一、熒光酶標儀和普通酶標儀的區別在哪里
熒光酶標儀和普通酶標儀兩者最大的區別就是原(yuan)理的不同。
1、熒光酶標儀
由光(guang)(guang)(guang)(guang)源氙弧燈發(fa)(fa)(fa)出(chu)(chu)的(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)通過(guo)切光(guang)(guang)(guang)(guang)器(qi)(qi)使其(qi)(qi)變成斷(duan)續之光(guang)(guang)(guang)(guang)以及(ji)激發(fa)(fa)(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)(dan)色(se)(se)(se)(se)器(qi)(qi)變成單(dan)(dan)色(se)(se)(se)(se)光(guang)(guang)(guang)(guang)后,此光(guang)(guang)(guang)(guang)即為熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)物質的(de)(de)(de)激發(fa)(fa)(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang),被測的(de)(de)(de)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)物質在激發(fa)(fa)(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)照(zhao)射(she)(she)(she)下所發(fa)(fa)(fa)出(chu)(chu)的(de)(de)(de)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang),經(jing)過(guo)單(dan)(dan)色(se)(se)(se)(se)器(qi)(qi)變成單(dan)(dan)色(se)(se)(se)(se)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)后照(zhao)射(she)(she)(she)于測樣(yang)品用(yong)的(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)電(dian)倍增管上(shang),由其(qi)(qi)所發(fa)(fa)(fa)生的(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)電(dian)流經(jing)過(guo)放大(da)器(qi)(qi)放大(da)輸至記(ji)錄儀,激發(fa)(fa)(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)(dan)色(se)(se)(se)(se)器(qi)(qi)和熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)(dan)色(se)(se)(se)(se)器(qi)(qi)的(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)柵均由電(dian)動機帶動的(de)(de)(de)凸輪(lun)所控制,當(dang)(dang)測繪熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)發(fa)(fa)(fa)射(she)(she)(she)光(guang)(guang)(guang)(guang)譜(pu)時,將激發(fa)(fa)(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)(dan)色(se)(se)(se)(se)器(qi)(qi)的(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)柵,固定在最適當(dang)(dang)的(de)(de)(de)激發(fa)(fa)(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)波長(chang)處,而讓(rang)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)(dan)色(se)(se)(se)(se)器(qi)(qi)凸輪(lun)轉動,將各波長(chang)的(de)(de)(de)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)強度訊號輸出(chu)(chu)至記(ji)錄儀上(shang),所記(ji)錄的(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)譜(pu)即發(fa)(fa)(fa)射(she)(she)(she)光(guang)(guang)(guang)(guang)譜(pu)。
當(dang)測繪熒光(guang)(guang)(guang)激(ji)(ji)發光(guang)(guang)(guang)譜(pu)時,將(jiang)熒光(guang)(guang)(guang)單色器(qi)的(de)光(guang)(guang)(guang)柵固(gu)定在最適當(dang)的(de)熒光(guang)(guang)(guang)波(bo)長處(chu),只讓激(ji)(ji)發光(guang)(guang)(guang)單色口的(de)凸輪轉動,將(jiang)各波(bo)長的(de)激(ji)(ji)發光(guang)(guang)(guang)的(de)強度訊號輸(shu)出至記錄(lu)儀(yi),所記錄(lu)的(de)光(guang)(guang)(guang)譜(pu)即激(ji)(ji)發。
當進行(xing)樣(yang)品溶液的(de)定量分析時,將激(ji)發光(guang)(guang)(guang)(guang)單色器固定在所選(xuan)擇的(de)激(ji)發光(guang)(guang)(guang)(guang)波長(chang)處(chu),將熒光(guang)(guang)(guang)(guang)單色器調節至所選(xuan)擇的(de)熒光(guang)(guang)(guang)(guang)波長(chang)處(chu),由記錄儀得出(chu)的(de)信號是樣(yang)品溶液的(de)熒光(guang)(guang)(guang)(guang)強度。
2、普通酶標儀(以光吸收酶標儀為例)
光(guang)(guang)(guang)是電(dian)磁波,波長(chang)(chang)100nm~400nm稱為(wei)紫外光(guang)(guang)(guang),400nm~780nm之(zhi)間(jian)的(de)光(guang)(guang)(guang)可被(bei)人眼觀察到,大于780nm稱為(wei)紅外光(guang)(guang)(guang)。光(guang)(guang)(guang)吸收酶(mei)標(biao)儀測定(ding)(ding)的(de)原(yuan)理是在(zai)特定(ding)(ding)波長(chang)(chang)下,檢測被(bei)測物吸光(guang)(guang)(guang)值。
光(guang)通過被(bei)(bei)檢測(ce)物(wu),前后(hou)的能量(liang)差異即是(shi)被(bei)(bei)檢測(ce)物(wu)吸收(shou)掉的能量(liang),特定波長(chang)下,同一種被(bei)(bei)檢測(ce)物(wu)的濃(nong)度與被(bei)(bei)吸收(shou)的能量(liang)成(cheng)定量(liang)關系。
檢(jian)(jian)測單(dan)位用OD值表示,OD是opticaldelnsity(光(guang)(guang)密(mi)度)的縮寫,表示被(bei)檢(jian)(jian)測物(wu)吸(xi)收掉的光(guang)(guang)密(mi)度,OD=1og(1/trans),其(qi)(qi)中trans為(wei)(wei)檢(jian)(jian)測物(wu)的透光(guang)(guang)值。根據Bouger-amberT-beer法(fa)則,OD值與(yu)光(guang)(guang)強(qiang)度成下述關系:E=OD=logΙ0/Ι其(qi)(qi)中E表示被(bei)吸(xi)收的光(guang)(guang)密(mi)度,Ι0為(wei)(wei)在檢(jian)(jian)測物(wu)之前的光(guang)(guang)強(qiang)度,Ι為(wei)(wei)從被(bei)檢(jian)(jian)測物(wu)出來(lai)的光(guang)(guang)強(qiang)度。
二、熒光酶標儀和普通酶標儀哪個更好
前(qian)文已經簡單(dan)了(le)解到了(le)熒光(guang)酶(mei)標(biao)(biao)儀和普(pu)通(tong)酶(mei)標(biao)(biao)儀的區別在(zai)哪里,那么在(zai)選擇(ze)的時候,熒光(guang)酶(mei)標(biao)(biao)儀和普(pu)通(tong)酶(mei)標(biao)(biao)儀哪個更好呢?
1、普通酶標儀(以光吸收酶標儀為例)
優點:檢測檢測技術成熟,成本低,操作簡單。
缺點(dian):動態范圍窄,靈敏度比較低,特異性不(bu)強。
2、熒光酶標儀
優點:靈敏度高(gao),可實時檢(jian)測,使用(yong)方便(bian),檢(jian)測模(mo)式(shi)多樣。
缺點:易受外(wai)界干(gan)擾,激發(fa)光(guang)(guang)與(yu)發(fa)射(she)光(guang)(guang)容易互相影響。
因(yin)此(ci),兩者比較起來,各(ge)有自己的優缺點,根(gen)據自己的實際情況進行選擇即可。