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沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)是(shi)(shi)一種(zhong)常見(jian)的(de)食(shi)源性致(zhi)病(bing)(bing)菌(jun)(jun)(jun)。沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)鑒定(ding)的(de)傳統方法主(zhu)要是(shi)(shi)根據形(xing)態學特(te)征、培養(yang)特(te)征、生(sheng)理(li)生(sheng)化特(te)征、抗原(yuan)特(te)征、噬菌(jun)(jun)(jun)體特(te)征等。1885年沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)等在霍(huo)亂流行時分離到豬霍(huo)亂沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)，故定(ding)名為沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)屬。沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)屬有(you)的(de)專對(dui)人類(lei)(lei)致(zhi)病(bing)(bing)，有(you)的(de)只對(dui)動物(wu)致(zhi)病(bing)(bing)，也(ye)有(you)對(dui)人和動物(wu)都致(zhi)病(bing)(bing)。沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)病(bing)(bing)是(shi)(shi)指由各種(zhong)類(lei)(lei)型沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)所引起的(de)對(dui)人類(lei)(lei)、家畜以及野生(sheng)禽獸(shou)不(bu)同形(xing)式的(de)總稱(cheng)。感染(ran)沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)的(de)人或帶菌(jun)(jun)(jun)者(zhe)的(de)糞(fen)便污染(ran)食(shi)品，可使人發生(sheng)食(shi)物(wu)中毒。據統計在世界各國的(de)種(zhong)類(lei)(lei)細菌(jun)(jun)(jun)性食(shi)物(wu)中毒中，沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)引起的(de)食(shi)物(wu)中毒常列榜首(shou)。我國內(nei)陸地區也(ye)以沙(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)為首(shou)位。

簡介

沙門氏菌(jun)(jun)病(bing)的(de)(de)病(bing)原(yuan)體。屬腸桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)科，革(ge)蘭氏陰性腸道(dao)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)。已發現的(de)(de)近一千種（或菌(jun)(jun)株）。按其(qi)抗(kang)原(yuan)成分，可分為(wei)甲(jia)、乙(yi)(yi)、丙(bing)、丁(ding)、戊等(deng)基本菌(jun)(jun)組。其(qi)中與人體疾(ji)病(bing)有(you)關的(de)(de)主要有(you)甲(jia)組的(de)(de)副(fu)(fu)傷(shang)寒(han)(han)甲(jia)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)，乙(yi)(yi)組的(de)(de)副(fu)(fu)傷(shang)寒(han)(han)乙(yi)(yi)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)和鼠(shu)傷(shang)寒(han)(han)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)，丙(bing)組的(de)(de)副(fu)(fu)傷(shang)寒(han)(han)丙(bing)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)和豬霍亂桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)，丁(ding)組的(de)(de)傷(shang)寒(han)(han)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)和腸炎桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)等(deng)。除傷(shang)寒(han)(han)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)、副(fu)(fu)傷(shang)寒(han)(han)甲(jia)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)和副(fu)(fu)傷(shang)寒(han)(han)乙(yi)(yi)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)引起(qi)人類的(de)(de)疾(ji)病(bing)外，大多數僅能(neng)引起(qi)家畜、鼠(shu)類和禽類等(deng)動(dong)物(wu)的(de)(de)疾(ji)病(bing)，但有(you)時也(ye)可污染人類的(de)(de)食物(wu)而引起(qi)食物(wu)中毒。

沙(sha)門氏(shi)菌(jun)在水中(zhong)不易繁(fan)(fan)殖，但(dan)可生存(cun)(cun)2-3周，冰(bing)箱中(zhong)可生存(cun)(cun)3-4個月(yue)，在自然環境的(de)糞(fen)便中(zhong)可存(cun)(cun)活1-2個月(yue)。沙(sha)門氏(shi)菌(jun)最(zui)適繁(fan)(fan)殖溫(wen)度為(wei)37℃，在20℃以(yi)上即(ji)能大量繁(fan)(fan)殖，因此，低溫(wen)儲存(cun)(cun)食(shi)品是(shi)一(yi)項重要預(yu)防措施。

沙門氏菌屬

菌體(ti)大小（0.6～0.9)×（1～3)微米無(wu)芽胞，一般無(wu)莢膜(mo)，除雞白痢(li)沙門(men)氏菌和(he)雞傷寒沙門(men)氏菌外(wai)，大多(duo)有周(zhou)身鞭毛。營養(yang)(yang)要求不(bu)(bu)高，分離(li)培養(yang)(yang)常采(cai)用腸道選擇鑒(jian)(jian)別(bie)培養(yang)(yang)基。生化(hua)反應對本屬(shu)菌的(de)鑒(jian)(jian)別(bie)具有重要參考(kao)意義（見表）。不(bu)(bu)液化(hua)明(ming)膠，不(bu)(bu)分解尿(niao)素，不(bu)(bu)產(chan)(chan)生吲哚，不(bu)(bu)發(fa)酵乳糖(tang)和(he)蔗(zhe)糖(tang)，能發(fa)酵葡(pu)萄糖(tang)、甘露醇、麥芽糖(tang)和(he)衛芽糖(tang)，大多(duo)產(chan)(chan)酸(suan)產(chan)(chan)氣，少數只產(chan)(chan)酸(suan)不(bu)(bu)產(chan)(chan)氣。VP試驗陰性，有賴(lai)氨酸(suan)脫羧(suo)酶。DNA的(de)G+C含量為50～53%。對熱抵抗力(li)不(bu)(bu)強，在(zai)60℃15分鐘可(ke)被殺(sha)死(si)。在(zai)水中(zhong)存活2～3周(zhou)。在(zai)5%的(de)石炭(tan)酸(suan)中(zhong)，5分鐘死(si)亡。

本屬菌(jun)按生化反應分(fen)為4個亞(ya)屬。亞(ya)屬Ⅰ是(shi)生化反應典(dian)型的(de)和最常見的(de)沙門(men)氏(shi)菌(jun)；亞(ya)屬Ⅱ和Ⅳ是(shi)生化反應不典(dian)型的(de)沙門(men)氏(shi)菌(jun)；亞(ya)屬Ⅲ是(shi)亞(ya)利桑那沙門(men)氏(shi)菌(jun)。

