一、什么是細胞培養基

細胞培養基是培養細胞的培養基，既是(shi)供給細胞營養和(he)促(cu)使細胞生(sheng)(sheng)殖增殖的基礎物質，也(ye)是(shi)培養細胞生(sheng)(sheng)長和(he)繁(fan)殖的生(sheng)(sheng)存環境，一般是(shi)鹽(yan)、碳水化合物、維(wei)生(sheng)(sheng)素、氨基酸、代謝(xie)前體、生(sheng)(sheng)長因子(zi)、激素和(he)微量(liang)元素的復雜混合物。

二、常用的細胞培養基有哪些

細胞(bao)培養基的種(zhong)類眾多(duo)，由于不(bu)同細胞(bao)系對這些成分的要求(qiu)各不(bu)相同，因此產生了不(bu)同類型(xing)的培養基，常用的細胞(bao)培養基主要有：

1、MEM培養基

是一種(zhong)(zhong)添加(jia)了營養(yang)(yang)物的(de)最(zui)低必需培養(yang)(yang)基，僅含有(you)12種(zhong)(zhong)必需氨基酸、L-谷氨酰胺和(he)(he)8種(zhong)(zhong)維生素，含糖量(liang)為1g/L。MEM是一種(zhong)(zhong)最(zui)基礎、最(zui)常用(yong)(yong)的(de)細(xi)胞(bao)(bao)培養(yang)(yang)基，主要應用(yong)(yong)于(yu)(yu)貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)(bao)的(de)培養(yang)(yang)，在添加(jia)血(xue)清后，可(ke)用(yong)(yong)于(yu)(yu)培養(yang)(yang)多(duo)種(zhong)(zhong)單(dan)層生長的(de)細(xi)胞(bao)(bao)，如成纖(xian)維細(xi)胞(bao)(bao)。修改(gai)配方(fang)后的(de)a-MEM則(ze)可(ke)廣泛(fan)應用(yong)(yong)于(yu)(yu)各種(zhong)(zhong)哺乳動(dong)物懸浮和(he)(he)貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)(bao)培養(yang)(yang)。

2、DMEM培養基

氨基酸含(han)量(liang)是(shi)MEM的(de)兩(liang)倍，維(wei)生(sheng)(sheng)素含(han)量(liang)是(shi)MEM的(de)4倍，以及(ji)硝(xiao)酸鐵、丙酮酸鈉和(he)(he)一些(xie)補充氨基酸。此外，DMEM分(fen)為(wei)(wei)低(di)糖型(xing)和(he)(he)高糖型(xing)，葡(pu)萄糖含(han)量(liang)分(fen)別為(wei)(wei)1g/L和(he)(he)4.5g/L。（低(di)糖適于依賴性貼壁細胞(bao)(bao)培養(yang)(yang)，特(te)別適用(yong)(yong)于生(sheng)(sheng)長速度快、附著性較(jiao)差的(de)腫瘤(liu)細胞(bao)(bao)培養(yang)(yang)；高糖更(geng)適合高密度懸浮(fu)細胞(bao)(bao)培養(yang)(yang)，也適用(yong)(yong)于附著性較(jiao)差，但(dan)又(you)不希望它脫離原來生(sheng)(sheng)長點的(de)克隆培養(yang)(yang)，也可用(yong)(yong)于雜交瘤(liu)中(zhong)骨髓(sui)瘤(liu)細胞(bao)(bao)和(he)(he)DNA轉(zhuan)染的(de)轉(zhuan)化細胞(bao)(bao)的(de)培養(yang)(yang)。）

3、IMDM培養基

用于淋巴細胞和(he)雜交瘤(liu)細胞的生(sheng)長。與DMEM相比(bi)，添加了HEPES和(he)硒，硝酸鉀取代(dai)了硝酸鐵，并且含有(you)更多的氨基酸、維(wei)生(sheng)素和(he)無(wu)機鹽。

4、Ham 's F-12K培養基

用于(yu)支持原(yuan)代(dai)細胞(bao)的生長和分化。F-12K增加了氨(an)基酸、丙酮酸、生物(wu)素(su)、鈣、鎂、腐胺和酚紅的含量。

5、DMEM/F12培養基

DMEM和(he)(he)F12的1:1混合物，能(neng)夠在低(di)血清條件下支持多種哺乳動物細胞(bao)的培(pei)養，在此培(pei)養基中成功培(pei)養的細胞(bao)包括(kuo)：MDCK、神經膠質(zhi)細胞(bao)、成纖維細胞(bao)和(he)(he)人內皮細胞(bao)等。

