽命、偏振等)可隨(sui)所處環境的性(xing)質,如極性(xing)、折(zhe)射(she)率、粘度等改(gai)變(bian)而靈敏(min)地改(gai)變(bian)的一類熒光(guang)性(xing)分子。