沙門氏(shi)菌具有復雜的抗原結構，一般可分為菌體(O)抗原、鞭毛(H)抗原和表(biao)面(Vi)抗原3種。

理化特性

生化反應很活潑，能(neng)分解多種糖(tang)類和醇。

培養特性

1）需氧(yang)及兼性厭氧(yang)菌(jun)。

2）在普通瓊脂培(pei)養基上生長(chang)良好(hao)，培(pei)養24h后，形成中等大(da)小、圓形、表面光滑、無色半透明、邊(bian)緣整(zheng)齊(qi)的(de)菌(jun)落，其(qi)菌(jun)落特征亦與大(da)腸桿菌(jun)相似（無糞臭味）。

3）鑒別(bie)培養(yang)基（麥康(kang)凱、SS、伊紅美藍）：一(yi)般無色菌落。

4）三(san)糖鐵瓊脂(zhi)斜(xie)(xie)面：斜(xie)(xie)面為紅(hong)色(se)，底部變(bian)黑并產氣。

生化特性

1）發酵葡萄糖，麥芽糖，甘露醇和山梨醇產氣；

2）不發酵(jiao)乳糖、蔗糖和側金盞花醇；

3）不產吲哚(duo)、V-P反(fan)應陰性(xing)；

4）不水解尿素(su)和對苯丙氨(an)酸不脫氨(an)。

傷寒(han)沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)、雞傷寒(han)沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)及一(yi)部分雞白痢沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)發酵糖不產氣，大(da)多數雞白痢沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)不發酵麥(mai)芽糖；除雞白痢沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)、豬傷寒(han)沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)、甲型副(fu)傷寒(han)沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)、傷寒(han)沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)和(he)仙(xian)臺沙(sha)(sha)(sha)(sha)門(men)(men)氏(shi)菌(jun)(jun)等外(wai)，均能利用(yong)枸櫞酸鹽。

血清學特性

沙門氏菌具有復雜的抗原(yuan)結構，一(yi)般沙門氏菌具有菌體(O)抗原(yuan)、鞭毛(H)抗原(yuan)和表(biao)面(mian)抗原(yuan)(莢膜或包膜抗原(yuan))三種(zhong)抗原(yuan)。

傳播途徑

肉的污染

肉及其制品(pin)的(de)沙(sha)門(men)氏(shi)菌(jun)檢(jian)出率美國(guo)為20%-25%、英國(guo)為9.9%、日本檢(jian)查(cha)進口家(jia)禽(qin)的(de)污染率為10.3%，國(guo)內肉類(lei)沙(sha)門(men)氏(shi)菌(jun)檢(jian)出率在1.1%-39.5%。

蛋的污染

中國蛋(dan)(dan)及(ji)其制品(pin)沙門氏菌檢出率(lv)為3.9%-43.7%，由于吃蛋(dan)(dan)引起鼠(shu)傷寒(han)病的病例報告逐漸有增加的趨(qu)勢。

環境污染

食品在加工、運輸(shu)、出售過程中往往被(bei)沙門(men)氏菌(jun)污染。沙門(men)氏菌(jun)在糞便、土壤、食品、水中可生存5個月至2年(nian)之久。

傳播問題

恢復期患者和無癥狀(zhuang)的(de)帶菌者也是常見的(de)傳染源。

分布

廣泛分布于自然(ran)界，常常寄居在人和(he)動物(wu)體內，特別是家禽、家畜及寵物(wu)的(de)腸道中。主要污染(ran)的(de)食品(pin)有：肉(rou)(rou)和(he)肉(rou)(rou)制(zhi)品(pin)、蛋和(he)蛋制(zhi)品(pin)、奶(nai)和(he)奶(nai)制(zhi)品(pin)等。由于沙門氏菌不分解蛋白(bai)質，食物(wu)被(bei)其污染(ran)后表面看起來似乎并(bing)沒有變化(hua).

感染癥

沙門(men)氏菌(jun)感染癥為(wei)人畜(chu)共患感染性疾病，主要由食(shi)用遭受污染的食(shi)物導致，是許多國家(jia)食(shi)物中毒的重要病源。

癥狀

典型癥狀包(bao)括發(fa)熱(re)、惡心、嘔吐、腹(fu)瀉及腹(fu)部絞痛等癥狀，通(tong)常在發(fa)熱(re)后72小時內會(hui)好轉。嬰兒、老(lao)年人、免疫功能低下(xia)的患者則(ze)可能因沙門氏菌進入血液而(er)出現嚴重且危及生命的菌血癥，少數還會(hui)合并腦膜炎(yan)或骨髓炎(yan)。

治療

一(yi)般沙(sha)門氏菌造成的(de)腸胃炎不需要(yao)給予抗生(sheng)(sheng)素治療；而以補充水分與電解質(zhi)為主；但對于新生(sheng)(sheng)兒、免疫功能低(di)下患者(zhe)及特(te)殊傷員；則需要(yao)視(shi)情況紿予抗生(sheng)(sheng)素治療。

預防

1、餐前、便后(hou)、接(jie)觸(chu)食物前、接(jie)觸(chu)動物或生蛋后(hou)應仔細洗凈雙(shuang)手(shou)。

2、處理生食和(he)熟食的砧板要分開。

3、食物要(yao)熟透再吃(尤其是雞蛋與家禽類)。

4、非(fei)現做(zuo)現吃(chi)的食物應(ying)以保(bao)鮮(xian)膜(mo)包(bao)覆后放(fang)進冰(bing)箱保(bao)存，再次食用前應(ying)加熱或煮熟。

5、撲滅(mie)并(bing)阻隔(ge)蒼蠅等(deng)病媒。被蒼蠅沾染、過期或腐(fu)敗的不潔食物均應丟棄(qi)，切(qie)勿(wu)食用(yong)。

