一、高效液相色譜儀和液相色譜儀的定義和作用
高效液(ye)相色譜儀(yi)(yi)(yi)(HPLC)和液(ye)相色譜儀(yi)(yi)(yi)(LC)都是(shi)使用液(ye)體(ti)移(yi)動相將樣品分(fen)(fen)離(li)開來的(de)儀(yi)(yi)(yi)器。HPLC是(shi)在LC的(de)基礎(chu)上發(fa)展而來的(de),在分(fen)(fen)離(li)性能、分(fen)(fen)析(xi)效率、檢測(ce)靈(ling)敏度等(deng)方面均有所提高。HPLC主(zhu)要應(ying)用于有機(ji)化學、生化、藥學、環境分(fen)(fen)析(xi)等(deng)領域。
二、高效液相色譜儀和液相色譜儀的區別
雖(sui)然(ran)高(gao)效液(ye)(ye)相色(se)(se)譜(pu)儀(yi)和(he)液(ye)(ye)相色(se)(se)譜(pu)儀(yi)都屬于液(ye)(ye)相色(se)(se)譜(pu)儀(yi)類別,但它們(men)在分離性(xing)能、分析效率、檢測靈敏度等方面均有所不同:
1、分離性能的區別
HPLC的(de)分離(li)性能比LC更(geng)好(hao),分離(li)效(xiao)率更(geng)高,分離(li)劑更(geng)多樣化。HPLC在(zai)柱(zhu)子(zi)填充材料(liao)和柱(zhu)子(zi)直(zhi)徑等方面具有更(geng)多變化的(de)選擇(ze),可根據(ju)不同的(de)樣品和要求(qiu)設(she)計(ji)出不同的(de)柱(zhu)子(zi),從而實(shi)現更(geng)好(hao)的(de)分離(li)效(xiao)果。
2、分析效率的區別
HPLC擁(yong)有更(geng)快的(de)分(fen)(fen)析速(su)度和更(geng)快的(de)洗脫速(su)度,可以更(geng)快地得到分(fen)(fen)離和檢測結果。此外,HPLC中使用(yong)的(de)柱子通常(chang)較長,能夠保(bao)證(zheng)更(geng)高的(de)峰分(fen)(fen)辨(bian)率和更(geng)好的(de)分(fen)(fen)析效(xiao)率。
3、檢測靈敏度的區別
HPLC的流動相流速更快,反相柱分離更好,它(ta)能夠(gou)在較短的時間內,更準確地(di)檢(jian)測出細(xi)微的化學物質,與(yu)LC相比,更適用(yong)于高靈(ling)敏度分析和(he)有機化合物的分析。
三、高效液相色譜儀的分類有哪些
高效(xiao)液(ye)(ye)相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)(yi)(yi)主(zhu)要有三類:正相(xiang)(xiang)高效(xiao)液(ye)(ye)相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)(yi)(yi)、反(fan)相(xiang)(xiang)高效(xiao)液(ye)(ye)相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)(yi)(yi)和超高效(xiao)液(ye)(ye)相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)(yi)(yi)(超高效(xiao)液(ye)(ye)相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)(yi)(yi))。
1、盡管有(you)(you)名稱,正(zheng)相(xiang)(xiang)高(gao)效(xiao)(xiao)液相(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)儀并不是最(zui)常(chang)用(yong)的(de)高(gao)效(xiao)(xiao)液相(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)儀方法。正(zheng)相(xiang)(xiang)高(gao)效(xiao)(xiao)液相(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)儀使用(yong)非(fei)極(ji)(ji)性溶(rong)劑(ji)作為(wei)流動相(xiang)(xiang),硅膠(jiao)顆粒作為(wei)固定(ding)相(xiang)(xiang)。在(zai)(zai)常(chang)規高(gao)效(xiao)(xiao)液相(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)儀中,與非(fei)極(ji)(ji)性化合物相(xiang)(xiang)比,極(ji)(ji)性化合物在(zai)(zai)固定(ding)相(xiang)(xiang)中會更(geng)長時間地粘附在(zai)(zai)極(ji)(ji)性有(you)(you)機硅上。因此(ci),非(fei)極(ji)(ji)性化合物在(zai)(zai)正(zheng)常(chang)高(gao)效(xiao)(xiao)液相(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)儀中的(de)洗脫速度更(geng)快。孔(kong)徑一般在(zai)(zai)3微(wei)米左右。
2、反(fan)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)是最常見的高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)類型。在(zai)反(fan)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)中,固(gu)定相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)被烴鏈(通常長8-18個碳)改(gai)性(xing),導致色(se)譜(pu)柱變(bian)為非(fei)極(ji)性(xing)。也(ye)使用(yong)極(ji)性(xing)溶劑。在(zai)反(fan)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)中,樣品(pin)中的極(ji)性(xing)分(fen)子(zi)會與溶劑產生(sheng)強烈的吸(xi)引力,從(cong)而使它們更(geng)快地洗(xi)脫。它們也(ye)不(bu)會與非(fei)極(ji)性(xing)固(gu)定相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)互作用(yong)。非(fei)極(ji)性(xing)化合物(wu)會與固(gu)定相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)產生(sheng)范德華力和分(fen)散相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)互作用(yong),因此(ci)它們的洗(xi)脫速度(du)較(jiao)慢。
3、與高效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)色(se)(se)譜儀相(xiang)(xiang)(xiang)比,超(chao)高效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)色(se)(se)譜儀運行速(su)度更快、使用的(de)溶(rong)劑更少且(qie)分辨(bian)(bian)率(lv)(lv)更高。色(se)(se)譜柱也更小,固定相(xiang)(xiang)(xiang)顆粒的(de)尺寸要(yao)小得(de)多。較小的(de)孔(亞(ya)2微(wei)米)促進(jin)(jin)了分子更好的(de)分離(li)和分辨(bian)(bian)率(lv)(lv)。較短的(de)色(se)(se)譜柱還可以進(jin)(jin)行快速(su)檢測(ce)。然(ran)而,超(chao)高效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)色(se)(se)譜儀不能用于干(gan)燥或(huo)未(wei)過濾(lv)的(de)樣品(pin),因(yin)為較小的(de)孔會(hui)堵塞,這是(shi)一個昂貴且(qie)耗時的(de)修復過程(cheng)。