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高效液相色譜儀有什么特點 高效液相色譜儀原理是什么

本文章由注冊用戶 淺嘗不止— 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。接下來本文將簡單介紹高效液相色譜儀有什么特點以及高效液相色譜儀原理是什么,一起到文中來看看吧!

一、高效液相色譜儀有什么特點

高(gao)(gao)效(xiao)液相色譜儀的顯著特征是高(gao)(gao)壓、高(gao)(gao)速、高(gao)(gao)效(xiao)、高(gao)(gao)靈敏度、高(gao)(gao)選(xuan)擇性(xing)和應用范圍廣等(deng)。

1、高壓

高(gao)(gao)效液(ye)相(xiang)色(se)譜儀為了獲得高(gao)(gao)柱效,使用的(de)固(gu)定(ding)相(xiang)粒徑很(hen)小(xiao)(<10um),液(ye)體(ti)流動相(xiang)高(gao)(gao)速通(tong)過(guo)時,產生(sheng)很(hen)高(gao)(gao)的(de)壓力(li),工(gong)作壓力(li)范(fan)圍為1.5×107~3.5×107Pa。

2、高速

由于釆用了(le)高壓,流動相流速快(kuai),所需的分析時間比經典(dian)液相柱色譜儀少得多。

3、高效

高效液相色譜儀的柱(zhu)效能(neng)(neng)約3萬(wan)塔(ta)(ta)板/米,氣相色(se)譜(pu)儀(yi)的柱(zhu)效能(neng)(neng)約2000塔(ta)(ta)板/米。

4、高靈敏度

由(you)于采用了高靈敏度的(de)檢測器,最小(xiao)檢測量可達10-9g,甚至10-11g,而所需樣品量很少。

5、高選擇性

可以(yi)通(tong)過控制流動相(xiang)改善分離過程的選擇性(xing)。

6、應用范圍廣

高(gao)效液相(xiang)色(se)(se)譜儀(yi)可用(yong)于高(gao)沸點、熱穩定性差以(yi)(yi)及具有(you)生理活性物(wu)(wu)質(zhi)的(de)分(fen)析。一般來說,沸點在450℃以(yi)(yi)下,相(xiang)對分(fen)子質(zhi)量小于450的(de)有(you)機(ji)物(wu)(wu)可用(yong)氣相(xiang)色(se)(se)譜儀(yi)分(fen)析,但這些物(wu)(wu)質(zhi)只占有(you)機(ji)物(wu)(wu)的(de)15%~20%,其余的(de)80%~85%有(you)機(ji)物(wu)(wu)原則上可采用(yong)高(gao)效液相(xiang)色(se)(se)譜儀(yi)分(fen)析。

二、高效液相色譜儀原理是什么

高(gao)效液相色(se)(se)(se)譜(pu)儀(yi)(HPLC)是應用高(gao)效液相色(se)(se)(se)譜(pu)原(yuan)理(li),主要用于分(fen)析高(gao)沸點不易揮(hui)發(fa)的(de)(de)(de)、受(shou)熱不穩(wen)定的(de)(de)(de)和(he)分(fen)子(zi)量大(da)的(de)(de)(de)有(you)機化合物(wu)的(de)(de)(de)儀(yi)器(qi)設備。它由(you)儲(chu)液器(qi)、泵(beng)、進(jin)(jin)樣器(qi)、色(se)(se)(se)譜(pu)柱、檢(jian)測器(qi)、記錄(lu)儀(yi)等幾(ji)部分(fen)組(zu)成。儲(chu)液器(qi)中的(de)(de)(de)流動相被(bei)(bei)高(gao)壓泵(beng)打入(ru)(ru)系統,樣品(pin)溶液經進(jin)(jin)樣器(qi)進(jin)(jin)入(ru)(ru)流動相,被(bei)(bei)流動相載(zai)入(ru)(ru)色(se)(se)(se)譜(pu)柱(固定相)內(nei),由(you)于樣品(pin)溶液中的(de)(de)(de)各(ge)組(zu)分(fen)在兩相中具有(you)不同的(de)(de)(de)分(fen)配系數,在兩相中做相對運(yun)動時,經過反復多次(ci)的(de)(de)(de)吸(xi)附(fu)-解吸(xi)的(de)(de)(de)分(fen)配過程,各(ge)組(zu)分(fen)在移動速度(du)上(shang)產生較大(da)的(de)(de)(de)差(cha)別,被(bei)(bei)分(fen)離(li)成單(dan)個組(zu)分(fen)依次(ci)從柱內(nei)流出(chu),通過檢(jian)測器(qi)時,樣品(pin)濃度(du)被(bei)(bei)轉換成電信號傳送到記錄(lu)儀(yi),數據(ju)以圖(tu)譜(pu)形式打印出(chu)來。

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