6、水塔應(ying)經常清洗(xi)、消毒。

7、旅行(xing)或(huo)野(ye)營時的飲用水(shui)應(ying)煮沸(fei)并消毒。

8、如(ru)有嘔吐、腹(fu)瀉(xie)或發熱等癥狀，應盡(jin)快就(jiu)醫。

感染

沙(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)是(shi)美(mei)國(guo)(guo)食(shi)(shi)物(wu)(wu)中毒(du)致(zhi)死(si)(si)的(de)(de)(de)(de)(de)主(zhu)要(yao)原(yuan)因(yin)。美(mei)國(guo)(guo)人(ren)(ren)對這(zhe)種病(bing)(bing)菌(jun)(jun)(jun)(jun)一(yi)點都不(bu)陌生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)，每(mei)年全(quan)國(guo)(guo)大(da)(da)(da)約報告40000例(li)沙(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)感(gan)染病(bing)(bing)例(li)。但實(shi)際的(de)(de)(de)(de)(de)感(gan)染人(ren)(ren)數可能(neng)要(yao)達20倍以(yi)(yi)上(shang)(shang)，因(yin)為許多輕型(xing)病(bing)(bing)人(ren)(ren)可能(neng)未(wei)確診，據(ju)不(bu)完全(quan)統計，每(mei)年大(da)(da)(da)約有(you)(you)1000人(ren)(ren)死(si)(si)于急性(xing)沙(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)感(gan)染。但是(shi)，以(yi)(yi)前各州爆發(fa)的(de)(de)(de)(de)(de)疫情幾(ji)乎都與(yu)(yu)人(ren)(ren)們吃(chi)了(le)染上(shang)(shang)沙(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)的(de)(de)(de)(de)(de)肉類(lei)(lei)、蛋(dan)(dan)(dan)類(lei)(lei)、乳類(lei)(lei)有(you)(you)關，但迄(qi)今(jin)為止，很少聽說吃(chi)蔬果(guo)大(da)(da)(da)面(mian)積(ji)受沙(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)污(wu)(wu)染甚至(zhi)在(zai)(zai)人(ren)(ren)群中引發(fa)大(da)(da)(da)疫情的(de)(de)(de)(de)(de)。對此，周福生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)教(jiao)授解釋說，這(zhe)可能(neng)是(shi)西(xi)(xi)紅(hong)柿在(zai)(zai)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)長的(de)(de)(de)(de)(de)過(guo)程中，由于空氣中紫外線(xian)不(bu)夠強烈(lie)，植物(wu)(wu)在(zai)(zai)灌溉過(guo)程或因(yin)土壤中含有(you)(you)沙(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)，這(zhe)樣(yang)才使西(xi)(xi)紅(hong)柿的(de)(de)(de)(de)(de)表皮上(shang)(shang)沾(zhan)染了(le)沙(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)，加上(shang)(shang)不(bu)少人(ren)(ren)有(you)(you)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)食(shi)(shi)西(xi)(xi)紅(hong)柿的(de)(de)(de)(de)(de)習慣(guan)，如果(guo)沒有(you)(you)清洗干凈，就(jiu)(jiu)完全(quan)有(you)(you)可能(neng)發(fa)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)沙(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)感(gan)染。不(bu)光是(shi)食(shi)(shi)用西(xi)(xi)紅(hong)柿，其他瓜(gua)果(guo)蔬菜也一(yi)樣(yang)。沙(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)主(zhu)要(yao)污(wu)(wu)染肉類(lei)(lei)食(shi)(shi)品，魚、禽、奶、蛋(dan)(dan)(dan)類(lei)(lei)食(shi)(shi)品也可受此菌(jun)(jun)(jun)(jun)污(wu)(wu)染。沙(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)食(shi)(shi)物(wu)(wu)中毒(du)全(quan)年都可發(fa)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)，吃(chi)了(le)未(wei)煮(zhu)透的(de)(de)(de)(de)(de)病(bing)(bing)、死(si)(si)牲畜肉或在(zai)(zai)屠宰(zai)后其他環節(jie)污(wu)(wu)染的(de)(de)(de)(de)(de)牲畜肉是(shi)引起(qi)沙(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)食(shi)(shi)物(wu)(wu)中毒(du)的(de)(de)(de)(de)(de)最主(zhu)要(yao)原(yuan)因(yin)。有(you)(you)食(shi)(shi)品專家指出美(mei)國(guo)(guo)人(ren)(ren)吃(chi)雞蛋(dan)(dan)(dan)的(de)(de)(de)(de)(de)習慣(guan)與(yu)(yu)國(guo)(guo)人(ren)(ren)不(bu)同(tong)，他們喜(xi)歡(huan)吃(chi)半熟的(de)(de)(de)(de)(de)雞蛋(dan)(dan)(dan)甚至(zhi)是(shi)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)雞蛋(dan)(dan)(dan)，所以(yi)(yi)一(yi)旦雞蛋(dan)(dan)(dan)里含有(you)(you)沙(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)，感(gan)染的(de)(de)(de)(de)(de)幾(ji)率(lv)就(jiu)(jiu)比(bi)較高(gao)。“在(zai)(zai)國(guo)(guo)內，生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)雞蛋(dan)(dan)(dan)里含有(you)(you)沙(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)其實(shi)并不(bu)奇怪(guai)，只不(bu)過(guo)國(guo)(guo)人(ren)(ren)喜(xi)歡(huan)將(jiang)雞蛋(dan)(dan)(dan)煮(zhu)熟吃(chi)，這(zhe)樣(yang)就(jiu)(jiu)大(da)(da)(da)大(da)(da)(da)減少了(le)感(gan)染的(de)(de)(de)(de)(de)幾(ji)率(lv)。”

