酶標儀實際上就是一(yi)臺變相光(guang)(guang)電比色(se)(se)計或分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計，其(qi)基本(ben)工作原(yuan)理(li)與(yu)主要結構和(he)光(guang)(guang)電比色(se)(se)計基本(ben)相同。光(guang)(guang)源燈(deng)發(fa)出的(de)光(guang)(guang)波經(jing)過(guo)濾光(guang)(guang)片或單色(se)(se)器(qi)變成一(yi)束(shu)單色(se)(se)光(guang)(guang)，進(jin)(jin)入(ru)塑料微孔(kong)極中的(de)待測標本(ben)。該單色(se)(se)光(guang)(guang)一(yi)部分被標本(ben)吸收，另一(yi)部分則透過(guo)標本(ben)照射到光(guang)(guang)電檢測器(qi)上，光(guang)(guang)電檢測器(qi)將(jiang)這(zhe)一(yi)待測標本(ben)不同而(er)強弱不同的(de)光(guang)(guang)信號(hao)轉換(huan)成相應的(de)電信號(hao)，電信號(hao)經(jing)前置放(fang)大(da)，對數(shu)放(fang)大(da)，模數(shu)轉換(huan)等信號(hao)處理(li)后(hou)送入(ru)微處理(li)器(qi)進(jin)(jin)行數(shu)據處理(li)和(he)計算，最后(hou)由顯(xian)示器(qi)和(he)打印機顯(xian)示結果。微處理(li)機還通過(guo)控制(zhi)(zhi)電路控制(zhi)(zhi)機械(xie)(xie)驅動(dong)機構X方向(xiang)和(he)Y方向(xiang)的(de)運動(dong)來(lai)移動(dong)微孔(kong)板(ban)，從(cong)而(er)實現自動(dong)進(jin)(jin)樣檢測過(guo)程。而(er)另一(yi)些酶標儀則是采用手(shou)工移動(dong)微孔(kong)板(ban)進(jin)(jin)行檢測，因此省去了X,Y方向(xiang)的(de)機械(xie)(xie)驅動(dong)機構和(he)控制(zhi)(zhi)電路，從(cong)而(er)使儀器(qi)更(geng)小巧，結構也更(geng)簡(jian)單。
微孔板(ban)是(shi)一種(zhong)經事(shi)先包埋專(zhuan)用于放(fang)置待(dai)測樣本的透明(ming)塑料板(ban)，板(ban)上有多(duo)排大(da)小均勻一致的小孔，孔內都包埋著(zhu)相應(ying)的抗(kang)原(yuan)或抗(kang)體(ti)，微孔板(ban)上每個小孔可盛放(fang)零(ling)點幾毫(hao)升的溶液。
光(guang)是(shi)電磁波(bo)，波(bo)長100nm～400nm稱(cheng)為(wei)紫外(wai)光(guang)，400nm～780nm之間的光(guang)可被(bei)人眼觀察到(dao)，大(da)于(yu)780nm稱(cheng)為(wei)紅外(wai)光(guang)。人們之所(suo)以(yi)能夠看到(dao)色(se)(se)彩(cai)，是(shi)因為(wei)光(guang)照射(she)到(dao)物(wu)體上被(bei)物(wu)體反(fan)射(she)回(hui)來。綠色(se)(se)植物(wu)之所(suo)以(yi)是(shi)綠色(se)(se)，是(shi)因為(wei)植物(wu)吸(xi)收(shou)的大(da)部(bu)分為(wei)紅橙光(guang)和藍(lan)紫光(guang)，但對綠色(se)(se)不吸(xi)收(shou)，反(fan)射(she)出(chu)來，所(suo)以(yi)植物(wu)呈(cheng)現為(wei)綠色(se)(se)。酶標(biao)儀測定(ding)的原理是(shi)在特定(ding)波(bo)長下(xia)，檢(jian)測被(bei)測物(wu)的吸(xi)光(guang)值。
