一、什么是細胞培養基

細胞培養基是培養細胞的培養基，既是供給細(xi)胞營養(yang)和(he)促使細(xi)胞生(sheng)(sheng)殖增殖的(de)基礎物質，也(ye)是培養(yang)細(xi)胞生(sheng)(sheng)長(chang)和(he)繁殖的(de)生(sheng)(sheng)存環境(jing)，一般(ban)是鹽、碳水化合物、維生(sheng)(sheng)素、氨基酸(suan)、代謝前體、生(sheng)(sheng)長(chang)因子(zi)、激素和(he)微量(liang)元素的(de)復雜混(hun)合物。

二、常用的細胞培養基有哪些

細胞培(pei)養基(ji)(ji)的(de)種(zhong)類眾多，由于不(bu)同(tong)細胞系對這些成(cheng)分的(de)要求(qiu)各不(bu)相同(tong)，因此產生了不(bu)同(tong)類型的(de)培(pei)養基(ji)(ji)，常用的(de)細胞培(pei)養基(ji)(ji)主要有：

1、MEM培養基

是一種添加了營養物的(de)最低必需培(pei)(pei)養基，僅(jin)含有12種必需氨(an)基酸、L-谷氨(an)酰胺和8種維生素，含糖(tang)量(liang)為1g/L。MEM是一種最基礎(chu)、最常用的(de)細(xi)(xi)胞培(pei)(pei)養基，主(zhu)要應用于(yu)貼壁(bi)細(xi)(xi)胞的(de)培(pei)(pei)養，在添加血清后，可(ke)(ke)用于(yu)培(pei)(pei)養多種單層生長的(de)細(xi)(xi)胞，如(ru)成(cheng)纖維細(xi)(xi)胞。修改(gai)配方(fang)后的(de)a-MEM則可(ke)(ke)廣(guang)泛應用于(yu)各(ge)種哺(bu)乳動(dong)物懸浮(fu)和貼壁(bi)細(xi)(xi)胞培(pei)(pei)養。

2、DMEM培養基

氨基酸(suan)含(han)(han)量(liang)是MEM的(de)兩倍，維生(sheng)素(su)含(han)(han)量(liang)是MEM的(de)4倍，以(yi)及硝酸(suan)鐵、丙酮酸(suan)鈉和(he)(he)(he)一些補充氨基酸(suan)。此外，DMEM分為低(di)糖(tang)型和(he)(he)(he)高糖(tang)型，葡萄糖(tang)含(han)(han)量(liang)分別為1g/L和(he)(he)(he)4.5g/L。（低(di)糖(tang)適(shi)于(yu)依賴性(xing)貼壁細(xi)胞(bao)培(pei)(pei)養(yang)(yang)，特別適(shi)用于(yu)生(sheng)長(chang)速(su)度快、附(fu)著性(xing)較差的(de)腫瘤(liu)細(xi)胞(bao)培(pei)(pei)養(yang)(yang)；高糖(tang)更適(shi)合高密(mi)度懸浮細(xi)胞(bao)培(pei)(pei)養(yang)(yang)，也適(shi)用于(yu)附(fu)著性(xing)較差，但又(you)不(bu)希望(wang)它脫離原來生(sheng)長(chang)點的(de)克隆培(pei)(pei)養(yang)(yang)，也可用于(yu)雜交瘤(liu)中(zhong)骨髓瘤(liu)細(xi)胞(bao)和(he)(he)(he)DNA轉染的(de)轉化(hua)細(xi)胞(bao)的(de)培(pei)(pei)養(yang)(yang)。）

3、IMDM培養基

用于(yu)淋巴(ba)細胞和(he)雜交瘤細胞的(de)生長。與DMEM相比(bi)，添加了HEPES和(he)硒，硝酸(suan)鉀取代了硝酸(suan)鐵，并(bing)且含有更多的(de)氨(an)基酸(suan)、維生素(su)和(he)無機鹽(yan)。

4、Ham 's F-12K培養基

用于支持原(yuan)代細胞的生長(chang)和分化。F-12K增加了氨基酸(suan)、丙酮酸(suan)、生物(wu)素、鈣、鎂、腐胺和酚(fen)紅的含量。

5、DMEM/F12培養基

DMEM和(he)F12的(de)(de)1:1混(hun)合物，能夠在低(di)血清條件下支持多種哺乳動物細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)培養，在此培養基中(zhong)成(cheng)功培養的(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)包括(kuo)：MDCK、神經膠質細(xi)(xi)胞(bao)(bao)、成(cheng)纖維細(xi)(xi)胞(bao)(bao)和(he)人內皮細(xi)(xi)胞(bao)(bao)等。

