一、免疫診斷原理有哪幾種

免(mian)疫診斷(duan)是應(ying)用免(mian)疫學(xue)的(de)理(li)論、技術和方法(fa)診斷(duan)各種(zhong)疾病(bing)和測定(ding)免(mian)疫狀(zhuang)態(tai)的(de)診斷(duan)方法(fa)，目前免(mian)疫診斷(duan)的(de)平臺(tai)和方法(fa)有多種(zhong)多樣，但是都基(ji)于相(xiang)同或(huo)相(xiang)似的(de)原理(li)，主要有五大基(ji)本原理(li)：

1、雙抗體夾心

（1）原(yuan)理：雙(shuang)抗(kang)體(ti)夾(jia)(jia)心法(fa)(fa)是檢(jian)測抗(kang)原(yuan)最(zui)常用(yong)的(de)方法(fa)(fa)，雙(shuang)抗(kang)體(ti)夾(jia)(jia)心法(fa)(fa)適用(yong)于(yu)測定擁有至少兩(liang)(liang)個表位(wei)的(de)大分(fen)子抗(kang)原(yuan)。不(bu)(bu)適用(yong)于(yu)測定半抗(kang)原(yuan)及小(xiao)分(fen)子單價抗(kang)原(yuan)，不(bu)(bu)能(neng)形成兩(liang)(liang)位(wei)點(dian)夾(jia)(jia)心。

（2）應(ying)用場景：絕大多數檢測蛋(dan)白(bai)都可(ke)以使(shi)用雙(shuang)抗體夾(jia)心法。有些抗體檢測項目(mu)，如總IgE檢測。

（3）注意事(shi)宜：在(zai)一(yi)步(bu)法(fa)，待測抗原與標記抗體(ti)一(yi)起(qi)加入反應中，當(dang)標本(ben)中受檢抗原的(de)含量很(hen)高(gao)時，過量抗原會(hui)分(fen)別(bie)和(he)固相包(bao)被(bei)抗體(ti)及標記抗體(ti)結合，不會(hui)形成“夾(jia)心復合物”就(jiu)出現(xian)鉤狀效應，導致結果(guo)偏低或者甚至(zhi)可出現(xian)假陰性結果(guo)。

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2、雙抗原夾心

（1）原(yuan)(yuan)理(li)：雙抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)夾心法(fa)的反應模式與雙抗(kang)(kang)(kang)體(ti)夾心法(fa)類似。用特異(yi)性(xing)抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)進(jin)行包被和(he)標記。有研(yan)究表明，雙抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)夾心法(fa)檢測(ce)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)的靈敏度和(he)準確(que)性(xing)要抗(kang)(kang)(kang)體(ti)檢測(ce)使用的間接法(fa)（檢測(ce)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)更為常用的一種方(fang)法(fa)）。

（2）應用(yong)場景(jing)：理(li)論上，檢測(ce)抗(kang)體(ti)(ti)的項目(mu)均可使用(yong)，如乙(yi)肝(gan)表面蛋(dan)白抗(kang)體(ti)(ti)檢測(ce)。待檢抗(kang)體(ti)(ti)IgG的兩(liang)個Fab需(xu)要(yao)分別(bie)同固相(xiang)包(bao)被(bei)抗(kang)原(yuan)和標記抗(kang)原(yuan)同時結合(he)。

（3）注意事宜：抗原標記(ji)過程可能(neng)導致蛋白(bai)構象(xiang)變化，需要尋找最(zui)適合的標記(ji)物(wu)和(he)標記(ji)方法。

3、間接法

（1）原(yuan)理(li)：間接法是檢測(ce)抗(kang)(kang)體常用(yong)的(de)(de)方法。其原(yuan)理(li)為利用(yong)標記(ji)的(de)(de)抗(kang)(kang)抗(kang)(kang)體，俗(su)稱二抗(kang)(kang)，來檢測(ce)與固(gu)相包被抗(kang)(kang)原(yuan)結合的(de)(de)受(shou)檢抗(kang)(kang)體。本法主要(yao)用(yong)于對病原(yuan)體抗(kang)(kang)體的(de)(de)檢測(ce)而進行傳染病的(de)(de)診(zhen)斷。

（2）應用場景(jing)：所有的IgG抗體(ti)檢測都可以(yi)使用。如(ru)新(xin)冠血(xue)清IgG檢測。

（3）注意事宜(yi)：本方法(fa)的(de)優點(dian)是只要變換包被(bei)抗(kang)(kang)原的(de)種類(lei)就可利(li)用同一標(biao)記抗(kang)(kang)抗(kang)(kang)體(ti)（二抗(kang)(kang)）建立檢測相應(ying)抗(kang)(kang)體(ti)的(de)方法(fa)。

