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高效液相色譜儀有什么特點 高效液相色譜儀原理是什么

本文章由注冊用戶 淺嘗不止— 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。接下來本文將簡單介紹高效液相色譜儀有什么特點以及高效液相色譜儀原理是什么,一起到文中來看看吧!

一、高效液相色譜儀有什么特點

高(gao)(gao)效液相(xiang)色譜儀的(de)顯著特征是高(gao)(gao)壓、高(gao)(gao)速、高(gao)(gao)效、高(gao)(gao)靈敏(min)度、高(gao)(gao)選(xuan)擇性和(he)應用范圍(wei)廣(guang)等。

1、高壓

高效液相色譜儀為(wei)了(le)獲(huo)得高柱效,使用的(de)(de)固(gu)定相粒徑很小(<10um),液體(ti)流動相高速通(tong)過時,產生很高的(de)(de)壓(ya)力,工作(zuo)壓(ya)力范圍為(wei)1.5×107~3.5×107Pa。

2、高速

由于釆用了高壓,流動相(xiang)流速快(kuai),所(suo)需的分析時間比(bi)經典液相(xiang)柱色(se)譜(pu)儀少得多。

3、高效

高效液相色譜儀的(de)柱效能(neng)約3萬塔板/米(mi),氣(qi)相色譜儀的(de)柱效能(neng)約2000塔板/米(mi)。

4、高靈敏度

由于采用了高靈敏度的檢測器,最(zui)小(xiao)檢測量可(ke)達10-9g,甚(shen)至10-11g,而所需樣品量很少。

5、高選擇性

可(ke)以通過控制流動相改善分離過程的(de)選擇性。

6、應用范圍廣

高效液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)(pu)儀可(ke)用于(yu)(yu)高沸(fei)點、熱穩定性(xing)差以及具有生理活性(xing)物(wu)(wu)質(zhi)(zhi)的(de)分(fen)(fen)析(xi)。一般來說(shuo),沸(fei)點在450℃以下,相(xiang)(xiang)(xiang)對分(fen)(fen)子質(zhi)(zhi)量小于(yu)(yu)450的(de)有機物(wu)(wu)可(ke)用氣相(xiang)(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)(pu)儀分(fen)(fen)析(xi),但這些物(wu)(wu)質(zhi)(zhi)只占有機物(wu)(wu)的(de)15%~20%,其余的(de)80%~85%有機物(wu)(wu)原則上可(ke)采用高效液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)(pu)儀分(fen)(fen)析(xi)。

二、高效液相色譜儀原理是什么

高(gao)(gao)效液相(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)(HPLC)是(shi)應用(yong)高(gao)(gao)效液相(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)原(yuan)理(li),主要(yao)用(yong)于(yu)(yu)分(fen)(fen)(fen)析高(gao)(gao)沸點不(bu)(bu)易揮發的(de)、受熱(re)不(bu)(bu)穩(wen)定的(de)和(he)分(fen)(fen)(fen)子(zi)量大的(de)有機化合物的(de)儀(yi)器設(she)備。它由(you)儲液器、泵、進樣(yang)器、色(se)譜(pu)柱、檢(jian)(jian)測(ce)器、記(ji)錄儀(yi)等(deng)幾(ji)部(bu)分(fen)(fen)(fen)組(zu)(zu)成。儲液器中(zhong)的(de)流(liu)(liu)動(dong)相(xiang)(xiang)(xiang)被(bei)(bei)高(gao)(gao)壓泵打入系統,樣(yang)品溶液經進樣(yang)器進入流(liu)(liu)動(dong)相(xiang)(xiang)(xiang),被(bei)(bei)流(liu)(liu)動(dong)相(xiang)(xiang)(xiang)載(zai)入色(se)譜(pu)柱(固定相(xiang)(xiang)(xiang))內,由(you)于(yu)(yu)樣(yang)品溶液中(zhong)的(de)各組(zu)(zu)分(fen)(fen)(fen)在兩相(xiang)(xiang)(xiang)中(zhong)具(ju)有不(bu)(bu)同(tong)的(de)分(fen)(fen)(fen)配(pei)系數,在兩相(xiang)(xiang)(xiang)中(zhong)做相(xiang)(xiang)(xiang)對(dui)運動(dong)時(shi),經過反(fan)復(fu)多次(ci)(ci)的(de)吸(xi)(xi)附-解吸(xi)(xi)的(de)分(fen)(fen)(fen)配(pei)過程,各組(zu)(zu)分(fen)(fen)(fen)在移動(dong)速度上產生較大的(de)差(cha)別,被(bei)(bei)分(fen)(fen)(fen)離成單個組(zu)(zu)分(fen)(fen)(fen)依次(ci)(ci)從柱內流(liu)(liu)出(chu),通(tong)過檢(jian)(jian)測(ce)器時(shi),樣(yang)品濃(nong)度被(bei)(bei)轉(zhuan)換(huan)成電信號傳送到記(ji)錄儀(yi),數據(ju)以(yi)圖譜(pu)形式(shi)打印出(chu)來。

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