癥狀及原因

由(you)沙門氏菌(jun)引(yin)起(qi)的食(shi)品(pin)(pin)中(zhong)毒(du)(du)癥(zheng)狀主要(yao)有(you)(you)惡心、嘔(ou)吐、腹痛(tong)、頭痛(tong)、畏(wei)寒和腹瀉等，還伴有(you)(you)乏力、肌(ji)肉酸痛(tong)、視(shi)覺模糊、中(zhong)等程度發熱、躁動不安和嗜睡(shui)，延續時(shi)間2～3d，平均致死率為4．1%。其主要(yao)原因是由(you)于(yu)攝入了含有(you)(you)大量沙門氏菌(jun)屬的非寄主專一性菌(jun)種或血清型的食(shi)品(pin)(pin)所引(yin)起(qi)的。在攝入含毒(du)(du)食(shi)品(pin)(pin)之后．癥(zheng)狀一般在12～14h內出現，有(you)(you)些潛伏期較長。

預防措施

防(fang)止沙(sha)門氏菌污染食(shi)品；控(kong)制食(shi)品中(zhong)沙(sha)門氏菌的繁殖；加(jia)熱(re)以徹底殺滅病原菌。

沙(sha)門(men)氏菌不耐高(gao)溫，食物的(de)中心溫度達(da)70℃以上，持(chi)續5分鐘一(yi)般(ban)都可以殺死包(bao)括(kuo)沙(sha)門(men)氏菌等常見食源性致病菌。家庭中一(yi)般(ban)的(de)熱處理烹調方式都可有效殺滅該菌。

檢測方法

前增菌

稱取25g（mL）樣品(pin)(pin)放入盛(sheng)有225 mL BPW的(de)無(wu)菌均(jun)(jun)(jun)質(zhi)(zhi)杯(bei)中，以8000 r/min～10 000 r/min均(jun)(jun)(jun)質(zhi)(zhi)1min～2min，或置于盛(sheng)有225 mL BPW的(de)無(wu)菌均(jun)(jun)(jun)質(zhi)(zhi)袋(dai)中，用(yong)拍擊式均(jun)(jun)(jun)質(zhi)(zhi)器(qi)拍打1min～2min。若(ruo)樣品(pin)(pin)為液態，不需(xu)要均(jun)(jun)(jun)質(zhi)(zhi)，振(zhen)蕩混勻(yun)。如需(xu)測定pH值(zhi)，用(yong)1mol/mL無(wu)菌NaOH或HCl調(diao)pH至6.8±0.2。無(wu)菌操作(zuo)將樣品(pin)(pin)轉至500mL錐形瓶(ping)中，如使(shi)用(yong)均(jun)(jun)(jun)質(zhi)(zhi)袋(dai)，可直接進行培(pei)養，于36 ℃±1℃培(pei)養8h～18h。

如為冷凍產品(pin)，應(ying)在45℃以下不超過15min，或2℃～5℃不超過18h解(jie)凍。

增菌

輕(qing)輕(qing)搖動培養過的樣(yang)品混合物，移取1mL，轉種于(yu)10mL TTB內(nei)，于(yu)42℃±1℃培養18h～24h。同時，另取1mL，轉種于(yu)10 mL SC內(nei)，于(yu)36℃±1℃培養18h～24h。

分離

分別(bie)用接種(zhong)環取(qu)增菌(jun)液(ye)1環，劃線接種(zhong)于一個(ge)(ge)BS瓊(qiong)(qiong)脂(zhi)平(ping)(ping)板(ban)(ban)(ban)和(he)一個(ge)(ge)XLD瓊(qiong)(qiong)脂(zhi)平(ping)(ping)板(ban)(ban)(ban)（或HE瓊(qiong)(qiong)脂(zhi)平(ping)(ping)板(ban)(ban)(ban)或沙(sha)門(men)氏(shi)菌(jun)屬(shu)顯色培(pei)養(yang)基(ji)平(ping)(ping)板(ban)(ban)(ban)）。于36℃±1℃分別(bie)培(pei)養(yang)18h～24h（XLD瓊(qiong)(qiong)脂(zhi)平(ping)(ping)板(ban)(ban)(ban)、HE瓊(qiong)(qiong)脂(zhi)平(ping)(ping)板(ban)(ban)(ban)、沙(sha)門(men)氏(shi)菌(jun)屬(shu)顯色培(pei)養(yang)基(ji)平(ping)(ping)板(ban)(ban)(ban)）或40h～48h （BS瓊(qiong)(qiong)脂(zhi)平(ping)(ping)板(ban)(ban)(ban)），觀察各(ge)個(ge)(ge)平(ping)(ping)板(ban)(ban)(ban)上生長(chang)的菌(jun)落(luo)，各(ge)個(ge)(ge)平(ping)(ping)板(ban)(ban)(ban)上的菌(jun)落(luo)特(te)征見表(biao)1。

表 1 沙門氏(shi)菌(jun)屬在(zai)不同選(xuan)擇性(xing)瓊脂平板上的菌(jun)落特征

選(xuan)擇性瓊脂平板 沙(sha)門氏菌

BS 瓊脂 菌(jun)落(luo)為黑色有(you)金屬光澤、棕(zong)(zong)褐色或灰色，菌(jun)落(luo)周(zhou)(zhou)圍培(pei)養基可呈黑色或棕(zong)(zong)色；有(you)些菌(jun)株(zhu)形成灰綠色的菌(jun)落(luo)，周(zhou)(zhou)圍培(pei)養基不(bu)變。

HE 瓊脂(zhi) 藍綠色(se)(se)或(huo)藍色(se)(se)，多數菌落(luo)中(zhong)心(xin)黑(hei)色(se)(se)或(huo)幾乎全黑(hei)色(se)(se)；有些菌株為黃色(se)(se)，中(zhong)心(xin)黑(hei)色(se)(se)或(huo)幾乎全黑(hei)色(se)(se)。

XLD 瓊脂(zhi) 菌落呈粉(fen)紅色(se)，帶或不(bu)帶黑(hei)色(se)中(zhong)心(xin)，有些菌株可呈現大(da)的(de)帶光澤的(de)黑(hei)色(se)中(zhong)心(xin)，或呈現全部黑(hei)色(se)的(de)菌落；有些菌株為黃色(se)菌落，帶或不(bu)帶黑(hei)色(se)中(zhong)心(xin)。

