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高效液相色譜儀有什么特點 高效液相色譜儀原理是什么

本文章由注冊用戶 淺嘗不止— 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。接下來本文將簡單介紹高效液相色譜儀有什么特點以及高效液相色譜儀原理是什么,一起到文中來看看吧!

一、高效液相色譜儀有什么特點

高(gao)效(xiao)液相色譜(pu)儀的顯(xian)著特征(zheng)是高(gao)壓、高(gao)速、高(gao)效(xiao)、高(gao)靈敏(min)度、高(gao)選(xuan)擇(ze)性和(he)應用(yong)范(fan)圍廣等。

1、高壓

高(gao)(gao)效液相(xiang)色譜(pu)儀為了(le)獲得高(gao)(gao)柱效,使用(yong)的固定相(xiang)粒徑很(hen)小(<10um),液體流動相(xiang)高(gao)(gao)速通過時,產(chan)生很(hen)高(gao)(gao)的壓(ya)力(li),工(gong)作壓(ya)力(li)范(fan)圍為1.5×107~3.5×107Pa。

2、高速

由于釆用(yong)了(le)高(gao)壓,流動相(xiang)流速(su)快,所(suo)需的(de)分(fen)析時間(jian)比經典(dian)液(ye)相(xiang)柱色(se)譜儀少得多。

3、高效

高效液相色譜儀的柱(zhu)效能約3萬塔板/米,氣相色(se)譜儀的柱(zhu)效能約2000塔板/米。

4、高靈敏度

由于采用了(le)高靈敏度的檢(jian)測器,最小檢(jian)測量可達10-9g,甚至10-11g,而所需樣品(pin)量很少(shao)。

5、高選擇性

可以通(tong)過(guo)(guo)控(kong)制(zhi)流(liu)動(dong)相改(gai)善分離過(guo)(guo)程的選(xuan)擇性。

6、應用范圍廣

高(gao)效(xiao)液相(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)儀(yi)(yi)可(ke)用于(yu)高(gao)沸點(dian)、熱穩定性差以及具(ju)有生理活性物(wu)(wu)質的(de)(de)分(fen)(fen)析。一(yi)般來說,沸點(dian)在450℃以下,相(xiang)(xiang)對分(fen)(fen)子質量小于(yu)450的(de)(de)有機(ji)物(wu)(wu)可(ke)用氣相(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)儀(yi)(yi)分(fen)(fen)析,但這些物(wu)(wu)質只(zhi)占(zhan)有機(ji)物(wu)(wu)的(de)(de)15%~20%,其(qi)余(yu)的(de)(de)80%~85%有機(ji)物(wu)(wu)原則上可(ke)采(cai)用高(gao)效(xiao)液相(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)儀(yi)(yi)分(fen)(fen)析。

二、高效液相色譜儀原理是什么

高(gao)效液(ye)相(xiang)(xiang)色譜儀(yi)(yi)(HPLC)是應用高(gao)效液(ye)相(xiang)(xiang)色譜原(yuan)理(li),主(zhu)要用于(yu)分(fen)析高(gao)沸點不易(yi)揮發的(de)、受(shou)熱不穩定(ding)的(de)和(he)分(fen)子量(liang)大的(de)有機化合物的(de)儀(yi)(yi)器(qi)設(she)備。它由儲(chu)液(ye)器(qi)、泵、進(jin)樣(yang)器(qi)、色譜柱(zhu)、檢測器(qi)、記(ji)錄儀(yi)(yi)等(deng)幾部(bu)分(fen)組成(cheng)。儲(chu)液(ye)器(qi)中的(de)流(liu)動(dong)(dong)相(xiang)(xiang)被高(gao)壓泵打入(ru)系(xi)統,樣(yang)品溶液(ye)經進(jin)樣(yang)器(qi)進(jin)入(ru)流(liu)動(dong)(dong)相(xiang)(xiang),被流(liu)動(dong)(dong)相(xiang)(xiang)載入(ru)色譜柱(zhu)(固定(ding)相(xiang)(xiang))內(nei),由于(yu)樣(yang)品溶液(ye)中的(de)各組分(fen)在兩相(xiang)(xiang)中具(ju)有不同(tong)的(de)分(fen)配系(xi)數,在兩相(xiang)(xiang)中做相(xiang)(xiang)對運動(dong)(dong)時(shi),經過(guo)反(fan)復多(duo)次的(de)吸(xi)附-解吸(xi)的(de)分(fen)配過(guo)程,各組分(fen)在移動(dong)(dong)速(su)度上(shang)產生(sheng)較大的(de)差(cha)別(bie),被分(fen)離成(cheng)單個組分(fen)依次從柱(zhu)內(nei)流(liu)出,通過(guo)檢測器(qi)時(shi),樣(yang)品濃度被轉換(huan)成(cheng)電信號傳送到記(ji)錄儀(yi)(yi),數據(ju)以圖譜形式打印出來。

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