一、液相色譜儀操作流程是什么 ?
生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流程是什(shen)么呢?一起(qi)來看看吧!
首(shou)先先對(dui)(dui)流(liu)動相進(jin)行(xing)過濾,根(gen)據(ju)需要選擇(ze)不同的濾膜(mo),一(yi)般(ban)為(wei)有(you)機系和水系,常(chang)用的孔徑為(wei)0.20um和0.45um。然(ran)后(hou)(hou)對(dui)(dui)抽濾后(hou)(hou)的流(liu)動相進(jin)行(xing)超(chao)聲(sheng)脫氣10-20分(fen)鐘(zhong)。一(yi)般(ban)情(qing)況下,流(liu)動相沖洗20-30分(fen)鐘(zhong)后(hou)(hou),儀(yi)器方可穩定,最重要的是儀(yi)器基線走后(hou)(hou),方可進(jin)樣測(ce)試(shi)。
二、液相色譜儀操作注意事項有哪些
1、流動相必須用(yong)HPLC級的試劑,使用(yong)前過濾除去其中的顆(ke)粒性雜質(zhi)和其他物質(zhi)。
2、流動相過濾(lv)后(hou)(hou)要用(yong)(yong)超(chao)聲波脫(tuo)氣(qi)(qi),脫(tuo)氣(qi)(qi)后(hou)(hou)應該恢復到室溫(wen)后(hou)(hou)使用(yong)(yong)。
3、不能用純乙腈(jing)作為流動相(xiang),這樣會使單向閥(fa)粘住(zhu)而導致泵不進液。
4、使(shi)用(yong)緩沖溶液時(shi)(shi),做(zuo)完樣品后(hou)應立(li)即用(yong)去離子水(shui)沖洗(xi)(xi)管(guan)路及(ji)柱(zhu)子一小(xiao)時(shi)(shi),然后(hou)用(yong)甲醇沖洗(xi)(xi)40分鐘以(yi)上,以(yi)充分洗(xi)(xi)去離子。對于柱(zhu)塞桿外部,做(zuo)完樣品后(hou)也必(bi)須(xu)用(yong)去離子水(shui)沖洗(xi)(xi)。
5、長時間不用儀器,應(ying)該將柱(zhu)子(zi)取下(xia)用堵頭封好(hao)保存,注意不能用純水(shui)保存柱(zhu)子(zi),而應(ying)該用有(you)機相,因為純水(shui)易(yi)長霉。
6、每次做完樣(yang)品后(hou)應該用(yong)溶解(jie)樣(yang)品的溶劑清洗進樣(yang)器。
7、C18柱絕(jue)對不能進蛋(dan)白(bai)樣品(pin),血樣、生(sheng)物樣品(pin)。
8、堵塞導致(zhi)壓力(li)太(tai)大,按預柱→混(hun)合(he)器(qi)中的過(guo)濾器(qi)→管路過(guo)濾器(qi)→單向閥檢查(cha)并(bing)清洗。
9、氣泡(pao)會致(zhi)使(shi)(shi)壓力(li)不穩(wen),重現性差,所以(yi)在使(shi)(shi)用過程中要盡量避免產生氣泡(pao)。
10、如果進(jin)液(ye)管內不進(jin)液(ye)體時,要使用注射器吸液(ye):通常在輸液(ye)前要進(jin)行(xing)流動相的清(qing)洗。
11、要注意柱子的pH值范圍,不得(de)注射強酸強堿(jian)的樣(yang)品,特別是(shi)堿(jian)性樣(yang)品。
12、更換流動(dong)相時應該先將吸濾頭部分放入燒杯(bei)中(zhong)邊振動(dong)邊靖洗(xi),然后插入新的流動(dong)相中(zhong)。更換無(wu)互溶性的流動(dong)相時要(yao)用異(yi)丙醇過渡一(yi)下。