一、高效液相色譜儀和液相色譜儀的定義和作用

高(gao)效液相色譜儀(yi)（HPLC）和(he)液相色譜儀(yi)（LC）都是(shi)使用液體移動(dong)相將樣(yang)品分離開來的(de)儀(yi)器。HPLC是(shi)在(zai)LC的(de)基礎(chu)上發展而來的(de)，在(zai)分離性能、分析效率、檢測(ce)靈敏度等(deng)方面均(jun)有所提高(gao)。HPLC主要應用于有機化學(xue)、生化、藥(yao)學(xue)、環境(jing)分析等(deng)領域。

二、高效液相色譜儀和液相色譜儀的區別

雖(sui)然(ran)高效液(ye)相(xiang)色(se)譜儀(yi)和液(ye)相(xiang)色(se)譜儀(yi)都屬于液(ye)相(xiang)色(se)譜儀(yi)類別(bie)，但它們在分離(li)性能(neng)、分析(xi)效率、檢測(ce)靈敏度等(deng)方面均(jun)有(you)所不(bu)同：

1、分離性能的區別

HPLC的(de)分(fen)(fen)離(li)性(xing)能比LC更(geng)(geng)好，分(fen)(fen)離(li)效(xiao)(xiao)率更(geng)(geng)高，分(fen)(fen)離(li)劑(ji)更(geng)(geng)多樣(yang)化(hua)。HPLC在柱(zhu)子填充(chong)材(cai)料和(he)柱(zhu)子直徑(jing)等方(fang)面(mian)具有更(geng)(geng)多變化(hua)的(de)選擇，可根據不(bu)同的(de)樣(yang)品和(he)要求設計(ji)出不(bu)同的(de)柱(zhu)子，從而實現(xian)更(geng)(geng)好的(de)分(fen)(fen)離(li)效(xiao)(xiao)果。

2、分析效率的區別

HPLC擁有更(geng)快的(de)分析(xi)速度(du)和更(geng)快的(de)洗脫(tuo)速度(du)，可以更(geng)快地(di)得到分離和檢測(ce)結果。此外，HPLC中使用的(de)柱(zhu)子(zi)通常較長(chang)，能夠保(bao)證更(geng)高(gao)的(de)峰分辨(bian)率和更(geng)好的(de)分析(xi)效率。

3、檢測靈敏度的區別

HPLC的流動(dong)相(xiang)(xiang)流速更(geng)(geng)(geng)快，反相(xiang)(xiang)柱分(fen)離更(geng)(geng)(geng)好(hao)，它能夠在(zai)較短的時間內，更(geng)(geng)(geng)準確地(di)檢測出細(xi)微(wei)的化學物(wu)質(zhi)，與LC相(xiang)(xiang)比，更(geng)(geng)(geng)適用于高靈敏度分(fen)析和有機(ji)化合物(wu)的分(fen)析。

三、高效液相色譜儀的分類有哪些

高(gao)效(xiao)(xiao)液(ye)相色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)主要有三類：正相高(gao)效(xiao)(xiao)液(ye)相色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)、反相高(gao)效(xiao)(xiao)液(ye)相色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)和超高(gao)效(xiao)(xiao)液(ye)相色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)（超高(gao)效(xiao)(xiao)液(ye)相色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)）。

1、盡(jin)管有名稱，正(zheng)(zheng)相(xiang)高(gao)效液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)儀并不是最常用(yong)的高(gao)效液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)儀方法。正(zheng)(zheng)相(xiang)高(gao)效液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)儀使用(yong)非極(ji)性(xing)溶劑作為流(liu)動相(xiang)，硅膠顆粒(li)作為固定(ding)相(xiang)。在(zai)常規高(gao)效液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)儀中，與非極(ji)性(xing)化(hua)(hua)合物相(xiang)比，極(ji)性(xing)化(hua)(hua)合物在(zai)固定(ding)相(xiang)中會更長時間(jian)地粘(zhan)附(fu)在(zai)極(ji)性(xing)有機硅上。因此，非極(ji)性(xing)化(hua)(hua)合物在(zai)正(zheng)(zheng)常高(gao)效液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)儀中的洗脫速度更快(kuai)。孔徑(jing)一般(ban)在(zai)3微(wei)米(mi)左右。

2、反相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)高(gao)(gao)效液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)儀是最常見的(de)高(gao)(gao)效液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)儀類(lei)型(xing)。在反相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)高(gao)(gao)效液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)儀中(zhong)，固(gu)(gu)定(ding)(ding)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)被(bei)烴鏈（通常長8-18個碳）改性，導致色(se)(se)譜(pu)柱變為(wei)非極(ji)(ji)性。也(ye)使用極(ji)(ji)性溶劑。在反相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)高(gao)(gao)效液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)儀中(zhong)，樣(yang)品中(zhong)的(de)極(ji)(ji)性分(fen)子會與(yu)溶劑產生(sheng)強烈的(de)吸引力，從而使它們更快地洗脫。它們也(ye)不(bu)會與(yu)非極(ji)(ji)性固(gu)(gu)定(ding)(ding)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)互作用。非極(ji)(ji)性化合物會與(yu)固(gu)(gu)定(ding)(ding)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)產生(sheng)范德(de)華力和分(fen)散相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)互作用，因此(ci)它們的(de)洗脫速度(du)較慢。

3、與高(gao)效液(ye)相色譜儀(yi)相比，超高(gao)效液(ye)相色譜儀(yi)運行(xing)速(su)度(du)更(geng)快(kuai)、使用的(de)溶劑更(geng)少且分辨(bian)(bian)率更(geng)高(gao)。色譜柱也更(geng)小(xiao)(xiao)，固(gu)定(ding)相顆粒(li)的(de)尺(chi)寸要(yao)小(xiao)(xiao)得(de)多。較小(xiao)(xiao)的(de)孔（亞2微米）促進了分子更(geng)好的(de)分離和分辨(bian)(bian)率。較短的(de)色譜柱還可(ke)以進行(xing)快(kuai)速(su)檢測(ce)。然(ran)而，超高(gao)效液(ye)相色譜儀(yi)不能用于干(gan)燥或(huo)未過(guo)濾的(de)樣品，因為(wei)較小(xiao)(xiao)的(de)孔會堵(du)塞，這是一個昂貴且耗時(shi)的(de)修復過(guo)程。