隨著檢測(ce)方式(shi)的發展，擁有多(duo)種檢測(ce)模式(shi)的單體臺式(shi)酶標(biao)儀叫做多(duo)功能酶標(biao)儀，可(ke)檢測(ce)吸(xi)光(guang)(guang)度（Abs)、熒光(guang)(guang)強度(FI)、時間(jian)分辨熒光(guang)(guang)（TRF)、熒光(guang)(guang)偏(pian)振（FP)、和化學發光(guang)(guang)（Lum)。
酶標儀(yi)從原理上可以分為(wei)光(guang)柵型(xing)酶標儀(yi)和濾光(guang)片型(xing)酶標儀(yi)。光(guang)柵型(xing)酶標儀(yi)可以截(jie)取光(guang)源波長(chang)范圍內的(de)任意波長(chang)，而濾光(guang)片型(xing)酶標儀(yi)則(ze)根據(ju)選配(pei)的(de)濾光(guang)片，只能(neng)截(jie)取特定波長(chang)進行(xing)檢(jian)測。
中心定位
儀器會自(zi)動對酶標(biao)孔進(jin)行中(zhong)心定位，中(zhong)心定位是(shi)要(yao)消除酶標(biao)孔底的(de)(de)凸(tu)凹引起的(de)(de)厚薄不均帶來檢(jian)測(ce)的(de)(de)不準確。在對每(mei)一個酶標(biao)儀進(jin)行檢(jian)測(ce)時，儀器其實(shi)要(yao)進(jin)行35個點(dian)(dian)的(de)(de)測(ce)量，選取最中(zhong)間(jian)的(de)(de)5個點(dian)(dian)的(de)(de)均值(zhi)為本孔的(de)(de)OD值(zhi)。
光源的參照通道
參(can)照(zhao)通道是(shi)用來(lai)校準由于電(dian)壓不穩或燈泡磨損帶(dai)來(lai)的影響。
用途和其它提示
用于ELISA試劑(ji)的(de)測定，廣泛用于各種實驗(yan)(yan)室，包括(kuo)臨床實驗(yan)(yan)室。
質量控制
質量控制是試(shi)劑檢測(ce)的重要(yao)因素。請按照試(shi)劑說明書的要(yao)求(qiu)進行質量控制。
空白校正
有一些試劑(ji)盒的(de)(de)說明書將空白(bai)孔(kong)設置(zhi)為空氣，其它(ta)大(da)多數(shu)空白(bai)孔(kong)的(de)(de)設置(zhi)是用試劑(ji)來設置(zhi)的(de)(de)，請(qing)按照試劑(ji)盒的(de)(de)說明書要求進行。
檢測結果的解釋
由于有(you)相當多的因素會影(ying)響(xiang)檢(jian)測的結(jie)果(guo)，如不同(tong)的酶標板，檢(jian)測試(shi)劑的體積，都會造成OD值的不同(tong)，因此，只有(you)使用同(tong)一酶標板反(fan)應(ying)的試(shi)劑檢(jian)測結(jie)果(guo)才能比(bi)較(jiao)和分(fen)析。對結(jie)果(guo)的臨床解釋請依照試(shi)劑盒的說明(ming)書(shu)進行。
規(gui)格有24孔(kong)(kong)板(ban)，48孔(kong)(kong)板(ban)，96孔(kong)(kong)板(ban)等(deng)多(duo)種，不(bu)同的(de)儀器(qi)選用(yong)不(bu)同規(gui)格的(de)孔(kong)(kong)板(ban)，對其可(ke)進行(xing)一(yi)孔(kong)(kong)一(yi)孔(kong)(kong)地檢測(ce)或(huo)一(yi)排一(yi)排地檢測(ce)。
