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高效液相色譜儀有什么特點 高效液相色譜儀原理是什么

本文章由注冊用戶 淺嘗不止— 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。接下來本文將簡單介紹高效液相色譜儀有什么特點以及高效液相色譜儀原理是什么,一起到文中來看看吧!

一、高效液相色譜儀有什么特點

高效液相(xiang)色譜儀的(de)顯著特(te)征是高壓、高速、高效、高靈(ling)敏度、高選(xuan)擇性和(he)應用范(fan)圍廣(guang)等(deng)。

1、高壓

高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)色譜儀為了獲得高(gao)柱效(xiao),使用的固(gu)定相(xiang)粒徑很(hen)小(xiao)(<10um),液(ye)體(ti)流動相(xiang)高(gao)速通過時,產(chan)生很(hen)高(gao)的壓(ya)力(li),工作壓(ya)力(li)范圍(wei)為1.5×107~3.5×107Pa。

2、高速

由(you)于(yu)釆用了(le)高(gao)壓(ya),流(liu)動相流(liu)速快(kuai),所(suo)需的分(fen)析時間(jian)比經典液(ye)相柱色譜儀少得多。

3、高效

高效液相色譜儀的(de)柱(zhu)(zhu)效能(neng)約3萬塔板(ban)/米(mi),氣(qi)相色(se)譜儀的(de)柱(zhu)(zhu)效能(neng)約2000塔板(ban)/米(mi)。

4、高靈敏度

由于采(cai)用了(le)高靈敏度的檢測器,最(zui)小檢測量可達10-9g,甚至10-11g,而所需樣品(pin)量很少。

5、高選擇性

可(ke)以通過(guo)控制流動(dong)相改善分離過(guo)程的(de)選擇性。

6、應用范圍廣

高(gao)效液相(xiang)色(se)譜(pu)儀可(ke)用(yong)于高(gao)沸點、熱穩定性(xing)差(cha)以(yi)及具有(you)生(sheng)理(li)活性(xing)物(wu)(wu)質(zhi)(zhi)的(de)分析。一(yi)般來說,沸點在450℃以(yi)下(xia),相(xiang)對分子質(zhi)(zhi)量(liang)小于450的(de)有(you)機(ji)(ji)物(wu)(wu)可(ke)用(yong)氣相(xiang)色(se)譜(pu)儀分析,但這些物(wu)(wu)質(zhi)(zhi)只占有(you)機(ji)(ji)物(wu)(wu)的(de)15%~20%,其余(yu)的(de)80%~85%有(you)機(ji)(ji)物(wu)(wu)原則上可(ke)采用(yong)高(gao)效液相(xiang)色(se)譜(pu)儀分析。

二、高效液相色譜儀原理是什么

高效液(ye)相(xiang)色譜(pu)儀(HPLC)是應用高效液(ye)相(xiang)色譜(pu)原理,主要用于(yu)分(fen)析高沸點不易(yi)揮(hui)發的、受熱不穩定的和分(fen)子量大的有(you)機(ji)化(hua)合物的儀器(qi)(qi)設備。它由儲液(ye)器(qi)(qi)、泵、進樣(yang)(yang)器(qi)(qi)、色譜(pu)柱、檢(jian)(jian)測器(qi)(qi)、記(ji)錄(lu)儀等幾部(bu)分(fen)組成。儲液(ye)器(qi)(qi)中(zhong)的流(liu)動相(xiang)被(bei)(bei)高壓泵打入系統,樣(yang)(yang)品溶液(ye)經進樣(yang)(yang)器(qi)(qi)進入流(liu)動相(xiang),被(bei)(bei)流(liu)動相(xiang)載入色譜(pu)柱(固(gu)定相(xiang))內,由于(yu)樣(yang)(yang)品溶液(ye)中(zhong)的各組分(fen)在兩(liang)相(xiang)中(zhong)具(ju)有(you)不同的分(fen)配系數,在兩(liang)相(xiang)中(zhong)做相(xiang)對運(yun)動時,經過反復多次的吸(xi)附-解(jie)吸(xi)的分(fen)配過程,各組分(fen)在移動速度(du)上產生較(jiao)大的差別,被(bei)(bei)分(fen)離成單個組分(fen)依(yi)次從(cong)柱內流(liu)出(chu),通過檢(jian)(jian)測器(qi)(qi)時,樣(yang)(yang)品濃(nong)度(du)被(bei)(bei)轉換成電信號傳送到記(ji)錄(lu)儀,數據以圖(tu)譜(pu)形式打印(yin)出(chu)來(lai)。

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