4、競爭法

（1）原(yuan)(yuan)理：當小分(fen)子抗原(yuan)(yuan)或半抗原(yuan)(yuan)因缺乏可(ke)作(zuo)夾(jia)心法的(de)(de)(de)(de)兩個表位供包(bao)被(bei)和檢測(ce)(ce)(ce)抗體同(tong)時識別(bie)結(jie)合(he)(he)，因此(ci)不能(neng)用雙抗體夾(jia)心法進行(xing)測(ce)(ce)(ce)定，可(ke)以采用競爭法模(mo)式。由于物(wu)(wu)(wu)質的(de)(de)(de)(de)相(xiang)互作(zuo)用或者結(jie)合(he)(he)是相(xiang)對(dui)動態平衡的(de)(de)(de)(de)過程(cheng)，一旦樣本中(zhong)存在待檢測(ce)(ce)(ce)物(wu)(wu)(wu)，樣品(pin)中(zhong)的(de)(de)(de)(de)待檢測(ce)(ce)(ce)物(wu)(wu)(wu)會同(tong)試劑中(zhong)的(de)(de)(de)(de)標記(ji)物(wu)(wu)(wu)去競爭結(jie)合(he)(he)包(bao)被(bei)物(wu)(wu)(wu)。這樣就會導致原(yuan)(yuan)來結(jie)合(he)(he)在一起的(de)(de)(de)(de)包(bao)被(bei)物(wu)(wu)(wu)和標記(ji)物(wu)(wu)(wu)分(fen)離，使原(yuan)(yuan)本飽滿的(de)(de)(de)(de)信號值(zhi)進行(xing)降(jiang)低。信號降(jiang)低的(de)(de)(de)(de)程(cheng)度同(tong)待檢測(ce)(ce)(ce)物(wu)(wu)(wu)的(de)(de)(de)(de)濃度成正相(xiang)關。

（2）應用場景：小分子抗原(yuan)或半抗原(yuan)，如(ru)激素檢測(ce)，雌(ci)二醇(chun)，睪酮(tong)；甲(jia)狀(zhuang)腺功能(neng)檢測(ce)，T4，T3等(deng)。

（3）注意事宜：競爭(zheng)法(fa)中，有些待檢測(ce)物分子(zi)特別小，很難制備或找到適合使(shi)用的抗(kang)(kang)體(ti)，而且生理條件下可(ke)以同其他蛋白結合，那么可(ke)以使(shi)用該分子(zi)的結合蛋白來代(dai)替抗(kang)(kang)體(ti)實(shi)現。如(ru)，25OH-Vd檢測(ce)，可(ke)使(shi)用25OH-Vd特異(yi)性抗(kang)(kang)體(ti)，也可(ke)使(shi)用Vd結合蛋白。

5、捕獲法（反向間接法）

（1）原(yuan)(yuan)理：捕獲包(bao)被(bei)法，又稱為反向(xiang)間接法，采用(yong)抗抗體（二抗）包(bao)被(bei)，抗原(yuan)(yuan)進行(xing)標記的(de)(de)檢測(ce)方法。以(yi)目前常用(yong)的(de)(de)IgM測(ce)定為例，因(yin)血清(qing)中針對某(mou)種抗原(yuan)(yuan)的(de)(de)特(te)異性(xing)IgM和(he)IgG同時(shi)存在，則(ze)后者可干擾IgM的(de)(de)測(ce)定。因(yin)此先(xian)將所有血清(qing)IgM（包(bao)括(kuo)異性(xing)IgM和(he)非(fei)特(te)異性(xing)IgM）固(gu)定在固(gu)相上，在去除IgG后再測(ce)定特(te)異性(xing)IgM。

（2）應用場景(jing)：IgM測(ce)(ce)定最為常見，特定過敏原IgE檢測(ce)(ce)。

（3）注意事宜：IgM型(xing)類(lei)風濕(shi)因子（RF）的干擾(rao)，IgE型(xing)類(lei)風濕(shi)因子相對較少(shao)。

二、免疫診斷有什么特點

1、特異性強，不出現(xian)交叉(cha)反應，不出現(xian)假陽性，可保證診斷(duan)的(de)準確性。

2、靈(ling)敏度(du)高，能(neng)測出微(wei)量(liang)反(fan)應物(wu)質和(he)輕(qing)微(wei)的(de)異常變化，有(you)利于(yu)早(zao)期診斷和(he)排(pai)除可疑病(bing)例。

3、簡(jian)便、快速、安(an)全。