酶標儀所(suo)用(yong)的(de)(de)單色(se)光(guang)(guang)既可(ke)(ke)(ke)通(tong)過(guo)相干濾光(guang)(guang)片(pian)(pian)來獲(huo)得(de)，也可(ke)(ke)(ke)用(yong)分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計相同的(de)(de)單色(se)器來得(de)到.在(zai)使用(yong)濾光(guang)(guang)片(pian)(pian)作濾波裝置時與普通(tong)比色(se)計一樣，濾光(guang)(guang)片(pian)(pian)即可(ke)(ke)(ke)放在(zai)微孔板的(de)(de)前面(mian)，也可(ke)(ke)(ke)放在(zai)微孔板的(de)(de)后面(mian)，聚光(guang)(guang)鏡，光(guang)(guang)欄后到達反(fan)(fan)射鏡，經(jing)反(fan)(fan)射鏡作90°反(fan)(fan)射后垂直通(tong)過(guo)比色(se)溶液,然(ran)后再(zai)經(jing)濾光(guang)(guang)片(pian)(pian)送(song)到光(guang)(guang)電管。
酶標(biao)儀(yi)和(he)普(pu)通的(de)光電(dian)比色計(ji)有以下(xia)幾點差異：
（1）盛裝待測比色液(ye)的(de)容器不再(zai)使(shi)用(yong)比色皿，而是使(shi)用(yong)塑(su)料微(wei)孔板.微(wei)孔板常(chang)用(yong)透明的(de)聚乙烯材料制成，對抗原抗體有(you)較強的(de)吸附作用(yong)，故用(yong)它作為固相載體。
（2）由于盛樣(yang)本(ben)的(de)塑料(liao)微孔(kong)板(ban)是(shi)多排多孔(kong)的(de)，光線只(zhi)能垂(chui)直穿過，因此酶標儀的(de)光束(shu)都是(shi)垂(chui)直通過待測溶液(ye)和微孔(kong)板(ban)的(de)，光束(shu)既(ji)可是(shi)從上到下，也可以是(shi)從下到上穿過比色(se)液(ye)。
（3）酶標(biao)儀(yi)通(tong)(tong)常不僅用A，有(you)時也使用光密度OD來(lai)表示吸光度.酶標(biao)儀(yi)可(ke)分為(wei)單通(tong)(tong)道(dao)和多通(tong)(tong)道(dao)2種(zhong)類型(xing)(xing)，單通(tong)(tong)道(dao)又有(you)自動(dong)(dong)和手動(dong)(dong)2種(zhong)之分.自動(dong)(dong)型(xing)(xing)的儀(yi)器有(you)X,Y方向的機械驅(qu)動(dong)(dong)機構(gou)，可(ke)將微孔板L的小孔一(yi)個(ge)個(ge)依次送入(ru)光束下面(mian)測(ce)試，手動(dong)(dong)型(xing)(xing)則(ze)靠(kao)手工移動(dong)(dong)微孔板來(lai)進行測(ce)量。
在(zai)單通道(dao)酶標儀(yi)(yi)的(de)基(ji)礎上又(you)發展了多通道(dao)酶標儀(yi)(yi)，此類酶標儀(yi)(yi)一般都是自動(dong)化型(xing)的(de)。它設(she)(she)有多個(ge)光(guang)束(shu)和多個(ge)光(guang)電檢測(ce)器(qi)，如12個(ge)通道(dao)的(de)儀(yi)(yi)器(qi)設(she)(she)有12條光(guang)束(shu)或(huo)12個(ge)光(guang)源，12個(ge)檢測(ce)器(qi)和12個(ge)放大器(qi)，在(zai)X方向的(de)機械驅動(dong)裝置的(de)作用下，樣(yang)品12個(ge)為一排(pai)被(bei)檢測(ce).多通道(dao)酶標儀(yi)(yi)的(de)檢測(ce)速度快(kuai)，但其結構較復雜(za)價格也較高(gao)。
可(ke)廣泛應(ying)用于(yu)低紫外區的DNA、RNA定量及(ji)(ji)純度分(fen)析（A260/A280）和蛋白定量（A280/BCA/Braford/Lowry），酶活、酶動力學(xue)檢(jian)(jian)測(ce)，酶聯免疫測(ce)定（ELISAs），細胞增殖與毒性(xing)分(fen)析，細胞凋亡檢(jian)(jian)測(ce)（MTT），報告基因檢(jian)(jian)測(ce)及(ji)(ji)G蛋白偶聯受體分(fen)析（GPCR）等(deng)。
