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高效液相色譜儀有什么特點 高效液相色譜儀原理是什么

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。接下來本文將簡單介紹高效液相色譜儀有什么特點以及高效液相色譜儀原理是什么,一起到文中來看看吧!

一、高效液相色譜儀有什么特點

高(gao)(gao)效液相色(se)譜(pu)儀的(de)顯著特征是(shi)高(gao)(gao)壓、高(gao)(gao)速(su)、高(gao)(gao)效、高(gao)(gao)靈敏度、高(gao)(gao)選擇性和應(ying)用范圍廣等。

1、高壓

高效液(ye)相色(se)譜儀為了(le)獲得高柱效,使用的(de)固定相粒(li)徑很小(<10um),液(ye)體流動(dong)相高速通過時,產生很高的(de)壓力,工作壓力范圍(wei)為1.5×107~3.5×107Pa。

2、高速

由于(yu)釆用了高壓,流(liu)動相流(liu)速快(kuai),所(suo)需的分析時間比經典液相柱(zhu)色譜儀少(shao)得多。

3、高效

高效液相色譜儀的柱效能約3萬(wan)塔(ta)板(ban)/米(mi),氣相色(se)譜儀(yi)的柱效能約2000塔(ta)板(ban)/米(mi)。

4、高靈敏度

由(you)于采用了(le)高靈敏度的檢測器(qi),最小檢測量(liang)可達10-9g,甚至10-11g,而所(suo)需樣品量(liang)很少。

5、高選擇性

可以通過控制流(liu)動相改善分離過程的(de)選擇(ze)性。

6、應用范圍廣

高效液相(xiang)色(se)譜儀可用于高沸點(dian)、熱穩定性(xing)差以及具有(you)生理活(huo)性(xing)物(wu)(wu)質的(de)分析。一般來說,沸點(dian)在450℃以下,相(xiang)對分子質量小于450的(de)有(you)機物(wu)(wu)可用氣相(xiang)色(se)譜儀分析,但這些物(wu)(wu)質只(zhi)占(zhan)有(you)機物(wu)(wu)的(de)15%~20%,其余的(de)80%~85%有(you)機物(wu)(wu)原(yuan)則上(shang)可采用高效液相(xiang)色(se)譜儀分析。

二、高效液相色譜儀原理是什么

高(gao)(gao)(gao)效液(ye)相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)(HPLC)是應用(yong)高(gao)(gao)(gao)效液(ye)相(xiang)(xiang)色譜(pu)原理,主要用(yong)于(yu)分(fen)(fen)(fen)析高(gao)(gao)(gao)沸點不易(yi)揮發的(de)、受熱不穩定(ding)的(de)和分(fen)(fen)(fen)子量大(da)的(de)有(you)機化合物(wu)的(de)儀(yi)器(qi)(qi)(qi)設(she)備。它由儲液(ye)器(qi)(qi)(qi)、泵、進樣器(qi)(qi)(qi)、色譜(pu)柱(zhu)、檢(jian)測器(qi)(qi)(qi)、記(ji)錄(lu)儀(yi)等(deng)幾部分(fen)(fen)(fen)組成。儲液(ye)器(qi)(qi)(qi)中(zhong)(zhong)的(de)流動相(xiang)(xiang)被(bei)(bei)高(gao)(gao)(gao)壓泵打(da)入(ru)系統(tong),樣品(pin)溶液(ye)經(jing)進樣器(qi)(qi)(qi)進入(ru)流動相(xiang)(xiang),被(bei)(bei)流動相(xiang)(xiang)載入(ru)色譜(pu)柱(zhu)(固(gu)定(ding)相(xiang)(xiang))內(nei),由于(yu)樣品(pin)溶液(ye)中(zhong)(zhong)的(de)各組分(fen)(fen)(fen)在兩相(xiang)(xiang)中(zhong)(zhong)具有(you)不同的(de)分(fen)(fen)(fen)配系數(shu),在兩相(xiang)(xiang)中(zhong)(zhong)做相(xiang)(xiang)對運(yun)動時(shi),經(jing)過反復多次的(de)吸(xi)附-解吸(xi)的(de)分(fen)(fen)(fen)配過程,各組分(fen)(fen)(fen)在移動速度上(shang)產生(sheng)較大(da)的(de)差別,被(bei)(bei)分(fen)(fen)(fen)離成單個(ge)組分(fen)(fen)(fen)依次從(cong)柱(zhu)內(nei)流出(chu),通過檢(jian)測器(qi)(qi)(qi)時(shi),樣品(pin)濃(nong)度被(bei)(bei)轉換成電信號(hao)傳送到(dao)記(ji)錄(lu)儀(yi),數(shu)據以(yi)圖譜(pu)形式打(da)印出(chu)來(lai)。

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