一、什么是細胞培養基

細胞培養基是培養細胞的培養基，既是(shi)供給細胞營養和促(cu)使細胞生(sheng)殖(zhi)增殖(zhi)的(de)基(ji)礎物(wu)質(zhi)，也是(shi)培養細胞生(sheng)長(chang)和繁殖(zhi)的(de)生(sheng)存環境，一(yi)般(ban)是(shi)鹽(yan)、碳水化合物(wu)、維(wei)生(sheng)素、氨(an)基(ji)酸、代謝前體、生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)、激素和微(wei)量元(yuan)素的(de)復雜混合物(wu)。

二、常用的細胞培養基有哪些

細(xi)(xi)胞培(pei)養基(ji)的種(zhong)類眾多，由于(yu)不同(tong)(tong)細(xi)(xi)胞系對這些(xie)成(cheng)分的要求(qiu)各不相(xiang)同(tong)(tong)，因此產生了不同(tong)(tong)類型(xing)的培(pei)養基(ji)，常用的細(xi)(xi)胞培(pei)養基(ji)主(zhu)要有：

1、MEM培養基

是一種(zhong)添加了營養物(wu)(wu)的(de)最(zui)低必需培(pei)養基，僅含有12種(zhong)必需氨基酸(suan)、L-谷(gu)氨酰胺和8種(zhong)維生素，含糖(tang)量為1g/L。MEM是一種(zhong)最(zui)基礎(chu)、最(zui)常用(yong)的(de)細胞(bao)培(pei)養基，主要應用(yong)于(yu)貼壁(bi)細胞(bao)的(de)培(pei)養，在(zai)添加血清后，可用(yong)于(yu)培(pei)養多種(zhong)單層生長的(de)細胞(bao)，如(ru)成纖(xian)維細胞(bao)。修改配(pei)方后的(de)a-MEM則可廣泛應用(yong)于(yu)各種(zhong)哺乳動物(wu)(wu)懸浮和貼壁(bi)細胞(bao)培(pei)養。

2、DMEM培養基

氨基(ji)酸(suan)(suan)(suan)含(han)量是(shi)MEM的(de)兩倍，維(wei)生(sheng)素含(han)量是(shi)MEM的(de)4倍，以及硝酸(suan)(suan)(suan)鐵、丙酮酸(suan)(suan)(suan)鈉和(he)(he)一些補充氨基(ji)酸(suan)(suan)(suan)。此(ci)外，DMEM分(fen)為低(di)糖(tang)(tang)型和(he)(he)高糖(tang)(tang)型，葡萄(tao)糖(tang)(tang)含(han)量分(fen)別為1g/L和(he)(he)4.5g/L。（低(di)糖(tang)(tang)適(shi)(shi)于依賴性貼壁細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)，特(te)別適(shi)(shi)用于生(sheng)長(chang)速度快(kuai)、附著(zhu)性較(jiao)差的(de)腫(zhong)瘤細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)；高糖(tang)(tang)更適(shi)(shi)合高密度懸浮(fu)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)，也適(shi)(shi)用于附著(zhu)性較(jiao)差，但(dan)又不(bu)希望它脫(tuo)離原來生(sheng)長(chang)點(dian)的(de)克(ke)隆培(pei)養(yang)，也可用于雜交瘤中骨(gu)髓瘤細(xi)胞(bao)和(he)(he)DNA轉(zhuan)染(ran)的(de)轉(zhuan)化細(xi)胞(bao)的(de)培(pei)養(yang)。）

3、IMDM培養基

用(yong)于淋巴(ba)細胞和雜交瘤細胞的生長。與DMEM相比，添加了(le)(le)HEPES和硒，硝酸鉀取代了(le)(le)硝酸鐵，并(bing)且(qie)含(han)有更多的氨基酸、維(wei)生素(su)和無機鹽。

4、Ham 's F-12K培養基

用于支持原代(dai)細胞的生長和分化。F-12K增(zeng)加了氨基酸(suan)、丙酮酸(suan)、生物素、鈣、鎂、腐胺和酚(fen)紅的含量。

5、DMEM/F12培養基

DMEM和F12的1:1混合物，能夠(gou)在(zai)低血(xue)清(qing)條(tiao)件下支持(chi)多種哺乳(ru)動物細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的培養(yang)，在(zai)此培養(yang)基中成功培養(yang)的細(xi)(xi)胞(bao)(bao)包括：MDCK、神經膠(jiao)質細(xi)(xi)胞(bao)(bao)、成纖維細(xi)(xi)胞(bao)(bao)和人內皮(pi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)等。

