一、培養基滅菌的方法有哪些

培養基配制好后，必須立即滅菌，因為如果長時間不進行滅菌，培養料內的微生物就會在料內發酵生長，從而破壞培養基內的營養成分。一般來說，培養基的滅菌方(fang)法(fa)主要有以下六種：

1、干熱滅菌

多用(yong)于耐熱(re)器(qi)皿(min)滅(mie)菌，例如移液管(guan)和玻璃平皿(min)等、玻璃試管(guan)或者(zhe)金屬器(qi)皿(min)等等，可(ke)(ke)在170攝(she)氏度滅(mie)菌2-4h，也可(ke)(ke)在200所說(shuo)的滅(mie)菌0.5-1h。接(jie)(jie)種(zhong)環(huan)，接(jie)(jie)種(zhong)針等、涂布棒(bang)之類的實驗器(qi)材(cai)，可(ke)(ke)用(yong)酒精(jing)燈(deng)直接(jie)(jie)灼燒(shao)滅(mie)菌。

滅菌(jun)效果：滅菌(jun)效果好，能殺死一切微生物，芽(ya)孢也(ye)不例外。

注(zhu)意事項：干熱(re)滅(mie)菌(jun)(jun)過(guo)程的熱(re)穿透效果差(cha)且比較慢，因此(ci)在烘箱內進行干熱(re)滅(mie)菌(jun)(jun)時，不(bu)可擺放過(guo)滿；塑料(liao)、橡膠等不(bu)耐(nai)熱(re)材質(zhi)不(bu)可采(cai)用此(ci)方法滅(mie)菌(jun)(jun)；紙、棉的滅(mie)菌(jun)(jun)溫度不(bu)能(neng)超過(guo)170℃。

2、高壓蒸氣滅菌（濕熱滅菌）

通(tong)常用于(yu)實驗室大(da)部分培養(yang)基(ji)的滅菌，亦可(ke)用在玻璃器(qi)皿上(shang)、金(jin)屬器(qi)皿滅菌。通(tong)常采用121°C高壓滅菌15-20min或116°C高壓滅菌30min，滅菌參數(shu)可(ke)以依據培養(yang)基(ji)的不同而(er)調節。

滅菌效果：它能殺死一切(qie)微生物，芽(ya)孢也不例外。

注意事項：滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)時冷空(kong)氣(qi)沒(mei)有排出、培(pei)養基本身(shen)含有過多的芽孢、滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)方式(shi)不當(dang)、滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)鍋中的物品放置(zhi)過滿，均會造成滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)的失敗(bai)；在進行容器滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)時，容器不可(ke)密封，需與(yu)滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)鍋內空(kong)氣(qi)流通。

3、水浴-加熱-流動蒸汽滅菌

常用(yong)于含有不耐熱成分培養(yang)基(ji)的滅(mie)(mie)菌(jun)，如XLD瓊(qiong)脂等、亞硒酸鹽胱(guang)氨酸增菌(jun)液等、亞硫酸鉍瓊(qiong)脂等等。用(yong)流(liu)動(dong)(dong)蒸汽(qi)對培養(yang)基(ji)進(jin)行(xing)滅(mie)(mie)菌(jun)，若無對應流(liu)動(dong)(dong)蒸汽(qi)滅(mie)(mie)菌(jun)設(she)備(bei)，既可用(yong)水浴(yu)加熱，也(ye)可用(yong)“蒸”法殺菌(jun)。

滅菌(jun)(jun)效果(guo)：能殺(sha)死微生物(wu)的(de)(de)(de)繁殖體(ti)，無法殺(sha)死芽(ya)孢體(ti)，用這種方(fang)法殺(sha)菌(jun)(jun)的(de)(de)(de)培養基(ji)，一般抑菌(jun)(jun)性較(jiao)強，或者需(xu)要(yao)很短的(de)(de)(de)時間。

注意事項：不同(tong)培養基成分(fen)耐熱性(xing)有(you)差別，加(jia)熱時應注意，如(ru)將含(han)有(you)亞(ya)硒酸鹽(yan)的(de)培養基（SC、SBG等）加(jia)熱到90°C左(zuo)右，過高的(de)加(jia)熱可導致亞(ya)硒酸氫鈉的(de)分(fen)解，培養基變紅色，含(han)有(you)瓊(qiong)脂的(de)培養基可以加(jia)熱沸(fei)騰(teng)4-6次，也可以沸(fei)水浴后20-30min讓瓊(qiong)脂充分(fen)溶解。

4、過濾滅菌

多用(yong)(yong)于抗(kang)生(sheng)素(su)或含(han)有(you)不(bu)耐(nai)熱成分的(de)培養(yang)基滅菌(jun)(jun)，通常采(cai)用(yong)(yong)孔徑為0.22μm微孔濾(lv)膜或者濾(lv)芯過(guo)濾(lv)除菌(jun)(jun)。實(shi)驗室生(sheng)產無(wu)菌(jun)(jun)空氣(qi)時亦(yi)可使用(yong)(yong)此法，采(cai)用(yong)(yong)特殊濾(lv)芯或者濾(lv)網，過(guo)濾(lv)和除菌(jun)(jun)空氣(qi)。

