一、液相色譜儀操作流程是什么 ?
生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流程是什么呢?一起來(lai)看(kan)看(kan)吧!
首先(xian)先(xian)對流(liu)動(dong)相進(jin)行過濾,根據(ju)需(xu)要(yao)選擇不同的(de)(de)濾膜,一(yi)般為有機系(xi)和水系(xi),常(chang)用的(de)(de)孔(kong)徑為0.20um和0.45um。然后(hou)(hou)對抽濾后(hou)(hou)的(de)(de)流(liu)動(dong)相進(jin)行超聲脫氣(qi)10-20分鐘。一(yi)般情(qing)況(kuang)下(xia),流(liu)動(dong)相沖洗20-30分鐘后(hou)(hou),儀器(qi)方可穩定,最重要(yao)的(de)(de)是儀器(qi)基線走(zou)后(hou)(hou),方可進(jin)樣測試。
二、液相色譜儀操作注意事項有哪些
1、流動(dong)相必須用HPLC級的(de)試劑,使用前過濾除(chu)去其中的(de)顆粒性雜質和其他物質。
2、流動相(xiang)過濾后要用(yong)(yong)超聲波脫(tuo)氣(qi),脫(tuo)氣(qi)后應該恢復到(dao)室溫后使用(yong)(yong)。
3、不能(neng)用純(chun)乙腈作為流動相,這樣會使單向閥粘住(zhu)而導致(zhi)泵不進液(ye)。
4、使(shi)用(yong)(yong)緩沖溶液(ye)時,做完樣品后應立即用(yong)(yong)去離子水(shui)(shui)沖洗(xi)(xi)管路及柱(zhu)子一小時,然后用(yong)(yong)甲醇沖洗(xi)(xi)40分(fen)鐘以(yi)上,以(yi)充分(fen)洗(xi)(xi)去離子。對于柱(zhu)塞桿外部,做完樣品后也必須用(yong)(yong)去離子水(shui)(shui)沖洗(xi)(xi)。
5、長(chang)時間不(bu)用儀器,應(ying)該(gai)將(jiang)柱子取下用堵(du)頭(tou)封好保(bao)存,注意不(bu)能用純水保(bao)存柱子,而應(ying)該(gai)用有機相,因為純水易長(chang)霉。
6、每(mei)次(ci)做完樣(yang)品后應該用溶解樣(yang)品的溶劑清洗進樣(yang)器(qi)。
7、C18柱絕對不(bu)能進蛋白(bai)樣(yang)品(pin),血樣(yang)、生物樣(yang)品(pin)。
8、堵塞導致壓力太(tai)大,按預(yu)柱(zhu)→混合(he)器中的過濾器→管(guan)路過濾器→單向閥檢(jian)查(cha)并清(qing)洗(xi)。
9、氣(qi)泡會(hui)致使(shi)壓力不穩,重(zhong)現性差,所(suo)以(yi)在使(shi)用(yong)過程中要盡量避免產生(sheng)氣(qi)泡。
10、如果進液(ye)管內不進液(ye)體時,要使用注射器吸液(ye):通常在輸液(ye)前要進行流(liu)動相的清洗。
11、要注意柱(zhu)子的pH值(zhi)范圍(wei),不得注射強酸強堿的樣(yang)品,特(te)別是堿性樣(yang)品。
12、更換流(liu)動(dong)相時應(ying)該先將吸濾頭部分放入(ru)燒杯中邊振動(dong)邊靖(jing)洗,然后插入(ru)新的(de)流(liu)動(dong)相中。更換無互(hu)溶性的(de)流(liu)動(dong)相時要用異丙醇過(guo)渡一下。