一、液相色譜儀操作流程是什么 ?
生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操(cao)作流程(cheng)是什么呢?一起來看看吧!
首先先對(dui)流(liu)動相(xiang)(xiang)進行過濾,根據(ju)需(xu)要選擇(ze)不同的濾膜(mo),一(yi)般(ban)為有(you)機(ji)系(xi)和(he)水系(xi),常用的孔徑為0.20um和(he)0.45um。然(ran)后對(dui)抽濾后的流(liu)動相(xiang)(xiang)進行超聲(sheng)脫氣10-20分(fen)鐘。一(yi)般(ban)情況下,流(liu)動相(xiang)(xiang)沖洗(xi)20-30分(fen)鐘后,儀器方(fang)可(ke)穩定,最(zui)重要的是儀器基線走(zou)后,方(fang)可(ke)進樣測試。
二、液相色譜儀操作注意事項有哪些
1、流動相必須用HPLC級的試劑,使用前過(guo)濾除去其中的顆粒性雜質和其他物質。
2、流動(dong)相(xiang)過濾后(hou)要用超聲波脫(tuo)氣,脫(tuo)氣后(hou)應該恢(hui)復到室(shi)溫(wen)后(hou)使(shi)用。
3、不(bu)(bu)能用純(chun)乙(yi)腈作為流(liu)動(dong)相,這樣會使(shi)單向閥粘(zhan)住而導(dao)致泵不(bu)(bu)進液(ye)。
4、使(shi)用(yong)(yong)緩沖(chong)(chong)溶液時(shi),做(zuo)完樣品后(hou)(hou)應立即用(yong)(yong)去(qu)離子水沖(chong)(chong)洗(xi)管路及(ji)柱子一小時(shi),然后(hou)(hou)用(yong)(yong)甲醇沖(chong)(chong)洗(xi)40分(fen)鐘以上,以充分(fen)洗(xi)去(qu)離子。對于柱塞桿外部,做(zuo)完樣品后(hou)(hou)也必須用(yong)(yong)去(qu)離子水沖(chong)(chong)洗(xi)。
5、長(chang)時間不用儀器,應(ying)(ying)該將(jiang)柱(zhu)子(zi)取下用堵頭封好(hao)保存,注意不能用純(chun)水保存柱(zhu)子(zi),而應(ying)(ying)該用有(you)機相(xiang),因(yin)為純(chun)水易長(chang)霉(mei)。
6、每次做完樣(yang)品后(hou)應該用(yong)溶(rong)解樣(yang)品的溶(rong)劑清洗進樣(yang)器。
7、C18柱絕對不能進(jin)蛋白樣品,血樣、生(sheng)物樣品。
8、堵塞導(dao)致壓力太大(da),按預柱→混(hun)合器(qi)中的(de)過(guo)(guo)濾器(qi)→管路(lu)過(guo)(guo)濾器(qi)→單向(xiang)閥檢查并清洗。
9、氣泡(pao)(pao)會致使壓力不(bu)穩,重現性差,所以在使用過程中要盡(jin)量(liang)避(bi)免產生氣泡(pao)(pao)。
10、如果進液管內不(bu)進液體時,要(yao)使用注射器吸液:通常在(zai)輸液前要(yao)進行流動相的清洗(xi)。
11、要注(zhu)(zhu)意(yi)柱子(zi)的pH值范(fan)圍(wei),不得注(zhu)(zhu)射強酸強堿的樣品,特別是堿性樣品。
12、更換流(liu)動相時應該先將吸(xi)濾頭(tou)部分放入燒杯中邊振動邊靖洗,然后插(cha)入新的流(liu)動相中。更換無(wu)互溶性的流(liu)動相時要用異丙醇過渡一下。