一、石蠟切片厚度一般為多少

石蠟切片厚(hou)度(du)通(tong)常為4～7微米(mi)，切(qie)(qie)(qie)(qie)出(chu)一(yi)片接一(yi)片的蠟帶，用毛筆輕托輕放在紙上(shang)。這個厚(hou)度(du)通(tong)常可以滿足(zu)大部(bu)分實驗室的需求(qiu)。如果(guo)需要(yao)更(geng)(geng)薄的切(qie)(qie)(qie)(qie)片厚(hou)度(du)，則可以使用微切(qie)(qie)(qie)(qie)機進(jin)行(xing)切(qie)(qie)(qie)(qie)割(ge)，厚(hou)度(du)可達1-2微米(mi)，但這種切(qie)(qie)(qie)(qie)片會更(geng)(geng)脆弱，操作難度(du)更(geng)(geng)大。

二、石蠟切片制作過程是什么

石蠟切片的制作步驟(zou)如下(xia)：

1、組織包埋

（1）乙醇脫水：組織(zhi)(zhi)經(jing)不同濃度(du)的(de)乙(yi)醇溶(rong)液進(jin)行逐級脫水70％、80％、90％、95％、100％、100％，各級乙(yi)醇 40min（注意：骨性及鈣(gai)化(hua)(hua)組織(zhi)(zhi)需在JYBL-Ⅱ脫鈣(gai)液中(zhong)浸泡24h，待組織(zhi)(zhi)軟化(hua)(hua)后再(zai)進(jin)行乙(yi)醇脫水步驟(zou)）。

（2）透明：組(zu)織依次浸泡于三(san)個二甲苯中(zhong)，每(mei)缸各1h。

（3）浸蠟：組(zu)織依(yi)次浸泡于三個石蠟(la)缸中，每缸各1h。

（4）包埋：將(jiang)液態的(de)石蠟(la)倒(dao)入模具盒中，再將(jiang)浸(jin)好蠟(la)的(de)組織塊平(ping)放(fang)底部(bu)，注(zhu)意切(qie)面(mian)方向(xiang)朝下放(fang)置(zhi)，待石蠟(la)凝固后(hou)去(qu)掉(diao)包(bao)埋框，完全冷卻(que)變硬后(hou)再修整蠟(la)塊，組織外圍(wei)的(de)石蠟(la)保留適(shi)中以便(bian)切(qie)片(pian)。

2、切片與貼片

切片制作將預冷的蠟塊固定在石蠟切片機上，使石蠟塊的(de)切(qie)面與刀口成平行(xing)方向(xiang)，刀的(de)傾斜度通常15℃，轉動輪轉推(tui)進器，調節切(qie)片(pian)(pian)厚度為4μm，切(qie)成厚度均勻的(de)切(qie)片(pian)(pian)。

左手持毛筆，右手旋動切片機轉把，切片帶出來之后，用毛筆輕輕托起，再用鑷子輕鑷蠟片，以正面放入展片箱中，其水溫45℃左右。待攤平整后撈片。貼附切片左手持載玻片之一端，垂直入水去附貼切片，右手用鑷子輔助推動，附貼至玻片上的三分之二處。切片貼附后，放在(zai)空氣中(zhong)稍(shao)晾干，放置65℃烤片機上烤1h，再放置烘箱內(nei)烘烤2h。

3、石蠟切片脫蠟至水

依次將石蠟切(qie)片放(fang)入二(er)甲(jia)苯Ⅰ10min-二(er)甲(jia)苯Ⅱ10min-二(er)甲(jia)苯Ⅲ10min-無(wu)水乙(yi)醇Ⅰ5min-無(wu)水乙(yi)醇Ⅱ5min-90%酒(jiu)(jiu)精5min-80%酒(jiu)(jiu)精5min-70%酒(jiu)(jiu)精5min-50%酒(jiu)(jiu)精5min梯度脫蠟。

4、HE染色

石蠟切(qie)片入蘇木素染0.5-1分(fen)鐘(zhong)min，自來(lai)水漂(piao)洗，1%鹽酸酒精分(fen)化數(shu)秒(miao)(miao)，自來(lai)水漂(piao)洗，然后1%氨水水溶液返(fan)藍1min，流(liu)水沖洗數(shu)秒(miao)(miao)，放入伊紅染液中染色數(shu)秒(miao)(miao)，流(liu)水漂(piao)洗。

5、脫水封片

石蠟切片(pian)依次(ci)放入75%乙醇(chun)2min-85%乙醇(chun)2min-無(wu)水(shui)乙醇(chun)5min-無(wu)水(shui)乙醇(chun)5min-二甲苯5min透明，將切片(pian)從二甲苯拿出來中性樹(shu)膠封片(pian)。