酶(mei)標儀（MicroplateReader）是對(dui)酶(mei)聯免疫(yi)檢測（EIA）實驗結果進行讀(du)取和分析的(de)專業儀器(qi)。酶(mei)聯免疫(yi)反(fan)應通過偶聯在抗(kang)(kang)原或抗(kang)(kang)體上(shang)的(de)酶(mei)催化顯(xian)色底物進行的(de)，反(fan)應結果以顏色顯(xian)示(shi)，通過顯(xian)色的(de)深(shen)淺即吸(xi)光度值的(de)大小就可以判斷標本中待測抗(kang)(kang)體或抗(kang)(kang)原的(de)濃(nong)度。
酶標(biao)儀廣泛地應(ying)用(yong)在臨床檢驗、生(sheng)物(wu)學(xue)研(yan)究、農業(ye)科學(xue)、食(shi)品(pin)和環境科學(xue)中，由于大(da)量的(de)(de)酶聯免疫檢測試(shi)劑盒的(de)(de)應(ying)用(yong)，使得酶標(biao)儀在生(sheng)殖(zhi)保健領域中應(ying)用(yong)越(yue)來越(yue)廣泛，同時(shi)促進了(le)生(sheng)殖(zhi)健康技術水平(ping)提高。
國內許多(duo)(duo)計生站系(xi)(xi)統開展了酶免檢測(ce)(ce)(ce)項(xiang)目，如：乙肝五項(xiang)、艾滋病檢測(ce)(ce)(ce)、優生優育系(xi)(xi)列(lie)檢測(ce)(ce)(ce)、激素檢測(ce)(ce)(ce)等。過(guo)(guo)去(qu)多(duo)(duo)數采用目測(ce)(ce)(ce)方法(fa)，報出的(de)結果缺乏科學的(de)依據。例如：某弓形蟲檢測(ce)(ce)(ce)試劑盒中(zhong)，臨界值(zhi)規(gui)定為(wei)：陰性對照品的(de)OD值(zhi)×2.5，通過(guo)(guo)目測(ce)(ce)(ce)無法(fa)判斷標本孔(kong)的(de)反(fan)應顏色(se)(se)是否超過(guo)(guo)臨界值(zhi)。肉眼進行兩孔(kong)之(zhi)間的(de)顏色(se)(se)比較可能還行，但比較一(yi)孔(kong)的(de)顏色(se)(se)是否超過(guo)(guo)另一(yi)孔(kong)顏色(se)(se)的(de)2.5倍就(jiu)不可能。
國內(nei)多(duo)家權威機構，如衛生部臨床(chuang)檢驗中心和計劃生育系統等多(duo)次(ci)強調酶(mei)(mei)標(biao)(biao)儀(yi)的(de)(de)重要(yao)性(xing)，并要(yao)求酶(mei)(mei)聯免(mian)疫檢測(ce)(ce)試劑(ji)應(ying)使(shi)用酶(mei)(mei)標(biao)(biao)儀(yi)判(pan)讀(du)，酶(mei)(mei)免(mian)試劑(ji)的(de)(de)質控(kong)也應(ying)使(shi)用酶(mei)(mei)標(biao)(biao)儀(yi)，并提供(gong)酶(mei)(mei)標(biao)(biao)儀(yi)測(ce)(ce)定(ding)的(de)(de)原始數(shu)據(ju)，而各廠家的(de)(de)試劑(ji)盒說明書沒有是讓(rang)用目測(ce)(ce)的(de)(de)。同時(shi)酶(mei)(mei)免(mian)檢測(ce)(ce)的(de)(de)項目往往是一些實質性(xing)的(de)(de)感(gan)染(ran)和病變（如：肝炎、艾滋(zi)病、優生優育等），判(pan)讀(du)更要(yao)求嚴謹，由誤診引起(qi)的(de)(de)糾紛(fen)很難(nan)處理。另外(wai)，住(zhu)院手術病人術前的(de)(de)丙肝、艾滋(zi)等EIA試劑(ji)檢測(ce)(ce)是避免(mian)因(yin)輸血引起(qi)感(gan)染(ran)引發的(de)(de)醫療事故(gu)糾紛(fen)的(de)(de)必要(yao)手段，正逐漸被(bei)許多(duo)單位所采用。
1.外觀
