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液相色譜儀操作流程是什么 液相色譜儀操作注意事項有哪些

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:液相色譜儀引入了氣相色譜儀的理論,技術上采用了高壓輸液泵、高效固定相、梯度洗脫技術和高靈敏度檢測器,具有高壓、高速、高效、高靈敏度、高選擇性和應用范圍廣等特點。接下來本文將簡單介紹液相色譜儀操作流程是什么以及液相色譜儀操作注意事項有哪些,一起到文中來看看吧!

一、液相色譜儀操作流程是什么 ?

生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作(zuo)流程是什么呢?一起來看(kan)看(kan)吧!

首先先對流動相(xiang)(xiang)進(jin)行過濾,根據需(xu)要選(xuan)擇不同的(de)(de)濾膜,一般(ban)為有機系(xi)和水系(xi),常用(yong)的(de)(de)孔徑為0.20um和0.45um。然后(hou)對抽濾后(hou)的(de)(de)流動相(xiang)(xiang)進(jin)行超聲脫(tuo)氣10-20分(fen)鐘(zhong)。一般(ban)情況下,流動相(xiang)(xiang)沖洗20-30分(fen)鐘(zhong)后(hou),儀器方可(ke)(ke)穩定,最(zui)重(zhong)要的(de)(de)是(shi)儀器基線走后(hou),方可(ke)(ke)進(jin)樣測試。

二、液相色譜儀操作注意事項有哪些

1、流動相必須用(yong)(yong)HPLC級的(de)試劑,使用(yong)(yong)前過濾除(chu)去其中的(de)顆粒性雜質(zhi)和其他物(wu)質(zhi)。

2、流動相(xiang)過濾后要用(yong)超聲波(bo)脫(tuo)氣,脫(tuo)氣后應(ying)該(gai)恢復到室溫(wen)后使用(yong)。

3、不能用(yong)純乙腈作為流動相,這(zhe)樣會(hui)使單向閥粘住而(er)導致泵(beng)不進液。

4、使用(yong)(yong)緩(huan)沖溶液時,做(zuo)完樣品(pin)后應立即用(yong)(yong)去(qu)離子水(shui)沖洗管路及柱子一小時,然后用(yong)(yong)甲醇沖洗40分鐘以上(shang),以充分洗去(qu)離子。對于(yu)柱塞(sai)桿外部(bu),做(zuo)完樣品(pin)后也必須用(yong)(yong)去(qu)離子水(shui)沖洗。

5、長(chang)時間不(bu)用(yong)(yong)儀(yi)器,應該將柱(zhu)子取(qu)下(xia)用(yong)(yong)堵頭封好保(bao)存(cun),注意不(bu)能用(yong)(yong)純(chun)水保(bao)存(cun)柱(zhu)子,而應該用(yong)(yong)有機相,因為(wei)純(chun)水易長(chang)霉(mei)。

6、每次做(zuo)完樣品(pin)后應該用溶(rong)解樣品(pin)的溶(rong)劑清(qing)洗進樣器。

7、C18柱絕對(dui)不能進(jin)蛋白樣品,血(xue)樣、生(sheng)物樣品。

8、堵塞(sai)導(dao)致壓力太(tai)大,按(an)預柱→混(hun)合器中的過濾(lv)器→管路過濾(lv)器→單向閥檢查(cha)并清洗。

9、氣泡(pao)會致(zhi)使壓(ya)力(li)不穩,重現性差,所以在使用過(guo)程(cheng)中要盡(jin)量避免產生氣泡(pao)。

10、如果進液(ye)管內不進液(ye)體時,要(yao)使用注射器吸液(ye):通常在輸液(ye)前(qian)要(yao)進行流動(dong)相的清洗(xi)。

11、要(yao)注(zhu)意(yi)柱子的pH值范圍,不得(de)注(zhu)射強(qiang)酸強(qiang)堿的樣品,特別是堿性樣品。

12、更(geng)換(huan)流動相(xiang)時(shi)應該先將吸濾(lv)頭部分放入燒杯中邊振動邊靖洗,然后插(cha)入新的流動相(xiang)中。更(geng)換(huan)無互溶(rong)性的流動相(xiang)時(shi)要用異丙醇過渡一下。

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