一、液相色譜儀操作流程是什么 ?
生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流程(cheng)是什么呢?一起(qi)來看(kan)看(kan)吧(ba)!
首先先對(dui)流(liu)(liu)動相(xiang)進行過濾,根據(ju)需(xu)要(yao)選擇不(bu)同的(de)濾膜,一般(ban)為(wei)有(you)機系和(he)水系,常用的(de)孔徑為(wei)0.20um和(he)0.45um。然后對(dui)抽濾后的(de)流(liu)(liu)動相(xiang)進行超聲脫(tuo)氣10-20分(fen)鐘。一般(ban)情(qing)況下,流(liu)(liu)動相(xiang)沖洗20-30分(fen)鐘后,儀器方(fang)可穩(wen)定,最重要(yao)的(de)是儀器基(ji)線走后,方(fang)可進樣(yang)測試。
二、液相色譜儀操作注意事項有哪些
1、流(liu)動相必須用(yong)HPLC級的試劑,使(shi)用(yong)前過濾除(chu)去其中的顆(ke)粒性雜質(zhi)和(he)其他物(wu)質(zhi)。
2、流(liu)動(dong)相(xiang)過(guo)濾后(hou)要用超(chao)聲波脫(tuo)氣,脫(tuo)氣后(hou)應該恢復到室(shi)溫后(hou)使(shi)用。
3、不能用純乙腈作為流動相,這樣會使單向閥粘住(zhu)而導致泵不進液。
4、使用(yong)(yong)緩沖(chong)溶液(ye)時(shi),做完樣品后應立(li)即用(yong)(yong)去離(li)(li)子(zi)水沖(chong)洗(xi)管路(lu)及柱子(zi)一小(xiao)時(shi),然后用(yong)(yong)甲醇沖(chong)洗(xi)40分(fen)鐘以上,以充分(fen)洗(xi)去離(li)(li)子(zi)。對于柱塞桿外部,做完樣品后也(ye)必須(xu)用(yong)(yong)去離(li)(li)子(zi)水沖(chong)洗(xi)。
5、長(chang)時間不用(yong)儀器,應該(gai)將(jiang)柱子取下用(yong)堵頭封好保(bao)存,注意不能用(yong)純水保(bao)存柱子,而應該(gai)用(yong)有機相,因為純水易長(chang)霉。
6、每次做完(wan)樣(yang)(yang)品(pin)后應該(gai)用溶解樣(yang)(yang)品(pin)的溶劑清(qing)洗進樣(yang)(yang)器(qi)。
7、C18柱絕對不能進(jin)蛋白樣(yang)(yang)品(pin),血樣(yang)(yang)、生(sheng)物樣(yang)(yang)品(pin)。
8、堵(du)塞導(dao)致(zhi)壓力太(tai)大(da),按預(yu)柱(zhu)→混合(he)器中的過(guo)濾器→管路(lu)過(guo)濾器→單向閥檢查并清(qing)洗。
9、氣泡會致(zhi)使壓力不(bu)穩,重現(xian)性差(cha),所以在使用過程中要盡量避免產(chan)生氣泡。
10、如果進液(ye)管內不進液(ye)體時,要使用注射器吸液(ye):通常在輸(shu)液(ye)前要進行流動(dong)相的清洗(xi)。
11、要(yao)注(zhu)意柱子的(de)pH值范圍,不得(de)注(zhu)射強酸(suan)強堿的(de)樣品,特(te)別是堿性(xing)樣品。
12、更換流動(dong)相(xiang)時(shi)應該先將吸(xi)濾頭部(bu)分放(fang)入燒杯中(zhong)邊振動(dong)邊靖洗,然后插入新的流動(dong)相(xiang)中(zhong)。更換無互(hu)溶性的流動(dong)相(xiang)時(shi)要用異(yi)丙(bing)醇過渡(du)一下。