一、掃描電鏡樣品制備流程是什么

化學方法(fa)制備(bei)樣(yang)品的程(cheng)序(xu)通常(chang)是：清洗(xi)、化學固(gu)定(ding)、干燥、噴(pen)鍍金屬。

1、清洗：某(mou)些(xie)生(sheng)物(wu)(wu)(wu)材料表面常(chang)附血液、細(xi)(xi)胞碎片、消(xiao)化(hua)道內的食(shi)物(wu)(wu)(wu)殘(can)渣、細(xi)(xi)菌、淋(lin)巴液及粘液等異物(wu)(wu)(wu)，掩(yan)蓋(gai)著要觀察的部位(wei)，因而(er)，需要在固定之前用(yong)(yong)生(sheng)理鹽水(shui)或等滲緩沖液等把(ba)附著物(wu)(wu)(wu)清洗(xi)干凈(jing)。亦可(ke)用(yong)(yong)5%碳酸鈉沖洗(xi)或酶消(xiao)化(hua)法去除這些(xie)異物(wu)(wu)(wu)。

2、固定：通常采用醛(quan)類（主要是戊二醛(quan)和(he)多聚甲醛(quan)）與四(si)(si)氧(yang)化鋨雙固(gu)定(ding)，也可用四(si)(si)氧(yang)化鋨單固(gu)定(ding)。四(si)(si)氧(yang)化鋨固(gu)定(ding)不僅可良好(hao)地(di)保(bao)存組織細(xi)胞結構，而且能增加材(cai)料(liao)的(de)(de)導(dao)電(dian)性和(he)二次電(dian)子(zi)產額，提高(gao)掃描電(dian)子(zi)顯微圖象的(de)(de)質量。這(zhe)對高(gao)分(fen)辨掃描電(dian)子(zi)顯微術是極(ji)端重要的(de)(de)。為增強(qiang)這(zhe)種效果，可用四(si)(si)氧(yang)化鋨-單寧(ning)酸或是四(si)(si)氧(yang)化鋨-珠(zhu)叉(cha)二胼(pian)等反復處(chu)理(li)材(cai)料(liao)，使(shi)其(qi)結合(he)更多的(de)(de)重金屬鋨，這(zhe)就是導(dao)電(dian)染色。

3、干燥：固(gu)定后通常(chang)采用臨界(jie)點干(gan)燥(zao)法。其(qi)原(yuan)理是(shi)：適(shi)當選擇(ze)溫度和(he)壓(ya)力(li)(li)，使液體(ti)達到臨界(jie)狀態（液態和(he)氣相(xiang)間界(jie)面(mian)消失(shi)），從(cong)而(er)避免在干(gan)燥(zao)過程中由水的表面(mian)張力(li)(li)所(suo)造成的樣品變(bian)形。對含水生物材料直接(jie)進行臨界(jie)點干(gan)燥(zao)時，水的臨界(jie)溫度和(he)壓(ya)力(li)(li)不能過高（37.4℃，218帕(pa)）。通常(chang)用乙醇(chun)或(huo)丙(bing)酮等(deng)使材料脫(tuo)水，再用一種(zhong)中間介質，如醋(cu)酸(suan)戊酯，置(zhi)(zhi)換脫(tuo)水劑(ji)，然(ran)后在臨界(jie)點干(gan)燥(zao)器中用液體(ti)或(huo)固(gu)體(ti)二氧化(hua)碳(tan)、氟利昂13以及一氧化(hua)二氮等(deng)置(zhi)(zhi)換劑(ji)置(zhi)(zhi)換中間介質，進行臨界(jie)干(gan)燥(zao)。

4、噴鍍金屬：將(jiang)干(gan)燥的(de)樣(yang)(yang)(yang)品(pin)用(yong)導電(dian)(dian)性(xing)好(hao)的(de)粘(zhan)合(he)劑或其(qi)他粘(zhan)合(he)劑粘(zhan)在(zai)金屬(shu)樣(yang)(yang)(yang)品(pin)臺(tai)上，然(ran)后放在(zai)真空蒸發器中噴鍍(du)一層(ceng)50～300埃厚(hou)的(de)金屬(shu)膜，以提高樣(yang)(yang)(yang)品(pin)的(de)導電(dian)(dian)性(xing)和二(er)次電(dian)(dian)子(zi)(zi)產額，改善(shan)圖象質量，并且(qie)防止樣(yang)(yang)(yang)品(pin)受(shou)熱(re)和輻射損傷。如果采用(yong)離子(zi)(zi)濺射鍍(du)膜機(ji)噴鍍(du)金屬(shu)，可獲得均(jun)勻的(de)細顆(ke)粒薄金屬(shu)鍍(du)層(ceng)，提高掃描電(dian)(dian)子(zi)(zi)圖象的(de)質量。

二、掃描電鏡樣品要求有哪些

前文已經簡單了解了掃描電鏡樣品制備流程，在制作的時候，我們要注意掃描電鏡對于(yu)樣品還有(you)一定的要求：

1、樣品要盡可能干燥，若樣品(pin)中含有水(shui)份，水(shui)分(fen)揮發會造成倉內真空度(du)急劇下降，導致圖像漂移，有白色條紋，甚至會影響燈絲(si)壽命。

2、熱穩定性好，熱(re)穩定(ding)性差(cha)的樣品往往在電(dian)子束的轟(hong)擊(ji)下分解，釋放氣(qi)體和其他物質，污染電(dian)鏡(jing)。

3、導電性好，導電(dian)性差的樣(yang)品會發生荷(he)電(dian)效應，造成圖像畸變，亮(liang)點亮(liang)線，像散等。

4、不含強磁性，強磁性(xing)的(de)樣品觀察一般會出現嚴重的(de)像散(san)，無法(fa)消去，磁性(xing)粉(fen)末如果粘的(de)不牢固還可能會吸(xi)附(fu)到(dao)探頭上，損(sun)害電(dian)鏡。