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液相色譜儀操作流程是什么 液相色譜儀操作注意事項有哪些

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:液相色譜儀引入了氣相色譜儀的理論,技術上采用了高壓輸液泵、高效固定相、梯度洗脫技術和高靈敏度檢測器,具有高壓、高速、高效、高靈敏度、高選擇性和應用范圍廣等特點。接下來本文將簡單介紹液相色譜儀操作流程是什么以及液相色譜儀操作注意事項有哪些,一起到文中來看看吧!

一、液相色譜儀操作流程是什么 ?

生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流程是什么呢?一起來看(kan)看(kan)吧!

首先(xian)先(xian)對(dui)流動相(xiang)(xiang)進(jin)行過濾(lv),根(gen)據需要(yao)選擇不同的(de)濾(lv)膜(mo),一般(ban)為有機系和(he)水系,常用(yong)的(de)孔徑為0.20um和(he)0.45um。然后對(dui)抽濾(lv)后的(de)流動相(xiang)(xiang)進(jin)行超(chao)聲脫氣10-20分鐘。一般(ban)情況下,流動相(xiang)(xiang)沖洗20-30分鐘后,儀(yi)器方可穩(wen)定(ding),最重要(yao)的(de)是儀(yi)器基線(xian)走(zou)后,方可進(jin)樣測試。

二、液相色譜儀操作注意事項有哪些

1、流動(dong)相必須用HPLC級的試劑,使用前過濾除去其(qi)中的顆(ke)粒性(xing)雜(za)質和其(qi)他物質。

2、流動(dong)相過濾后(hou)要用(yong)超聲(sheng)波脫氣(qi),脫氣(qi)后(hou)應該恢(hui)復到室溫后(hou)使(shi)用(yong)。

3、不能用純(chun)乙腈作為流動相,這樣會使單向閥(fa)粘住而導致(zhi)泵不進液。

4、使用(yong)緩沖(chong)溶液時,做(zuo)(zuo)完樣品(pin)后應立(li)即用(yong)去離子(zi)水沖(chong)洗管路及柱子(zi)一小時,然后用(yong)甲醇沖(chong)洗40分鐘以上,以充分洗去離子(zi)。對于柱塞桿(gan)外部,做(zuo)(zuo)完樣品(pin)后也必須用(yong)去離子(zi)水沖(chong)洗。

5、長時間不用(yong)(yong)儀器,應(ying)該(gai)將柱子取下用(yong)(yong)堵(du)頭(tou)封好(hao)保存(cun),注意不能(neng)用(yong)(yong)純水保存(cun)柱子,而應(ying)該(gai)用(yong)(yong)有機相,因為純水易長霉(mei)。

6、每(mei)次做完樣(yang)品后應(ying)該用(yong)溶解樣(yang)品的溶劑清(qing)洗進樣(yang)器。

7、C18柱絕對不能進蛋白樣(yang)品,血樣(yang)、生物樣(yang)品。

8、堵塞導致壓力太(tai)大,按預(yu)柱→混合器中的過(guo)濾(lv)器→管路過(guo)濾(lv)器→單向閥檢(jian)查并清(qing)洗(xi)。

9、氣(qi)泡(pao)會致使壓力不穩,重現性差,所以在使用過程中要(yao)盡量避(bi)免產生氣(qi)泡(pao)。

10、如果(guo)進液管內不進液體時,要使用注(zhu)射器吸液:通常在輸液前要進行流動相的清洗。

11、要注(zhu)意柱子的(de)pH值范圍,不得(de)注(zhu)射(she)強酸強堿的(de)樣品(pin),特(te)別是(shi)堿性樣品(pin)。

12、更換流(liu)動(dong)相時應該(gai)先將(jiang)吸濾頭部分(fen)放入燒杯中邊振(zhen)動(dong)邊靖洗,然后插(cha)入新的(de)流(liu)動(dong)相中。更換無互溶性的(de)流(liu)動(dong)相時要(yao)用異丙醇過渡一下。

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