一、液相色譜儀操作流程是什么 ?
生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流程是什么呢?一起來看看吧!
首(shou)先先對(dui)流(liu)動相進行(xing)過濾,根據需要選(xuan)擇不(bu)同(tong)的濾膜(mo),一(yi)般(ban)(ban)為(wei)有(you)機系(xi)和水系(xi),常用(yong)的孔徑為(wei)0.20um和0.45um。然后對(dui)抽(chou)濾后的流(liu)動相進行(xing)超聲脫氣10-20分(fen)鐘。一(yi)般(ban)(ban)情況(kuang)下,流(liu)動相沖洗20-30分(fen)鐘后,儀(yi)器(qi)方可穩定,最重要的是(shi)儀(yi)器(qi)基線(xian)走后,方可進樣(yang)測(ce)試。
二、液相色譜儀操作注意事項有哪些
1、流動(dong)相必(bi)須用(yong)HPLC級(ji)的試劑,使用(yong)前(qian)過濾除去其中的顆粒性雜質和(he)其他物質。
2、流動相過(guo)濾(lv)后要用超(chao)聲波脫氣,脫氣后應(ying)該恢復到(dao)室(shi)溫(wen)后使用。
3、不(bu)能用純乙腈作為(wei)流(liu)動相,這(zhe)樣會使單向(xiang)閥(fa)粘住而(er)導(dao)致泵(beng)不(bu)進液。
4、使用緩(huan)沖溶(rong)液時(shi)(shi),做完(wan)樣(yang)品后應立即用去離子(zi)(zi)水(shui)(shui)沖洗(xi)管路及(ji)柱子(zi)(zi)一小(xiao)時(shi)(shi),然后用甲醇沖洗(xi)40分鐘以上(shang),以充分洗(xi)去離子(zi)(zi)。對于柱塞(sai)桿外(wai)部,做完(wan)樣(yang)品后也(ye)必須用去離子(zi)(zi)水(shui)(shui)沖洗(xi)。
5、長(chang)時(shi)間不(bu)用儀器,應(ying)該(gai)將柱(zhu)子(zi)取下用堵頭封(feng)好保存,注意(yi)不(bu)能用純水保存柱(zhu)子(zi),而應(ying)該(gai)用有機相,因為(wei)純水易(yi)長(chang)霉。
6、每次(ci)做完樣(yang)品(pin)后應該用溶解樣(yang)品(pin)的溶劑清洗進樣(yang)器。
7、C18柱絕對不能進蛋白樣品(pin),血樣、生(sheng)物樣品(pin)。
8、堵塞導致壓力太大(da),按(an)預柱(zhu)→混(hun)合器(qi)中的過(guo)濾(lv)器(qi)→管路過(guo)濾(lv)器(qi)→單(dan)向閥檢查并清(qing)洗(xi)。
9、氣(qi)泡(pao)(pao)會致(zhi)使壓(ya)力(li)不穩,重現(xian)性差,所以在使用過程中要盡量(liang)避免產生氣(qi)泡(pao)(pao)。
10、如果進液(ye)(ye)管(guan)內不進液(ye)(ye)體(ti)時,要使用注射器吸液(ye)(ye):通常在(zai)輸液(ye)(ye)前要進行流動相的清洗。
11、要(yao)注意(yi)柱子的pH值范(fan)圍,不得注射強(qiang)(qiang)酸強(qiang)(qiang)堿的樣品(pin),特別是堿性樣品(pin)。
12、更換流(liu)動(dong)相時應該(gai)先將吸(xi)濾(lv)頭(tou)部分(fen)放入(ru)燒杯中邊振動(dong)邊靖洗,然(ran)后插入(ru)新(xin)的(de)流(liu)動(dong)相中。更換無互(hu)溶性(xing)的(de)流(liu)動(dong)相時要用異丙醇過渡一下。