一、培養基的制備常見問題及原因分析

培養基(ji)(ji)的配制(zhi)(zhi)(zhi)是微生物實(shi)驗人(ren)員的基(ji)(ji)本技(ji)能之一(yi)，適(shi)宜(yi)的培養基(ji)(ji)制(zhi)(zhi)(zhi)備(bei)方法、選擇正確的滅菌方式、貯藏條件和質量控制(zhi)(zhi)(zhi)試驗是提供優質培養基(ji)(ji)的保證，在制(zhi)(zhi)(zhi)備(bei)培養基(ji)(ji)的過程(cheng)中，可能會遇到以(yi)下幾種問題(ti)：

1、培養基不能凝固

（1）制備過(guo)程中過(guo)度加熱。

（2）低pH造成(cheng)培(pei)養基酸解。

（3）稱量不(bu)正確(que)瓊脂未完全(quan)溶(rong)解。

（4）培(pei)養基成分未充(chong)分混(hun)勻。

2、pH不正確

（1）制備過(guo)程中過(guo)度加熱。

（2）水質不佳。

（3）外部(bu)化學物質污染。

（4）測定是溫度不正確(que)。

（5）pH計為(wei)正確校準(zhun)。

（6）脫水培養基(ji)質量(liang)差。

3、顏色異常

（1）制備過程過度加熱。

（2）水質不佳。

（3）pH不正確。

（4）外來污染。

（5）脫水培(pei)養基質量差。

4、產生沉淀

（1）制備過(guo)程過(guo)度加熱。

（2）水質不佳。

（3）pH不正確。

（4）原料(liao)中的雜質。

（5）脫水培養(yang)基質量差。

5、培養基出現抑制/低生長率

（1）制備過程過度加熱。

（2）水質不佳。

（3）脫水培養基質量差。

（4）使用(yong)成分不正確，添(tian)加劑用(yong)量不正確。

（5）容器或水中的有(you)毒殘留物(wu)。

6、選擇性差

（1）制備過(guo)程過(guo)度加熱。

（2）脫水培(pei)養基(ji)質量(liang)差。

（3）配方使用不對。

（4）添加(jia)成(cheng)分不正確，例如添加(jia)成(cheng)分是培養基過熱(re)、添加(jia)濃度錯誤等。

7、污染

（1）無菌操(cao)作存(cun)在問題。

（2）添加劑污染。

（3）不適當滅菌

二、制備培養基如何減少失敗率

制(zhi)備培養基的時候，因(yin)為(wei)操作不當可能(neng)會出(chu)現各種(zhong)問題，導致制(zhi)備失(shi)敗，為(wei)了減少(shao)失(shi)敗率，制(zhi)備培養基時要注意(yi)：

1、選擇合適的培養基配方

同(tong)一種培養(yang)基的(de)(de)配方(fang)在不同(tong)著作中常會有某些差別。因此，除所用的(de)(de)是標(biao)準方(fang)法，應嚴格按其規定進行配制(zhi)外，一般(ban)均應盡(jin)量(liang)收集有關資料，加(jia)以比較核對，再依據自己的(de)(de)使用目的(de)(de)加(jia)以選用，記錄其來源。

2、培養基成分的稱取要精確

培養(yang)基的各種成分(fen)必須(xu)精確(que)稱取(qu)并要注意防止(zhi)錯亂，最好一次完成，不要中斷(duan)。可將配方置于(yu)傍側，每稱完一種成分(fen)即在配方上做出記(ji)號，并將所需(xu)稱取(qu)的藥品一次取(qu)齊，置于(yu)左側，每種稱取(qu)完畢后(hou)，即移放(fang)于(yu)右側。完全稱取(qu)完畢后(hou)，還應(ying)進行一次檢查。

3、培養基各成分的混合和溶化要注意

培(pei)養基(ji)所(suo)用(yong)(yong)化學藥品(pin)均應是化學純的。使(shi)(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)的蒸煮鍋(guo)不得為銅(tong)(tong)鍋(guo)或(huo)鐵(tie)鍋(guo)，以防(fang)(fang)有微量銅(tong)(tong)或(huo)鐵(tie)混入培(pei)養基(ji)中(zhong)，使(shi)(shi)(shi)(shi)細菌不易生(sheng)長(chang)。最(zui)好使(shi)(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)不銹鋼鍋(guo)加熱溶(rong)化，也可(ke)放入大(da)燒杯或(huo)大(da)燒瓶中(zhong)置(zhi)高(gao)壓(ya)蒸汽滅(mie)菌器或(huo)流動蒸汽消毒器中(zhong)蒸煮溶(rong)化。在鍋(guo)中(zhong)溶(rong)化時(shi)、可(ke)先用(yong)(yong)溫水加熱并(bing)隨時(shi)擾(rao)動，以防(fang)(fang)焦化、如(ru)發現有焦化現象、該培(pei)養基(ji)即(ji)不能使(shi)(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)，應重新(xin)制(zhi)備(bei)。待大(da)部分(fen)固體成(cheng)分(fen)溶(rong)化后，再(zai)用(yong)(yong)較小火(huo)力使(shi)(shi)(shi)(shi)所(suo)有成(cheng)分(fen)完全溶(rong)化。

4、調整好pH

培養(yang)(yang)基(ji)(ji)各成分(fen)完全(quan)溶解(jie)后，應進行(xing)pH的(de)(de)初步調(diao)正，因(yin)培養(yang)(yang)基(ji)(ji)在加(jia)熱消毒過(guo)程(cheng)中、pH會有所變化，例(li)如，牛肉浸液(ye)約(yue)可(ke)降低pH0.2。而腸浸液(ye)pH卻(que)會有顯著的(de)(de)升(sheng)高。因(yin)此，對這(zhe)個步驟，操作(zuo)者應隨時注意探索經驗、以期(qi)能掌握培養(yang)(yang)基(ji)(ji)的(de)(de)最終pH，保證(zheng)培養(yang)(yang)基(ji)(ji)的(de)(de)質量。pH調(diao)正后，還(huan)應將培養(yang)(yang)基(ji)(ji)煮沸數(shu)分(fen)鐘，以利培養(yang)(yang)基(ji)(ji)沉淀物的(de)(de)析出。