一、高效液相色譜儀和液相色譜儀的定義和作用
高效液相色譜儀(yi)(yi)(yi)(HPLC)和(he)液相色譜儀(yi)(yi)(yi)(LC)都是使用(yong)液體移動相將(jiang)樣(yang)品(pin)分(fen)離開(kai)來的儀(yi)(yi)(yi)器。HPLC是在LC的基(ji)礎上發(fa)展而來的,在分(fen)離性能(neng)、分(fen)析(xi)效率、檢測(ce)靈敏度等(deng)方面均有所提高。HPLC主要應用(yong)于有機(ji)化(hua)學(xue)、生化(hua)、藥學(xue)、環(huan)境分(fen)析(xi)等(deng)領(ling)域。
二、高效液相色譜儀和液相色譜儀的區別
雖然高效液相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)儀和(he)液相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)儀都屬(shu)于(yu)液相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)儀類別,但它們在分(fen)離性能、分(fen)析效率(lv)、檢測靈敏度等方面均有所不同:
1、分離性能的區別
HPLC的(de)分(fen)(fen)離(li)性能比(bi)LC更(geng)好,分(fen)(fen)離(li)效率更(geng)高,分(fen)(fen)離(li)劑更(geng)多樣化。HPLC在柱子(zi)填充材料和柱子(zi)直徑等方面具有(you)更(geng)多變化的(de)選擇,可根據不同(tong)的(de)樣品和要求設計(ji)出不同(tong)的(de)柱子(zi),從而(er)實現更(geng)好的(de)分(fen)(fen)離(li)效果。
2、分析效率的區別
HPLC擁有更(geng)(geng)快(kuai)(kuai)的分析速度和更(geng)(geng)快(kuai)(kuai)的洗脫速度,可以更(geng)(geng)快(kuai)(kuai)地得到分離和檢測結(jie)果。此外,HPLC中使用的柱子通常較長,能夠保證更(geng)(geng)高的峰(feng)分辨(bian)率和更(geng)(geng)好的分析效率。
3、檢測靈敏度的區別
HPLC的流動相流速(su)更(geng)快,反(fan)相柱分(fen)離更(geng)好,它(ta)能夠在較短(duan)的時間內,更(geng)準確地檢測出(chu)細微的化學物(wu)質(zhi),與LC相比(bi),更(geng)適用于高靈敏度分(fen)析(xi)和有機化合物(wu)的分(fen)析(xi)。
三、高效液相色譜儀的分類有哪些
高(gao)(gao)效(xiao)(xiao)液相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)儀主(zhu)要(yao)有三類:正(zheng)相(xiang)(xiang)高(gao)(gao)效(xiao)(xiao)液相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)儀、反(fan)相(xiang)(xiang)高(gao)(gao)效(xiao)(xiao)液相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)儀和超(chao)高(gao)(gao)效(xiao)(xiao)液相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)儀(超(chao)高(gao)(gao)效(xiao)(xiao)液相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)儀)。
1、盡管有(you)名稱(cheng),正相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)高(gao)效(xiao)液相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜儀(yi)并不是最常用的高(gao)效(xiao)液相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜儀(yi)方法。正相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)高(gao)效(xiao)液相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜儀(yi)使用非極性溶劑作為流動相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang),硅膠(jiao)顆(ke)粒作為固定(ding)(ding)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)。在(zai)常規高(gao)效(xiao)液相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜儀(yi)中,與非極性化合(he)(he)物相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)比,極性化合(he)(he)物在(zai)固定(ding)(ding)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)中會更長時間地(di)粘(zhan)附在(zai)極性有(you)機硅上。因此,非極性化合(he)(he)物在(zai)正常高(gao)效(xiao)液相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜儀(yi)中的洗(xi)脫速度(du)更快。孔徑一般在(zai)3微米左右。
2、反(fan)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)高效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)是最(zui)常見的(de)高效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)類型。在反(fan)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)高效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)中(zhong)(zhong),固定(ding)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)被烴鏈(通常長8-18個碳(tan))改性,導致(zhi)色譜(pu)柱變(bian)為非極(ji)性。也(ye)使用(yong)極(ji)性溶劑(ji)(ji)。在反(fan)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)高效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)中(zhong)(zhong),樣品中(zhong)(zhong)的(de)極(ji)性分子會與(yu)溶劑(ji)(ji)產生(sheng)強烈的(de)吸引力,從而使它(ta)們(men)更快地洗脫。它(ta)們(men)也(ye)不會與(yu)非極(ji)性固定(ding)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)互作用(yong)。非極(ji)性化合(he)物(wu)會與(yu)固定(ding)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)產生(sheng)范(fan)德華力和分散相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)互作用(yong),因此它(ta)們(men)的(de)洗脫速度較慢。
3、與高(gao)效液(ye)相色(se)譜(pu)儀相比,超高(gao)效液(ye)相色(se)譜(pu)儀運行速度更(geng)(geng)快、使用的(de)溶劑更(geng)(geng)少且(qie)分(fen)辨率(lv)更(geng)(geng)高(gao)。色(se)譜(pu)柱也(ye)更(geng)(geng)小(xiao)(xiao),固定相顆粒的(de)尺寸(cun)要(yao)小(xiao)(xiao)得(de)多。較小(xiao)(xiao)的(de)孔(kong)(亞(ya)2微(wei)米)促進了分(fen)子(zi)更(geng)(geng)好的(de)分(fen)離和(he)分(fen)辨率(lv)。較短的(de)色(se)譜(pu)柱還可以(yi)進行快速檢測(ce)。然而,超高(gao)效液(ye)相色(se)譜(pu)儀不(bu)能用于干燥或未過濾的(de)樣品,因(yin)為較小(xiao)(xiao)的(de)孔(kong)會堵(du)塞(sai),這是一個昂貴(gui)且(qie)耗時的(de)修復過程。