一、液相色譜儀操作流程是什么 ?
生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流程是什么呢?一起來看(kan)看(kan)吧!
首先(xian)先(xian)對(dui)流動相(xiang)(xiang)進(jin)行過濾(lv),根(gen)據需要(yao)選擇不同的(de)濾(lv)膜(mo),一般(ban)為有機系和(he)水系,常用(yong)的(de)孔徑為0.20um和(he)0.45um。然后對(dui)抽濾(lv)后的(de)流動相(xiang)(xiang)進(jin)行超(chao)聲脫氣10-20分鐘。一般(ban)情況下,流動相(xiang)(xiang)沖洗20-30分鐘后,儀(yi)器方可穩(wen)定(ding),最重要(yao)的(de)是儀(yi)器基線(xian)走(zou)后,方可進(jin)樣測試。
二、液相色譜儀操作注意事項有哪些
1、流動(dong)相必須用HPLC級的試劑,使用前過濾除去其(qi)中的顆(ke)粒性(xing)雜(za)質和其(qi)他物質。
2、流動(dong)相過濾后(hou)要用(yong)超聲(sheng)波脫氣(qi),脫氣(qi)后(hou)應該恢(hui)復到室溫后(hou)使(shi)用(yong)。
3、不能用純(chun)乙腈作為流動相,這樣會使單向閥(fa)粘住而導致(zhi)泵不進液。
4、使用(yong)緩沖(chong)溶液時,做(zuo)(zuo)完樣品(pin)后應立(li)即用(yong)去離子(zi)水沖(chong)洗管路及柱子(zi)一小時,然后用(yong)甲醇沖(chong)洗40分鐘以上,以充分洗去離子(zi)。對于柱塞桿(gan)外部,做(zuo)(zuo)完樣品(pin)后也必須用(yong)去離子(zi)水沖(chong)洗。
5、長時間不用(yong)(yong)儀器,應(ying)該(gai)將柱子取下用(yong)(yong)堵(du)頭(tou)封好(hao)保存(cun),注意不能(neng)用(yong)(yong)純水保存(cun)柱子,而應(ying)該(gai)用(yong)(yong)有機相,因為純水易長霉(mei)。
6、每(mei)次做完樣(yang)品后應(ying)該用(yong)溶解樣(yang)品的溶劑清(qing)洗進樣(yang)器。
7、C18柱絕對不能進蛋白樣(yang)品,血樣(yang)、生物樣(yang)品。
8、堵塞導致壓力太(tai)大,按預(yu)柱→混合器中的過(guo)濾(lv)器→管路過(guo)濾(lv)器→單向閥檢(jian)查并清(qing)洗(xi)。
9、氣(qi)泡(pao)會致使壓力不穩,重現性差,所以在使用過程中要(yao)盡量避(bi)免產生氣(qi)泡(pao)。
10、如果(guo)進液管內不進液體時,要使用注(zhu)射器吸液:通常在輸液前要進行流動相的清洗。
11、要注(zhu)意柱子的(de)pH值范圍,不得(de)注(zhu)射(she)強酸強堿的(de)樣品(pin),特(te)別是(shi)堿性樣品(pin)。
12、更換流(liu)動(dong)相時應該(gai)先將(jiang)吸濾頭部分(fen)放入燒杯中邊振(zhen)動(dong)邊靖洗,然后插(cha)入新的(de)流(liu)動(dong)相中。更換無互溶性的(de)流(liu)動(dong)相時要(yao)用異丙醇過渡一下。