一、液相色譜儀操作流程是什么 ?
生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操(cao)作流(liu)程(cheng)是什么(me)呢?一起來看(kan)看(kan)吧!
首先先對流(liu)(liu)動(dong)相進行(xing)過濾,根據需要選(xuan)擇不同(tong)的濾膜,一般為有機系和水系,常用的孔徑為0.20um和0.45um。然后對抽濾后的流(liu)(liu)動(dong)相進行(xing)超聲(sheng)脫氣10-20分鐘(zhong)(zhong)。一般情況下,流(liu)(liu)動(dong)相沖洗(xi)20-30分鐘(zhong)(zhong)后,儀(yi)器方可穩定,最重(zhong)要的是儀(yi)器基(ji)線(xian)走后,方可進樣測(ce)試。
二、液相色譜儀操作注意事項有哪些
1、流動(dong)相必(bi)須用(yong)HPLC級的試劑,使用(yong)前過濾除去其中的顆粒性雜(za)質(zhi)和其他物質(zhi)。
2、流動(dong)相過濾后(hou)要用超(chao)聲波(bo)脫氣,脫氣后(hou)應(ying)該(gai)恢復到室溫后(hou)使用。
3、不(bu)能用(yong)純(chun)乙(yi)腈作為流動相,這樣會使單向閥(fa)粘住而導致泵(beng)不(bu)進(jin)液。
4、使(shi)用(yong)緩沖溶(rong)液(ye)時(shi),做完樣(yang)品后應立即用(yong)去(qu)離(li)子(zi)水沖洗(xi)(xi)管(guan)路及柱子(zi)一(yi)小時(shi),然(ran)后用(yong)甲醇沖洗(xi)(xi)40分鐘以上,以充分洗(xi)(xi)去(qu)離(li)子(zi)。對于柱塞(sai)桿(gan)外部(bu),做完樣(yang)品后也必(bi)須(xu)用(yong)去(qu)離(li)子(zi)水沖洗(xi)(xi)。
5、長時間不用儀(yi)器,應該(gai)(gai)將柱子取下用堵頭封(feng)好保存(cun),注意不能用純水(shui)保存(cun)柱子,而應該(gai)(gai)用有機相,因(yin)為(wei)純水(shui)易(yi)長霉。
6、每次做完(wan)樣(yang)品后應(ying)該用溶(rong)解樣(yang)品的溶(rong)劑清(qing)洗(xi)進樣(yang)器。
7、C18柱絕對不(bu)能進蛋白樣(yang)品(pin)(pin),血樣(yang)、生物樣(yang)品(pin)(pin)。
8、堵塞導致壓力太大,按(an)預柱→混合器中(zhong)的過濾(lv)器→管路過濾(lv)器→單(dan)向閥檢查并清(qing)洗。
9、氣泡(pao)會致使(shi)(shi)壓(ya)力不穩,重(zhong)現(xian)性差(cha),所(suo)以(yi)在(zai)使(shi)(shi)用(yong)過程中要盡(jin)量避免產生氣泡(pao)。
10、如果進(jin)液管內不(bu)進(jin)液體時,要使用注射器吸(xi)液:通常(chang)在輸液前要進(jin)行流(liu)動相的清洗。
11、要注意(yi)柱子的pH值范圍,不(bu)得注射強酸(suan)強堿的樣(yang)品,特別是堿性樣(yang)品。
12、更(geng)換(huan)流動(dong)相(xiang)時(shi)應(ying)該(gai)先將吸濾頭(tou)部(bu)分放入燒杯中邊振動(dong)邊靖洗,然后插入新的流動(dong)相(xiang)中。更(geng)換(huan)無互溶性的流動(dong)相(xiang)時(shi)要用異(yi)丙醇(chun)過渡(du)一下。