一、免疫診斷原理有哪幾種

免(mian)疫診(zhen)斷是應用免(mian)疫學的理論(lun)、技術和(he)方法診(zhen)斷各種(zhong)疾病(bing)和(he)測定(ding)免(mian)疫狀態的診(zhen)斷方法，目前(qian)免(mian)疫診(zhen)斷的平臺和(he)方法有(you)多種(zhong)多樣，但是都基于相(xiang)同或相(xiang)似的原理，主要有(you)五大基本(ben)原理：

1、雙抗體夾心

（1）原理：雙(shuang)抗(kang)體(ti)夾心法(fa)是檢測抗(kang)原最常用的(de)方法(fa)，雙(shuang)抗(kang)體(ti)夾心法(fa)適用于測定擁有至少(shao)兩個表位的(de)大分子抗(kang)原。不(bu)適用于測定半抗(kang)原及小分子單價抗(kang)原，不(bu)能形成兩位點夾心。

（2）應用(yong)場景：絕(jue)大多數檢(jian)測蛋(dan)白都可以(yi)使用(yong)雙抗體(ti)夾心法(fa)。有些抗體(ti)檢(jian)測項目，如總IgE檢(jian)測。

（3）注(zhu)意事宜：在(zai)一(yi)步法，待測抗(kang)原(yuan)與標(biao)記抗(kang)體(ti)一(yi)起加入反(fan)應(ying)中，當標(biao)本中受檢(jian)抗(kang)原(yuan)的含量(liang)很高時，過量(liang)抗(kang)原(yuan)會(hui)分別和(he)固(gu)相包(bao)被抗(kang)體(ti)及(ji)標(biao)記抗(kang)體(ti)結(jie)合，不會(hui)形成“夾心(xin)復合物”就出(chu)現鉤狀效應(ying)，導致結(jie)果(guo)偏低或者甚至(zhi)可(ke)出(chu)現假陰(yin)性結(jie)果(guo)。

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2、雙抗原夾心

（1）原(yuan)理(li)：雙抗(kang)原(yuan)夾心法(fa)的反應模(mo)式與雙抗(kang)體夾心法(fa)類似。用(yong)(yong)特異性抗(kang)原(yuan)進行包被和標記。有研究表明，雙抗(kang)原(yuan)夾心法(fa)檢(jian)測抗(kang)體的靈(ling)敏度和準確性要抗(kang)體檢(jian)測使(shi)用(yong)(yong)的間接(jie)法(fa)（檢(jian)測抗(kang)體更為常用(yong)(yong)的一種(zhong)方法(fa)）。

（2）應用場(chang)景(jing)：理論上，檢測抗體的項目均可(ke)使用，如乙肝表面蛋白抗體檢測。待檢抗體IgG的兩個Fab需(xu)要(yao)分(fen)別同固相包被抗原(yuan)和標記抗原(yuan)同時結合。

（3）注意事宜：抗原標(biao)記過程可(ke)能導致蛋白構象變化(hua)，需要尋找最適合(he)的(de)標(biao)記物(wu)和標(biao)記方法。

3、間接法

（1）原理：間(jian)接法(fa)(fa)是(shi)檢(jian)(jian)測抗(kang)體常用(yong)的(de)方法(fa)(fa)。其(qi)原理為利(li)用(yong)標記的(de)抗(kang)抗(kang)體，俗稱二抗(kang)，來(lai)檢(jian)(jian)測與固相包被(bei)抗(kang)原結(jie)合(he)的(de)受(shou)檢(jian)(jian)抗(kang)體。本法(fa)(fa)主要用(yong)于對病原體抗(kang)體的(de)檢(jian)(jian)測而進行傳染病的(de)診斷。

（2）應用(yong)場景：所(suo)有的(de)IgG抗(kang)體檢(jian)測(ce)都可(ke)以使用(yong)。如新冠(guan)血清IgG檢(jian)測(ce)。

（3）注意事宜：本方(fang)法的優點是(shi)只要變換(huan)包被(bei)抗原的種類就(jiu)可(ke)利(li)用同一標記(ji)抗抗體(ti)（二(er)抗）建立檢(jian)測(ce)相應抗體(ti)的方(fang)法。

