一、高效液相色譜儀和液相色譜儀的定義和作用

高(gao)效液相(xiang)色(se)譜儀（HPLC）和液相(xiang)色(se)譜儀（LC）都是使用(yong)液體移動相(xiang)將樣品分(fen)離開來的(de)(de)儀器。HPLC是在LC的(de)(de)基礎上發展而來的(de)(de)，在分(fen)離性能(neng)、分(fen)析效率、檢測靈敏(min)度等方面均有(you)所提高(gao)。HPLC主要(yao)應用(yong)于有(you)機化學、生化、藥學、環境分(fen)析等領(ling)域。

二、高效液相色譜儀和液相色譜儀的區別

雖然高效(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)譜儀和液(ye)相(xiang)色(se)譜儀都屬(shu)于液(ye)相(xiang)色(se)譜儀類別，但它們(men)在(zai)分離性能、分析效(xiao)率、檢測靈敏度等方面(mian)均有所不同：

1、分離性能的區別

HPLC的分(fen)(fen)離(li)性能比(bi)LC更(geng)(geng)好，分(fen)(fen)離(li)效(xiao)率(lv)更(geng)(geng)高，分(fen)(fen)離(li)劑更(geng)(geng)多樣化。HPLC在柱(zhu)(zhu)子(zi)填充(chong)材料(liao)和柱(zhu)(zhu)子(zi)直(zhi)徑(jing)等(deng)方面具有更(geng)(geng)多變化的選(xuan)擇，可根(gen)據不(bu)同的樣品和要求設計(ji)出不(bu)同的柱(zhu)(zhu)子(zi)，從而實現(xian)更(geng)(geng)好的分(fen)(fen)離(li)效(xiao)果。

2、分析效率的區別

HPLC擁有更快(kuai)的分(fen)析速(su)度(du)和(he)更快(kuai)的洗(xi)脫速(su)度(du)，可以更快(kuai)地得(de)到分(fen)離和(he)檢(jian)測結果。此(ci)外，HPLC中使用(yong)的柱子通(tong)常較(jiao)長，能夠(gou)保(bao)證(zheng)更高的峰分(fen)辨(bian)率和(he)更好的分(fen)析效率。

3、檢測靈敏度的區別

HPLC的流動(dong)相流速(su)更(geng)快，反相柱(zhu)分離更(geng)好，它能夠在較(jiao)短的時間內，更(geng)準(zhun)確地檢測(ce)出(chu)細(xi)微的化(hua)學物質，與(yu)LC相比，更(geng)適用于高(gao)靈敏(min)度分析和(he)有機化(hua)合物的分析。

三、高效液相色譜儀的分類有哪些

高效(xiao)液(ye)相色譜(pu)儀主要有(you)三(san)類(lei)：正相高效(xiao)液(ye)相色譜(pu)儀、反相高效(xiao)液(ye)相色譜(pu)儀和(he)超高效(xiao)液(ye)相色譜(pu)儀（超高效(xiao)液(ye)相色譜(pu)儀）。

1、盡(jin)管有名稱，正相(xiang)(xiang)(xiang)高效(xiao)液相(xiang)(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)儀(yi)并不是最(zui)常用(yong)的高效(xiao)液相(xiang)(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)儀(yi)方(fang)法。正相(xiang)(xiang)(xiang)高效(xiao)液相(xiang)(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)儀(yi)使用(yong)非極(ji)(ji)性溶劑(ji)作(zuo)為(wei)流動相(xiang)(xiang)(xiang)，硅膠顆粒作(zuo)為(wei)固定(ding)相(xiang)(xiang)(xiang)。在常規高效(xiao)液相(xiang)(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)儀(yi)中(zhong)，與(yu)非極(ji)(ji)性化合物相(xiang)(xiang)(xiang)比，極(ji)(ji)性化合物在固定(ding)相(xiang)(xiang)(xiang)中(zhong)會更(geng)長時間地粘附在極(ji)(ji)性有機硅上。因此(ci)，非極(ji)(ji)性化合物在正常高效(xiao)液相(xiang)(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)儀(yi)中(zhong)的洗(xi)脫速(su)度(du)更(geng)快。孔徑一般在3微米左右(you)。

2、反相高效液相色(se)譜(pu)儀(yi)是最常見的(de)(de)高效液相色(se)譜(pu)儀(yi)類(lei)型。在(zai)反相高效液相色(se)譜(pu)儀(yi)中，固(gu)(gu)定相被烴鏈（通常長8-18個碳）改性(xing)(xing)(xing)，導致色(se)譜(pu)柱(zhu)變為非(fei)極(ji)性(xing)(xing)(xing)。也使用(yong)極(ji)性(xing)(xing)(xing)溶(rong)劑。在(zai)反相高效液相色(se)譜(pu)儀(yi)中，樣品中的(de)(de)極(ji)性(xing)(xing)(xing)分子會(hui)(hui)(hui)與(yu)溶(rong)劑產生(sheng)強烈的(de)(de)吸引力，從而使它(ta)們(men)更快地洗脫。它(ta)們(men)也不(bu)會(hui)(hui)(hui)與(yu)非(fei)極(ji)性(xing)(xing)(xing)固(gu)(gu)定相相互作用(yong)。非(fei)極(ji)性(xing)(xing)(xing)化(hua)合物會(hui)(hui)(hui)與(yu)固(gu)(gu)定相產生(sheng)范德華(hua)力和(he)分散(san)相互作用(yong)，因(yin)此它(ta)們(men)的(de)(de)洗脫速度較慢。

3、與高(gao)效液(ye)相色(se)(se)譜儀相比，超高(gao)效液(ye)相色(se)(se)譜儀運行速度(du)更快、使用(yong)的(de)溶劑更少且分(fen)辨(bian)(bian)率(lv)更高(gao)。色(se)(se)譜柱(zhu)也更小，固定相顆粒(li)的(de)尺寸要小得多。較小的(de)孔（亞(ya)2微米）促進了分(fen)子更好的(de)分(fen)離(li)和(he)分(fen)辨(bian)(bian)率(lv)。較短的(de)色(se)(se)譜柱(zhu)還可以(yi)進行快速檢測。然(ran)而(er)，超高(gao)效液(ye)相色(se)(se)譜儀不能用(yong)于干燥或(huo)未過濾的(de)樣品，因為較小的(de)孔會堵塞，這是(shi)一個(ge)昂貴(gui)且耗時的(de)修復過程。