一、石蠟切片厚度一般為多少

石蠟切片厚度(du)(du)通(tong)常為4～7微(wei)米(mi)，切(qie)(qie)出(chu)一片(pian)(pian)接一片(pian)(pian)的蠟帶，用(yong)毛筆輕托(tuo)輕放(fang)在紙上。這個(ge)厚度(du)(du)通(tong)常可(ke)以(yi)滿足大部分實驗室的需(xu)(xu)求。如果(guo)需(xu)(xu)要更薄的切(qie)(qie)片(pian)(pian)厚度(du)(du)，則可(ke)以(yi)使(shi)用(yong)微(wei)切(qie)(qie)機進行切(qie)(qie)割，厚度(du)(du)可(ke)達1-2微(wei)米(mi)，但這種(zhong)切(qie)(qie)片(pian)(pian)會更脆弱，操作難度(du)(du)更大。

二、石蠟切片制作過程是什么

石蠟切片的制作步驟如下：

1、組織包埋

（1）乙醇脫水：組織經不同濃度的(de)乙(yi)醇(chun)溶液進行逐級脫水(shui)70％、80％、90％、95％、100％、100％，各級乙(yi)醇(chun) 40min（注(zhu)意：骨(gu)性及鈣化組織需在JYBL-Ⅱ脫鈣液中(zhong)浸泡24h，待組織軟化后再進行乙(yi)醇(chun)脫水(shui)步驟）。

（2）透明：組(zu)織依次浸泡于三個二甲苯中(zhong)，每缸各1h。

（3）浸蠟：組織(zhi)依次浸泡(pao)于三個石(shi)蠟缸(gang)中，每缸(gang)各1h。

（4）包埋：將(jiang)液態的石蠟(la)(la)倒入模具(ju)盒(he)中，再將(jiang)浸好(hao)蠟(la)(la)的組織(zhi)塊平放底部(bu)，注意切(qie)面方(fang)向朝(chao)下放置，待石蠟(la)(la)凝固后去掉包埋框，完全冷(leng)卻變硬后再修整蠟(la)(la)塊，組織(zhi)外(wai)圍的石蠟(la)(la)保(bao)留(liu)適中以便切(qie)片。

2、切片與貼片

切片制作將預冷的蠟塊固定在石蠟切片機上，使石蠟塊的(de)切面與(yu)刀口(kou)成平行方(fang)向，刀的(de)傾斜度(du)通常15℃，轉動輪轉推進器，調(diao)節切片厚(hou)度(du)為4μm，切成厚(hou)度(du)均勻的(de)切片。

左手持毛筆，右手旋動切片機轉把，切片帶出來之后，用毛筆輕輕托起，再用鑷子輕鑷蠟片，以正面放入展片箱中，其水溫45℃左右。待攤平整后撈片。貼附切片左手持載玻片之一端，垂直入水去附貼切片，右手用鑷子輔助推動，附貼至玻片上的三分之二處。切(qie)片貼附后(hou)，放(fang)在空氣中稍晾干，放(fang)置(zhi)65℃烤片機上烤1h，再放(fang)置(zhi)烘箱內烘烤2h。

3、石蠟切片脫蠟至水

依次將石蠟(la)切片放入二甲(jia)苯(ben)Ⅰ10min-二甲(jia)苯(ben)Ⅱ10min-二甲(jia)苯(ben)Ⅲ10min-無水(shui)乙(yi)醇Ⅰ5min-無水(shui)乙(yi)醇Ⅱ5min-90%酒(jiu)(jiu)精(jing)5min-80%酒(jiu)(jiu)精(jing)5min-70%酒(jiu)(jiu)精(jing)5min-50%酒(jiu)(jiu)精(jing)5min梯度脫蠟(la)。

4、HE染色

石蠟切(qie)片入蘇木素染(ran)0.5-1分(fen)鐘min，自(zi)來水(shui)漂洗(xi)，1%鹽酸酒精分(fen)化數(shu)秒(miao)，自(zi)來水(shui)漂洗(xi)，然后1%氨水(shui)水(shui)溶液(ye)返(fan)藍(lan)1min，流水(shui)沖洗(xi)數(shu)秒(miao)，放入伊紅染(ran)液(ye)中(zhong)染(ran)色數(shu)秒(miao)，流水(shui)漂洗(xi)。

5、脫水封片

石蠟切片(pian)(pian)依次(ci)放入(ru)75%乙(yi)(yi)醇2min-85%乙(yi)(yi)醇2min-無(wu)水(shui)乙(yi)(yi)醇5min-無(wu)水(shui)乙(yi)(yi)醇5min-二(er)甲(jia)(jia)苯5min透明(ming)，將切片(pian)(pian)從二(er)甲(jia)(jia)苯拿出來中性樹膠封片(pian)(pian)。