沙門氏菌屬顯色培養(yang) 按照顯色培養(yang)基的說明進行判定(ding)。

自19世紀(ji)后期(qi)，沙(sha)(sha)門(men)氏(shi)菌(jun)首次被鑒定為(wei)(wei)人(ren)類的(de)(de)(de)一(yi)種病(bing)(bing)(bing)(bing)原(yuan)(yuan)以(yi)來，檢(jian)測方(fang)法(fa)(fa)學都是建(jian)立在采取感染(ran)病(bing)(bing)(bing)(bing)人(ren)的(de)(de)(de)糞便或血液作(zuo)為(wei)(wei)臨床(chuang)病(bing)(bing)(bing)(bing)料(liao)的(de)(de)(de)基礎上(shang)(shang)。此(ci)后的(de)(de)(de)60年間，用(yong)(yong)于從(cong)(cong)食(shi)(shi)品(pin)中(zhong)分(fen)(fen)離沙(sha)(sha)門(men)氏(shi)菌(jun)的(de)(de)(de)方(fang)法(fa)(fa)實質上(shang)(shang)與那(nei)些(xie)(xie)用(yong)(yong)于臨床(chuang)病(bing)(bing)(bing)(bing)料(liao)的(de)(de)(de)方(fang)法(fa)(fa)是相(xiang)同的(de)(de)(de)。但至少有三個(ge)(ge)(ge)因(yin)素(su)(su)限制了(le)用(yong)(yong)于臨床(chuang)病(bing)(bing)(bing)(bing)料(liao)的(de)(de)(de)方(fang)法(fa)(fa)應用(yong)(yong)在食(shi)(shi)品(pin)分(fen)(fen)析上(shang)(shang)。第(di)一(yi)，通(tong)(tong)常(chang)(chang)，沙(sha)(sha)門(men)氏(shi)菌(jun)的(de)(de)(de)含量(liang)水平(ping)在污染(ran)食(shi)(shi)品(pin)中(zhong)比有感染(ran)病(bing)(bing)(bing)(bing)人(ren)的(de)(de)(de)病(bing)(bing)(bing)(bing)料(liao)中(zhong)要低(di)很(hen)多；第(di)二，食(shi)(shi)品(pin)本身(shen)的(de)(de)(de)性(xing)質會干(gan)擾病(bing)(bing)(bing)(bing)原(yuan)(yuan)的(de)(de)(de)檢(jian)測，例(li)如，某些(xie)(xie)食(shi)(shi)品(pin)中(zhong)固有菌(jun)群可能處在一(yi)個(ge)(ge)(ge)很(hen)高(gao)(gao)的(de)(de)(de)水平(ping)，從(cong)(cong)而(er)影響(xiang)特(te)定細(xi)菌(jun)的(de)(de)(de)選擇(ze)(ze)性(xing)分(fen)(fen)離和(he)鑒定；第(di)三，與臨床(chuang)病(bing)(bing)(bing)(bing)料(liao)不(bu)同的(de)(de)(de)是，經過加工的(de)(de)(de)食(shi)(shi)品(pin)，由于加熱、干(gan)燥、高(gao)(gao)含鹽量(liang)、酸和(he)冷凍(dong)等因(yin)素(su)(su)的(de)(de)(de)作(zuo)用(yong)(yong)，其中(zhong)的(de)(de)(de)沙(sha)(sha)門(men)氏(shi)菌(jun)受到了(le)尚不(bu)致(zhi)命的(de)(de)(de)損傷(shang)或稱(cheng)“致(zhi)傷(shang)”。這就形成了(le)一(yi)個(ge)(ge)(ge)具有不(bu)同生(sheng)長特(te)性(xing)的(de)(de)(de)細(xi)菌(jun)群。這種現(xian)象對(dui)(dui)那(nei)些(xie)(xie)希望從(cong)(cong)食(shi)(shi)物(wu)樣(yang)品(pin)中(zhong)分(fen)(fen)離出(chu)(chu)沙(sha)(sha)門(men)氏(shi)菌(jun)的(de)(de)(de)食(shi)(shi)品(pin)分(fen)(fen)析家來說(shuo)有很(hen)大影響(xiang)，因(yin)為(wei)(wei)在選擇(ze)(ze)培養基上(shang)(shang)直接培養“致(zhi)傷(shang)”的(de)(de)(de)沙(sha)(sha)門(men)氏(shi)菌(jun)通(tong)(tong)常(chang)(chang)是以(yi)細(xi)菌(jun)死亡和(he)試驗失敗而(er)告終。為(wei)(wei)克服這些(xie)(xie)困難，人(ren)們(men)建(jian)立了(le)一(yi)種簡(jian)單(dan)的(de)(de)(de)微生(sheng)物(wu)增殖步(bu)驟，專門(men)針對(dui)(dui)以(yi)食(shi)(shi)品(pin)為(wei)(wei)傳播載(zai)體的(de)(de)(de)病(bing)(bing)(bing)(bing)原(yuan)(yuan)。雖然這些(xie)(xie)方(fang)法(fa)(fa)本身(shen)證(zheng)明(ming)是可靠的(de)(de)(de)，但卻很(hen)費力、耗時，需要4～7天才能完成。因(yin)此(ci)，在需要及時、快速評(ping)價食(shi)(shi)品(pin)中(zhong)微生(sheng)物(wu)的(de)(de)(de)安全性(xing)時，通(tong)(tong)常(chang)(chang)不(bu)被采用(yong)(yong)。隨著DNA和(he)抗體技術的(de)(de)(de)發展(zhan)，近(jin)10～15年間發展(zhan)了(le)無(wu)數改進的(de)(de)(de)方(fang)法(fa)(fa)，其中(zhong)許多可以(yi)在48h內檢(jian)出(chu)(chu)沙(sha)(sha)門(men)氏(shi)菌(jun)，這些(xie)(xie)方(fang)法(fa)(fa)通(tong)(tong)稱(cheng)為(wei)(wei)快速檢(jian)測。

