一、什么是探針
探(tan)針(zhen)是電測(ce)試(shi)的接觸(chu)媒介(jie),為高端精密型(xing)電子五金元(yuan)器件。
二、探針是干什么用的
探針(zhen)是(shi)一小段單(dan)鏈DNA或(huo)者(zhe)RNA片段(大約是(shi)20到500bp),用(yong)于(yu)檢測(ce)與其互補(bu)的(de)核(he)酸(suan)(suan)序(xu)列(lie)。雙(shuang)鏈DNA加熱變性成(cheng)(cheng)為(wei)(wei)單(dan)鏈,隨(sui)后用(yong)放射性同位(wei)素(通常用(yong)磷(lin)-32)、熒光染(ran)料(liao)或(huo)者(zhe)酶(如辣根(gen)過氧(yang)化物酶)標(biao)記(ji)成(cheng)(cheng)為(wei)(wei)探針(zhen)。磷(lin)-32通常被摻(chan)入組成(cheng)(cheng)DNA的(de)四種核(he)苷(gan)酸(suan)(suan)之一的(de)磷(lin)酸(suan)(suan)基團中,而(er)熒光染(ran)料(liao)和酶與核(he)酸(suan)(suan)序(xu)列(lie)以共價鍵相連。
當將探(tan)針與樣品(pin)雜交(jiao)時,探(tan)針和與其互(hu)補的核酸(DNA或(huo)RNA)序(xu)列(lie)通(tong)過氫鍵緊(jin)密相連(lian),隨后,未被(bei)雜交(jiao)的多余探(tan)針被(bei)洗去。最(zui)后,根據(ju)探(tan)針的標記物種類,可(ke)進(jin)行放(fang)射自顯影、熒(ying)光發(fa)光、酶(mei)聯化學(xue)發(fa)光等方法來判斷(duan)樣品(pin)中是否(fou),或(huo)者(zhe)何位置含(han)有被(bei)測序(xu)列(lie)(即與探(tan)針互(hu)補的序(xu)列(lie))。
三、探針和引物的區別
1、兩者的用途不同:
(1)引物設計的(de)用途:用于PCR擴(kuo)增(zeng)技(ji)術(shu)。
(2)探針設計的用途:用于(yu)標記待定的核苷酸片斷,用與特異性地(di)、定量(liang)地(di)檢測核酸的量(liang)。
2、兩者的實質不同:
(1)引物(wu)設計的實質:一小段單鏈DNA或(huo)RNA,在(zai)核(he)酸(suan)(suan)合成反應時(shi),作為每個多(duo)核(he)苷酸(suan)(suan)鏈進行延伸的出發(fa)點而(er)起作用(yong)的多(duo)核(he)苷酸(suan)(suan)鏈。
(2)探針(zhen)設(she)計的實質(zhi):在紫外(wai)-可見-近紅外(wai)區(qu)有(you)特(te)征(zheng)熒光(guang),并且其熒光(guang)性質(zhi)(激發(fa)和發(fa)射(she)(she)波長、強度、壽命、偏振等)可隨所(suo)處環境的性質(zhi),如(ru)極性、折(zhe)射(she)(she)率、粘(zhan)度等改(gai)(gai)變而(er)靈(ling)敏地改(gai)(gai)變的一類熒光(guang)性分(fen)子。