一、掃描電鏡樣品制備流程是什么

化(hua)學方(fang)法(fa)制備樣品的程(cheng)序通常是：清洗、化(hua)學固定、干燥、噴鍍(du)金屬。

1、清洗：某些生物(wu)材(cai)料表面常附血液、細胞碎(sui)片(pian)、消(xiao)化道內的(de)食(shi)物(wu)殘渣、細菌(jun)、淋巴液及粘液等異(yi)物(wu)，掩蓋著要觀(guan)察的(de)部位，因而，需要在固定(ding)之前用(yong)生理鹽水(shui)或等滲緩(huan)沖液等把附著物(wu)清洗干凈。亦可用(yong)5%碳酸鈉沖洗或酶消(xiao)化法(fa)去除這(zhe)些異(yi)物(wu)。

2、固定：通(tong)常(chang)采(cai)用醛(quan)(quan)類(lei)（主要(yao)是戊二(er)醛(quan)(quan)和多聚(ju)甲醛(quan)(quan)）與四氧化(hua)鋨(e)(e)(e)雙(shuang)固定(ding)(ding)，也可(ke)用四氧化(hua)鋨(e)(e)(e)單固定(ding)(ding)。四氧化(hua)鋨(e)(e)(e)固定(ding)(ding)不(bu)僅(jin)可(ke)良好地保存(cun)組織細胞結構，而且能增(zeng)加材(cai)(cai)料的導電(dian)性和二(er)次電(dian)子產額，提高(gao)掃描電(dian)子顯(xian)微(wei)圖(tu)象(xiang)的質量。這對(dui)高(gao)分辨掃描電(dian)子顯(xian)微(wei)術是極端(duan)重要(yao)的。為增(zeng)強這種(zhong)效果，可(ke)用四氧化(hua)鋨(e)(e)(e)-單寧酸或(huo)是四氧化(hua)鋨(e)(e)(e)-珠叉二(er)胼等反(fan)復處理(li)材(cai)(cai)料，使其結合更(geng)多的重金(jin)屬鋨(e)(e)(e)，這就(jiu)是導電(dian)染色。

3、干燥：固定后通(tong)常采用(yong)臨(lin)界點干(gan)(gan)燥(zao)法。其原(yuan)理(li)是：適(shi)當(dang)選擇(ze)溫(wen)度和壓(ya)力(li)(li)(li)，使液體達到臨(lin)界狀(zhuang)態(tai)（液態(tai)和氣相間(jian)界面消失(shi)），從而避免(mian)在(zai)干(gan)(gan)燥(zao)過程中(zhong)由水(shui)(shui)的(de)表面張力(li)(li)(li)所造成(cheng)的(de)樣品變形。對(dui)含水(shui)(shui)生物材料(liao)直接進行臨(lin)界點干(gan)(gan)燥(zao)時，水(shui)(shui)的(de)臨(lin)界溫(wen)度和壓(ya)力(li)(li)(li)不能過高（37.4℃，218帕(pa)）。通(tong)常用(yong)乙醇或丙(bing)酮等使材料(liao)脫水(shui)(shui)，再用(yong)一種中(zhong)間(jian)介(jie)質(zhi)，如(ru)醋酸(suan)戊酯，置(zhi)(zhi)換(huan)脫水(shui)(shui)劑(ji)(ji)，然(ran)后在(zai)臨(lin)界點干(gan)(gan)燥(zao)器中(zhong)用(yong)液體或固體二(er)氧化(hua)(hua)碳(tan)、氟利昂(ang)13以及一氧化(hua)(hua)二(er)氮等置(zhi)(zhi)換(huan)劑(ji)(ji)置(zhi)(zhi)換(huan)中(zhong)間(jian)介(jie)質(zhi)，進行臨(lin)界干(gan)(gan)燥(zao)。

4、噴鍍金屬：將干燥的(de)樣(yang)品(pin)用(yong)導(dao)電性好的(de)粘合(he)劑(ji)或(huo)其他粘合(he)劑(ji)粘在金屬(shu)樣(yang)品(pin)臺上，然后放(fang)在真(zhen)空蒸發(fa)器中噴(pen)鍍(du)一層50～300埃厚(hou)的(de)金屬(shu)膜，以提高樣(yang)品(pin)的(de)導(dao)電性和二次電子產額，改善圖象(xiang)質量，并且防止樣(yang)品(pin)受熱和輻(fu)射損(sun)傷。如果采(cai)用(yong)離子濺(jian)射鍍(du)膜機噴(pen)鍍(du)金屬(shu)，可獲得均勻(yun)的(de)細顆粒(li)薄金屬(shu)鍍(du)層，提高掃描電子圖象(xiang)的(de)質量。

二、掃描電鏡樣品要求有哪些

前文已經簡單了解了掃描電鏡樣品制備流程，在制作的時候，我們要注意掃描電鏡對于樣品還有(you)一定的要求：

1、樣品要盡可能干燥，若(ruo)樣品(pin)中含有(you)水(shui)份，水(shui)分揮發會(hui)造成倉內真空度急劇下(xia)降，導致(zhi)圖像漂(piao)移(yi)，有(you)白(bai)色條紋，甚(shen)至會(hui)影響燈(deng)絲壽命(ming)。

2、熱穩定性好，熱穩(wen)定性差的樣(yang)品往(wang)往(wang)在(zai)電子束(shu)的轟擊下分解，釋放氣體和(he)其他物質，污(wu)染電鏡。

3、導電性好，導(dao)電性差的樣品會發生荷電效應，造成圖像(xiang)畸變，亮(liang)點亮(liang)線，像(xiang)散等。

4、不含強磁性，強(qiang)磁性的樣品(pin)觀察一般會(hui)出現嚴重的像散，無(wu)法消(xiao)去(qu)，磁性粉末如果粘的不牢固還可能會(hui)吸(xi)附(fu)到探(tan)頭上，損(sun)害(hai)電鏡。