一、高效液相色譜儀和液相色譜儀的定義和作用

高(gao)效液相(xiang)色譜(pu)儀(yi)（HPLC）和液相(xiang)色譜(pu)儀(yi)（LC）都是(shi)使用(yong)液體移(yi)動相(xiang)將樣品分離開來的儀(yi)器。HPLC是(shi)在(zai)LC的基礎上(shang)發展(zhan)而來的，在(zai)分離性能(neng)、分析效率、檢測靈敏度等方面均有所提高(gao)。HPLC主要應用(yong)于有機化(hua)學、生化(hua)、藥學、環境分析等領(ling)域。

二、高效液相色譜儀和液相色譜儀的區別

雖(sui)然高效液(ye)相(xiang)色譜儀(yi)和(he)液(ye)相(xiang)色譜儀(yi)都屬于液(ye)相(xiang)色譜儀(yi)類(lei)別，但它們在分離(li)性(xing)能、分析(xi)效率、檢測(ce)靈敏度(du)等方面均有(you)所不(bu)同(tong)：

1、分離性能的區別

HPLC的(de)分離(li)性能比LC更(geng)(geng)(geng)好，分離(li)效(xiao)率更(geng)(geng)(geng)高，分離(li)劑(ji)更(geng)(geng)(geng)多樣(yang)化。HPLC在柱(zhu)子填充(chong)材料和(he)柱(zhu)子直徑等(deng)方面具有更(geng)(geng)(geng)多變化的(de)選擇，可(ke)根(gen)據不(bu)同(tong)(tong)的(de)樣(yang)品和(he)要(yao)求設(she)計出不(bu)同(tong)(tong)的(de)柱(zhu)子，從而實現更(geng)(geng)(geng)好的(de)分離(li)效(xiao)果。

2、分析效率的區別

HPLC擁有更(geng)快的(de)分(fen)(fen)析(xi)速度(du)和更(geng)快的(de)洗脫(tuo)速度(du)，可以(yi)更(geng)快地得到分(fen)(fen)離和檢測(ce)結(jie)果。此(ci)外，HPLC中(zhong)使用的(de)柱(zhu)子(zi)通(tong)常較長，能夠保證更(geng)高的(de)峰分(fen)(fen)辨率和更(geng)好的(de)分(fen)(fen)析(xi)效率。

3、檢測靈敏度的區別

HPLC的(de)流(liu)動相(xiang)流(liu)速更(geng)(geng)(geng)快，反(fan)相(xiang)柱分(fen)(fen)離更(geng)(geng)(geng)好，它能夠在較(jiao)短的(de)時間(jian)內，更(geng)(geng)(geng)準(zhun)確地檢測出細微(wei)的(de)化(hua)學(xue)物質，與LC相(xiang)比，更(geng)(geng)(geng)適用于高靈敏(min)度分(fen)(fen)析和(he)有機化(hua)合物的(de)分(fen)(fen)析。

三、高效液相色譜儀的分類有哪些

高(gao)效(xiao)液(ye)相色譜(pu)儀(yi)主要(yao)有三類：正相高(gao)效(xiao)液(ye)相色譜(pu)儀(yi)、反相高(gao)效(xiao)液(ye)相色譜(pu)儀(yi)和超高(gao)效(xiao)液(ye)相色譜(pu)儀(yi)（超高(gao)效(xiao)液(ye)相色譜(pu)儀(yi)）。

1、盡管(guan)有名(ming)稱，正(zheng)相高(gao)(gao)效液(ye)相色(se)譜儀(yi)(yi)并不是最常用的(de)高(gao)(gao)效液(ye)相色(se)譜儀(yi)(yi)方(fang)法。正(zheng)相高(gao)(gao)效液(ye)相色(se)譜儀(yi)(yi)使(shi)用非極(ji)性(xing)溶(rong)劑作(zuo)為流動相，硅膠顆(ke)粒作(zuo)為固(gu)(gu)定相。在(zai)(zai)常規高(gao)(gao)效液(ye)相色(se)譜儀(yi)(yi)中(zhong)(zhong)，與非極(ji)性(xing)化(hua)合(he)物相比，極(ji)性(xing)化(hua)合(he)物在(zai)(zai)固(gu)(gu)定相中(zhong)(zhong)會更(geng)長(chang)時間(jian)地(di)粘附在(zai)(zai)極(ji)性(xing)有機硅上。因(yin)此，非極(ji)性(xing)化(hua)合(he)物在(zai)(zai)正(zheng)常高(gao)(gao)效液(ye)相色(se)譜儀(yi)(yi)中(zhong)(zhong)的(de)洗脫(tuo)速度更(geng)快(kuai)。孔(kong)徑一般(ban)在(zai)(zai)3微(wei)米左右。

2、反(fan)(fan)相(xiang)(xiang)高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜儀(yi)(yi)是最常見的(de)高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜儀(yi)(yi)類型(xing)。在反(fan)(fan)相(xiang)(xiang)高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜儀(yi)(yi)中，固定相(xiang)(xiang)被烴(jing)鏈（通常長8-18個碳）改(gai)性(xing)，導(dao)致色(se)(se)譜柱變為非(fei)極(ji)性(xing)。也使用(yong)極(ji)性(xing)溶劑。在反(fan)(fan)相(xiang)(xiang)高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜儀(yi)(yi)中，樣品中的(de)極(ji)性(xing)分子會與溶劑產生強烈的(de)吸引(yin)力(li)，從而使它們更快地洗脫。它們也不會與非(fei)極(ji)性(xing)固定相(xiang)(xiang)相(xiang)(xiang)互作(zuo)(zuo)用(yong)。非(fei)極(ji)性(xing)化合物會與固定相(xiang)(xiang)產生范德華力(li)和(he)分散相(xiang)(xiang)互作(zuo)(zuo)用(yong)，因此它們的(de)洗脫速(su)度較慢(man)。

3、與高(gao)(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)相(xiang)比，超高(gao)(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)運行速(su)度更(geng)(geng)快、使用的(de)(de)溶劑更(geng)(geng)少且(qie)分辨率更(geng)(geng)高(gao)(gao)。色(se)譜(pu)(pu)柱也(ye)更(geng)(geng)小(xiao)(xiao)，固定相(xiang)顆粒(li)的(de)(de)尺寸要小(xiao)(xiao)得多。較(jiao)(jiao)小(xiao)(xiao)的(de)(de)孔(kong)（亞2微米）促進(jin)了分子更(geng)(geng)好的(de)(de)分離(li)和分辨率。較(jiao)(jiao)短的(de)(de)色(se)譜(pu)(pu)柱還可以進(jin)行快速(su)檢測。然而(er)，超高(gao)(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)不能(neng)用于干燥或未過濾的(de)(de)樣品，因(yin)為較(jiao)(jiao)小(xiao)(xiao)的(de)(de)孔(kong)會堵塞，這是一個(ge)昂貴且(qie)耗時的(de)(de)修復過程。