一、高效液相色譜儀和液相色譜儀的定義和作用

高(gao)效液(ye)(ye)相(xiang)色譜(pu)(pu)儀（HPLC）和液(ye)(ye)相(xiang)色譜(pu)(pu)儀（LC）都(dou)是使(shi)用液(ye)(ye)體移(yi)動相(xiang)將樣品分(fen)(fen)離開來的儀器(qi)。HPLC是在LC的基礎上發(fa)展而來的，在分(fen)(fen)離性(xing)能(neng)、分(fen)(fen)析效率、檢測靈(ling)敏度等(deng)方面均有所提高(gao)。HPLC主要應用于有機化(hua)學(xue)(xue)、生化(hua)、藥(yao)學(xue)(xue)、環境分(fen)(fen)析等(deng)領域(yu)。

二、高效液相色譜儀和液相色譜儀的區別

雖(sui)然高效液相色(se)譜(pu)儀和液相色(se)譜(pu)儀都(dou)屬于液相色(se)譜(pu)儀類(lei)別(bie)，但它們在(zai)分離性能、分析效率、檢測靈敏度等方面均有所不同(tong)：

1、分離性能的區別

HPLC的分離(li)(li)性能比LC更好，分離(li)(li)效(xiao)率更高，分離(li)(li)劑更多樣(yang)化。HPLC在(zai)柱子(zi)填充(chong)材(cai)料和(he)柱子(zi)直徑(jing)等方面具(ju)有更多變化的選(xuan)擇，可(ke)根據不同的樣(yang)品(pin)和(he)要求設計出(chu)不同的柱子(zi)，從而實現更好的分離(li)(li)效(xiao)果。

2、分析效率的區別

HPLC擁有更快的分(fen)(fen)析(xi)速(su)度和(he)更快的洗脫速(su)度，可以更快地(di)得到分(fen)(fen)離和(he)檢測結果。此外，HPLC中使用(yong)的柱(zhu)子通(tong)常(chang)較長(chang)，能夠保(bao)證更高的峰分(fen)(fen)辨(bian)率和(he)更好的分(fen)(fen)析(xi)效(xiao)率。

3、檢測靈敏度的區別

HPLC的(de)流動相(xiang)(xiang)流速更(geng)(geng)快，反相(xiang)(xiang)柱分離更(geng)(geng)好(hao)，它能(neng)夠在(zai)較短的(de)時間內，更(geng)(geng)準確地檢測出細(xi)微的(de)化(hua)學物(wu)質，與LC相(xiang)(xiang)比(bi)，更(geng)(geng)適用(yong)于高靈(ling)敏度分析(xi)和(he)有機化(hua)合(he)物(wu)的(de)分析(xi)。

三、高效液相色譜儀的分類有哪些

高效(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)主要有三類：正相(xiang)(xiang)高效(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)、反(fan)相(xiang)(xiang)高效(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)和超高效(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)（超高效(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)）。

1、盡(jin)管有名稱，正相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)高(gao)效(xiao)液(ye)(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀并不是最常(chang)用的高(gao)效(xiao)液(ye)(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀方法。正相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)高(gao)效(xiao)液(ye)(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀使用非極性(xing)溶劑作為(wei)流動相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)，硅(gui)膠顆粒(li)作為(wei)固定(ding)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)。在常(chang)規高(gao)效(xiao)液(ye)(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀中，與非極性(xing)化(hua)合(he)(he)物相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)比，極性(xing)化(hua)合(he)(he)物在固定(ding)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)中會更長時間地粘(zhan)附在極性(xing)有機硅(gui)上。因此，非極性(xing)化(hua)合(he)(he)物在正常(chang)高(gao)效(xiao)液(ye)(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀中的洗脫速度更快。孔(kong)徑一般(ban)在3微米左右(you)。

2、反(fan)(fan)相(xiang)(xiang)高效液相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)(yi)是最常見的(de)高效液相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)(yi)類型。在(zai)(zai)反(fan)(fan)相(xiang)(xiang)高效液相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)(yi)中，固(gu)定相(xiang)(xiang)被烴(jing)鏈（通(tong)常長8-18個碳）改性，導致色(se)譜(pu)(pu)柱變為非(fei)(fei)極(ji)性。也使用(yong)極(ji)性溶(rong)劑。在(zai)(zai)反(fan)(fan)相(xiang)(xiang)高效液相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)(yi)中，樣品(pin)中的(de)極(ji)性分子(zi)會(hui)(hui)與溶(rong)劑產(chan)生(sheng)強烈的(de)吸引力，從而(er)使它(ta)(ta)們更快地洗脫(tuo)。它(ta)(ta)們也不會(hui)(hui)與非(fei)(fei)極(ji)性固(gu)定相(xiang)(xiang)相(xiang)(xiang)互作(zuo)用(yong)。非(fei)(fei)極(ji)性化合(he)物會(hui)(hui)與固(gu)定相(xiang)(xiang)產(chan)生(sheng)范德華力和分散(san)相(xiang)(xiang)互作(zuo)用(yong)，因(yin)此(ci)它(ta)(ta)們的(de)洗脫(tuo)速度較慢。

3、與高(gao)效(xiao)液相(xiang)(xiang)色(se)譜儀(yi)相(xiang)(xiang)比，超高(gao)效(xiao)液相(xiang)(xiang)色(se)譜儀(yi)運行速度更(geng)快(kuai)、使(shi)用的(de)(de)溶劑更(geng)少且分(fen)辨率(lv)更(geng)高(gao)。色(se)譜柱也更(geng)小(xiao)，固(gu)定相(xiang)(xiang)顆粒(li)的(de)(de)尺寸要(yao)小(xiao)得多。較(jiao)小(xiao)的(de)(de)孔(kong)（亞2微(wei)米）促進(jin)了(le)分(fen)子更(geng)好的(de)(de)分(fen)離和分(fen)辨率(lv)。較(jiao)短(duan)的(de)(de)色(se)譜柱還(huan)可以進(jin)行快(kuai)速檢測。然而(er)，超高(gao)效(xiao)液相(xiang)(xiang)色(se)譜儀(yi)不能用于干燥或未過濾的(de)(de)樣品，因為較(jiao)小(xiao)的(de)(de)孔(kong)會(hui)堵塞，這(zhe)是一個昂(ang)貴且耗時(shi)的(de)(de)修(xiu)復過程。