4、競爭法

（1）原(yuan)理：當小分(fen)子(zi)抗(kang)原(yuan)或半抗(kang)原(yuan)因缺(que)乏可作夾(jia)心法的(de)(de)(de)兩個(ge)表位(wei)供包(bao)(bao)被和(he)檢測抗(kang)體(ti)同(tong)時識別結(jie)(jie)合(he)，因此(ci)不能用(yong)雙抗(kang)體(ti)夾(jia)心法進行測定，可以(yi)采用(yong)競爭法模式。由于物(wu)(wu)(wu)(wu)質的(de)(de)(de)相互作用(yong)或者結(jie)(jie)合(he)是(shi)相對動態(tai)平衡的(de)(de)(de)過(guo)程，一旦樣本(ben)中(zhong)(zhong)存在待檢測物(wu)(wu)(wu)(wu)，樣品中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)待檢測物(wu)(wu)(wu)(wu)會同(tong)試劑中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)標記物(wu)(wu)(wu)(wu)去(qu)競爭結(jie)(jie)合(he)包(bao)(bao)被物(wu)(wu)(wu)(wu)。這(zhe)樣就會導致原(yuan)來結(jie)(jie)合(he)在一起的(de)(de)(de)包(bao)(bao)被物(wu)(wu)(wu)(wu)和(he)標記物(wu)(wu)(wu)(wu)分(fen)離(li)，使原(yuan)本(ben)飽滿的(de)(de)(de)信號(hao)值進行降(jiang)低。信號(hao)降(jiang)低的(de)(de)(de)程度(du)同(tong)待檢測物(wu)(wu)(wu)(wu)的(de)(de)(de)濃度(du)成(cheng)正相關。

（2）應用場景：小分子抗(kang)(kang)原或(huo)半抗(kang)(kang)原，如激(ji)素檢(jian)測，雌二(er)醇，睪酮；甲狀腺功(gong)能檢(jian)測，T4，T3等。

（3）注意事宜(yi)：競爭法中，有些待檢測(ce)物分子特別小，很(hen)難制(zhi)備或找到適合(he)(he)(he)使(shi)用的抗體，而且(qie)生理條件下(xia)可以同其他(ta)蛋(dan)白結(jie)合(he)(he)(he)，那么可以使(shi)用該(gai)分子的結(jie)合(he)(he)(he)蛋(dan)白來代替抗體實現。如，25OH-Vd檢測(ce)，可使(shi)用25OH-Vd特異性抗體，也(ye)可使(shi)用Vd結(jie)合(he)(he)(he)蛋(dan)白。

5、捕獲法（反向間接法）

（1）原(yuan)理：捕獲包被法，又(you)稱(cheng)為反向間接法，采用抗抗體（二抗）包被，抗原(yuan)進(jin)行標記的(de)(de)檢測(ce)方(fang)法。以(yi)目前(qian)常(chang)用的(de)(de)IgM測(ce)定(ding)(ding)為例，因(yin)血清(qing)中(zhong)針對某種抗原(yuan)的(de)(de)特異(yi)(yi)性IgM和(he)IgG同時存在，則后者可干擾IgM的(de)(de)測(ce)定(ding)(ding)。因(yin)此先(xian)將所有(you)血清(qing)IgM（包括異(yi)(yi)性IgM和(he)非特異(yi)(yi)性IgM）固定(ding)(ding)在固相上，在去除(chu)IgG后再(zai)測(ce)定(ding)(ding)特異(yi)(yi)性IgM。

（2）應用場(chang)景：IgM測定最為常見，特定過敏原IgE檢測。

（3）注意事宜：IgM型(xing)類風(feng)濕因子(zi)（RF）的干擾，IgE型(xing)類風(feng)濕因子(zi)相對(dui)較(jiao)少。

二、免疫診斷有什么特點

1、特異(yi)性強，不出現(xian)交叉反應，不出現(xian)假陽性，可(ke)保證診斷的準確性。

2、靈敏度高，能(neng)測出(chu)微量(liang)反應物質和(he)輕微的(de)異(yi)常變化(hua)，有利于早期診斷和(he)排除可(ke)疑病例。

3、簡便、快(kuai)速、安(an)全。