6、McCoy’s 5A培養基

廣(guang)泛用于多種原(yuan)代細胞及細胞系的(de)(de)培(pei)養(yang)，如來源于骨髓(sui)、皮膚、脾臟、腎臟和肺等組織的(de)(de)哺乳動物原(yuan)代細胞。

7、RPMI-1640培養基

是在McCoy’5A的(de)(de)(de)(de)基礎上(shang)進行改良研發出的(de)(de)(de)(de)，最(zui)初用于(yu)人白血(xue)病(bing)細胞的(de)(de)(de)(de)懸浮培(pei)養，后(hou)來發現也適用于(yu)HeLa、MCF-7、PC12、外(wai)周(zhou)血(xue)單核細胞（B/T淋巴細胞）和(he)星形細胞的(de)(de)(de)(de)培(pei)養。RPMI 1640與其它培(pei)養基的(de)(de)(de)(de)區別是含(han)有(you)(you)還原型谷胱甘肽和(he)高濃度(du)維生(sheng)素。此外(wai)還含(han)有(you)(you)含(han)有(you)(you)MEM、DMEM中不含(han)的(de)(de)(de)(de)生(sheng)物素、維生(sheng)素B12和(he)對氨(an)基苯。

8、L15培養基

L-15培(pei)養(yang)基的配方(fang)中不(bu)含用(yong)于(yu)CO2平衡環(huan)境的碳酸(suan)(suan)(suan)鹽(yan)(yan)緩(huan)沖(chong)系統, 而是用(yong)磷酸(suan)(suan)(suan)鹽(yan)(yan)、L-精氨(an)(an)酸(suan)(suan)(suan)、L-組氨(an)(an)酸(suan)(suan)(suan)和(he) L-半(ban)胱氨(an)(an)酸(suan)(suan)(suan)作為緩(huan)沖(chong)劑。用(yong)半(ban)乳糖和(he)丙酮酸(suan)(suan)(suan)鈉代(dai)替葡萄糖以(yi)防止乳酸(suan)(suan)(suan)的形成。可以(yi)在無CO2培(pei)養(yang)箱中進行(xing)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)，或者擰緊瓶蓋培(pei)養(yang)。

三、細胞培養基的品質要求

細(xi)(xi)胞(bao)培(pei)養基有多(duo)種，不(bu)同種類的細(xi)(xi)胞(bao)培(pei)養基用于(yu)培(pei)養不(bu)同細(xi)(xi)胞(bao)，一般來說，好的細(xi)(xi)胞(bao)培(pei)養基，需要滿足以下幾點要求：

1、外觀

顏色、粉末細(xi)度(du)須均勻。

2、溶解性

培養基完全溶解，可以避免培養基內營養成分的流失。

3、pH值

哺(bu)乳(ru)類動(dong)物(wu)細胞(bao)生長需要合適的酸堿度，同時(shi)pH值的測定也可以(yi)檢(jian)查培養基的批間差異。

4、水分

培養基的(de)(de)營養成份很豐富，利于微生物的(de)(de)滋長，因此水分的(de)(de)含量控制(zhi)可以(yi)延長有效期。

5、冰點滲透壓

細胞(bao)必須(xu)生活在合適(shi)的滲透(tou)壓環(huan)境中，同時(shi)滲透(tou)壓值(zhi)的測定(ding)也可以(yi)檢查培養基(ji)的批間差異。

6、菌落總數

粉末培養基不是無菌制劑，培養基本身的(de)營(ying)養成分很豐(feng)富，容易滋生微生物，因此菌(jun)落的(de)控制可以延長有效期

7、細胞生長試驗

可(ke)檢(jian)查細(xi)胞培養基是(shi)(shi)否有促生長的(de)能力，以(yi)及是(shi)(shi)否有不利細(xi)胞生長的(de)毒(du)素。

8、細菌內毒素

為(wei)滿足(zu)生物制(zhi)(zhi)品細(xi)(xi)菌內(nei)毒(du)素(su)的(de)控制(zhi)(zhi)要求，作為(wei)生物制(zhi)(zhi)品生產原料的(de)培(pei)養(yang)基同樣(yang)需要細(xi)(xi)菌內(nei)毒(du)素(su)控制(zhi)(zhi)。

9、穩定性

確定產品的儲存、運輸條件，產品的保質期(qi)限。

10、一致性

驗證產品的均一性。