一、熒光酶標儀和普通酶標儀的區別在哪里
熒光酶標(biao)儀和普通酶標(biao)儀兩者最(zui)大的區別就是原理的不同。
1、熒光酶標儀
由(you)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)源氙弧燈發(fa)出(chu)的(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)通(tong)過切(qie)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)器(qi)(qi)使(shi)其變成斷續(xu)之光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)以及激(ji)發(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)(dan)色(se)器(qi)(qi)變成單(dan)(dan)色(se)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)后,此(ci)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)即為(wei)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)物質的(de)(de)(de)激(ji)發(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang),被測的(de)(de)(de)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)物質在(zai)激(ji)發(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)照(zhao)射下(xia)所(suo)發(fa)出(chu)的(de)(de)(de)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang),經過單(dan)(dan)色(se)器(qi)(qi)變成單(dan)(dan)色(se)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)后照(zhao)射于測樣品(pin)用的(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)電(dian)倍增管上(shang),由(you)其所(suo)發(fa)生的(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)電(dian)流經過放大器(qi)(qi)放大輸至(zhi)記(ji)錄儀,激(ji)發(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)(dan)色(se)器(qi)(qi)和熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)(dan)色(se)器(qi)(qi)的(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)柵均(jun)由(you)電(dian)動機帶(dai)動的(de)(de)(de)凸輪所(suo)控(kong)制,當測繪熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)發(fa)射光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)譜(pu)(pu)時,將(jiang)激(ji)發(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)(dan)色(se)器(qi)(qi)的(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)柵,固定在(zai)最(zui)適當的(de)(de)(de)激(ji)發(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)波長(chang)處,而讓熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)(dan)色(se)器(qi)(qi)凸輪轉動,將(jiang)各波長(chang)的(de)(de)(de)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)強度(du)訊號(hao)輸出(chu)至(zhi)記(ji)錄儀上(shang),所(suo)記(ji)錄的(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)譜(pu)(pu)即發(fa)射光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)譜(pu)(pu)。
當測繪熒(ying)光激(ji)(ji)發光譜時,將熒(ying)光單(dan)色器的(de)(de)(de)光柵固定在最適當的(de)(de)(de)熒(ying)光波長處,只(zhi)讓激(ji)(ji)發光單(dan)色口的(de)(de)(de)凸輪轉動,將各波長的(de)(de)(de)激(ji)(ji)發光的(de)(de)(de)強(qiang)度訊(xun)號(hao)輸(shu)出至記錄(lu)(lu)儀,所記錄(lu)(lu)的(de)(de)(de)光譜即激(ji)(ji)發。
當(dang)進行樣(yang)品(pin)溶液的(de)定(ding)量分析時,將激發(fa)光單色器(qi)固定(ding)在所選擇的(de)激發(fa)光波長處(chu),將熒(ying)(ying)光單色器(qi)調節至(zhi)所選擇的(de)熒(ying)(ying)光波長處(chu),由(you)記錄儀得出的(de)信(xin)號(hao)是樣(yang)品(pin)溶液的(de)熒(ying)(ying)光強度。
2、普通酶標儀(以光吸收酶標儀為例)
光(guang)是電磁波,波長100nm~400nm稱為(wei)紫外光(guang),400nm~780nm之間的光(guang)可被人眼(yan)觀察到,大于780nm稱為(wei)紅外光(guang)。光(guang)吸收酶(mei)標儀測(ce)定(ding)的原理是在特定(ding)波長下,檢(jian)測(ce)被測(ce)物吸光(guang)值。
光通過被(bei)檢測物,前后的(de)能量(liang)差異(yi)即是被(bei)檢測物吸收掉的(de)能量(liang),特(te)定波長下,同一種(zhong)被(bei)檢測物的(de)濃度(du)與(yu)被(bei)吸收的(de)能量(liang)成定量(liang)關(guan)系(xi)。
檢測單位用OD值表示(shi),OD是opticaldelnsity(光密(mi)度(du)(du))的(de)縮寫,表示(shi)被(bei)(bei)檢測物(wu)吸收掉的(de)光密(mi)度(du)(du),OD=1og(1/trans),其(qi)中(zhong)trans為檢測物(wu)的(de)透光值。根據Bouger-amberT-beer法則(ze),OD值與光強度(du)(du)成(cheng)下述關系:E=OD=logΙ0/Ι其(qi)中(zhong)E表示(shi)被(bei)(bei)吸收的(de)光密(mi)度(du)(du),Ι0為在檢測物(wu)之前的(de)光強度(du)(du),Ι為從被(bei)(bei)檢測物(wu)出(chu)來的(de)光強度(du)(du)。
二、熒光酶標儀和普通酶標儀哪個更好
前文已經簡單了解到了熒(ying)(ying)光酶(mei)標儀(yi)(yi)和(he)普通(tong)酶(mei)標儀(yi)(yi)的(de)區別在(zai)(zai)哪里,那么在(zai)(zai)選擇的(de)時候,熒(ying)(ying)光酶(mei)標儀(yi)(yi)和(he)普通(tong)酶(mei)標儀(yi)(yi)哪個更好(hao)呢(ni)?
1、普通酶標儀(以光吸收酶標儀為例)
優點:檢測檢測技術成(cheng)熟(shu),成(cheng)本低,操作簡單。
缺點:動態范圍窄,靈敏度比較低,特(te)異性不強。
2、熒光酶標儀
優點(dian):靈敏(min)度(du)高,可實時檢測(ce)(ce),使用方便,檢測(ce)(ce)模式多樣(yang)。
缺(que)點:易受外(wai)界干擾,激(ji)發光與發射(she)光容易互相影響。
因此,兩者(zhe)比較起來,各有自(zi)己(ji)的(de)優缺點,根據(ju)自(zi)己(ji)的(de)實際情(qing)況進行選(xuan)擇即可(ke)。