抗體檢測

利(li)用(yong)(yong)抗原(yuan)(yuan)-抗體(ti)反應(ying)的(de)(de)顯著特異(yi)性，來進行細(xi)菌(jun)的(de)(de)鑒別和血清(qing)學(xue)(xue)定型，已有半個多(duo)世紀的(de)(de)歷史。細(xi)菌(jun)菌(jun)體(ti)或鞭毛抗原(yuan)(yuan)的(de)(de)特異(yi)性抗體(ti)的(de)(de)存(cun)在，使(shi)得(de)人(ren)們(men)可以(yi)建立一(yi)些快(kuai)速(su)方法(fa)(fa)來檢測(ce)以(yi)食(shi)品為載體(ti)的(de)(de)病原(yuan)(yuan)。已經(jing)建立的(de)(de)沙門氏菌(jun)免(mian)(mian)(mian)疫學(xue)(xue)檢測(ce)方法(fa)(fa)有許(xu)多(duo)種，大致可分為以(yi)酶標(biao)抗體(ti)（ELISA)，熒光(guang)(guang)抗體(ti)染色(se)（免(mian)(mian)(mian)疫熒光(guang)(guang)法(fa)(fa)），同(tong)位(wei)(wei)素標(biao)記(ji)抗體(ti)（放射免(mian)(mian)(mian)疫試驗）為基(ji)礎的(de)(de)方法(fa)(fa)及其它多(duo)種以(yi)抗體(ti)為基(ji)礎，利(li)用(yong)(yong)乳膠凝集、免(mian)(mian)(mian)疫傳(chuan)感(gan)器、免(mian)(mian)(mian)疫擴散及免(mian)(mian)(mian)疫色(se)譜技術的(de)(de)方法(fa)(fa)。但常規中(zhong)最廣泛采用(yong)(yong)的(de)(de)是以(yi)雙(shuang)位(wei)(wei)點(dian)ELISA技術即夾心ELISA為基(ji)礎的(de)(de)方法(fa)(fa)。此法(fa)(fa)改進后(hou)用(yong)(yong)有放射活性的(de)(de)同(tong)位(wei)(wei)素替代標(biao)記(ji)抗體(ti)，概括地(di)說(shuo)，是指(zhi)以(yi)固定在固體(ti)基(ji)質(zhi)上的(de)(de)“捕捉”抗體(ti)來捕捉目(mu)標(biao)抗原(yuan)(yuan)，經(jing)洗滌除去未結(jie)(jie)合的(de)(de)成分，加入(ru)第二種酶標(biao)抗體(ti)，此者結(jie)(jie)合在捕捉到(dao)的(de)(de)抗原(yuan)(yuan)的(de)(de)不同(tong)位(wei)(wei)點(dian)上，第二次洗滌后(hou)加入(ru)酶作用(yong)(yong)基(ji)質(zhi)，并(bing)令其與(yu)顏色(se)成分反應(ying)，然后(hou)用(yong)(yong)分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度(du)法(fa)(fa)即很容易(yi)檢測(ce)到(dao)目(mu)標(biao)抗原(yuan)(yuan)。采用(yong)(yong)微(wei)量滴定板作為固態基(ji)質(zhi)使(shi)反應(ying)形式標(biao)準化，并(bing)促成其自動化。

