一、液相色譜儀操作流程是什么 ?
生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作(zuo)流程是什么呢?一起來看(kan)看(kan)吧!
首先先對流動相(xiang)(xiang)進(jin)行過濾,根據需(xu)要選(xuan)擇不同的(de)(de)濾膜,一般(ban)為有機系(xi)和水系(xi),常用(yong)的(de)(de)孔徑為0.20um和0.45um。然后(hou)對抽濾后(hou)的(de)(de)流動相(xiang)(xiang)進(jin)行超聲脫(tuo)氣10-20分(fen)鐘(zhong)。一般(ban)情況下,流動相(xiang)(xiang)沖洗20-30分(fen)鐘(zhong)后(hou),儀器方可(ke)(ke)穩定,最(zui)重(zhong)要的(de)(de)是(shi)儀器基線走后(hou),方可(ke)(ke)進(jin)樣測試。
二、液相色譜儀操作注意事項有哪些
1、流動相必須用(yong)(yong)HPLC級的(de)試劑,使用(yong)(yong)前過濾除(chu)去其中的(de)顆粒性雜質(zhi)和其他物(wu)質(zhi)。
2、流動相(xiang)過濾后要用(yong)超聲波(bo)脫(tuo)氣,脫(tuo)氣后應(ying)該(gai)恢復到室溫(wen)后使用(yong)。
3、不能用(yong)純乙腈作為流動相,這(zhe)樣會(hui)使單向閥粘住而(er)導致泵(beng)不進液。
4、使用(yong)(yong)緩(huan)沖溶液時,做(zuo)完樣品(pin)后應立即用(yong)(yong)去(qu)離子水(shui)沖洗管路及柱子一小時,然后用(yong)(yong)甲醇沖洗40分鐘以上(shang),以充分洗去(qu)離子。對于(yu)柱塞(sai)桿外部(bu),做(zuo)完樣品(pin)后也必須用(yong)(yong)去(qu)離子水(shui)沖洗。
5、長(chang)時間不(bu)用(yong)(yong)儀(yi)器,應該將柱(zhu)子取(qu)下(xia)用(yong)(yong)堵頭封好保(bao)存(cun),注意不(bu)能用(yong)(yong)純(chun)水保(bao)存(cun)柱(zhu)子,而應該用(yong)(yong)有機相,因為(wei)純(chun)水易長(chang)霉(mei)。
6、每次做(zuo)完樣品(pin)后應該用溶(rong)解樣品(pin)的溶(rong)劑清(qing)洗進樣器。
7、C18柱絕對(dui)不能進(jin)蛋白樣品,血(xue)樣、生(sheng)物樣品。
8、堵塞(sai)導(dao)致壓力太(tai)大,按(an)預柱→混(hun)合器中的過濾(lv)器→管路過濾(lv)器→單向閥檢查(cha)并清洗。
9、氣泡(pao)會致(zhi)使壓(ya)力(li)不穩,重現性差,所以在使用過(guo)程(cheng)中要盡(jin)量避免產生氣泡(pao)。
10、如果進液(ye)管內不進液(ye)體時,要(yao)使用注射器吸液(ye):通常在輸液(ye)前(qian)要(yao)進行流動(dong)相的清洗(xi)。
11、要(yao)注(zhu)意(yi)柱子的pH值范圍,不得(de)注(zhu)射強(qiang)酸強(qiang)堿的樣品,特別是堿性樣品。
12、更(geng)換(huan)流動相(xiang)時(shi)應該先將吸濾(lv)頭部分放入燒杯中邊振動邊靖洗,然后插(cha)入新的流動相(xiang)中。更(geng)換(huan)無互溶(rong)性的流動相(xiang)時(shi)要用異丙醇過渡一下。