一、高效液相色譜儀和液相色譜儀的定義和作用
高效液相(xiang)色譜(pu)儀(yi)(yi)(HPLC)和液相(xiang)色譜(pu)儀(yi)(yi)(LC)都是(shi)(shi)使用液體移(yi)動相(xiang)將樣品分離(li)開來(lai)的儀(yi)(yi)器。HPLC是(shi)(shi)在(zai)LC的基礎上(shang)發展而(er)來(lai)的,在(zai)分離(li)性能(neng)、分析(xi)效率、檢測(ce)靈(ling)敏(min)度(du)等方面均有所提(ti)高。HPLC主要應用于有機化(hua)學、生化(hua)、藥(yao)學、環境(jing)分析(xi)等領域。
二、高效液相色譜儀和液相色譜儀的區別
雖然高效(xiao)液(ye)相色譜儀和液(ye)相色譜儀都屬于液(ye)相色譜儀類別,但(dan)它們在分離性(xing)能、分析效(xiao)率、檢測靈敏度等方面均有所不(bu)同:
1、分離性能的區別
HPLC的(de)(de)分離性能比LC更好,分離效(xiao)率更高(gao),分離劑更多樣化。HPLC在(zai)柱(zhu)(zhu)子填充材料和柱(zhu)(zhu)子直徑等方(fang)面具有更多變化的(de)(de)選擇,可根據(ju)不(bu)同的(de)(de)樣品和要求設(she)計(ji)出不(bu)同的(de)(de)柱(zhu)(zhu)子,從而實現更好的(de)(de)分離效(xiao)果。
2、分析效率的區別
HPLC擁有更(geng)快(kuai)的分(fen)析速度和更(geng)快(kuai)的洗(xi)脫速度,可以更(geng)快(kuai)地得到分(fen)離和檢測結果。此外,HPLC中(zhong)使用的柱子通常較長,能夠保證更(geng)高的峰分(fen)辨率(lv)和更(geng)好的分(fen)析效率(lv)。
3、檢測靈敏度的區別
HPLC的流動相流速更快,反相柱分離更好,它(ta)能夠在較短的時間(jian)內,更準確地檢測出細微的化(hua)學(xue)物質,與(yu)LC相比(bi),更適用(yong)于高靈敏(min)度(du)分析和(he)有(you)機化(hua)合(he)物的分析。
三、高效液相色譜儀的分類有哪些
高(gao)效(xiao)(xiao)(xiao)液相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀主要(yao)有(you)三類(lei):正相(xiang)高(gao)效(xiao)(xiao)(xiao)液相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀、反相(xiang)高(gao)效(xiao)(xiao)(xiao)液相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀和超(chao)高(gao)效(xiao)(xiao)(xiao)液相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀(超(chao)高(gao)效(xiao)(xiao)(xiao)液相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀)。
1、盡管(guan)有(you)名稱,正(zheng)相(xiang)(xiang)高效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)并不(bu)是最常用(yong)的(de)高效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)方(fang)法。正(zheng)相(xiang)(xiang)高效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)使(shi)用(yong)非(fei)極性溶劑作(zuo)為流動相(xiang)(xiang),硅(gui)膠顆(ke)粒作(zuo)為固定相(xiang)(xiang)。在(zai)(zai)常規高效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)中,與非(fei)極性化(hua)合(he)物相(xiang)(xiang)比,極性化(hua)合(he)物在(zai)(zai)固定相(xiang)(xiang)中會更長時(shi)間(jian)地粘附在(zai)(zai)極性有(you)機硅(gui)上。因此,非(fei)極性化(hua)合(he)物在(zai)(zai)正(zheng)常高效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)中的(de)洗(xi)脫速度更快。孔徑一般在(zai)(zai)3微米(mi)左右。
2、反(fan)(fan)相(xiang)(xiang)高效液相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)是最常見的高效液相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)類型(xing)。在(zai)反(fan)(fan)相(xiang)(xiang)高效液相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)中,固定(ding)相(xiang)(xiang)被烴(jing)鏈(lian)(通(tong)常長(chang)8-18個碳)改性(xing),導致色譜(pu)柱變(bian)為非(fei)極(ji)(ji)性(xing)。也使用(yong)(yong)極(ji)(ji)性(xing)溶劑(ji)。在(zai)反(fan)(fan)相(xiang)(xiang)高效液相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)中,樣品(pin)中的極(ji)(ji)性(xing)分(fen)子(zi)會與(yu)溶劑(ji)產生強(qiang)烈的吸(xi)引力(li),從而使它們(men)更快地(di)洗脫。它們(men)也不會與(yu)非(fei)極(ji)(ji)性(xing)固定(ding)相(xiang)(xiang)相(xiang)(xiang)互作(zuo)用(yong)(yong)。非(fei)極(ji)(ji)性(xing)化合物會與(yu)固定(ding)相(xiang)(xiang)產生范(fan)德(de)華力(li)和分(fen)散相(xiang)(xiang)互作(zuo)用(yong)(yong),因此它們(men)的洗脫速度較慢。
3、與高效(xiao)液相(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)相(xiang)比,超高效(xiao)液相(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)運行速度更(geng)快(kuai)、使用(yong)的溶劑更(geng)少(shao)且分辨率更(geng)高。色(se)譜(pu)柱(zhu)也更(geng)小(xiao)(xiao),固定(ding)相(xiang)顆粒的尺寸要小(xiao)(xiao)得多。較小(xiao)(xiao)的孔(亞2微(wei)米)促進了分子更(geng)好(hao)的分離和(he)分辨率。較短的色(se)譜(pu)柱(zhu)還可以進行快(kuai)速檢測。然(ran)而(er),超高效(xiao)液相(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)不(bu)能(neng)用(yong)于(yu)干燥或未過(guo)濾的樣品,因為較小(xiao)(xiao)的孔會堵塞(sai),這是一個昂貴(gui)且耗時的修復過(guo)程(cheng)。