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液相色譜儀操作流程是什么 液相色譜儀操作注意事項有哪些

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:液相色譜儀引入了氣相色譜儀的理論,技術上采用了高壓輸液泵、高效固定相、梯度洗脫技術和高靈敏度檢測器,具有高壓、高速、高效、高靈敏度、高選擇性和應用范圍廣等特點。接下來本文將簡單介紹液相色譜儀操作流程是什么以及液相色譜儀操作注意事項有哪些,一起到文中來看看吧!

一、液相色譜儀操作流程是什么 ?

生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流程(cheng)是什么呢?一起(qi)來看(kan)看(kan)吧(ba)!

首先先對(dui)流(liu)(liu)動相(xiang)進行過濾,根據(ju)需(xu)要(yao)選擇不(bu)同的(de)濾膜,一般(ban)為(wei)有(you)機系和(he)水系,常用的(de)孔徑為(wei)0.20um和(he)0.45um。然后對(dui)抽濾后的(de)流(liu)(liu)動相(xiang)進行超聲脫(tuo)氣10-20分(fen)鐘。一般(ban)情(qing)況下,流(liu)(liu)動相(xiang)沖洗20-30分(fen)鐘后,儀器方(fang)可穩(wen)定,最重要(yao)的(de)是儀器基(ji)線走后,方(fang)可進樣(yang)測試。

二、液相色譜儀操作注意事項有哪些

1、流(liu)動相必須用(yong)HPLC級的試劑,使(shi)用(yong)前過濾除(chu)去其中的顆(ke)粒性雜質(zhi)和(he)其他物(wu)質(zhi)。

2、流(liu)動(dong)相(xiang)過(guo)濾后(hou)要用超(chao)聲波脫(tuo)氣,脫(tuo)氣后(hou)應該恢復到室(shi)溫后(hou)使(shi)用。

3、不能用純乙腈作為流動相,這樣會使單向閥粘住(zhu)而導致泵不進液。

4、使用(yong)(yong)緩沖(chong)溶液(ye)時(shi),做完樣品后應立(li)即用(yong)(yong)去離(li)(li)子(zi)水沖(chong)洗(xi)管路(lu)及柱子(zi)一小(xiao)時(shi),然后用(yong)(yong)甲醇沖(chong)洗(xi)40分(fen)鐘以上,以充分(fen)洗(xi)去離(li)(li)子(zi)。對于柱塞桿外部,做完樣品后也(ye)必須(xu)用(yong)(yong)去離(li)(li)子(zi)水沖(chong)洗(xi)。

5、長(chang)時間不用(yong)儀器,應該(gai)將(jiang)柱子取下用(yong)堵頭封好保(bao)存,注意不能用(yong)純水保(bao)存柱子,而應該(gai)用(yong)有機相,因為純水易長(chang)霉。

6、每次做完(wan)樣(yang)(yang)品(pin)后應該(gai)用溶解樣(yang)(yang)品(pin)的溶劑清(qing)洗進樣(yang)(yang)器(qi)。

7、C18柱絕對不能進(jin)蛋白樣(yang)(yang)品(pin),血樣(yang)(yang)、生(sheng)物樣(yang)(yang)品(pin)。

8、堵(du)塞導(dao)致(zhi)壓力太(tai)大(da),按預(yu)柱(zhu)→混合(he)器中的過(guo)濾器→管路(lu)過(guo)濾器→單向閥檢查并清(qing)洗。

9、氣泡會致(zhi)使壓力不(bu)穩,重現(xian)性差(cha),所以在使用過程中要盡量避免產(chan)生氣泡。

10、如果進液(ye)管內不進液(ye)體時,要使用注射器吸液(ye):通常在輸(shu)液(ye)前要進行流動(dong)相的清洗(xi)。

11、要(yao)注(zhu)意柱子的(de)pH值范圍,不得(de)注(zhu)射強酸(suan)強堿的(de)樣品,特(te)別是堿性(xing)樣品。

12、更換流動(dong)相(xiang)時(shi)應該先將吸(xi)濾頭部(bu)分放(fang)入燒杯中(zhong)邊振動(dong)邊靖洗,然后插入新的流動(dong)相(xiang)中(zhong)。更換無互(hu)溶性的流動(dong)相(xiang)時(shi)要用異(yi)丙(bing)醇過渡(du)一下。

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