一、液相色譜儀操作流程是什么 ?
生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流程是(shi)什么呢?一(yi)起來看看吧!
首先先對流(liu)動相(xiang)進(jin)行過濾,根(gen)據需要(yao)選擇不同的(de)濾膜,一(yi)般為(wei)有機系和水(shui)系,常(chang)用的(de)孔(kong)徑為(wei)0.20um和0.45um。然后(hou)對抽濾后(hou)的(de)流(liu)動相(xiang)進(jin)行超(chao)聲脫氣(qi)10-20分鐘(zhong)。一(yi)般情況下,流(liu)動相(xiang)沖(chong)洗20-30分鐘(zhong)后(hou),儀(yi)器方(fang)可穩定,最重要(yao)的(de)是(shi)儀(yi)器基線走(zou)后(hou),方(fang)可進(jin)樣測試。
二、液相色譜儀操作注意事項有哪些
1、流動相必須(xu)用HPLC級(ji)的試劑(ji),使用前過濾(lv)除去其中的顆粒性雜(za)質和其他物質。
2、流動(dong)相過濾后要用超聲波脫氣,脫氣后應該恢復到室(shi)溫后使用。
3、不(bu)能用純乙腈作為流動相,這樣會使(shi)單向(xiang)閥粘住而導致泵(beng)不(bu)進液。
4、使用(yong)緩沖(chong)溶(rong)液時(shi),做完(wan)樣品(pin)后(hou)應立即用(yong)去(qu)(qu)離子水沖(chong)洗管路(lu)及柱子一(yi)小時(shi),然后(hou)用(yong)甲(jia)醇沖(chong)洗40分鐘以上,以充分洗去(qu)(qu)離子。對于柱塞桿外部,做完(wan)樣品(pin)后(hou)也必須用(yong)去(qu)(qu)離子水沖(chong)洗。
5、長(chang)時(shi)間不(bu)用(yong)儀器,應(ying)該(gai)將柱子(zi)取下(xia)用(yong)堵頭(tou)封好保(bao)存(cun),注意不(bu)能用(yong)純(chun)水保(bao)存(cun)柱子(zi),而應(ying)該(gai)用(yong)有機相,因為純(chun)水易長(chang)霉。
6、每次做完樣品后(hou)應該用溶解樣品的溶劑清(qing)洗進樣器(qi)。
7、C18柱(zhu)絕對不能(neng)進蛋白(bai)樣品,血樣、生(sheng)物樣品。
8、堵(du)塞導致壓力太大,按(an)預(yu)柱→混(hun)合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查并(bing)清洗。
9、氣(qi)泡會(hui)致(zhi)使(shi)壓力不穩,重現性差,所以在使(shi)用過(guo)程中要盡量避免產生氣(qi)泡。
10、如果(guo)進液(ye)(ye)管(guan)內(nei)不進液(ye)(ye)體時,要使用注(zhu)射(she)器(qi)吸液(ye)(ye):通常在輸液(ye)(ye)前要進行流動相(xiang)的清洗。
11、要注(zhu)意(yi)柱(zhu)子的pH值范圍,不得(de)注(zhu)射強酸強堿的樣品,特別是堿性樣品。
12、更換流(liu)動(dong)相時(shi)應(ying)該先將吸濾(lv)頭部(bu)分放入燒杯中(zhong)邊振動(dong)邊靖洗,然后插入新的流(liu)動(dong)相中(zhong)。更換無互溶性的流(liu)動(dong)相時(shi)要用異丙醇過渡一下。