一、掃描電鏡樣品制備流程是什么

化(hua)學(xue)(xue)方(fang)法制備樣品的程序通常是：清洗(xi)、化(hua)學(xue)(xue)固定、干燥、噴鍍金屬。

1、清洗：某些生(sheng)物(wu)材料表面(mian)常附血液、細(xi)胞(bao)碎片、消(xiao)化道內的(de)食(shi)物(wu)殘渣、細(xi)菌、淋巴液及粘液等(deng)(deng)異物(wu)，掩蓋(gai)著(zhu)要觀(guan)察的(de)部位，因(yin)而，需要在固定之前用生(sheng)理鹽水或等(deng)(deng)滲(shen)緩沖液等(deng)(deng)把(ba)附著(zhu)物(wu)清洗(xi)干凈。亦(yi)可用5%碳酸鈉沖洗(xi)或酶消(xiao)化法去(qu)除這些異物(wu)。

2、固定：通常采(cai)用(yong)醛類(lei)（主要(yao)是(shi)戊二(er)醛和(he)(he)多聚(ju)甲醛）與四(si)氧(yang)化鋨(e)雙固(gu)定，也可(ke)用(yong)四(si)氧(yang)化鋨(e)單固(gu)定。四(si)氧(yang)化鋨(e)固(gu)定不僅(jin)可(ke)良(liang)好地保存組織細胞結(jie)構，而且(qie)能增(zeng)加材料的(de)導電(dian)性和(he)(he)二(er)次電(dian)子(zi)(zi)產(chan)額，提高掃描電(dian)子(zi)(zi)顯微圖象的(de)質量。這(zhe)對高分(fen)辨掃描電(dian)子(zi)(zi)顯微術是(shi)極端重要(yao)的(de)。為增(zeng)強這(zhe)種效(xiao)果(guo)，可(ke)用(yong)四(si)氧(yang)化鋨(e)-單寧酸或是(shi)四(si)氧(yang)化鋨(e)-珠叉二(er)胼等反(fan)復處理(li)材料，使其結(jie)合更多的(de)重金屬鋨(e)，這(zhe)就是(shi)導電(dian)染色。

3、干燥：固定后通(tong)常(chang)采用(yong)(yong)臨(lin)(lin)界(jie)(jie)(jie)點(dian)(dian)干(gan)(gan)(gan)燥(zao)法(fa)。其原理(li)是(shi)：適當(dang)選擇(ze)溫(wen)度和壓力(li)，使(shi)液體(ti)達到臨(lin)(lin)界(jie)(jie)(jie)狀態（液態和氣(qi)相間界(jie)(jie)(jie)面(mian)(mian)消失），從而避免(mian)在干(gan)(gan)(gan)燥(zao)過(guo)程中由水(shui)的表面(mian)(mian)張力(li)所造成的樣(yang)品變形(xing)。對含水(shui)生物材料(liao)直接進行(xing)臨(lin)(lin)界(jie)(jie)(jie)點(dian)(dian)干(gan)(gan)(gan)燥(zao)時，水(shui)的臨(lin)(lin)界(jie)(jie)(jie)溫(wen)度和壓力(li)不能過(guo)高（37.4℃，218帕）。通(tong)常(chang)用(yong)(yong)乙醇或丙(bing)酮(tong)等使(shi)材料(liao)脫水(shui)，再(zai)用(yong)(yong)一(yi)(yi)種中間介質，如醋酸(suan)戊酯，置(zhi)換(huan)脫水(shui)劑，然后在臨(lin)(lin)界(jie)(jie)(jie)點(dian)(dian)干(gan)(gan)(gan)燥(zao)器中用(yong)(yong)液體(ti)或固體(ti)二(er)氧化碳、氟利昂13以(yi)及(ji)一(yi)(yi)氧化二(er)氮等置(zhi)換(huan)劑置(zhi)換(huan)中間介質，進行(xing)臨(lin)(lin)界(jie)(jie)(jie)干(gan)(gan)(gan)燥(zao)。

4、噴鍍金屬：將(jiang)干燥的(de)(de)樣品用導(dao)電(dian)性(xing)好的(de)(de)粘合(he)劑或其他粘合(he)劑粘在金(jin)屬樣品臺上，然后放在真空(kong)蒸(zheng)發器(qi)中(zhong)噴(pen)鍍一層50～300埃(ai)厚(hou)的(de)(de)金(jin)屬膜，以提(ti)高(gao)樣品的(de)(de)導(dao)電(dian)性(xing)和二次電(dian)子(zi)(zi)產(chan)額，改善圖(tu)象質量(liang)，并(bing)且防止樣品受熱和輻射損傷。如果采用離子(zi)(zi)濺射鍍膜機(ji)噴(pen)鍍金(jin)屬，可獲得均勻的(de)(de)細顆粒薄金(jin)屬鍍層，提(ti)高(gao)掃(sao)描電(dian)子(zi)(zi)圖(tu)象的(de)(de)質量(liang)。

二、掃描電鏡樣品要求有哪些

前文已經簡單了解了掃描電鏡樣品制備流程，在制作的時候，我們要注意掃描電鏡對于樣品還有一定的要求：

1、樣品要盡可能干燥，若樣(yang)品中(zhong)含有(you)水(shui)份(fen)，水(shui)分揮發會(hui)造(zao)成(cheng)倉(cang)內(nei)真空度(du)急劇下降，導致圖(tu)像漂移，有(you)白色條紋，甚至會(hui)影響燈絲(si)壽命。

2、熱穩定性好，熱穩定性差的樣品往往在電子束的轟擊下分解，釋放(fang)氣(qi)體和其(qi)他物質，污染電鏡。

3、導電性好，導電性差的樣品會發生荷電效應，造(zao)成圖像畸變，亮點亮線，像散等。

4、不含強磁性，強(qiang)磁(ci)性的(de)(de)樣品觀(guan)察一般會(hui)出現嚴(yan)重的(de)(de)像散(san)，無法消去(qu)，磁(ci)性粉末(mo)如果(guo)粘(zhan)的(de)(de)不牢固(gu)還可(ke)能會(hui)吸附(fu)到探頭(tou)上，損(sun)害電鏡。