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液相色譜儀操作流程是什么 液相色譜儀操作注意事項有哪些

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:液相色譜儀引入了氣相色譜儀的理論,技術上采用了高壓輸液泵、高效固定相、梯度洗脫技術和高靈敏度檢測器,具有高壓、高速、高效、高靈敏度、高選擇性和應用范圍廣等特點。接下來本文將簡單介紹液相色譜儀操作流程是什么以及液相色譜儀操作注意事項有哪些,一起到文中來看看吧!

一、液相色譜儀操作流程是什么 ?

生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操(cao)作流(liu)程(cheng)是什么(me)呢?一起來看(kan)看(kan)吧!

首先先對流(liu)(liu)動(dong)相進行(xing)過濾,根據需要選(xuan)擇不同(tong)的濾膜,一般為有機系和水系,常用的孔徑為0.20um和0.45um。然后對抽濾后的流(liu)(liu)動(dong)相進行(xing)超聲(sheng)脫氣10-20分鐘(zhong)(zhong)。一般情況下,流(liu)(liu)動(dong)相沖洗(xi)20-30分鐘(zhong)(zhong)后,儀(yi)器方可穩定,最重(zhong)要的是儀(yi)器基(ji)線(xian)走后,方可進樣測(ce)試。

二、液相色譜儀操作注意事項有哪些

1、流動(dong)相必(bi)須用(yong)HPLC級的試劑,使用(yong)前過濾除去其中的顆粒性雜(za)質(zhi)和其他物質(zhi)。

2、流動(dong)相過濾后(hou)要用超(chao)聲波(bo)脫氣,脫氣后(hou)應(ying)該(gai)恢復到室溫后(hou)使用。

3、不(bu)能用(yong)純(chun)乙(yi)腈作為流動相,這樣會使單向閥(fa)粘住而導致泵(beng)不(bu)進(jin)液。

4、使(shi)用(yong)緩沖溶(rong)液(ye)時(shi),做完樣(yang)品后應立即用(yong)去(qu)離(li)子(zi)水沖洗(xi)(xi)管(guan)路及柱子(zi)一(yi)小時(shi),然(ran)后用(yong)甲醇沖洗(xi)(xi)40分鐘以上,以充分洗(xi)(xi)去(qu)離(li)子(zi)。對于柱塞(sai)桿(gan)外部(bu),做完樣(yang)品后也必(bi)須(xu)用(yong)去(qu)離(li)子(zi)水沖洗(xi)(xi)。

5、長時間不用儀(yi)器,應該(gai)(gai)將柱子取下用堵頭封(feng)好保存(cun),注意不能用純水(shui)保存(cun)柱子,而應該(gai)(gai)用有機相,因(yin)為(wei)純水(shui)易(yi)長霉。

6、每次做完(wan)樣(yang)品后應(ying)該用溶(rong)解樣(yang)品的溶(rong)劑清(qing)洗(xi)進樣(yang)器。

7、C18柱絕對不(bu)能進蛋白樣(yang)品(pin)(pin),血樣(yang)、生物樣(yang)品(pin)(pin)。

8、堵塞導致壓力太大,按(an)預柱→混合器中(zhong)的過濾(lv)器→管路過濾(lv)器→單(dan)向閥檢查并清(qing)洗。

9、氣泡(pao)會致使(shi)(shi)壓(ya)力不穩,重(zhong)現(xian)性差(cha),所(suo)以(yi)在(zai)使(shi)(shi)用(yong)過程中要盡(jin)量避免產生氣泡(pao)。

10、如果進(jin)液管內不(bu)進(jin)液體時,要使用注射器吸(xi)液:通常(chang)在輸液前要進(jin)行流(liu)動相的清洗。

11、要注意(yi)柱子的pH值范圍,不(bu)得注射強酸(suan)強堿的樣(yang)品,特別是堿性樣(yang)品。

12、更(geng)換(huan)流動(dong)相(xiang)時(shi)應(ying)該(gai)先將吸濾頭(tou)部(bu)分放入燒杯中邊振動(dong)邊靖洗,然后插入新的流動(dong)相(xiang)中。更(geng)換(huan)無互溶性的流動(dong)相(xiang)時(shi)要用異(yi)丙醇(chun)過渡(du)一下。

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