一、什么是細胞培養基

細胞培養基是培養細胞的培養基，既是供給細胞(bao)營養(yang)和(he)促(cu)使細胞(bao)生(sheng)(sheng)殖(zhi)增殖(zhi)的(de)基礎物質，也是培養(yang)細胞(bao)生(sheng)(sheng)長(chang)和(he)繁殖(zhi)的(de)生(sheng)(sheng)存(cun)環境，一般是鹽、碳水化合物、維(wei)生(sheng)(sheng)素、氨基酸、代(dai)謝前體、生(sheng)(sheng)長(chang)因(yin)子、激素和(he)微量元素的(de)復雜混合物。

二、常用的細胞培養基有哪些

細(xi)胞培(pei)養(yang)基(ji)的(de)種類(lei)眾多(duo)，由于不(bu)(bu)同(tong)(tong)細(xi)胞系對這些成分(fen)的(de)要求各不(bu)(bu)相同(tong)(tong)，因此產生了不(bu)(bu)同(tong)(tong)類(lei)型的(de)培(pei)養(yang)基(ji)，常用的(de)細(xi)胞培(pei)養(yang)基(ji)主要有：

1、MEM培養基

是一種添加了營(ying)養(yang)物的(de)(de)最(zui)低必(bi)需(xu)培(pei)養(yang)基，僅含有12種必(bi)需(xu)氨基酸、L-谷(gu)氨酰胺和8種維生(sheng)素，含糖量(liang)為1g/L。MEM是一種最(zui)基礎、最(zui)常用的(de)(de)細胞培(pei)養(yang)基，主要應用于(yu)貼壁細胞的(de)(de)培(pei)養(yang)，在添加血清后(hou)，可(ke)用于(yu)培(pei)養(yang)多種單層生(sheng)長(chang)的(de)(de)細胞，如成纖維細胞。修(xiu)改(gai)配方后(hou)的(de)(de)a-MEM則可(ke)廣泛(fan)應用于(yu)各種哺乳動物懸(xuan)浮和貼壁細胞培(pei)養(yang)。

2、DMEM培養基

氨基酸(suan)含(han)(han)量是MEM的(de)兩(liang)倍(bei)(bei)，維生素含(han)(han)量是MEM的(de)4倍(bei)(bei)，以及硝酸(suan)鐵、丙酮酸(suan)鈉和一些補充氨基酸(suan)。此外，DMEM分為(wei)低糖(tang)型和高(gao)糖(tang)型，葡萄糖(tang)含(han)(han)量分別(bie)為(wei)1g/L和4.5g/L。（低糖(tang)適(shi)于依賴性貼(tie)壁細胞(bao)培(pei)養(yang)，特別(bie)適(shi)用(yong)于生長速度快、附(fu)著性較差的(de)腫瘤(liu)細胞(bao)培(pei)養(yang)；高(gao)糖(tang)更適(shi)合高(gao)密度懸浮細胞(bao)培(pei)養(yang)，也適(shi)用(yong)于附(fu)著性較差，但(dan)又不希望它脫(tuo)離(li)原來生長點(dian)的(de)克隆(long)培(pei)養(yang)，也可(ke)用(yong)于雜交瘤(liu)中骨髓瘤(liu)細胞(bao)和DNA轉染(ran)的(de)轉化細胞(bao)的(de)培(pei)養(yang)。）

3、IMDM培養基

用于(yu)淋巴細胞和(he)雜(za)交瘤細胞的生長。與DMEM相比(bi)，添加了(le)HEPES和(he)硒(xi)，硝(xiao)酸鉀取代(dai)了(le)硝(xiao)酸鐵，并且(qie)含有更(geng)多的氨基酸、維生素(su)和(he)無機(ji)鹽。

4、Ham 's F-12K培養基

用于支持原代細胞(bao)的(de)生(sheng)長和(he)(he)分化。F-12K增加了氨基酸、丙酮酸、生(sheng)物素(su)、鈣(gai)、鎂(mei)、腐(fu)胺和(he)(he)酚紅的(de)含量。

5、DMEM/F12培養基

DMEM和(he)(he)F12的1:1混(hun)合物(wu)，能夠在低(di)血清條件下(xia)支(zhi)持(chi)多種(zhong)哺乳動物(wu)細胞的培(pei)(pei)養，在此(ci)培(pei)(pei)養基中成(cheng)功培(pei)(pei)養的細胞包(bao)括：MDCK、神(shen)經膠(jiao)質細胞、成(cheng)纖維細胞和(he)(he)人內(nei)皮細胞等。

