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液相色譜儀操作流程是什么 液相色譜儀操作注意事項有哪些

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:液相色譜儀引入了氣相色譜儀的理論,技術上采用了高壓輸液泵、高效固定相、梯度洗脫技術和高靈敏度檢測器,具有高壓、高速、高效、高靈敏度、高選擇性和應用范圍廣等特點。接下來本文將簡單介紹液相色譜儀操作流程是什么以及液相色譜儀操作注意事項有哪些,一起到文中來看看吧!

一、液相色譜儀操作流程是什么 ?

生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流程是什么呢?一起來看看吧!

首(shou)先先對(dui)流(liu)動相進行(xing)過濾,根據需要選(xuan)擇不(bu)同(tong)的濾膜(mo),一(yi)般(ban)(ban)為(wei)有(you)機系(xi)和水系(xi),常用(yong)的孔徑為(wei)0.20um和0.45um。然后對(dui)抽(chou)濾后的流(liu)動相進行(xing)超聲脫氣10-20分(fen)鐘。一(yi)般(ban)(ban)情況(kuang)下,流(liu)動相沖洗20-30分(fen)鐘后,儀(yi)器(qi)方可穩定,最重要的是(shi)儀(yi)器(qi)基線(xian)走后,方可進樣(yang)測(ce)試。

二、液相色譜儀操作注意事項有哪些

1、流動(dong)相必(bi)須用(yong)HPLC級(ji)的試劑,使用(yong)前(qian)過濾除去其中的顆粒性雜質和(he)其他物質。

2、流動相過(guo)濾(lv)后要用超(chao)聲波脫氣,脫氣后應(ying)該恢復到(dao)室(shi)溫(wen)后使用。

3、不(bu)能用純乙腈作為(wei)流(liu)動相,這(zhe)樣會使單向(xiang)閥(fa)粘住而(er)導(dao)致泵(beng)不(bu)進液。

4、使用緩(huan)沖溶(rong)液時(shi)(shi),做完(wan)樣(yang)品后應立即用去離子(zi)(zi)水(shui)(shui)沖洗(xi)管路及(ji)柱子(zi)(zi)一小(xiao)時(shi)(shi),然后用甲醇沖洗(xi)40分鐘以上(shang),以充分洗(xi)去離子(zi)(zi)。對于柱塞(sai)桿外(wai)部,做完(wan)樣(yang)品后也(ye)必須用去離子(zi)(zi)水(shui)(shui)沖洗(xi)。

5、長(chang)時(shi)間不(bu)用儀器,應(ying)該(gai)將柱(zhu)子(zi)取下用堵頭封(feng)好保存,注意(yi)不(bu)能用純水保存柱(zhu)子(zi),而應(ying)該(gai)用有機相,因為(wei)純水易(yi)長(chang)霉。

6、每次(ci)做完樣(yang)品(pin)后應該用溶解樣(yang)品(pin)的溶劑清洗進樣(yang)器。

7、C18柱絕對不能進蛋白樣品(pin),血樣、生(sheng)物樣品(pin)。

8、堵塞導致壓力太大(da),按(an)預柱(zhu)→混(hun)合器(qi)中的過(guo)濾(lv)器(qi)→管路過(guo)濾(lv)器(qi)→單(dan)向閥檢查并清(qing)洗(xi)。

9、氣(qi)泡(pao)(pao)會致(zhi)使壓(ya)力(li)不穩,重現(xian)性差,所以在使用過程中要盡量(liang)避免產生氣(qi)泡(pao)(pao)。

10、如果進液(ye)(ye)管(guan)內不進液(ye)(ye)體(ti)時,要使用注射器吸液(ye)(ye):通常在(zai)輸液(ye)(ye)前要進行流動相的清洗。

11、要(yao)注意(yi)柱子的pH值范(fan)圍,不得注射強(qiang)(qiang)酸強(qiang)(qiang)堿的樣品(pin),特別是堿性樣品(pin)。

12、更換流(liu)動(dong)相時應該(gai)先將吸(xi)濾(lv)頭(tou)部分(fen)放入(ru)燒杯中邊振動(dong)邊靖洗,然(ran)后插入(ru)新(xin)的(de)流(liu)動(dong)相中。更換無互(hu)溶性(xing)的(de)流(liu)動(dong)相時要用異丙醇過渡一下。

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