一、掃描電鏡樣品制備流程是什么

化學方法制備樣(yang)品的程序通常是：清洗(xi)、化學固定、干燥、噴鍍金屬(shu)。

1、清洗：某些生物(wu)(wu)材料(liao)表面(mian)常附血液、細(xi)胞碎片(pian)、消化道內的食物(wu)(wu)殘渣(zha)、細(xi)菌、淋巴液及粘液等異(yi)物(wu)(wu)，掩蓋著(zhu)要(yao)觀察的部位，因而，需要(yao)在(zai)固定之(zhi)前用生理(li)鹽水或等滲緩沖液等把附著(zhu)物(wu)(wu)清洗干凈(jing)。亦可用5%碳酸鈉沖洗或酶消化法去除(chu)這些異(yi)物(wu)(wu)。

2、固定：通(tong)常(chang)采用(yong)醛類（主(zhu)要是戊二醛和(he)多(duo)聚(ju)甲醛）與(yu)四(si)氧化鋨(e)(e)雙固定(ding)，也(ye)可(ke)用(yong)四(si)氧化鋨(e)(e)單固定(ding)。四(si)氧化鋨(e)(e)固定(ding)不僅可(ke)良好地保(bao)存組織細胞(bao)結構，而且能增(zeng)(zeng)加(jia)材(cai)料的導電(dian)性和(he)二次電(dian)子產(chan)額，提高(gao)(gao)掃(sao)描電(dian)子顯微圖象(xiang)的質量。這對高(gao)(gao)分辨掃(sao)描電(dian)子顯微術是極端重要的。為增(zeng)(zeng)強這種效果，可(ke)用(yong)四(si)氧化鋨(e)(e)-單寧酸或是四(si)氧化鋨(e)(e)-珠叉二胼等反(fan)復(fu)處理材(cai)料，使其(qi)結合(he)更多(duo)的重金屬(shu)鋨(e)(e)，這就是導電(dian)染(ran)色。

3、干燥：固(gu)定后(hou)通(tong)常采用臨(lin)界(jie)(jie)點干(gan)燥法。其原理是：適當選擇溫度(du)和(he)壓力(li)(li)，使(shi)液(ye)體達到臨(lin)界(jie)(jie)狀態（液(ye)態和(he)氣相(xiang)間界(jie)(jie)面(mian)消(xiao)失(shi)），從而避免在(zai)(zai)干(gan)燥過程中(zhong)由水(shui)(shui)(shui)的表面(mian)張力(li)(li)所造成的樣品變形。對含(han)水(shui)(shui)(shui)生(sheng)物材料(liao)直接進行(xing)臨(lin)界(jie)(jie)點干(gan)燥時，水(shui)(shui)(shui)的臨(lin)界(jie)(jie)溫度(du)和(he)壓力(li)(li)不能過高（37.4℃，218帕）。通(tong)常用乙醇或丙酮等(deng)使(shi)材料(liao)脫(tuo)水(shui)(shui)(shui)，再用一種中(zhong)間介(jie)質，如(ru)醋酸戊(wu)酯，置(zhi)換(huan)(huan)脫(tuo)水(shui)(shui)(shui)劑(ji)(ji)，然后(hou)在(zai)(zai)臨(lin)界(jie)(jie)點干(gan)燥器(qi)中(zhong)用液(ye)體或固(gu)體二(er)氧(yang)化(hua)碳、氟利昂13以(yi)及一氧(yang)化(hua)二(er)氮等(deng)置(zhi)換(huan)(huan)劑(ji)(ji)置(zhi)換(huan)(huan)中(zhong)間介(jie)質，進行(xing)臨(lin)界(jie)(jie)干(gan)燥。

4、噴鍍金屬：將干燥(zao)的(de)樣(yang)(yang)品用導(dao)電性(xing)好(hao)的(de)粘(zhan)合(he)劑或其他粘(zhan)合(he)劑粘(zhan)在(zai)金(jin)屬樣(yang)(yang)品臺上，然后放在(zai)真空蒸發器中噴鍍(du)(du)一層50～300埃厚的(de)金(jin)屬膜(mo)，以提高樣(yang)(yang)品的(de)導(dao)電性(xing)和二次(ci)電子產額，改(gai)善圖象(xiang)質(zhi)量(liang)，并且防止樣(yang)(yang)品受(shou)熱和輻射損傷。如(ru)果采用離子濺(jian)射鍍(du)(du)膜(mo)機噴鍍(du)(du)金(jin)屬，可(ke)獲得均勻的(de)細顆粒薄金(jin)屬鍍(du)(du)層，提高掃描電子圖象(xiang)的(de)質(zhi)量(liang)。

二、掃描電鏡樣品要求有哪些

前文已經簡單了解了掃描電鏡樣品制備流程，在制作的時候，我們要注意掃描電鏡對于樣品還有一(yi)定(ding)的要求：

1、樣品要盡可能干燥，若樣品中含有(you)水份(fen)，水分揮發會造成倉內真空度急劇(ju)下(xia)降(jiang)，導致圖像漂移，有(you)白(bai)色條(tiao)紋(wen)，甚至會影(ying)響(xiang)燈絲壽命。

2、熱穩定性好，熱穩定性差的(de)樣品往(wang)往(wang)在(zai)電子束的(de)轟擊(ji)下(xia)分解，釋放氣(qi)體和其他物質，污染電鏡。

3、導電性好，導電(dian)性差的樣品會發生荷電(dian)效應，造(zao)成圖像(xiang)(xiang)畸變，亮點亮線，像(xiang)(xiang)散等(deng)。

4、不含強磁性，強磁(ci)性的(de)樣品觀(guan)察一般(ban)會出現嚴(yan)重(zhong)的(de)像散，無法消去，磁(ci)性粉末(mo)如果粘(zhan)的(de)不牢固(gu)還可(ke)能會吸(xi)附(fu)到探頭上，損害電鏡。