一、熒光酶標儀和普通酶標儀的區別在哪里
熒光酶標(biao)儀和普通(tong)酶標(biao)儀兩(liang)者最大的區別就是原理的不同。
1、熒光酶標儀
由(you)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)源氙弧燈發(fa)出的(de)(de)(de)(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)通過切(qie)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)器(qi)(qi)使其(qi)變(bian)成斷續之光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)以及激發(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)色(se)器(qi)(qi)變(bian)成單(dan)色(se)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)后(hou),此光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)即為熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)物(wu)質的(de)(de)(de)(de)(de)(de)激發(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang),被(bei)測的(de)(de)(de)(de)(de)(de)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)物(wu)質在激發(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)照(zhao)射下所(suo)(suo)發(fa)出的(de)(de)(de)(de)(de)(de)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang),經過單(dan)色(se)器(qi)(qi)變(bian)成單(dan)色(se)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)后(hou)照(zhao)射于測樣(yang)品用的(de)(de)(de)(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)電(dian)倍增管上(shang),由(you)其(qi)所(suo)(suo)發(fa)生的(de)(de)(de)(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)電(dian)流經過放(fang)大器(qi)(qi)放(fang)大輸至記錄(lu)儀(yi),激發(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)色(se)器(qi)(qi)和(he)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)色(se)器(qi)(qi)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)柵均由(you)電(dian)動機(ji)帶動的(de)(de)(de)(de)(de)(de)凸輪(lun)(lun)所(suo)(suo)控制,當測繪(hui)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)發(fa)射光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)譜(pu)時,將激發(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)色(se)器(qi)(qi)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)柵,固定在最適(shi)當的(de)(de)(de)(de)(de)(de)激發(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)波(bo)長處,而讓熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)色(se)器(qi)(qi)凸輪(lun)(lun)轉動,將各波(bo)長的(de)(de)(de)(de)(de)(de)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)強(qiang)度訊(xun)號輸出至記錄(lu)儀(yi)上(shang),所(suo)(suo)記錄(lu)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)譜(pu)即發(fa)射光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)譜(pu)。
當測繪熒光(guang)激(ji)發光(guang)譜時,將熒光(guang)單色器的(de)(de)(de)光(guang)柵固定在最適(shi)當的(de)(de)(de)熒光(guang)波長(chang)處(chu),只讓激(ji)發光(guang)單色口(kou)的(de)(de)(de)凸輪轉動,將各波長(chang)的(de)(de)(de)激(ji)發光(guang)的(de)(de)(de)強度訊號輸出至記錄(lu)儀,所記錄(lu)的(de)(de)(de)光(guang)譜即(ji)激(ji)發。
當進行樣品溶(rong)液的(de)定量(liang)分析時(shi),將(jiang)激發(fa)光(guang)單色器固定在所選擇(ze)的(de)激發(fa)光(guang)波長(chang)(chang)處(chu),將(jiang)熒(ying)光(guang)單色器調節至所選擇(ze)的(de)熒(ying)光(guang)波長(chang)(chang)處(chu),由記錄儀得出的(de)信號是樣品溶(rong)液的(de)熒(ying)光(guang)強(qiang)度(du)。
2、普通酶標儀(以光吸收酶標儀為例)
光(guang)(guang)是(shi)電磁波(bo),波(bo)長100nm~400nm稱(cheng)為紫外光(guang)(guang),400nm~780nm之間(jian)的光(guang)(guang)可被(bei)人眼觀察(cha)到,大于780nm稱(cheng)為紅外光(guang)(guang)。光(guang)(guang)吸收酶標儀測(ce)(ce)定的原理是(shi)在(zai)特(te)定波(bo)長下,檢測(ce)(ce)被(bei)測(ce)(ce)物吸光(guang)(guang)值。
光通過(guo)被(bei)檢(jian)(jian)測物,前后的(de)能(neng)(neng)量(liang)差異即是(shi)被(bei)檢(jian)(jian)測物吸收掉的(de)能(neng)(neng)量(liang),特定波長(chang)下,同一種被(bei)檢(jian)(jian)測物的(de)濃度與被(bei)吸收的(de)能(neng)(neng)量(liang)成定量(liang)關系。
檢(jian)測(ce)單位用OD值(zhi)表(biao)示,OD是opticaldelnsity(光(guang)密(mi)度(du))的縮寫(xie),表(biao)示被(bei)檢(jian)測(ce)物(wu)吸收(shou)掉(diao)的光(guang)密(mi)度(du),OD=1og(1/trans),其中trans為(wei)檢(jian)測(ce)物(wu)的透光(guang)值(zhi)。根(gen)據Bouger-amberT-beer法則,OD值(zhi)與光(guang)強(qiang)度(du)成下(xia)述關系:E=OD=logΙ0/Ι其中E表(biao)示被(bei)吸收(shou)的光(guang)密(mi)度(du),Ι0為(wei)在(zai)檢(jian)測(ce)物(wu)之前(qian)的光(guang)強(qiang)度(du),Ι為(wei)從(cong)被(bei)檢(jian)測(ce)物(wu)出(chu)來的光(guang)強(qiang)度(du)。
二、熒光酶標儀和普通酶標儀哪個更好
前文已(yi)經簡單了解到了熒(ying)(ying)光酶(mei)標(biao)儀(yi)和(he)普通酶(mei)標(biao)儀(yi)的區別(bie)在哪里,那么在選擇的時候,熒(ying)(ying)光酶(mei)標(biao)儀(yi)和(he)普通酶(mei)標(biao)儀(yi)哪個(ge)更好呢?
1、普通酶標儀(以光吸收酶標儀為例)
優點:檢測檢測技(ji)術成(cheng)熟,成(cheng)本低,操作簡(jian)單。
缺點:動態范圍窄,靈敏(min)度比(bi)較低,特(te)異性不(bu)強。
2、熒光酶標儀
優點(dian):靈(ling)敏度高,可實時檢(jian)測,使(shi)用方便(bian),檢(jian)測模(mo)式(shi)多樣(yang)。
缺(que)點:易受外(wai)界(jie)干(gan)擾(rao),激(ji)發(fa)光與發(fa)射光容易互相影響。
因此,兩者(zhe)比較起來,各有自(zi)己的優缺點,根(gen)據自(zi)己的實際(ji)情況進行選(xuan)擇即(ji)可。