一、液相色譜儀操作流程是什么 ?
生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操(cao)作流程(cheng)是什么呢(ni)?一起來看看吧!
首先(xian)先(xian)對流(liu)動相(xiang)進行過濾(lv)(lv),根據需要選(xuan)擇不同的濾(lv)(lv)膜,一般(ban)為有機系和水系,常用的孔徑為0.20um和0.45um。然后對抽濾(lv)(lv)后的流(liu)動相(xiang)進行超聲脫氣10-20分(fen)鐘。一般(ban)情(qing)況下(xia),流(liu)動相(xiang)沖洗20-30分(fen)鐘后,儀器(qi)方可(ke)穩定,最重要的是儀器(qi)基線走(zou)后,方可(ke)進樣(yang)測試(shi)。
二、液相色譜儀操作注意事項有哪些
1、流動相必須用(yong)HPLC級的試劑,使用(yong)前過濾除去其(qi)中的顆粒(li)性雜質(zhi)和其(qi)他(ta)物質(zhi)。
2、流動相過濾后(hou)要(yao)用(yong)超聲波脫氣,脫氣后(hou)應(ying)該恢(hui)復到室溫后(hou)使用(yong)。
3、不(bu)能用純(chun)乙腈(jing)作為流動(dong)相(xiang),這樣會(hui)使單(dan)向閥粘(zhan)住而導(dao)致泵不(bu)進液。
4、使(shi)用(yong)緩沖(chong)溶液時(shi),做完樣(yang)品(pin)后應(ying)立即用(yong)去離子(zi)水(shui)沖(chong)洗(xi)管路(lu)及柱(zhu)子(zi)一小時(shi),然后用(yong)甲(jia)醇沖(chong)洗(xi)40分(fen)鐘以上,以充分(fen)洗(xi)去離子(zi)。對(dui)于柱(zhu)塞桿(gan)外部,做完樣(yang)品(pin)后也必須用(yong)去離子(zi)水(shui)沖(chong)洗(xi)。
5、長時間(jian)不用(yong)儀器(qi),應該將柱(zhu)子取下用(yong)堵頭封好保存(cun),注意不能用(yong)純(chun)(chun)水(shui)保存(cun)柱(zhu)子,而應該用(yong)有(you)機相,因為純(chun)(chun)水(shui)易(yi)長霉。
6、每次做完(wan)樣品后應該用溶(rong)解樣品的溶(rong)劑清洗進樣器。
7、C18柱(zhu)絕對(dui)不(bu)能進蛋(dan)白樣品(pin),血(xue)樣、生物樣品(pin)。
8、堵塞導致壓(ya)力(li)太(tai)大,按預柱(zhu)→混合器(qi)中(zhong)的過(guo)(guo)濾(lv)器(qi)→管路過(guo)(guo)濾(lv)器(qi)→單向閥檢查并清洗(xi)。
9、氣泡會(hui)致使壓力不(bu)穩,重現性差,所(suo)以在使用(yong)過程中要(yao)盡量避免產(chan)生(sheng)氣泡。
10、如果進液(ye)管(guan)內不進液(ye)體(ti)時,要使用注(zhu)射(she)器吸液(ye):通常在(zai)輸液(ye)前要進行流(liu)動相的清洗(xi)。
11、要(yao)注意柱子(zi)的pH值(zhi)范圍,不(bu)得注射強酸強堿的樣品,特別(bie)是堿性樣品。
12、更換流動相時(shi)應該先將吸濾頭(tou)部分放入燒杯中(zhong)邊振動邊靖洗,然后插入新的(de)流動相中(zhong)。更換無互溶性的(de)流動相時(shi)要用異丙醇過渡(du)一下(xia)。