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高效液相色譜儀有什么特點 高效液相色譜儀原理是什么

本文章由注冊用戶 淺嘗不止— 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。接下來本文將簡單介紹高效液相色譜儀有什么特點以及高效液相色譜儀原理是什么,一起到文中來看看吧!

一、高效液相色譜儀有什么特點

高(gao)(gao)效液相色譜儀的(de)顯著特征是高(gao)(gao)壓、高(gao)(gao)速(su)、高(gao)(gao)效、高(gao)(gao)靈敏度、高(gao)(gao)選(xuan)擇(ze)性和應用范圍廣等。

1、高壓

高效液相色譜(pu)儀(yi)為了(le)獲(huo)得高柱(zhu)效,使用的固(gu)定相粒徑很(hen)小(xiao)(<10um),液體流動(dong)相高速通過時,產生(sheng)很(hen)高的壓力,工作壓力范圍為1.5×107~3.5×107Pa。

2、高速

由于(yu)釆(bian)用了高壓,流(liu)(liu)動相流(liu)(liu)速快,所需(xu)的分(fen)析時間比經典液(ye)相柱色譜儀(yi)少得多(duo)。

3、高效

高效液相色譜儀的(de)柱(zhu)效(xiao)能約(yue)3萬塔板/米,氣相色譜儀的(de)柱(zhu)效(xiao)能約(yue)2000塔板/米。

4、高靈敏度

由(you)于采用(yong)了高靈(ling)敏度(du)的檢測器,最(zui)小檢測量可達10-9g,甚至10-11g,而(er)所需樣品量很少。

5、高選擇性

可以通過控(kong)制流動相改善分(fen)離過程的選擇性。

6、應用范圍廣

高(gao)效(xiao)液相色譜儀可(ke)用于高(gao)沸(fei)點、熱穩定性差(cha)以及(ji)具有(you)(you)生(sheng)理活性物(wu)質的(de)分(fen)析。一(yi)般來說,沸(fei)點在450℃以下,相對分(fen)子質量小于450的(de)有(you)(you)機(ji)物(wu)可(ke)用氣相色譜儀分(fen)析,但這些物(wu)質只占有(you)(you)機(ji)物(wu)的(de)15%~20%,其余的(de)80%~85%有(you)(you)機(ji)物(wu)原(yuan)則上可(ke)采(cai)用高(gao)效(xiao)液相色譜儀分(fen)析。

二、高效液相色譜儀原理是什么

高(gao)效(xiao)液(ye)(ye)(ye)相(xiang)(xiang)色(se)譜儀(HPLC)是(shi)應用高(gao)效(xiao)液(ye)(ye)(ye)相(xiang)(xiang)色(se)譜原理,主要(yao)用于分(fen)(fen)(fen)(fen)析高(gao)沸點不(bu)易揮發的、受熱不(bu)穩定(ding)(ding)的和(he)分(fen)(fen)(fen)(fen)子量大的有(you)機化合物的儀器(qi)(qi)設備。它由(you)儲液(ye)(ye)(ye)器(qi)(qi)、泵、進(jin)樣器(qi)(qi)、色(se)譜柱、檢測器(qi)(qi)、記(ji)錄儀等幾部分(fen)(fen)(fen)(fen)組成。儲液(ye)(ye)(ye)器(qi)(qi)中(zhong)的流(liu)(liu)動相(xiang)(xiang)被高(gao)壓泵打入(ru)(ru)系統,樣品溶液(ye)(ye)(ye)經(jing)進(jin)樣器(qi)(qi)進(jin)入(ru)(ru)流(liu)(liu)動相(xiang)(xiang),被流(liu)(liu)動相(xiang)(xiang)載入(ru)(ru)色(se)譜柱(固定(ding)(ding)相(xiang)(xiang))內,由(you)于樣品溶液(ye)(ye)(ye)中(zhong)的各組分(fen)(fen)(fen)(fen)在(zai)兩相(xiang)(xiang)中(zhong)具(ju)有(you)不(bu)同的分(fen)(fen)(fen)(fen)配(pei)系數,在(zai)兩相(xiang)(xiang)中(zhong)做(zuo)相(xiang)(xiang)對運動時,經(jing)過(guo)反復(fu)多次的吸(xi)附-解吸(xi)的分(fen)(fen)(fen)(fen)配(pei)過(guo)程,各組分(fen)(fen)(fen)(fen)在(zai)移動速度上產生較大的差別,被分(fen)(fen)(fen)(fen)離成單個組分(fen)(fen)(fen)(fen)依次從柱內流(liu)(liu)出(chu),通過(guo)檢測器(qi)(qi)時,樣品濃度被轉換成電信(xin)號(hao)傳送到記(ji)錄儀,數據以圖譜形式打印出(chu)來(lai)。

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