6、McCoy’s 5A培養基

廣泛(fan)用于多種原代細(xi)胞及細(xi)胞系的培養，如來(lai)源于骨髓、皮膚、脾(pi)臟、腎(shen)臟和(he)肺等組織的哺乳(ru)動物原代細(xi)胞。

7、RPMI-1640培養基

是(shi)在(zai)McCoy’5A的基礎上進行改良研(yan)發出的，最初用于人白血病細(xi)胞的懸浮培(pei)養(yang)(yang)，后來發現也適用于HeLa、MCF-7、PC12、外(wai)周血單核細(xi)胞（B/T淋巴(ba)細(xi)胞）和星形細(xi)胞的培(pei)養(yang)(yang)。RPMI 1640與(yu)其它培(pei)養(yang)(yang)基的區別是(shi)含(han)有還(huan)原型谷(gu)胱甘肽和高濃(nong)度維(wei)生素(su)(su)。此外(wai)還(huan)含(han)有含(han)有MEM、DMEM中不含(han)的生物素(su)(su)、維(wei)生素(su)(su)B12和對氨基苯。

8、L15培養基

L-15培養基的(de)配(pei)方(fang)中不含用(yong)于CO2平衡(heng)環境(jing)的(de)碳酸(suan)(suan)鹽(yan)緩沖系統, 而是用(yong)磷(lin)酸(suan)(suan)鹽(yan)、L-精氨(an)酸(suan)(suan)、L-組氨(an)酸(suan)(suan)和(he) L-半胱氨(an)酸(suan)(suan)作(zuo)為緩沖劑。用(yong)半乳(ru)糖和(he)丙酮酸(suan)(suan)鈉代(dai)替葡(pu)萄(tao)糖以防(fang)止乳(ru)酸(suan)(suan)的(de)形(xing)成(cheng)。可以在無CO2培養箱中進行(xing)細胞培養，或者擰緊瓶蓋培養。

三、細胞培養基的品質要求

細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基(ji)有(you)多種(zhong)(zhong)，不(bu)同(tong)種(zhong)(zhong)類的細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基(ji)用于培(pei)養(yang)不(bu)同(tong)細(xi)胞(bao)，一般來說(shuo)，好的細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基(ji)，需要滿足以下(xia)幾點要求：

1、外觀

顏色、粉(fen)末(mo)細度須(xu)均勻(yun)。

2、溶解性

培(pei)養基完全溶解，可以避免(mian)培(pei)養基內營養成(cheng)分的流失。

3、pH值

哺乳類動物細胞(bao)生(sheng)長需要合(he)適的酸(suan)堿度，同時pH值(zhi)的測定也可以(yi)檢查培養基的批間(jian)差異。

4、水分

培養基的營養成(cheng)份很豐富，利于微生物(wu)的滋長(chang)，因此(ci)水分的含量控制可(ke)以(yi)延長(chang)有效期。

5、冰點滲透壓

細胞必(bi)須生(sheng)活在合適的(de)滲透(tou)壓環(huan)境中(zhong)，同(tong)時滲透(tou)壓值的(de)測定也可以檢查(cha)培養(yang)基的(de)批間(jian)差異(yi)。

6、菌落總數

粉末培養基不是無菌制劑，培養基本(ben)身的(de)營養成分很豐富，容易滋生微生物，因(yin)此菌落的(de)控制可以延長有(you)效期

7、細胞生長試驗

可檢查(cha)細胞培(pei)養基是否有促(cu)生長的能力，以及是否有不利細胞生長的毒素。

8、細菌內毒素

為滿足生(sheng)物(wu)制(zhi)品(pin)細菌內(nei)毒素的(de)控(kong)制(zhi)要求，作(zuo)為生(sheng)物(wu)制(zhi)品(pin)生(sheng)產(chan)原料的(de)培養基同(tong)樣需要細菌內(nei)毒素控(kong)制(zhi)。

9、穩定性

確定產品的(de)儲存、運輸條件，產品的(de)保質期限。

10、一致性

驗證產品的均一性。