酶(mei)標儀上應有儀器名稱(cheng)，型號，編號，生產廠家，出(chu)廠日期和(he)電源電壓；各調節旋鈕(niu)，按鍵和(he)開關均能(neng)正常(chang)工(gong)作，外表面無明顯機械損傷；顯示文字應清楚完整。
2.酶標儀的穩定性(漂移(yi))
選用492nm波長，在(zai)吸光度0.0A處，測定標稱值(zhi)(zhi)為1.0A的光譜中(zhong)性濾光片(測定操作按(an)儀(yi)器說明進(jin)行)，記(ji)錄儀(yi)器示值(zhi)(zhi)或均值(zhi)(zhi)，10min后(hou)再(zai)次(ci)(ci)記(ji)錄儀(yi)器示值(zhi)(zhi)或均值(zhi)(zhi)，前后(hou)兩次(ci)(ci)測定值(zhi)(zhi)之(zhi)差(cha)不應超過±0．005A。
3.吸光(guang)度測定(ding)的(de)準(zhun)確(que)度
選用(yong)405，492和620nm波(bo)長，以(yi)空氣為(wei)參比，分別(bie)測(ce)定標(biao)(biao)稱值(zhi)為(wei)0.5和1.0A的(de)光譜中性玻璃(li)濾(lv)光片，用(yong)專用(yong)測(ce)試(shi)板代替酶標(biao)(biao)板，按儀器說明(ming)連續測(ce)定3次，按下式計算(suan)準確度：AA=1/3(A、+A。+A3)—A：(A：為(wei)標(biao)(biao)準值(zhi))。
4.吸光度測定(ding)的重復性
波長(chang)選擇同(3)，在酶標板(ban)第一排(pai)加注空白溶液(ye)，第二(er)排(pai)加入(ru)濃度(du)為(wei)200rig/ml的重鉻(ge)酸鉀溶液(ye)，重復測定5次。記錄每次測定的第二(er)排(pai)吸光(guang)度(du)值(zhi)，取(qu)第二(er)排(pai)任一孔(kong)吸光(guang)度(du)值(zhi)與各(ge)次對應孔(kong)吸光(guang)度(du)值(zhi)。按(an)下(xia)式(shi)計算重復性：
5.酶標儀(yi)的線(xian)性
選用540nm波(bo)長，將標稱值0.5，1.0A中(zhong)(zhong)性濾(lv)光(guang)片分別放入專用測試(shi)板樣(yang)本位(wei)(wei)置中(zhong)(zhong)，以空(kong)氣為(wei)參(can)比，各重(zhong)復測定(ding)3次；然后將以上兩片中(zhong)(zhong)性濾(lv)光(guang)片疊加后置于專用測試(shi)板的同一孔(kong)位(wei)(wei)中(zhong)(zhong)，重(zhong)復測定(ding)3次。
6.測定(ding)(ding)速(su)度的檢定(ding)(ding)
選用(yong)492nm波長，放入96孔酶標板進行(xing)測定，用(yong)秒表計測儀器打印出(chu)全部數據(ju)的時(shi)間。
酶標儀除(chu)了在選(xuan)購(gou)時，應盡可能自檢外，在使(shi)用(yong)中也應定期檢定，以保證酶標儀測定的有效性。
1.光學系統
光柵光路系統，包括(kuo)內(nei)建(jian)的參(can)比檢(jian)測(ce)通道，確保任何測(ce)量情況下獲得一致的結(jie)果。
2.光路
長(chang)壽命閃爍(shuo)氙燈光源，光柵單(dan)色光發生器，200~1000nm波長(chang)范圍內(nei)全波長(chang)掃描，1nm步進
3.檢測模式
在微孔板檢測模(mo)式和(he)(he)比色杯檢測模(mo)式下(xia)均可進(jin)行全波長范(fan)圍光譜掃描(miao)，對樣品和(he)(he)空白(bai)同時掃描(miao)。
4.光(guang)譜掃描(miao)速(su)度
10s，200~1000nm，1nm步進
5.樣品前處理
無需衍生(sheng)處理，即可直接測定(ding)DNA、RNA和蛋白的吸(xi)光值。
6.光程校準
使用微(wei)孔板檢測時可(ke)(ke)直接讀出OD值和濃度(du)，對(dui)于水(shui)相溶液可(ke)(ke)使用光程校正
7.樣品容器
可使(shi)用96&384孔板(ban)，或標準(zhun)杯(bei)/微量杯(bei)
8.帶寬
帶寬2.4nm
