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電子顯微鏡的組成部分 電子顯微鏡樣本的預處理方法

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摘要:電子顯微鏡,簡稱電鏡,經過五十多年的發展已成為現代科學技術中不可缺少的重要工具。電子顯微鏡由鏡筒、真空裝置和電源柜三部分組成。我們知道電子顯微鏡對樣本的要求比較高,因此在觀察生物樣本的時候必須進行預處理。一般的處理過程包括:固定、冷固定、脫干、墊入、分割、染色等。接下來就一起來了解下電子顯微鏡的知識吧。

一、電子顯微鏡的組成

電子顯微鏡由鏡筒、真(zhen)空裝置和電源柜三(san)部分組成。

1、鏡筒

主要有電(dian)子源、電(dian)子透鏡(jing)、樣(yang)品(pin)架、熒光屏和探測器等部(bu)件(jian),這些(xie)部(bu)件(jian)通常是自(zi)上而下地裝配成(cheng)一個柱體(ti)。

電(dian)(dian)(dian)(dian)子透(tou)鏡(jing)(jing)(jing)用來聚焦(jiao)電(dian)(dian)(dian)(dian)子,是(shi)(shi)電(dian)(dian)(dian)(dian)子顯(xian)微(wei)(wei)鏡(jing)(jing)(jing)鏡(jing)(jing)(jing)筒中最重要的(de)(de)(de)(de)(de)(de)部件。一(yi)般(ban)使(shi)(shi)(shi)用的(de)(de)(de)(de)(de)(de)是(shi)(shi)磁(ci)透(tou)鏡(jing)(jing)(jing),有(you)時也有(you)使(shi)(shi)(shi)用靜(jing)電(dian)(dian)(dian)(dian)透(tou)鏡(jing)(jing)(jing)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)。它用一(yi)個對稱于(yu)鏡(jing)(jing)(jing)筒軸線(xian)(xian)(xian)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)空間(jian)電(dian)(dian)(dian)(dian)場或磁(ci)場使(shi)(shi)(shi)電(dian)(dian)(dian)(dian)子軌跡向軸線(xian)(xian)(xian)彎曲(qu)形成(cheng)聚焦(jiao),其作(zuo)用與(yu)光學(xue)顯(xian)微(wei)(wei)鏡(jing)(jing)(jing)中的(de)(de)(de)(de)(de)(de)光學(xue)透(tou)鏡(jing)(jing)(jing)(凸透(tou)鏡(jing)(jing)(jing))使(shi)(shi)(shi)光束聚焦(jiao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)作(zuo)用是(shi)(shi)一(yi)樣(yang)(yang)的(de)(de)(de)(de)(de)(de),所以(yi)稱為(wei)電(dian)(dian)(dian)(dian)子透(tou)鏡(jing)(jing)(jing)。光學(xue)透(tou)鏡(jing)(jing)(jing)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)焦(jiao)點(dian)是(shi)(shi)固定(ding)(ding)的(de)(de)(de)(de)(de)(de),而電(dian)(dian)(dian)(dian)子透(tou)鏡(jing)(jing)(jing)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)焦(jiao)點(dian)可以(yi)被調節,因此電(dian)(dian)(dian)(dian)子顯(xian)微(wei)(wei)鏡(jing)(jing)(jing)不(bu)像光學(xue)顯(xian)微(wei)(wei)鏡(jing)(jing)(jing)那(nei)樣(yang)(yang)有(you)可以(yi)移動的(de)(de)(de)(de)(de)(de)透(tou)鏡(jing)(jing)(jing)系統(tong)。現代電(dian)(dian)(dian)(dian)子顯(xian)微(wei)(wei)鏡(jing)(jing)(jing)大多采用電(dian)(dian)(dian)(dian)磁(ci)透(tou)鏡(jing)(jing)(jing),由很穩定(ding)(ding)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)直流勵磁(ci)電(dian)(dian)(dian)(dian)流通過帶極靴的(de)(de)(de)(de)(de)(de)線(xian)(xian)(xian)圈產生的(de)(de)(de)(de)(de)(de)強(qiang)磁(ci)場使(shi)(shi)(shi)電(dian)(dian)(dian)(dian)子聚焦(jiao)。電(dian)(dian)(dian)(dian)子源(yuan)是(shi)(shi)一(yi)個釋放自由電(dian)(dian)(dian)(dian)子的(de)(de)(de)(de)(de)(de)陰(yin)極,柵極,一(yi)個環狀加速(su)電(dian)(dian)(dian)(dian)子的(de)(de)(de)(de)(de)(de)陽極構(gou)成(cheng)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)。陰(yin)極和陽極之(zhi)間(jian)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)電(dian)(dian)(dian)(dian)壓差(cha)必須非(fei)常高,一(yi)般(ban)在(zai)數千伏到3百(bai)萬伏特之(zhi)間(jian)。它能發(fa)射并形成(cheng)速(su)度(du)均勻的(de)(de)(de)(de)(de)(de)電(dian)(dian)(dian)(dian)子束,所以(yi)加速(su)電(dian)(dian)(dian)(dian)壓的(de)(de)(de)(de)(de)(de)穩定(ding)(ding)度(du)要求不(bu)低于(yu)萬分之(zhi)一(yi)。

樣品(pin)(pin)可以穩定地放在(zai)樣品(pin)(pin)架(jia)上(shang),此外往往還有可以用來改(gai)變樣品(pin)(pin)(如移(yi)動(dong)、轉動(dong)、加(jia)熱、降(jiang)溫、拉長等)的裝置。

探(tan)測器用來收集(ji)電子(zi)的信(xin)號(hao)或次(ci)級信(xin)號(hao)。

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2、真空裝置

用以保障顯微鏡內(nei)的真(zhen)空狀態,這樣電(dian)子在其(qi)路徑上不會被吸收(shou)或(huo)偏(pian)向,由機(ji)械(xie)真(zhen)空泵、擴(kuo)散泵和真(zhen)空閥門等構(gou)成,并(bing)通過(guo)抽氣管道(dao)與鏡筒(tong)相聯接。

3、電源柜

由高壓發生器、勵磁電流穩流器和各種調節控制單元組成。

二、電子顯微鏡如何進行樣本處理

1、固定:為了盡量保存樣(yang)本的(de)原樣(yang)使用戊二醛(quan)來(lai)硬化樣(yang)本和(he)使用鋨酸來(lai)染(ran)色脂肪。

2、冷固定:將樣本放在液態(tai)的乙烷中速凍,這(zhe)樣水不會(hui)結晶,而形成(cheng)非(fei)晶體的冰。這(zhe)樣保存的樣品損壞比較小,但圖(tu)像(xiang)的對比度(du)非(fei)常低(di)。

3、脫干:使用乙醇和丙酮來取代(dai)水。

4、墊(dian)(dian)入:樣本被墊(dian)(dian)入后(hou)可以分割。

5、分割:將樣本使(shi)用(yong)金剛石刃切成薄(bo)片(pian)。

6、染(ran)色:重的(de)原子(zi)如鉛或鈾比(bi)輕的(de)原子(zi)散(san)射(she)電子(zi)的(de)能力(li)高(gao),因此可被用來(lai)提高(gao)對比(bi)度(du)。

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