一、高效液相色譜儀和液相色譜儀的定義和作用

高(gao)效液(ye)(ye)(ye)相(xiang)色譜儀（HPLC）和(he)液(ye)(ye)(ye)相(xiang)色譜儀（LC）都是使用(yong)液(ye)(ye)(ye)體移動相(xiang)將(jiang)樣品分(fen)離開來(lai)的儀器。HPLC是在LC的基礎上發展而來(lai)的，在分(fen)離性能、分(fen)析(xi)效率、檢(jian)測靈(ling)敏度等方面(mian)均有(you)所提高(gao)。HPLC主(zhu)要(yao)應用(yong)于有(you)機(ji)化學(xue)、生化、藥(yao)學(xue)、環境分(fen)析(xi)等領域。

二、高效液相色譜儀和液相色譜儀的區別

雖然(ran)高效(xiao)液(ye)(ye)相色譜儀(yi)(yi)和(he)液(ye)(ye)相色譜儀(yi)(yi)都屬于(yu)液(ye)(ye)相色譜儀(yi)(yi)類別，但它們(men)在分(fen)離性能、分(fen)析效(xiao)率、檢(jian)測靈敏度等(deng)方(fang)面(mian)均有所(suo)不同：

1、分離性能的區別

HPLC的(de)分離性(xing)能(neng)比LC更(geng)(geng)好，分離效率更(geng)(geng)高(gao)，分離劑更(geng)(geng)多(duo)(duo)樣(yang)化。HPLC在柱(zhu)子填充材料(liao)和(he)柱(zhu)子直徑等方面具有更(geng)(geng)多(duo)(duo)變化的(de)選(xuan)擇，可(ke)根(gen)據(ju)不(bu)同的(de)樣(yang)品和(he)要求(qiu)設計出不(bu)同的(de)柱(zhu)子，從而實現更(geng)(geng)好的(de)分離效果(guo)。

2、分析效率的區別

HPLC擁有更(geng)快(kuai)的(de)分(fen)析(xi)速(su)度和(he)更(geng)快(kuai)的(de)洗脫(tuo)速(su)度，可以更(geng)快(kuai)地得(de)到分(fen)離和(he)檢(jian)測結(jie)果。此外(wai)，HPLC中使用的(de)柱子通常(chang)較長(chang)，能夠保證(zheng)更(geng)高的(de)峰分(fen)辨率(lv)(lv)和(he)更(geng)好(hao)的(de)分(fen)析(xi)效率(lv)(lv)。

3、檢測靈敏度的區別

HPLC的(de)(de)流動相(xiang)(xiang)流速更(geng)(geng)快(kuai)，反相(xiang)(xiang)柱分離更(geng)(geng)好，它能夠在較短的(de)(de)時間(jian)內，更(geng)(geng)準確(que)地檢測出(chu)細微(wei)的(de)(de)化學(xue)物質，與LC相(xiang)(xiang)比，更(geng)(geng)適(shi)用于高靈敏度分析(xi)和有機化合物的(de)(de)分析(xi)。

三、高效液相色譜儀的分類有哪些

高(gao)(gao)效(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)色譜儀主要有三類(lei)：正相(xiang)高(gao)(gao)效(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)色譜儀、反相(xiang)高(gao)(gao)效(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)色譜儀和超(chao)高(gao)(gao)效(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)色譜儀（超(chao)高(gao)(gao)效(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)色譜儀）。

1、盡管有名(ming)稱，正(zheng)相(xiang)(xiang)高(gao)效液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)儀(yi)并不是最常用(yong)的(de)高(gao)效液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)儀(yi)方法。正(zheng)相(xiang)(xiang)高(gao)效液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)儀(yi)使用(yong)非(fei)(fei)極(ji)(ji)(ji)性(xing)溶(rong)劑作為流(liu)動(dong)相(xiang)(xiang)，硅膠顆粒作為固定(ding)相(xiang)(xiang)。在(zai)常規高(gao)效液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)儀(yi)中(zhong)，與(yu)非(fei)(fei)極(ji)(ji)(ji)性(xing)化(hua)(hua)合(he)物(wu)相(xiang)(xiang)比，極(ji)(ji)(ji)性(xing)化(hua)(hua)合(he)物(wu)在(zai)固定(ding)相(xiang)(xiang)中(zhong)會更長時間地粘附在(zai)極(ji)(ji)(ji)性(xing)有機(ji)硅上(shang)。因此，非(fei)(fei)極(ji)(ji)(ji)性(xing)化(hua)(hua)合(he)物(wu)在(zai)正(zheng)常高(gao)效液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)儀(yi)中(zhong)的(de)洗(xi)脫速(su)度更快。孔徑一(yi)般在(zai)3微米左右。

2、反(fan)相(xiang)高效液相(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)(yi)(yi)是最常見的(de)(de)高效液相(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)(yi)(yi)類型。在反(fan)相(xiang)高效液相(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)(yi)(yi)中，固定(ding)相(xiang)被烴鏈(lian)（通(tong)常長(chang)8-18個(ge)碳）改性(xing)，導致色(se)譜(pu)柱變為非極(ji)(ji)(ji)(ji)性(xing)。也(ye)使(shi)用(yong)極(ji)(ji)(ji)(ji)性(xing)溶劑。在反(fan)相(xiang)高效液相(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)(yi)(yi)中，樣品(pin)中的(de)(de)極(ji)(ji)(ji)(ji)性(xing)分(fen)子會與(yu)溶劑產生強烈的(de)(de)吸(xi)引力(li)，從(cong)而使(shi)它們更快地(di)洗脫(tuo)。它們也(ye)不會與(yu)非極(ji)(ji)(ji)(ji)性(xing)固定(ding)相(xiang)相(xiang)互作用(yong)。非極(ji)(ji)(ji)(ji)性(xing)化合物會與(yu)固定(ding)相(xiang)產生范德(de)華(hua)力(li)和分(fen)散(san)相(xiang)互作用(yong)，因此它們的(de)(de)洗脫(tuo)速度(du)較慢。

3、與高(gao)效(xiao)液相(xiang)色(se)譜(pu)儀相(xiang)比，超(chao)高(gao)效(xiao)液相(xiang)色(se)譜(pu)儀運行(xing)速度更快、使用的溶劑更少且(qie)分辨率更高(gao)。色(se)譜(pu)柱(zhu)也(ye)更小，固定(ding)相(xiang)顆粒(li)的尺寸要(yao)小得(de)多。較(jiao)(jiao)小的孔（亞2微(wei)米）促(cu)進了(le)分子更好的分離和(he)分辨率。較(jiao)(jiao)短的色(se)譜(pu)柱(zhu)還可以(yi)進行(xing)快速檢測。然而，超(chao)高(gao)效(xiao)液相(xiang)色(se)譜(pu)儀不(bu)能用于干燥或未過濾的樣(yang)品(pin)，因(yin)為較(jiao)(jiao)小的孔會堵塞(sai)，這是一(yi)個昂貴且(qie)耗時(shi)的修復過程。