6、McCoy’s 5A培養基

廣泛用于多(duo)種原代細胞及細胞系的(de)培養，如來源于骨髓、皮(pi)膚、脾臟、腎臟和肺等組織的(de)哺(bu)乳動物原代細胞。

7、RPMI-1640培養基

是在McCoy’5A的(de)(de)(de)基礎上進行(xing)改良研發(fa)出的(de)(de)(de)，最(zui)初用于人白(bai)血病(bing)細胞(bao)的(de)(de)(de)懸浮(fu)培養，后(hou)來發(fa)現(xian)也適用于HeLa、MCF-7、PC12、外(wai)周血單核細胞(bao)（B/T淋(lin)巴(ba)細胞(bao)）和星形細胞(bao)的(de)(de)(de)培養。RPMI 1640與其它(ta)培養基的(de)(de)(de)區(qu)別(bie)是含(han)(han)有(you)(you)還原型谷(gu)胱甘(gan)肽和高濃(nong)度維生(sheng)素(su)(su)。此(ci)外(wai)還含(han)(han)有(you)(you)含(han)(han)有(you)(you)MEM、DMEM中(zhong)不含(han)(han)的(de)(de)(de)生(sheng)物素(su)(su)、維生(sheng)素(su)(su)B12和對氨基苯。

8、L15培養基

L-15培養基的(de)配方(fang)中不含用于CO2平衡環境的(de)碳酸(suan)(suan)鹽(yan)緩(huan)沖(chong)系(xi)統(tong), 而是用磷(lin)酸(suan)(suan)鹽(yan)、L-精氨酸(suan)(suan)、L-組氨酸(suan)(suan)和(he) L-半胱氨酸(suan)(suan)作為(wei)緩(huan)沖(chong)劑。用半乳(ru)糖和(he)丙酮酸(suan)(suan)鈉(na)代替葡萄糖以防(fang)止乳(ru)酸(suan)(suan)的(de)形成。可以在無CO2培養箱中進行(xing)細(xi)胞培養，或者擰緊瓶蓋培養。

三、細胞培養基的品質要求

細(xi)胞(bao)培養(yang)基(ji)(ji)有(you)多(duo)種(zhong)，不同種(zhong)類的(de)細(xi)胞(bao)培養(yang)基(ji)(ji)用于(yu)培養(yang)不同細(xi)胞(bao)，一般來說，好的(de)細(xi)胞(bao)培養(yang)基(ji)(ji)，需要(yao)滿足以下幾點要(yao)求：

1、外觀

顏色、粉末細度須均勻。

2、溶解性

培(pei)養(yang)基(ji)完全溶解，可以(yi)避免培(pei)養(yang)基(ji)內營養(yang)成分的(de)流失。

3、pH值

哺乳類(lei)動物細胞(bao)生長需(xu)要合(he)適的酸堿度，同時pH值的測定(ding)也可以(yi)檢查培養基的批間差異。

4、水分

培(pei)養基(ji)的營(ying)養成(cheng)份很豐(feng)富，利于微生(sheng)物的滋(zi)長(chang)，因此水分的含量控(kong)制可以延長(chang)有效期。

5、冰點滲透壓

細胞(bao)必須生活在合適的滲(shen)透壓環境中，同(tong)時滲(shen)透壓值(zhi)的測(ce)定也可以檢(jian)查培養基的批間(jian)差(cha)異。

6、菌落總數

粉末培養基不是無菌制劑，培養基本身(shen)的(de)營養成分很豐(feng)富，容易滋生(sheng)微生(sheng)物，因此菌落的(de)控(kong)制(zhi)可以延長有效(xiao)期

7、細胞生長試驗

可檢查細胞(bao)(bao)培養基是(shi)否有促生(sheng)長(chang)的能力，以及是(shi)否有不利(li)細胞(bao)(bao)生(sheng)長(chang)的毒(du)素。

8、細菌內毒素

為滿(man)足生物(wu)制(zhi)品細菌內(nei)毒(du)素(su)的控(kong)制(zhi)要(yao)求(qiu)，作為生物(wu)制(zhi)品生產(chan)原(yuan)料(liao)的培養基同(tong)樣(yang)需要(yao)細菌內(nei)毒(du)素(su)控(kong)制(zhi)。

9、穩定性

確定(ding)產品(pin)的(de)儲(chu)存、運(yun)輸條件，產品(pin)的(de)保質期限。

10、一致性

驗證產品的均一性。