一、石蠟切片厚度一般為多少

石蠟切片厚(hou)(hou)度(du)通常為4～7微(wei)米，切(qie)出一(yi)片(pian)接一(yi)片(pian)的(de)蠟帶，用(yong)毛筆輕(qing)托輕(qing)放在紙上(shang)。這(zhe)個(ge)厚(hou)(hou)度(du)通常可(ke)以(yi)滿足大(da)部分實驗室(shi)的(de)需(xu)求。如果需(xu)要更薄的(de)切(qie)片(pian)厚(hou)(hou)度(du)，則(ze)可(ke)以(yi)使用(yong)微(wei)切(qie)機進(jin)行切(qie)割，厚(hou)(hou)度(du)可(ke)達1-2微(wei)米，但這(zhe)種切(qie)片(pian)會(hui)更脆弱，操(cao)作難度(du)更大(da)。

二、石蠟切片制作過程是什么

石蠟切片(pian)的制作步驟如(ru)下：

1、組織包埋

（1）乙醇脫水：組織經不同濃(nong)度的乙醇(chun)溶液進行逐級(ji)脫水70％、80％、90％、95％、100％、100％，各級(ji)乙醇(chun) 40min（注意(yi)：骨性及鈣化(hua)組織需(xu)在JYBL-Ⅱ脫鈣液中(zhong)浸泡24h，待組織軟化(hua)后再進行乙醇(chun)脫水步驟）。

（2）透明：組織依次浸泡于三個二甲(jia)苯中(zhong)，每缸各1h。

（3）浸蠟：組織依次浸(jin)泡(pao)于三個(ge)石蠟缸中，每缸各(ge)1h。

（4）包埋：將液態的(de)(de)石蠟(la)倒入模具盒中(zhong)，再將浸好蠟(la)的(de)(de)組織(zhi)塊平(ping)放(fang)底部，注意切(qie)面方向(xiang)朝下放(fang)置，待石蠟(la)凝(ning)固后(hou)去掉包埋框，完全冷卻變硬后(hou)再修整蠟(la)塊，組織(zhi)外圍的(de)(de)石蠟(la)保留(liu)適中(zhong)以便切(qie)片。

2、切片與貼片

切片制作將預冷的蠟塊固定在石蠟切片機上，使石蠟塊的(de)切面與刀(dao)口(kou)成平行方(fang)向，刀(dao)的(de)傾斜度通常(chang)15℃，轉動輪轉推進(jin)器(qi)，調(diao)節(jie)切片厚(hou)度為4μm，切成厚(hou)度均勻(yun)的(de)切片。

左手持毛筆，右手旋動切片機轉把，切片帶出來之后，用毛筆輕輕托起，再用鑷子輕鑷蠟片，以正面放入展片箱中，其水溫45℃左右。待攤平整后撈片。貼附切片左手持載玻片之一端，垂直入水去附貼切片，右手用鑷子輔助推動，附貼至玻片上的三分之二處。切片貼附后，放(fang)在空氣中稍晾(liang)干(gan)，放(fang)置65℃烤(kao)(kao)片機上(shang)烤(kao)(kao)1h，再放(fang)置烘(hong)箱內(nei)烘(hong)烤(kao)(kao)2h。

3、石蠟切片脫蠟至水

依(yi)次將(jiang)石蠟切片放入二(er)甲苯(ben)(ben)Ⅰ10min-二(er)甲苯(ben)(ben)Ⅱ10min-二(er)甲苯(ben)(ben)Ⅲ10min-無(wu)水乙(yi)醇Ⅰ5min-無(wu)水乙(yi)醇Ⅱ5min-90%酒(jiu)(jiu)精(jing)5min-80%酒(jiu)(jiu)精(jing)5min-70%酒(jiu)(jiu)精(jing)5min-50%酒(jiu)(jiu)精(jing)5min梯度脫蠟。

4、HE染色

石蠟(la)切片(pian)入蘇木(mu)素(su)染0.5-1分鐘min，自來水(shui)漂洗(xi)，1%鹽酸(suan)酒(jiu)精分化數(shu)秒(miao)，自來水(shui)漂洗(xi)，然后1%氨水(shui)水(shui)溶液(ye)返藍1min，流水(shui)沖洗(xi)數(shu)秒(miao)，放入伊(yi)紅染液(ye)中染色(se)數(shu)秒(miao)，流水(shui)漂洗(xi)。

5、脫水封片

石蠟切片依次放(fang)入75%乙(yi)(yi)醇2min-85%乙(yi)(yi)醇2min-無水(shui)乙(yi)(yi)醇5min-無水(shui)乙(yi)(yi)醇5min-二(er)甲苯5min透明(ming)，將切片從(cong)二(er)甲苯拿出來(lai)中性樹(shu)膠封片。