黎(li)(li)兆(zhao)滾(gun)等(deng)(deng)人(ren)首(shou)次在(zai)國內口(kou)岸(an)系統應(ying)用(yong)(yong)微量(liang)(liang)(liang)板(ban)ELISA法(fa)(fa)(Salmonelletest1)對(dui)進出(chu)口(kou)動物產品(pin)（魚粉(fen)、肉(rou)(rou)(rou)骨粉(fen)等(deng)(deng)）進行(xing)(xing)沙門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)檢(jian)(jian)(jian)(jian)測。該法(fa)(fa)采用(yong)(yong)預(yu)先(xian)包被了沙門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)（A-E群(qun)）單克隆抗體的(de)(de)(de)(de)微量(liang)(liang)(liang)板(ban)，加(jia)(jia)入經(jing)(jing)增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)處(chu)理(li)的(de)(de)(de)(de)樣(yang)(yang)品(pin)，反應(ying)后(hou)再(zai)加(jia)(jia)入一定(ding)的(de)(de)(de)(de)指示劑，作用(yong)(yong)畢后(hou)用(yong)(yong)酶標(biao)儀測定(ding)OD值來判定(ding)結(jie)果(guo)。食(shi)物樣(yang)(yang)品(pin)經(jing)(jing)適當(dang)的(de)(de)(de)(de)增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)處(chu)理(li)，也可(ke)(ke)用(yong)(yong)此法(fa)(fa)進行(xing)(xing)沙門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)檢(jian)(jian)(jian)(jian)測。ELISA法(fa)(fa)檢(jian)(jian)(jian)(jian)出(chu)沙門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)的(de)(de)(de)(de)極(ji)限范圍在(zai)105～106個細胞/ml，因此，要(yao)得(de)出(chu)可(ke)(ke)靠(kao)的(de)(de)(de)(de)結(jie)果(guo)，食(shi)物樣(yang)(yang)品(pin)首(shou)先(xian)必需(xu)(xu)進行(xing)(xing)預(yu)增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)、選(xuan)擇性(xing)增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)，通常還要(yao)在(zai)含有D-甘露糖(tang)的(de)(de)(de)(de)肉(rou)(rou)(rou)湯(tang)（M肉(rou)(rou)(rou)湯(tang)）中進行(xing)(xing)后(hou)增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)，以促(cu)進鞭毛發育(yu)。總的(de)(de)(de)(de)來說，標(biao)準的(de)(de)(de)(de)ELISA法(fa)(fa)樣(yang)(yang)品(pin)的(de)(de)(de)(de)制(zhi)備(bei)，約需(xu)(xu)要(yao)經(jing)(jing)過(guo)40～48h的(de)(de)(de)(de)孵育(yu)才能完(wan)成。黎(li)(li)兆(zhao)滾(gun)等(deng)(deng)人(ren)的(de)(de)(de)(de)微量(liang)(liang)(liang)板(ban)ELISA法(fa)(fa)（Salmonellatest1)樣(yang)(yang)品(pin)制(zhi)備(bei)過(guo)程(cheng)分三(san)步，共耗時24h：①選(xuan)用(yong)(yong)營養肉(rou)(rou)(rou)湯(tang)進行(xing)(xing)預(yu)增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)（6h），使(shi)(shi)(shi)(shi)“致傷”、冷凍(dong)的(de)(de)(de)(de)沙門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)復蘇。②使(shi)(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)選(xuan)擇性(xing)培養基RV進行(xing)(xing)增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)（14h），使(shi)(shi)(shi)(shi)沙門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)大量(liang)(liang)(liang)繁殖(zhi)，同時抑制(zhi)其它(ta)雜菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)生長。③使(shi)(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)營養肉(rou)(rou)(rou)湯(tang)（蛋白胨水）進行(xing)(xing)后(hou)增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)（4h），使(shi)(shi)(shi)(shi)沙門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)的(de)(de)(de)(de)數量(liang)(liang)(liang)大大增(zeng)(zeng)加(jia)(jia)。比(bi)上(shang)述標(biao)準的(de)(de)(de)(de)ELISA法(fa)(fa)樣(yang)(yang)品(pin)制(zhi)備(bei)過(guo)程(cheng)縮短了一半(ban)的(de)(de)(de)(de)時間(jian)。ELISA方(fang)法(fa)(fa)本身，則僅(jin)需(xu)(xu)要(yao)大約2h而(er)已（其中30min是(shi)操(cao)作時間(jian)，90min是(shi)孵育(yu)時間(jian)）。相比(bi)之下，黎(li)(li)兆(zhao)滾(gun)等(deng)(deng)人(ren)的(de)(de)(de)(de)方(fang)法(fa)(fa)可(ke)(ke)在(zai)27h內完(wan)成，比(bi)上(shang)述方(fang)法(fa)(fa)縮短了一半(ban)的(de)(de)(de)(de)時間(jian)，頗(po)值得(de)推廣應(ying)用(yong)(yong)。最新式的(de)(de)(de)(de)沙門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)免疫學檢(jian)(jian)(jian)(jian)測法(fa)(fa)，利用(yong)(yong)經(jing)(jing)特(te)異性(xing)抗體敏化的(de)(de)(de)(de)免疫色譜卡(ka)(ka)(ka)片(pian)為(wei)基礎。幾滴樣(yang)(yang)品(pin)加(jia)(jia)到卡(ka)(ka)(ka)片(pian)上(shang)，結(jie)果(guo)可(ke)(ke)以直接用(yong)(yong)肉(rou)(rou)(rou)眼讀出(chu)。免疫色譜卡(ka)(ka)(ka)片(pian)極(ji)易操(cao)作，且由于無需(xu)(xu)要(yao)特(te)殊設備(bei)，很適合小型實驗室使(shi)(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)。盡管(guan)卡(ka)(ka)(ka)片(pian)檢(jian)(jian)(jian)(jian)測法(fa)(fa)與ELISA法(fa)(fa)一樣(yang)(yang)需(xu)(xu)要(yao)對(dui)樣(yang)(yang)品(pin)進行(xing)(xing)增(zeng)(zeng)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)處(chu)理(li)，但它(ta)（卡(ka)(ka)(ka)片(pian)法(fa)(fa)）本身通常需(xu)(xu)時不(bu)超過(guo)10min，如果(guo)采用(yong)(yong)黎(li)(li)兆(zhao)滾(gun)等(deng)(deng)人(ren)的(de)(de)(de)(de)樣(yang)(yang)品(pin)制(zhi)備(bei)法(fa)(fa)，則可(ke)(ke)使(shi)(shi)(shi)(shi)操(cao)作時間(jian)更為(wei)縮短。

