一、掃描電鏡樣品制備流程是什么

化學(xue)方法制備(bei)樣品的程序通(tong)常是：清(qing)洗(xi)、化學(xue)固定、干燥(zao)、噴鍍(du)金屬。

1、清洗：某些(xie)生(sheng)物(wu)材料(liao)表面常(chang)附血液、細胞碎片(pian)、消(xiao)化(hua)道(dao)內的食物(wu)殘渣、細菌(jun)、淋巴液及粘液等異物(wu)，掩蓋(gai)著要觀察的部位，因而，需要在固定之(zhi)前用(yong)生(sheng)理鹽水或等滲緩沖液等把附著物(wu)清洗干凈。亦可用(yong)5%碳酸鈉沖洗或酶(mei)消(xiao)化(hua)法去除這些(xie)異物(wu)。

2、固定：通常采用(yong)醛類(lei)（主要是戊二醛和(he)多聚甲醛）與四(si)氧(yang)化(hua)鋨(e)雙固(gu)定，也可用(yong)四(si)氧(yang)化(hua)鋨(e)單(dan)固(gu)定。四(si)氧(yang)化(hua)鋨(e)固(gu)定不僅可良好地保存組織細(xi)胞結構(gou)，而(er)且能增(zeng)加材料的導(dao)(dao)電(dian)性(xing)和(he)二次電(dian)子產額(e)，提高(gao)掃(sao)描(miao)電(dian)子顯(xian)微(wei)(wei)圖(tu)象的質量。這(zhe)對高(gao)分辨掃(sao)描(miao)電(dian)子顯(xian)微(wei)(wei)術是極(ji)端重要的。為增(zeng)強(qiang)這(zhe)種效果，可用(yong)四(si)氧(yang)化(hua)鋨(e)-單(dan)寧酸或(huo)是四(si)氧(yang)化(hua)鋨(e)-珠叉(cha)二胼等(deng)反復處理材料，使(shi)其結合更(geng)多的重金屬鋨(e)，這(zhe)就是導(dao)(dao)電(dian)染色(se)。

3、干燥：固(gu)(gu)定后通(tong)(tong)常(chang)采用(yong)臨(lin)(lin)(lin)界(jie)點(dian)干(gan)(gan)燥(zao)法。其原(yuan)理是：適當選擇溫度和壓力(li)，使液體達到(dao)臨(lin)(lin)(lin)界(jie)狀態（液態和氣相間界(jie)面消失），從而避免在干(gan)(gan)燥(zao)過程(cheng)中(zhong)由水(shui)(shui)的表面張力(li)所(suo)造成的樣品(pin)變形。對(dui)含水(shui)(shui)生物材(cai)料(liao)直接進行臨(lin)(lin)(lin)界(jie)點(dian)干(gan)(gan)燥(zao)時，水(shui)(shui)的臨(lin)(lin)(lin)界(jie)溫度和壓力(li)不(bu)能(neng)過高(gao)（37.4℃，218帕(pa)）。通(tong)(tong)常(chang)用(yong)乙醇或丙酮(tong)等使材(cai)料(liao)脫(tuo)水(shui)(shui)，再(zai)用(yong)一種中(zhong)間介(jie)質，如醋(cu)酸戊酯，置換脫(tuo)水(shui)(shui)劑，然(ran)后在臨(lin)(lin)(lin)界(jie)點(dian)干(gan)(gan)燥(zao)器中(zhong)用(yong)液體或固(gu)(gu)體二(er)氧化(hua)碳、氟(fu)利昂13以及一氧化(hua)二(er)氮等置換劑置換中(zhong)間介(jie)質，進行臨(lin)(lin)(lin)界(jie)干(gan)(gan)燥(zao)。

4、噴鍍金屬：將干燥(zao)的(de)樣(yang)品(pin)(pin)(pin)用導電(dian)(dian)性好(hao)的(de)粘合劑(ji)或(huo)其他粘合劑(ji)粘在金屬樣(yang)品(pin)(pin)(pin)臺上，然后放在真空蒸發(fa)器中噴鍍(du)一層50～300埃厚的(de)金屬膜(mo)，以提(ti)(ti)高樣(yang)品(pin)(pin)(pin)的(de)導電(dian)(dian)性和(he)二(er)次電(dian)(dian)子(zi)產額，改善圖象質(zhi)量，并(bing)且防止樣(yang)品(pin)(pin)(pin)受熱和(he)輻射(she)損傷(shang)。如果(guo)采用離子(zi)濺(jian)射(she)鍍(du)膜(mo)機噴鍍(du)金屬，可(ke)獲得均勻的(de)細顆(ke)粒薄金屬鍍(du)層，提(ti)(ti)高掃描電(dian)(dian)子(zi)圖象的(de)質(zhi)量。

二、掃描電鏡樣品要求有哪些

前文已經簡單了解了掃描電鏡樣品制備流程，在制作的時候，我們要注意掃描電鏡對于樣品還有一定的要(yao)求：

1、樣品要盡可能干燥，若樣品中含有(you)水份，水分揮(hui)發會造成倉內真空度急劇下降，導致圖像漂移，有(you)白色條紋，甚(shen)至(zhi)會影響燈絲壽命。

2、熱穩定性好，熱穩(wen)定(ding)性(xing)差(cha)的(de)樣(yang)品(pin)往(wang)往(wang)在電子束的(de)轟(hong)擊下分解，釋放氣(qi)體(ti)和(he)其他物質，污染電鏡。

3、導電性好，導電(dian)性差(cha)的樣品會發生荷電(dian)效應，造(zao)成圖像(xiang)畸變，亮點(dian)亮線(xian)，像(xiang)散等。

4、不含強磁性，強磁性的樣品觀察(cha)一般會(hui)出現(xian)嚴重的像散，無法消去，磁性粉末(mo)如果粘的不(bu)牢固還可(ke)能(neng)會(hui)吸附到探頭上，損害電鏡。