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高效液相色譜儀有什么特點 高效液相色譜儀原理是什么

本文章由注冊用戶 淺嘗不止— 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。接下來本文將簡單介紹高效液相色譜儀有什么特點以及高效液相色譜儀原理是什么,一起到文中來看看吧!

一、高效液相色譜儀有什么特點

高(gao)(gao)效液相(xiang)色譜儀(yi)的顯著(zhu)特征(zheng)是(shi)高(gao)(gao)壓、高(gao)(gao)速(su)、高(gao)(gao)效、高(gao)(gao)靈敏(min)度、高(gao)(gao)選(xuan)擇性和(he)應用范(fan)圍廣等。

1、高壓

高效(xiao)液(ye)相(xiang)色譜儀為(wei)了(le)獲得高柱效(xiao),使(shi)用的固定(ding)相(xiang)粒徑很小(<10um),液(ye)體流動相(xiang)高速通過時(shi),產生很高的壓力,工作壓力范圍為(wei)1.5×107~3.5×107Pa。

2、高速

由(you)于釆用了高壓,流(liu)動相流(liu)速(su)快,所需(xu)的分析時間(jian)比經典液相柱色譜儀少得多。

3、高效

高效液相色譜儀的柱效(xiao)能約3萬塔板/米(mi),氣相色譜儀(yi)的柱效(xiao)能約2000塔板/米(mi)。

4、高靈敏度

由于采用(yong)了(le)高靈敏度(du)的檢(jian)測器,最小檢(jian)測量可達(da)10-9g,甚至(zhi)10-11g,而所需樣品(pin)量很少。

5、高選擇性

可以通過(guo)控制(zhi)流動相改善(shan)分離過(guo)程的(de)選擇性。

6、應用范圍廣

高效(xiao)液相色譜(pu)儀(yi)可(ke)(ke)用于(yu)(yu)高沸點(dian)(dian)、熱穩定性(xing)差以(yi)及具有(you)(you)生理(li)活性(xing)物(wu)質的(de)分(fen)(fen)析。一般來說,沸點(dian)(dian)在450℃以(yi)下,相對(dui)分(fen)(fen)子質量小于(yu)(yu)450的(de)有(you)(you)機物(wu)可(ke)(ke)用氣相色譜(pu)儀(yi)分(fen)(fen)析,但這(zhe)些物(wu)質只占有(you)(you)機物(wu)的(de)15%~20%,其余(yu)的(de)80%~85%有(you)(you)機物(wu)原則上(shang)可(ke)(ke)采(cai)用高效(xiao)液相色譜(pu)儀(yi)分(fen)(fen)析。

二、高效液相色譜儀原理是什么

高(gao)效液(ye)相(xiang)色譜(pu)儀(HPLC)是(shi)應(ying)用高(gao)效液(ye)相(xiang)色譜(pu)原(yuan)理,主要用于分(fen)(fen)析高(gao)沸(fei)點(dian)不易揮發(fa)的、受熱不穩定的和分(fen)(fen)子(zi)量大(da)的有機化(hua)合(he)物(wu)的儀器(qi)(qi)設(she)備(bei)。它(ta)由儲液(ye)器(qi)(qi)、泵、進(jin)樣(yang)(yang)器(qi)(qi)、色譜(pu)柱、檢(jian)(jian)測器(qi)(qi)、記(ji)錄儀等幾部分(fen)(fen)組(zu)成(cheng)。儲液(ye)器(qi)(qi)中(zhong)的流動相(xiang)被高(gao)壓泵打入(ru)系統,樣(yang)(yang)品溶液(ye)經進(jin)樣(yang)(yang)器(qi)(qi)進(jin)入(ru)流動相(xiang),被流動相(xiang)載入(ru)色譜(pu)柱(固(gu)定相(xiang))內,由于樣(yang)(yang)品溶液(ye)中(zhong)的各(ge)組(zu)分(fen)(fen)在兩相(xiang)中(zhong)具有不同的分(fen)(fen)配系數,在兩相(xiang)中(zhong)做相(xiang)對(dui)運動時(shi),經過(guo)反復多次的吸(xi)附-解吸(xi)的分(fen)(fen)配過(guo)程,各(ge)組(zu)分(fen)(fen)在移動速(su)度(du)上(shang)產生較(jiao)大(da)的差別,被分(fen)(fen)離成(cheng)單個組(zu)分(fen)(fen)依次從柱內流出,通過(guo)檢(jian)(jian)測器(qi)(qi)時(shi),樣(yang)(yang)品濃度(du)被轉換成(cheng)電信號(hao)傳送(song)到記(ji)錄儀,數據以圖譜(pu)形式打印出來。

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