一、石蠟切片厚度一般為多少

石蠟切片厚度通常為4～7微米(mi)，切(qie)出(chu)一片接一片的(de)蠟帶(dai)，用毛(mao)筆輕托輕放(fang)在紙上。這個(ge)厚度通常可(ke)以滿足大部分實驗室的(de)需求。如果(guo)需要更(geng)薄的(de)切(qie)片厚度，則(ze)可(ke)以使(shi)用微切(qie)機進行切(qie)割(ge)，厚度可(ke)達1-2微米(mi)，但這種切(qie)片會(hui)更(geng)脆弱，操作難度更(geng)大。

二、石蠟切片制作過程是什么

石蠟切片的(de)制作(zuo)步(bu)驟如下：

1、組織包埋

（1）乙醇脫水：組織經不同濃度的乙醇(chun)溶(rong)液進(jin)(jin)行(xing)逐級脫(tuo)水70％、80％、90％、95％、100％、100％，各級乙醇(chun) 40min（注意：骨性及鈣化(hua)組織需在JYBL-Ⅱ脫(tuo)鈣液中浸泡24h，待組織軟化(hua)后再進(jin)(jin)行(xing)乙醇(chun)脫(tuo)水步驟）。

（2）透明：組(zu)織依次浸泡于三個(ge)二甲苯中，每缸各1h。

（3）浸蠟：組織(zhi)依次浸(jin)泡于(yu)三(san)個(ge)石(shi)蠟缸(gang)中，每(mei)缸(gang)各1h。

（4）包埋：將液態的(de)石蠟倒入(ru)模具盒(he)中(zhong)，再(zai)(zai)將浸好(hao)蠟的(de)組(zu)(zu)織(zhi)塊(kuai)平放底部，注意切(qie)面方向朝(chao)下放置，待石蠟凝固后去掉包埋(mai)框，完(wan)全冷卻變硬(ying)后再(zai)(zai)修整蠟塊(kuai)，組(zu)(zu)織(zhi)外圍的(de)石蠟保(bao)留適中(zhong)以便切(qie)片。

2、切片與貼片

切片制作將預冷的蠟塊固定在石蠟切片機上，使石蠟塊的(de)切(qie)面與(yu)刀口成平行方向(xiang)，刀的(de)傾(qing)斜度通常15℃，轉(zhuan)動輪轉(zhuan)推進器(qi)，調節切(qie)片厚度為4μm，切(qie)成厚度均勻的(de)切(qie)片。

左手持毛筆，右手旋動切片機轉把，切片帶出來之后，用毛筆輕輕托起，再用鑷子輕鑷蠟片，以正面放入展片箱中，其水溫45℃左右。待攤平整后撈片。貼附切片左手持載玻片之一端，垂直入水去附貼切片，右手用鑷子輔助推動，附貼至玻片上的三分之二處。切片貼附后，放在(zai)空(kong)氣中稍晾干，放置65℃烤(kao)片機上烤(kao)1h，再放置烘箱內(nei)烘烤(kao)2h。

3、石蠟切片脫蠟至水

依次將石蠟切片(pian)放入二甲(jia)苯Ⅰ10min-二甲(jia)苯Ⅱ10min-二甲(jia)苯Ⅲ10min-無(wu)水乙醇(chun)Ⅰ5min-無(wu)水乙醇(chun)Ⅱ5min-90%酒(jiu)精(jing)5min-80%酒(jiu)精(jing)5min-70%酒(jiu)精(jing)5min-50%酒(jiu)精(jing)5min梯度脫蠟。

4、HE染色

石蠟(la)切片(pian)入蘇木素染(ran)0.5-1分鐘min，自來水(shui)漂洗(xi)，1%鹽酸(suan)酒精分化數(shu)秒，自來水(shui)漂洗(xi)，然后1%氨水(shui)水(shui)溶液返藍(lan)1min，流水(shui)沖洗(xi)數(shu)秒，放入伊紅染(ran)液中染(ran)色數(shu)秒，流水(shui)漂洗(xi)。

5、脫水封片

石蠟切片依(yi)次放入(ru)75%乙醇2min-85%乙醇2min-無(wu)水(shui)乙醇5min-無(wu)水(shui)乙醇5min-二甲苯(ben)5min透(tou)明，將(jiang)切片從二甲苯(ben)拿出來中性(xing)樹膠(jiao)封片。