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液相色譜儀操作流程是什么 液相色譜儀操作注意事項有哪些

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:液相色譜儀引入了氣相色譜儀的理論,技術上采用了高壓輸液泵、高效固定相、梯度洗脫技術和高靈敏度檢測器,具有高壓、高速、高效、高靈敏度、高選擇性和應用范圍廣等特點。接下來本文將簡單介紹液相色譜儀操作流程是什么以及液相色譜儀操作注意事項有哪些,一起到文中來看看吧!

一、液相色譜儀操作流程是什么 ?

生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流程是什么呢?一起來(lai)看(kan)看(kan)吧!

首先(xian)先(xian)對流(liu)動(dong)相進(jin)行過濾,根據(ju)需(xu)要(yao)選擇不同的(de)(de)濾膜,一(yi)般為有機系(xi)和水系(xi),常(chang)用的(de)(de)孔(kong)徑為0.20um和0.45um。然后(hou)(hou)對抽濾后(hou)(hou)的(de)(de)流(liu)動(dong)相進(jin)行超聲脫氣(qi)10-20分鐘。一(yi)般情(qing)況(kuang)下(xia),流(liu)動(dong)相沖洗20-30分鐘后(hou)(hou),儀器(qi)方可穩定,最重要(yao)的(de)(de)是儀器(qi)基線走(zou)后(hou)(hou),方可進(jin)樣測試。

二、液相色譜儀操作注意事項有哪些

1、流動(dong)相必須用HPLC級的(de)試劑,使用前過濾除(chu)去其中的(de)顆粒性雜質和其他物質。

2、流動相(xiang)過濾后要用(yong)(yong)超聲波脫(tuo)氣(qi),脫(tuo)氣(qi)后應該恢復到(dao)室溫后使用(yong)(yong)。

3、不能(neng)用純(chun)乙腈作為流動相,這樣會使單向閥粘住(zhu)而導致(zhi)泵不進液(ye)。

4、使(shi)用(yong)(yong)緩沖溶液(ye)時,做完樣品后應立即用(yong)(yong)去離子水(shui)(shui)沖洗(xi)(xi)管路及柱(zhu)子一小時,然后用(yong)(yong)甲醇沖洗(xi)(xi)40分(fen)鐘以(yi)上,以(yi)充分(fen)洗(xi)(xi)去離子。對于柱(zhu)塞桿外部,做完樣品后也必須用(yong)(yong)去離子水(shui)(shui)沖洗(xi)(xi)。

5、長(chang)時間不(bu)用儀器,應(ying)該(gai)將(jiang)柱子取下用堵(du)頭(tou)封好保(bao)存,注意不(bu)能用純水保(bao)存柱子,而應(ying)該(gai)用有機相,因為純水易長(chang)霉。

6、每(mei)次(ci)做完樣(yang)品后應該用溶解樣(yang)品的溶劑清洗進樣(yang)器(qi)。

7、C18柱絕對不(bu)能進蛋白(bai)樣(yang)品(pin),血樣(yang)、生物樣(yang)品(pin)。

8、堵塞導致壓力太(tai)大,按預(yu)柱(zhu)→混合(he)器中的過濾器→管(guan)路過濾器→單向閥檢(jian)查(cha)并清(qing)洗(xi)。

9、氣(qi)泡會(hui)致使(shi)壓力不穩,重(zhong)現性差,所(suo)以(yi)在使(shi)用(yong)過程中要盡量避免產生(sheng)氣(qi)泡。

10、如果進液(ye)管內不進液(ye)體時,要使用注射器吸液(ye):通常在輸液(ye)前要進行流(liu)動相的清洗。

11、要注意柱(zhu)子的pH值(zhi)范圍(wei),不得注射強酸強堿的樣(yang)品,特(te)別是堿性樣(yang)品。

12、更換流(liu)動(dong)相時應(ying)該先將吸濾頭部分放入(ru)燒杯中邊振動(dong)邊靖(jing)洗,然后插入(ru)新的(de)流(liu)動(dong)相中。更換無互(hu)溶性的(de)流(liu)動(dong)相時要用異丙醇過(guo)渡一下。

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