6、McCoy’s 5A培養基

廣泛用于多種(zhong)原代(dai)細胞(bao)及(ji)細胞(bao)系(xi)的培養(yang)，如(ru)來源于骨髓、皮膚、脾臟(zang)、腎臟(zang)和肺(fei)等組織(zhi)的哺乳動物原代(dai)細胞(bao)。

7、RPMI-1640培養基

是(shi)在McCoy’5A的基礎(chu)上進行(xing)改良研(yan)發出的，最初用于(yu)人(ren)白血病細胞(bao)的懸浮培養(yang)，后來(lai)發現也適用于(yu)HeLa、MCF-7、PC12、外周血單核細胞(bao)（B/T淋巴細胞(bao)）和星(xing)形細胞(bao)的培養(yang)。RPMI 1640與其(qi)它培養(yang)基的區別是(shi)含(han)有還(huan)原型谷胱(guang)甘(gan)肽和高濃(nong)度(du)維生素(su)。此(ci)外還(huan)含(han)有含(han)有MEM、DMEM中不含(han)的生物素(su)、維生素(su)B12和對氨基苯。

8、L15培養基

L-15培養(yang)(yang)基的(de)配方中不含用(yong)于CO2平衡環境的(de)碳酸(suan)鹽緩沖系統, 而是用(yong)磷酸(suan)鹽、L-精氨酸(suan)、L-組氨酸(suan)和(he) L-半胱氨酸(suan)作為緩沖劑。用(yong)半乳糖和(he)丙酮酸(suan)鈉代替葡萄糖以(yi)防(fang)止乳酸(suan)的(de)形成。可以(yi)在無CO2培養(yang)(yang)箱中進(jin)行細胞培養(yang)(yang)，或者擰(ning)緊瓶(ping)蓋培養(yang)(yang)。

三、細胞培養基的品質要求

細胞(bao)培養(yang)(yang)基有多(duo)種(zhong)(zhong)，不同種(zhong)(zhong)類的細胞(bao)培養(yang)(yang)基用于培養(yang)(yang)不同細胞(bao)，一般來說，好的細胞(bao)培養(yang)(yang)基，需要滿(man)足以(yi)下幾點要求(qiu)：

1、外觀

顏色、粉末細度須均勻。

2、溶解性

培養(yang)基完全(quan)溶解，可(ke)以(yi)避免培養(yang)基內營養(yang)成分(fen)的流失。

3、pH值

哺乳類動物細(xi)胞生長需(xu)要合適的(de)酸堿度(du)，同時pH值的(de)測定(ding)也可以檢查培(pei)養(yang)基的(de)批(pi)間(jian)差異。

4、水分

培養基的(de)(de)營養成份很豐(feng)富(fu)，利于微生物的(de)(de)滋長(chang)(chang)，因此水(shui)分的(de)(de)含量控(kong)制可以(yi)延(yan)長(chang)(chang)有效(xiao)期。

5、冰點滲透壓

細胞必須生活在合適的(de)(de)滲透(tou)壓(ya)環境中，同(tong)時滲透(tou)壓(ya)值的(de)(de)測定(ding)也可以檢查(cha)培養基的(de)(de)批間差異。

6、菌落總數

粉末培養基不是無菌制劑，培養基本身的(de)營養(yang)成分(fen)很豐富，容(rong)易滋生微生物，因此菌落的(de)控制(zhi)可以(yi)延長有效期(qi)

7、細胞生長試驗

可檢查細胞培養基是否有促(cu)生長(chang)的能(neng)力，以及是否有不利細胞生長(chang)的毒素。

8、細菌內毒素

為(wei)滿(man)足生物(wu)制(zhi)(zhi)品細(xi)(xi)菌內毒(du)素(su)(su)的(de)控(kong)制(zhi)(zhi)要求(qiu)，作為(wei)生物(wu)制(zhi)(zhi)品生產原料(liao)的(de)培養基同樣需(xu)要細(xi)(xi)菌內毒(du)素(su)(su)控(kong)制(zhi)(zhi)。

9、穩定性

確(que)定產(chan)品(pin)的(de)儲存、運輸條件，產(chan)品(pin)的(de)保質期(qi)限。

10、一致性

驗證產品的均一性。