一、高效液相色譜儀和液相色譜儀的定義和作用

高效(xiao)液相(xiang)色譜儀（HPLC）和液相(xiang)色譜儀（LC）都是使用(yong)液體移(yi)動相(xiang)將(jiang)樣(yang)品分(fen)(fen)離開來的(de)儀器(qi)。HPLC是在LC的(de)基礎(chu)上(shang)發展而來的(de)，在分(fen)(fen)離性能(neng)、分(fen)(fen)析效(xiao)率、檢測靈敏度等方(fang)面均有所(suo)提高。HPLC主(zhu)要應用(yong)于(yu)有機化學(xue)、生化、藥學(xue)、環境(jing)分(fen)(fen)析等領域。

二、高效液相色譜儀和液相色譜儀的區別

雖然高效液相色譜儀(yi)和(he)液相色譜儀(yi)都屬于液相色譜儀(yi)類(lei)別，但它們在分(fen)離性能(neng)、分(fen)析(xi)效率、檢測靈敏(min)度等方面均(jun)有所不同：

1、分離性能的區別

HPLC的(de)分離(li)性(xing)能比LC更(geng)好(hao)，分離(li)效(xiao)率更(geng)高(gao)，分離(li)劑更(geng)多樣化(hua)。HPLC在(zai)柱子(zi)填充材(cai)料和柱子(zi)直徑等方面具有(you)更(geng)多變化(hua)的(de)選擇，可根據不(bu)同(tong)的(de)樣品和要求(qiu)設(she)計出(chu)不(bu)同(tong)的(de)柱子(zi)，從而實現更(geng)好(hao)的(de)分離(li)效(xiao)果(guo)。

2、分析效率的區別

HPLC擁有更(geng)快的(de)分(fen)析速度和(he)更(geng)快的(de)洗脫速度，可以更(geng)快地得到分(fen)離和(he)檢(jian)測結果(guo)。此(ci)外，HPLC中(zhong)使用的(de)柱子通常較長，能(neng)夠保證(zheng)更(geng)高的(de)峰分(fen)辨率和(he)更(geng)好的(de)分(fen)析效率。

3、檢測靈敏度的區別

HPLC的(de)流動相(xiang)流速更(geng)快，反相(xiang)柱分離(li)更(geng)好(hao)，它能(neng)夠在較短的(de)時間內，更(geng)準確地檢測出細(xi)微的(de)化學物質(zhi)，與LC相(xiang)比，更(geng)適(shi)用(yong)于高靈敏度(du)分析和有機化合(he)物的(de)分析。

三、高效液相色譜儀的分類有哪些

高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)主要有(you)三類：正相(xiang)(xiang)高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)、反相(xiang)(xiang)高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)和超高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)（超高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)）。

1、盡管有(you)名稱，正(zheng)相(xiang)高(gao)效(xiao)液(ye)(ye)(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)儀并不是最(zui)常(chang)用(yong)的高(gao)效(xiao)液(ye)(ye)(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)儀方法(fa)。正(zheng)相(xiang)高(gao)效(xiao)液(ye)(ye)(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)儀使用(yong)非(fei)極(ji)性(xing)(xing)溶劑作(zuo)為流(liu)動相(xiang)，硅膠顆粒(li)作(zuo)為固(gu)定相(xiang)。在(zai)(zai)常(chang)規高(gao)效(xiao)液(ye)(ye)(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)儀中，與非(fei)極(ji)性(xing)(xing)化(hua)(hua)合物(wu)相(xiang)比，極(ji)性(xing)(xing)化(hua)(hua)合物(wu)在(zai)(zai)固(gu)定相(xiang)中會更長時(shi)間地粘附在(zai)(zai)極(ji)性(xing)(xing)有(you)機(ji)硅上。因此，非(fei)極(ji)性(xing)(xing)化(hua)(hua)合物(wu)在(zai)(zai)正(zheng)常(chang)高(gao)效(xiao)液(ye)(ye)(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)儀中的洗(xi)脫速度更快。孔徑(jing)一般在(zai)(zai)3微米左右。

2、反(fan)相高效液相色(se)譜(pu)儀是最(zui)常(chang)見的(de)(de)高效液相色(se)譜(pu)儀類型(xing)。在反(fan)相高效液相色(se)譜(pu)儀中(zhong)，固(gu)定相被(bei)烴鏈（通常(chang)長8-18個碳）改性，導致(zhi)色(se)譜(pu)柱(zhu)變為非(fei)極(ji)性。也(ye)使(shi)用極(ji)性溶劑(ji)。在反(fan)相高效液相色(se)譜(pu)儀中(zhong)，樣品中(zhong)的(de)(de)極(ji)性分子會與溶劑(ji)產(chan)生強(qiang)烈(lie)的(de)(de)吸(xi)引力，從而使(shi)它(ta)們更快(kuai)地洗脫(tuo)。它(ta)們也(ye)不會與非(fei)極(ji)性固(gu)定相相互作用。非(fei)極(ji)性化合物會與固(gu)定相產(chan)生范德華力和分散(san)相互作用，因此(ci)它(ta)們的(de)(de)洗脫(tuo)速度(du)較慢。

3、與(yu)高(gao)效液(ye)相(xiang)色(se)(se)譜(pu)(pu)儀相(xiang)比，超高(gao)效液(ye)相(xiang)色(se)(se)譜(pu)(pu)儀運行速度(du)更(geng)快、使用(yong)的(de)溶(rong)劑更(geng)少且(qie)分辨率更(geng)高(gao)。色(se)(se)譜(pu)(pu)柱(zhu)(zhu)也更(geng)小，固定相(xiang)顆粒的(de)尺(chi)寸要小得多(duo)。較(jiao)小的(de)孔（亞2微米）促進了(le)分子更(geng)好的(de)分離和分辨率。較(jiao)短的(de)色(se)(se)譜(pu)(pu)柱(zhu)(zhu)還可以進行快速檢測。然而，超高(gao)效液(ye)相(xiang)色(se)(se)譜(pu)(pu)儀不能用(yong)于干燥或未過濾的(de)樣品，因為(wei)較(jiao)小的(de)孔會堵塞，這是一(yi)個昂貴且(qie)耗(hao)時的(de)修復過程。