9.讀數范圍
0~4OD
10.線性范圍
@450nm：0~2.5Abs，±2%
11.檢測準確度
@450nm：1%+0.003Abs（0~2.0Abs），2%(2.0~2.5Abs）
12.檢測精度
@450nm<1.0%CV
13.檢測速度
8s/96孔；13s/384孔
14.溫控范圍
微孔(kong)板和比色杯(bei)模(mo)式均(jun)具溫控(kong)功能，溫控(kong)范(fan)圍（室(shi)溫+4)~65℃
15.振蕩模式
軌(gui)道(dao)，雙(shuang)軌(gui)道(dao)和線性三種調(diao)速振蕩(dang)模(mo)式，動力學過(guo)程中可執行背景振蕩(dang)模(mo)式
16.數據處(chu)理及(ji)分析(xi)
通過PC端數(shu)據(ju)(ju)分(fen)(fen)析(xi)軟件(jian)Gen5進行操作和設置：曲線擬合(he)、定量分(fen)(fen)析(xi)、定性(xing)分(fen)(fen)析(xi)、動力學計(ji)算、自定義方程以、平行線分(fen)(fen)析(xi)（PLA，符合(he)歐盟(meng)法規要(yao)求）及效價分(fen)(fen)析(xi)等。數(shu)據(ju)(ju)可一鍵導出到Excel，也可生(sheng)成詳盡的(de)結果報告。
17.電源
電(dian)源輸(shu)入(ru)100-240V(50/60Hz），最大功率消耗90W
18.體積
外部尺寸（HxWxD)216x216x406mm
19.重量
11kg
20.配置
全波長讀數儀一(yi)套（含比色杯(bei)基座）（比色皿必須為(wei)立式），標(biao)準(zhun)96孔(kong)酶標(biao)板一(yi)包，電源線壹(yi)根，說明書一(yi)份，軟件光盤一(yi)張。
酶(mei)標儀(yi)的(de)功能是(shi)用來(lai)讀(du)取(qu)酶(mei)聯免疫試(shi)劑(ji)盒的(de)反應(ying)結果，因此要得到準確結果，試(shi)劑(ji)盒的(de)使(shi)用必須規范。許多醫院在(zai)(zai)使(shi)用酶(mei)標儀(yi)之前是(shi)通過目(mu)測判(pan)斷結果，操(cao)作(zuo)過程隨意(yi)(yi)性(xing)較(jiao)大(da)，在(zai)(zai)使(shi)用酶(mei)標儀(yi)后如果不能及時糾正操(cao)作(zuo)習慣，會造成較(jiao)大(da)誤差。在(zai)(zai)酶(mei)標儀(yi)的(de)操(cao)作(zuo)中應(ying)注意(yi)(yi)以(yi)下事(shi)項：
1.使用加(jia)液器加(jia)液，加(jia)液頭不能混用。
2.洗板(ban)要洗干凈。如果條(tiao)件允許，使用洗板(ban)機洗板(ban)，避免交叉污染(ran)。
3.嚴格按照試劑盒(he)的說明書操作，反應時間準確。
4.在測(ce)量過程(cheng)中，請勿碰酶標(biao)板(ban)，以防酶標(biao)板(ban)傳送(song)時擠(ji)傷操作(zuo)人員的(de)手。
5.請(qing)勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內部，操作完成后(hou)請(qing)洗手。
6.如(ru)果使(shi)用的樣品或試劑(ji)具(ju)有污染性、毒性和(he)生物學危害，請嚴格按照試劑(ji)盒的操(cao)作說(shuo)明(ming)，以防(fang)對操(cao)作人員造成損(sun)害。
7.如果儀器接(jie)觸過(guo)污染(ran)性或傳(chuan)染(ran)性物品(pin)，請(qing)進行清洗和消(xiao)毒。
8.不要在測量過程中關閉電源。
9.對(dui)于因試劑盒(he)問題(ti)造成(cheng)的(de)測量結果(guo)(guo)的(de)偏差，應根(gen)據實際情況(kuang)及時修改參(can)數，以(yi)達到最佳效果(guo)(guo)。
10.使用(yong)后蓋(gai)好(hao)防(fang)塵罩。
11.出現技術故障時應及(ji)時與(yu)廠家聯系，切勿(wu)擅自拆卸酶(mei)標儀。