核酸法

細(xi)胞(bao)核(he)酸(suan)(suan)DNA和(he)RNA是(shi)(shi)唯一(yi)(yi)一(yi)(yi)類可(ke)以(yi)(yi)(yi)攜帶(dai)信息的(de)(de)(de)(de)(de)大分(fen)子。由于(yu)(yu)所有(you)的(de)(de)(de)(de)(de)細(xi)胞(bao)都含有(you)這(zhe)(zhe)種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)分(fen)子，可(ke)以(yi)(yi)(yi)利用它作(zuo)為(wei)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)的(de)(de)(de)(de)(de)標(biao)靶(ba)。標(biao)靶(ba)通(tong)常是(shi)(shi)一(yi)(yi)個(ge)(ge)特(te)異性(xing)核(he)酸(suan)(suan)序(xu)列(lie)，它可(ke)通(tong)過(guo)以(yi)(yi)(yi)補體(ti)核(he)酸(suan)(suan)分(fen)子作(zuo)為(wei)探針(zhen)(zhen)(zhen)來檢(jian)(jian)出。與(yu)免疫(yi)(yi)學(xue)方法(fa)(fa)(fa)(fa)相似，探針(zhen)(zhen)(zhen)也需要(yao)加(jia)附(fu)適(shi)當的(de)(de)(de)(de)(de)標(biao)記，如(ru)放(fang)(fang)射(she)(she)性(xing)同(tong)位素(su)、酶或發(fa)光的(de)(de)(de)(de)(de)標(biao)識物。Fitts等人(ren)在(zai)食(shi)品(pin)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)中引(yin)入(ru)了第一(yi)(yi)代(dai)DNA—RNA雜交(jiao)技術，此(ci)法(fa)(fa)(fa)(fa)應(ying)(ying)用的(de)(de)(de)(de)(de)探針(zhen)(zhen)(zhen)含有(you)用放(fang)(fang)射(she)(she)性(xing)同(tong)位素(su)標(biao)記的(de)(de)(de)(de)(de)傷寒沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)DNA片段，其敏(min)(min)(min)感性(xing)高，經大約48h的(de)(de)(de)(de)(de)增(zeng)菌(jun)(jun)步驟后，檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)極限可(ke)達108個(ge)(ge)細(xi)菌(jun)(jun)/ml，但(dan)(dan)由于(yu)(yu)要(yao)使(shi)用放(fang)(fang)射(she)(she)性(xing)同(tong)位素(su)，只能(neng)在(zai)專門(men)(men)(men)的(de)(de)(de)(de)(de)實驗室應(ying)(ying)用，此(ci)方法(fa)(fa)(fa)(fa)的(de)(de)(de)(de)(de)優(you)點都被抵(di)消(xiao)了。為(wei)此(ci)，以(yi)(yi)(yi)核(he)酸(suan)(suan)雜交(jiao)為(wei)基(ji)礎的(de)(de)(de)(de)(de)第二代(dai)技術—比(bi)色(se)計已發(fa)展(zhan)起來。這(zhe)(zhe)種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)方法(fa)(fa)(fa)(fa)依賴于(yu)(yu)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)核(he)糖體(ti)RNA(rRNA)—核(he)糖體(ti)發(fa)育過(guo)程(cheng)中儲存的(de)(de)(de)(de)(de)核(he)酸(suan)(suan)成(cheng)(cheng)分(fen)的(de)(de)(de)(de)(de)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)。核(he)糖體(ti)是(shi)(shi)細(xi)胞(bao)蛋(dan)白質合成(cheng)(cheng)器的(de)(de)(de)(de)(de)一(yi)(yi)部(bu)分(fen)，每個(ge)(ge)細(xi)菌(jun)(jun)細(xi)胞(bao)中存在(zai)5000～20000個(ge)(ge)復制體(ti)，而相比(bi)之(zhi)下(xia)染色(se)體(ti)DNA復制體(ti)僅2～10個(ge)(ge)。這(zhe)(zhe)種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)天然(ran)富含rRNA標(biao)靶(ba)序(xu)列(lie)的(de)(de)(de)(de)(de)情況使(shi)得(de)用無(wu)輻射(she)(she)計檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)成(cheng)(cheng)為(wei)可(ke)能(neng)，同(tong)時又保持了與(yu)放(fang)(fang)射(she)(she)性(xing)同(tong)位素(su)方法(fa)(fa)(fa)(fa)相當或更高的(de)(de)(de)(de)(de)敏(min)(min)(min)感性(xing)。其另(ling)一(yi)(yi)優(you)點是(shi)(shi)由于(yu)(yu)rRNA為(wei)單鏈（而DNA為(wei)雙鏈），雜交(jiao)前無(wu)需經過(guo)變性(xing)步驟。要(yao)得(de)到陽性(xing)結果，此(ci)法(fa)(fa)(fa)(fa)需要(yao)105個(ge)(ge)靶(ba)細(xi)胞(bao)/ml，因此(ci)對(dui)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)來說，需要(yao)進(jin)(jin)行預增(zeng)菌(jun)(jun)和(he)選擇性(xing)增(zeng)菌(jun)(jun)，總(zong)共約50h。rRNA探針(zhen)(zhen)(zhen)法(fa)(fa)(fa)(fa)比(bi)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)ELISA法(fa)(fa)(fa)(fa)（酶聯免疫(yi)(yi)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)法(fa)(fa)(fa)(fa)）更耗時，但(dan)(dan)二者成(cheng)(cheng)本相近。食(shi)品(pin)細(xi)菌(jun)(jun)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)法(fa)(fa)(fa)(fa)的(de)(de)(de)(de)(de)最新進(jin)(jin)展(zhan)是(shi)(shi)在(zai)化(hua)學(xue)擴(kuo)增(zeng)體(ti)系方面的(de)(de)(de)(de)(de)發(fa)展(zhan)，即(ji)聚合酶鏈反應(ying)(ying)(PCR)，用該(gai)體(ti)系可(ke)對(dui)制備(bei)好(hao)的(de)(de)(de)(de)(de)樣品(pin)進(jin)(jin)行細(xi)菌(jun)(jun)DNA擴(kuo)增(zeng)，以(yi)(yi)(yi)便更易于(yu)(yu)用諸如(ru)凝膠電泳法(fa)(fa)(fa)(fa)或比(bi)色(se)型ELISA法(fa)(fa)(fa)(fa)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)。用于(yu)(yu)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)和(he)其它以(yi)(yi)(yi)食(shi)物為(wei)載體(ti)的(de)(de)(de)(de)(de)病原(yuan)的(de)(de)(de)(de)(de)PCR方法(fa)(fa)(fa)(fa)業已建立，其中一(yi)(yi)些(xie)方法(fa)(fa)(fa)(fa)顯示(shi)了極好(hao)的(de)(de)(de)(de)(de)敏(min)(min)(min)感性(xing)。但(dan)(dan)該(gai)法(fa)(fa)(fa)(fa)較(jiao)難(nan)自動化(hua)，且必(bi)需經選擇性(xing)增(zeng)菌(jun)(jun)以(yi)(yi)(yi)稀釋(shi)可(ke)能(neng)干擾檢(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)反應(ying)(ying)的(de)(de)(de)(de)(de)某些(xie)成(cheng)(cheng)分(fen)。一(yi)(yi)個(ge)(ge)完(wan)整(zheng)的(de)(de)(de)(de)(de)以(yi)(yi)(yi)PCR為(wei)基(ji)礎的(de)(de)(de)(de)(de)方法(fa)(fa)(fa)(fa)，需要(yao)2天才能(neng)完(wan)成(cheng)(cheng)，很大程(cheng)度上抵(di)銷了其高敏(min)(min)(min)感性(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)優(you)點，但(dan)(dan)這(zhe)(zhe)種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)方法(fa)(fa)(fa)(fa)對(dui)那(nei)些(xie)含沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)較(jiao)少或沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)“致(zhi)傷”嚴重難(nan)以(yi)(yi)(yi)復蘇而仍(reng)保有(you)沙(sha)(sha)(sha)門(men)(men)(men)氏(shi)(shi)菌(jun)(jun)rRNA的(de)(de)(de)(de)(de)樣品(pin)尤其有(you)效(xiao)。