一、什么是探針
探(tan)針是電(dian)測(ce)試的接(jie)觸媒介(jie),為高端精密型電(dian)子五金元器件(jian)。
二、探針是干什么用的
探(tan)(tan)針是一小段(duan)單(dan)鏈(lian)DNA或(huo)者RNA片段(duan)(大約是20到500bp),用(yong)(yong)于檢測與其互補的(de)核(he)酸(suan)(suan)序列(lie)。雙(shuang)鏈(lian)DNA加(jia)熱(re)變性(xing)成(cheng)為單(dan)鏈(lian),隨后用(yong)(yong)放射性(xing)同位素(通(tong)(tong)常(chang)用(yong)(yong)磷-32)、熒光(guang)染料(liao)或(huo)者酶(如(ru)辣(la)根過氧化(hua)物酶)標記成(cheng)為探(tan)(tan)針。磷-32通(tong)(tong)常(chang)被摻入組成(cheng)DNA的(de)四種核(he)苷酸(suan)(suan)之(zhi)一的(de)磷酸(suan)(suan)基(ji)團中,而熒光(guang)染料(liao)和酶與核(he)酸(suan)(suan)序列(lie)以共價鍵相連。
當將探(tan)針(zhen)與樣品(pin)雜交時,探(tan)針(zhen)和與其互補的核酸(DNA或(huo)(huo)RNA)序(xu)列(lie)通過氫鍵緊密相(xiang)連,隨(sui)后,未被雜交的多余探(tan)針(zhen)被洗去。最(zui)后,根據探(tan)針(zhen)的標(biao)記物種類(lei),可(ke)進行(xing)放射自顯影、熒光發光、酶(mei)聯化(hua)學發光等(deng)方(fang)法(fa)來(lai)判斷樣品(pin)中是否,或(huo)(huo)者(zhe)何位置(zhi)含有被測序(xu)列(lie)(即與探(tan)針(zhen)互補的序(xu)列(lie))。
三、探針和引物的區別
1、兩者的用途不同:
(1)引(yin)物(wu)設計的用(yong)途(tu):用(yong)于PCR擴(kuo)增技術。
(2)探針設(she)計(ji)的(de)(de)用(yong)途:用(yong)于標記待定的(de)(de)核苷酸(suan)片斷(duan),用(yong)與特異(yi)性地、定量(liang)地檢測(ce)核酸(suan)的(de)(de)量(liang)。
2、兩者的實質不同:
(1)引物(wu)設計的(de)實質(zhi):一小(xiao)段單鏈(lian)DNA或RNA,在核(he)酸合成(cheng)反應時,作(zuo)為每個多(duo)(duo)核(he)苷(gan)酸鏈(lian)進行延伸的(de)出發點而起作(zuo)用的(de)多(duo)(duo)核(he)苷(gan)酸鏈(lian)。
(2)探針設計的(de)實質(zhi):在紫外-可見(jian)-近紅(hong)外區有(you)特(te)征熒光(guang),并且其熒光(guang)性(xing)(xing)(xing)質(zhi)(激發(fa)和發(fa)射波長、強度(du)、壽命、偏(pian)振等)可隨所(suo)處環境(jing)的(de)性(xing)(xing)(xing)質(zhi),如(ru)極性(xing)(xing)(xing)、折射率、粘(zhan)度(du)等改(gai)(gai)變而靈敏地(di)改(gai)(gai)變的(de)一類(lei)熒光(guang)性(xing)(xing)(xing)分(fen)子(zi)。