一、液相色譜儀操作流程是什么 ?
生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操(cao)作流程是什么呢?一起(qi)來看(kan)看(kan)吧!
首先先對流(liu)動(dong)(dong)相進行過濾,根據需要(yao)選擇(ze)不同(tong)的(de)濾膜,一般為有(you)機系和(he)水(shui)系,常用(yong)的(de)孔徑為0.20um和(he)0.45um。然后(hou)(hou)對抽濾后(hou)(hou)的(de)流(liu)動(dong)(dong)相進行超(chao)聲脫氣10-20分鐘。一般情(qing)況下,流(liu)動(dong)(dong)相沖洗20-30分鐘后(hou)(hou),儀(yi)器方可(ke)穩定,最(zui)重(zhong)要(yao)的(de)是儀(yi)器基線走(zou)后(hou)(hou),方可(ke)進樣(yang)測試(shi)。
二、液相色譜儀操作注意事項有哪些
1、流動(dong)相必須用(yong)HPLC級的試(shi)劑,使(shi)用(yong)前過濾除去其中的顆(ke)粒(li)性(xing)雜(za)質和(he)其他物質。
2、流動相(xiang)過濾后要用(yong)超(chao)聲(sheng)波(bo)脫氣,脫氣后應該恢復到室(shi)溫后使用(yong)。
3、不(bu)能用(yong)純乙腈作為(wei)流動相,這樣(yang)會使單向閥(fa)粘住而導(dao)致泵(beng)不(bu)進(jin)液。
4、使(shi)用緩沖溶液時,做完樣品(pin)后(hou)應立即用去離(li)子(zi)(zi)水(shui)沖洗(xi)管路及柱(zhu)子(zi)(zi)一(yi)小時,然(ran)后(hou)用甲醇沖洗(xi)40分鐘以上(shang),以充分洗(xi)去離(li)子(zi)(zi)。對于柱(zhu)塞桿外部,做完樣品(pin)后(hou)也必須用去離(li)子(zi)(zi)水(shui)沖洗(xi)。
5、長時間不用儀器,應(ying)該將(jiang)柱(zhu)子取下用堵頭封好保(bao)存(cun),注意不能(neng)用純(chun)水保(bao)存(cun)柱(zhu)子,而應(ying)該用有機相,因為純(chun)水易(yi)長霉(mei)。
6、每(mei)次做(zuo)完樣(yang)品(pin)后應該(gai)用溶解(jie)樣(yang)品(pin)的溶劑清洗進樣(yang)器。
7、C18柱絕對不能進(jin)蛋白樣品(pin),血樣、生(sheng)物樣品(pin)。
8、堵塞導致壓力太大,按(an)預柱→混(hun)合器中(zhong)的過濾(lv)器→管路過濾(lv)器→單向閥檢查并(bing)清洗(xi)。
9、氣泡會致使(shi)壓力不穩,重現性差,所(suo)以(yi)在(zai)使(shi)用過程中要盡量避免產生氣泡。
10、如果(guo)進液(ye)管(guan)內不進液(ye)體時,要(yao)使用注射器吸(xi)液(ye):通常(chang)在輸液(ye)前要(yao)進行流動相的(de)清(qing)洗。
11、要注(zhu)意柱子(zi)的pH值范圍,不得注(zhu)射強酸強堿的樣(yang)品,特別是堿性樣(yang)品。
12、更換流(liu)動(dong)相時(shi)應該先將(jiang)吸濾(lv)頭部分放入燒杯中邊(bian)振動(dong)邊(bian)靖洗,然后插(cha)入新的(de)(de)流(liu)動(dong)相中。更換無互(hu)溶性的(de)(de)流(liu)動(dong)相時(shi)要用異丙醇過渡一下。