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高效液相色譜儀有什么特點 高效液相色譜儀原理是什么

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。接下來本文將簡單介紹高效液相色譜儀有什么特點以及高效液相色譜儀原理是什么,一起到文中來看看吧!

一、高效液相色譜儀有什么特點

高(gao)效液相色譜(pu)儀的(de)顯著特征是高(gao)壓(ya)、高(gao)速、高(gao)效、高(gao)靈敏度(du)、高(gao)選擇(ze)性和應(ying)用范圍(wei)廣(guang)等。

1、高壓

高效液相(xiang)色譜儀(yi)為了(le)獲得高柱效,使用(yong)的固定相(xiang)粒徑很(hen)(hen)小(<10um),液體流動(dong)相(xiang)高速通(tong)過時,產生很(hen)(hen)高的壓力,工作壓力范圍為1.5×107~3.5×107Pa。

2、高速

由于釆用了高壓,流(liu)動相(xiang)流(liu)速快,所(suo)需的分析時間(jian)比經(jing)典(dian)液相(xiang)柱(zhu)色譜儀少得多。

3、高效

高效液相色譜儀的(de)柱(zhu)效能(neng)約3萬塔板/米,氣(qi)相色(se)譜儀的(de)柱(zhu)效能(neng)約2000塔板/米。

4、高靈敏度

由于采用了高靈(ling)敏度的檢測(ce)器,最小檢測(ce)量(liang)可(ke)達10-9g,甚至10-11g,而所需樣(yang)品量(liang)很(hen)少。

5、高選擇性

可(ke)以通過控制(zhi)流動相改善分離過程的選(xuan)擇性。

6、應用范圍廣

高(gao)效液(ye)相色譜(pu)儀(yi)可用于(yu)高(gao)沸點、熱穩定性差以及(ji)具有(you)生理活性物(wu)質的分析(xi)。一(yi)般來說,沸點在450℃以下,相對分子質量小于(yu)450的有(you)機(ji)(ji)物(wu)可用氣相色譜(pu)儀(yi)分析(xi),但(dan)這些(xie)物(wu)質只占有(you)機(ji)(ji)物(wu)的15%~20%,其(qi)余的80%~85%有(you)機(ji)(ji)物(wu)原(yuan)則上可采(cai)用高(gao)效液(ye)相色譜(pu)儀(yi)分析(xi)。

二、高效液相色譜儀原理是什么

高(gao)(gao)(gao)效液(ye)(ye)(ye)相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)儀(HPLC)是應(ying)用(yong)高(gao)(gao)(gao)效液(ye)(ye)(ye)相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)原理,主(zhu)要(yao)用(yong)于(yu)(yu)分(fen)(fen)(fen)(fen)析高(gao)(gao)(gao)沸點不(bu)易揮發的(de)、受熱不(bu)穩定的(de)和分(fen)(fen)(fen)(fen)子量大的(de)有(you)機化合物的(de)儀器(qi)(qi)(qi)(qi)設(she)備。它由(you)儲液(ye)(ye)(ye)器(qi)(qi)(qi)(qi)、泵(beng)、進樣(yang)器(qi)(qi)(qi)(qi)、色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)柱、檢測器(qi)(qi)(qi)(qi)、記錄(lu)儀等幾(ji)部分(fen)(fen)(fen)(fen)組成(cheng)。儲液(ye)(ye)(ye)器(qi)(qi)(qi)(qi)中的(de)流動(dong)相(xiang)(xiang)被(bei)(bei)高(gao)(gao)(gao)壓泵(beng)打入(ru)系統,樣(yang)品(pin)溶(rong)液(ye)(ye)(ye)經進樣(yang)器(qi)(qi)(qi)(qi)進入(ru)流動(dong)相(xiang)(xiang),被(bei)(bei)流動(dong)相(xiang)(xiang)載(zai)入(ru)色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)柱(固定相(xiang)(xiang))內,由(you)于(yu)(yu)樣(yang)品(pin)溶(rong)液(ye)(ye)(ye)中的(de)各組分(fen)(fen)(fen)(fen)在兩相(xiang)(xiang)中具有(you)不(bu)同的(de)分(fen)(fen)(fen)(fen)配系數,在兩相(xiang)(xiang)中做相(xiang)(xiang)對運動(dong)時,經過(guo)反復多次的(de)吸附-解吸的(de)分(fen)(fen)(fen)(fen)配過(guo)程,各組分(fen)(fen)(fen)(fen)在移(yi)動(dong)速度(du)上產(chan)生較大的(de)差(cha)別,被(bei)(bei)分(fen)(fen)(fen)(fen)離成(cheng)單個組分(fen)(fen)(fen)(fen)依次從柱內流出,通過(guo)檢測器(qi)(qi)(qi)(qi)時,樣(yang)品(pin)濃度(du)被(bei)(bei)轉換成(cheng)電(dian)信號傳送到記錄(lu)儀,數據(ju)以(yi)圖譜(pu)(pu)(pu)形式打印出來。

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