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液相色譜儀操作流程是什么 液相色譜儀操作注意事項有哪些

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:液相色譜儀引入了氣相色譜儀的理論,技術上采用了高壓輸液泵、高效固定相、梯度洗脫技術和高靈敏度檢測器,具有高壓、高速、高效、高靈敏度、高選擇性和應用范圍廣等特點。接下來本文將簡單介紹液相色譜儀操作流程是什么以及液相色譜儀操作注意事項有哪些,一起到文中來看看吧!

一、液相色譜儀操作流程是什么 ?

生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操(cao)作流程是什么呢?一起(qi)來看(kan)看(kan)吧!

首先先對流(liu)動(dong)(dong)相進行過濾,根據需要(yao)選擇(ze)不同(tong)的(de)濾膜,一般為有(you)機系和(he)水(shui)系,常用(yong)的(de)孔徑為0.20um和(he)0.45um。然后(hou)(hou)對抽濾后(hou)(hou)的(de)流(liu)動(dong)(dong)相進行超(chao)聲脫氣10-20分鐘。一般情(qing)況下,流(liu)動(dong)(dong)相沖洗20-30分鐘后(hou)(hou),儀(yi)器方可(ke)穩定,最(zui)重(zhong)要(yao)的(de)是儀(yi)器基線走(zou)后(hou)(hou),方可(ke)進樣(yang)測試(shi)。

二、液相色譜儀操作注意事項有哪些

1、流動(dong)相必須用(yong)HPLC級的試(shi)劑,使(shi)用(yong)前過濾除去其中的顆(ke)粒(li)性(xing)雜(za)質和(he)其他物質。

2、流動相(xiang)過濾后要用(yong)超(chao)聲(sheng)波(bo)脫氣,脫氣后應該恢復到室(shi)溫后使用(yong)。

3、不(bu)能用(yong)純乙腈作為(wei)流動相,這樣(yang)會使單向閥(fa)粘住而導(dao)致泵(beng)不(bu)進(jin)液。

4、使(shi)用緩沖溶液時,做完樣品(pin)后(hou)應立即用去離(li)子(zi)(zi)水(shui)沖洗(xi)管路及柱(zhu)子(zi)(zi)一(yi)小時,然(ran)后(hou)用甲醇沖洗(xi)40分鐘以上(shang),以充分洗(xi)去離(li)子(zi)(zi)。對于柱(zhu)塞桿外部,做完樣品(pin)后(hou)也必須用去離(li)子(zi)(zi)水(shui)沖洗(xi)。

5、長時間不用儀器,應(ying)該將(jiang)柱(zhu)子取下用堵頭封好保(bao)存(cun),注意不能(neng)用純(chun)水保(bao)存(cun)柱(zhu)子,而應(ying)該用有機相,因為純(chun)水易(yi)長霉(mei)。

6、每(mei)次做(zuo)完樣(yang)品(pin)后應該(gai)用溶解(jie)樣(yang)品(pin)的溶劑清洗進樣(yang)器。

7、C18柱絕對不能進(jin)蛋白樣品(pin),血樣、生(sheng)物樣品(pin)。

8、堵塞導致壓力太大,按(an)預柱→混(hun)合器中(zhong)的過濾(lv)器→管路過濾(lv)器→單向閥檢查并(bing)清洗(xi)。

9、氣泡會致使(shi)壓力不穩,重現性差,所(suo)以(yi)在(zai)使(shi)用過程中要盡量避免產生氣泡。

10、如果(guo)進液(ye)管(guan)內不進液(ye)體時,要(yao)使用注射器吸(xi)液(ye):通常(chang)在輸液(ye)前要(yao)進行流動相的(de)清(qing)洗。

11、要注(zhu)意柱子(zi)的pH值范圍,不得注(zhu)射強酸強堿的樣(yang)品,特別是堿性樣(yang)品。

12、更換流(liu)動(dong)相時(shi)應該先將(jiang)吸濾(lv)頭部分放入燒杯中邊(bian)振動(dong)邊(bian)靖洗,然后插(cha)入新的(de)(de)流(liu)動(dong)相中。更換無互(hu)溶性的(de)(de)流(liu)動(dong)相時(shi)要用異丙醇過渡一下。

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