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高效液相色譜儀有什么特點 高效液相色譜儀原理是什么

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。接下來本文將簡單介紹高效液相色譜儀有什么特點以及高效液相色譜儀原理是什么,一起到文中來看看吧!

一、高效液相色譜儀有什么特點

高(gao)效液相(xiang)色(se)譜儀的顯(xian)著特征是(shi)高(gao)壓、高(gao)速、高(gao)效、高(gao)靈敏度(du)、高(gao)選擇性和應用范圍廣等。

1、高壓

高效液相(xiang)色譜儀為(wei)了獲得高柱效,使(shi)用的(de)固(gu)定相(xiang)粒徑很(hen)小(xiao)(<10um),液體(ti)流動相(xiang)高速(su)通過時,產生很(hen)高的(de)壓力,工(gong)作(zuo)壓力范圍為(wei)1.5×107~3.5×107Pa。

2、高速

由于釆用了高壓,流(liu)動相流(liu)速快,所(suo)需(xu)的分析時間比經典液相柱色譜(pu)儀少得多。

3、高效

高效液相色譜儀的柱效能約(yue)3萬塔板/米,氣相色(se)譜儀的柱效能約(yue)2000塔板/米。

4、高靈敏度

由(you)于采用了高靈(ling)敏度的(de)檢(jian)測(ce)器,最小檢(jian)測(ce)量可達10-9g,甚至10-11g,而(er)所需樣品量很(hen)少。

5、高選擇性

可(ke)以通(tong)過控制(zhi)流動相改善分(fen)離(li)過程(cheng)的選擇(ze)性。

6、應用范圍廣

高(gao)效液相色(se)(se)譜儀(yi)(yi)可用(yong)(yong)于(yu)高(gao)沸(fei)點、熱(re)穩定(ding)性差以及(ji)具有(you)生理(li)活性物質的分(fen)(fen)析。一般來說(shuo),沸(fei)點在450℃以下,相對分(fen)(fen)子質量小于(yu)450的有(you)機物可用(yong)(yong)氣(qi)相色(se)(se)譜儀(yi)(yi)分(fen)(fen)析,但這(zhe)些物質只占有(you)機物的15%~20%,其余(yu)的80%~85%有(you)機物原則上可采(cai)用(yong)(yong)高(gao)效液相色(se)(se)譜儀(yi)(yi)分(fen)(fen)析。

二、高效液相色譜儀原理是什么

高(gao)效(xiao)液相(xiang)(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(HPLC)是應用高(gao)效(xiao)液相(xiang)(xiang)(xiang)色譜(pu)原(yuan)理,主要(yao)用于分(fen)(fen)析高(gao)沸點不(bu)易揮發的(de)(de)、受熱不(bu)穩定(ding)的(de)(de)和分(fen)(fen)子量大的(de)(de)有(you)(you)機化合物(wu)的(de)(de)儀器(qi)(qi)設備。它由儲液器(qi)(qi)、泵、進樣(yang)(yang)(yang)器(qi)(qi)、色譜(pu)柱(zhu)、檢測器(qi)(qi)、記錄儀等(deng)幾部分(fen)(fen)組(zu)成(cheng)(cheng)。儲液器(qi)(qi)中(zhong)(zhong)的(de)(de)流(liu)動(dong)相(xiang)(xiang)(xiang)被(bei)(bei)高(gao)壓泵打(da)入系(xi)統,樣(yang)(yang)(yang)品溶液經(jing)進樣(yang)(yang)(yang)器(qi)(qi)進入流(liu)動(dong)相(xiang)(xiang)(xiang),被(bei)(bei)流(liu)動(dong)相(xiang)(xiang)(xiang)載入色譜(pu)柱(zhu)(固定(ding)相(xiang)(xiang)(xiang))內(nei)(nei),由于樣(yang)(yang)(yang)品溶液中(zhong)(zhong)的(de)(de)各組(zu)分(fen)(fen)在兩相(xiang)(xiang)(xiang)中(zhong)(zhong)具有(you)(you)不(bu)同(tong)的(de)(de)分(fen)(fen)配系(xi)數,在兩相(xiang)(xiang)(xiang)中(zhong)(zhong)做相(xiang)(xiang)(xiang)對(dui)運動(dong)時(shi),經(jing)過反復多次(ci)的(de)(de)吸附-解吸的(de)(de)分(fen)(fen)配過程,各組(zu)分(fen)(fen)在移動(dong)速(su)度(du)上(shang)產生較大的(de)(de)差別,被(bei)(bei)分(fen)(fen)離成(cheng)(cheng)單個組(zu)分(fen)(fen)依次(ci)從柱(zhu)內(nei)(nei)流(liu)出,通過檢測器(qi)(qi)時(shi),樣(yang)(yang)(yang)品濃度(du)被(bei)(bei)轉換(huan)成(cheng)(cheng)電信號(hao)傳(chuan)送到(dao)記錄儀,數據以圖(tu)譜(pu)形式(shi)打(da)印(yin)出來。

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