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高效液相色譜儀有什么特點 高效液相色譜儀原理是什么

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。接下來本文將簡單介紹高效液相色譜儀有什么特點以及高效液相色譜儀原理是什么,一起到文中來看看吧!

一、高效液相色譜儀有什么特點

高(gao)(gao)(gao)(gao)效液相色譜儀的顯著特征(zheng)是高(gao)(gao)(gao)(gao)壓、高(gao)(gao)(gao)(gao)速、高(gao)(gao)(gao)(gao)效、高(gao)(gao)(gao)(gao)靈(ling)敏度、高(gao)(gao)(gao)(gao)選擇性和(he)應用范圍廣等。

1、高壓

高效液相色(se)譜儀為了獲得高柱效,使用的(de)固定相粒徑很小(<10um),液體流動(dong)相高速通過時,產生很高的(de)壓(ya)力,工作壓(ya)力范圍為1.5×107~3.5×107Pa。

2、高速

由于釆用(yong)了高壓,流(liu)動相流(liu)速快(kuai),所需的分(fen)析時(shi)間比(bi)經典液相柱色譜儀(yi)少得多(duo)。

3、高效

高效液相色譜儀的柱效能約(yue)3萬塔(ta)板/米,氣相(xiang)色譜儀的柱效能約(yue)2000塔(ta)板/米。

4、高靈敏度

由于(yu)采用了高(gao)靈敏度(du)的(de)檢(jian)測器,最小檢(jian)測量可達10-9g,甚至10-11g,而(er)所需(xu)樣品量很少。

5、高選擇性

可以(yi)通過(guo)控(kong)制流動(dong)相改善分(fen)離過(guo)程的選擇性。

6、應用范圍廣

高(gao)效液相(xiang)色譜儀可(ke)用(yong)于(yu)高(gao)沸(fei)點、熱(re)穩定性(xing)差(cha)以(yi)及具有(you)(you)(you)生理活性(xing)物(wu)(wu)質(zhi)的(de)(de)分(fen)析。一般來(lai)說,沸(fei)點在450℃以(yi)下,相(xiang)對分(fen)子質(zhi)量(liang)小于(yu)450的(de)(de)有(you)(you)(you)機物(wu)(wu)可(ke)用(yong)氣相(xiang)色譜儀分(fen)析,但這些物(wu)(wu)質(zhi)只占有(you)(you)(you)機物(wu)(wu)的(de)(de)15%~20%,其(qi)余的(de)(de)80%~85%有(you)(you)(you)機物(wu)(wu)原(yuan)則上(shang)可(ke)采用(yong)高(gao)效液相(xiang)色譜儀分(fen)析。

二、高效液相色譜儀原理是什么

高(gao)效液(ye)(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)儀(yi)(HPLC)是應(ying)用(yong)高(gao)效液(ye)(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)原理,主要用(yong)于分(fen)(fen)(fen)(fen)析高(gao)沸點(dian)不易揮發的(de)(de)、受(shou)熱不穩(wen)定的(de)(de)和分(fen)(fen)(fen)(fen)子量大的(de)(de)有機(ji)化合物的(de)(de)儀(yi)器(qi)(qi)設備。它由(you)儲液(ye)(ye)器(qi)(qi)、泵、進樣(yang)(yang)器(qi)(qi)、色(se)(se)譜(pu)柱、檢測(ce)器(qi)(qi)、記錄儀(yi)等幾部(bu)分(fen)(fen)(fen)(fen)組成。儲液(ye)(ye)器(qi)(qi)中的(de)(de)流(liu)動(dong)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)被高(gao)壓(ya)泵打入(ru)系統(tong),樣(yang)(yang)品(pin)(pin)溶液(ye)(ye)經進樣(yang)(yang)器(qi)(qi)進入(ru)流(liu)動(dong)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang),被流(liu)動(dong)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)載入(ru)色(se)(se)譜(pu)柱(固定相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang))內,由(you)于樣(yang)(yang)品(pin)(pin)溶液(ye)(ye)中的(de)(de)各組分(fen)(fen)(fen)(fen)在兩相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)中具有不同(tong)的(de)(de)分(fen)(fen)(fen)(fen)配系數,在兩相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)中做(zuo)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)對運動(dong)時(shi),經過反復多次的(de)(de)吸附-解(jie)吸的(de)(de)分(fen)(fen)(fen)(fen)配過程,各組分(fen)(fen)(fen)(fen)在移(yi)動(dong)速度上產生較大的(de)(de)差別,被分(fen)(fen)(fen)(fen)離成單(dan)個組分(fen)(fen)(fen)(fen)依(yi)次從(cong)柱內流(liu)出,通(tong)過檢測(ce)器(qi)(qi)時(shi),樣(yang)(yang)品(pin)(pin)濃度被轉換成電(dian)信號傳送到(dao)記錄儀(yi),數據以圖譜(pu)形式(shi)打印出來。

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