滅菌(jun)效果：能去除(chu)常(chang)見的(de)細菌(jun)，真菌(jun)和(he)芽孢體，卻無法去除(chu)支原(yuan)體，病毒和(he)其他體積(ji)微小(xiao)的(de)生物。

注意事項(xiang)：使(shi)用前通常需按照(zhao)說明(ming)書使(shi)濾(lv)(lv)(lv)膜或(huo)濾(lv)(lv)(lv)芯浸濕；需要嚴格遵(zun)守(shou)過(guo)(guo)濾(lv)(lv)(lv)器或(huo)者濾(lv)(lv)(lv)膜的(de)(de)指示，速度(du)過(guo)(guo)快或(huo)者過(guo)(guo)濾(lv)(lv)(lv)體積過(guo)(guo)大都會(hui)造成濾(lv)(lv)(lv)膜的(de)(de)斷(duan)裂和除菌的(de)(de)失敗(bai)；黏度(du)較大或(huo)有沉淀的(de)(de)培養(yang)基不適合(he)用此方(fang)式除菌。

5、輻照滅菌

微(wei)波、紫(zi)外線(xian)、X射(she)(she)線(xian)、γ射(she)(she)線(xian)都可以進行滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)。γ射(she)(she)線(xian)具有很強(qiang)的穿透力，滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)效果良好，在食品(pin)中(zhong)得到了廣泛的應(ying)用(yong)(yong)(yong)、藥品(pin)行業的產(chan)品(pin)滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)，亦(yi)多用(yong)(yong)(yong)于微(wei)生(sheng)物(wu)培養(yang)基中(zhong)、實(shi)驗(yan)器材的滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)。某些特殊(shu)培養(yang)基或(huo)者添(tian)加劑成分，由于不宜采(cai)用(yong)(yong)(yong)高溫蒸汽滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)、過濾除(chu)菌(jun)(jun)等等，可用(yong)(yong)(yong)γ射(she)(she)線(xian)照射(she)(she)滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)。紫(zi)外線(xian)殺菌(jun)(jun)作用(yong)(yong)(yong)弱，很少有穿透力，一般只適(shi)用(yong)(yong)(yong)于實(shi)驗(yan)室內空氣或(huo)者物(wu)體(ti)表面的殺菌(jun)(jun)。

滅(mie)菌(jun)效果(guo)：γ射線具有(you)良好的滅(mie)菌(jun)和穿透力，能殺滅(mie)一(yi)切微生(sheng)物，芽孢體也不例外。

注意(yi)事項：并(bing)非(fei)所有(you)(you)培養基都(dou)可(ke)以(yi)采(cai)用γ射(she)線(xian)輻照滅菌方式，一(yi)(yi)些染料或不(bu)(bu)穩定成分經輻照后會發生(sheng)變(bian)化；γ射(she)線(xian)對瓊(qiong)脂有(you)(you)一(yi)(yi)定的(de)損傷，所以(yi)在固體培養基滅菌的(de)過程中(zhong)，輻照劑量及(ji)瓊(qiong)脂的(de)加入量均需適當調整；玻璃(li)制品、金屬制品一(yi)(yi)般不(bu)(bu)可(ke)采(cai)用此方法滅菌。

6、化學試劑滅菌

通(tong)常用環氧(yang)乙(yi)烷(wan)殺菌，及各種(zhong)消毒劑(ji)的(de)浸泡滅菌。環氧(yang)乙(yi)烷(wan)在(zai)平皿中曾經得到廣泛(fan)應用、對一次性醫療(liao)產品進行滅菌，卻因環境(jing)污染(ran)大，滅過菌后的(de)制品需要較長時間放置，讓環氧(yang)乙(yi)烷(wan)散去，目(mu)前已逐漸為其他滅菌方式(shi)所代替。

滅菌效(xiao)果：不同(tong)消毒(du)(du)劑(ji)的(de)殺滅效(xiao)果是有區別的(de)，粗略地(di)可以(yi)分為低效(xiao)消毒(du)(du)劑(ji)、中，高效(xiao)消毒(du)(du)劑(ji)。環氧乙烷是一種高效(xiao)消毒(du)(du)劑(ji)，能(neng)殺死含有芽孢等一切微生物。

注意(yi)事項：此類滅菌方式(shi)通常會(hui)有殘留(liu)，且對環境有污染，因此一般不適合用于(yu)直接進行微生物培養相關器皿滅菌；殺菌能力越(yue)強的消毒劑，刺(ci)激性、腐蝕性、毒性往往越(yue)大，使用時需注意(yi)防護。

二、培養基滅菌用哪種方法好

培養(yang)基(ji)的(de)(de)滅(mie)菌方(fang)法眾多，采(cai)用不適當的(de)(de)滅(mie)菌方(fang)法可能會(hui)破壞培養(yang)基(ji)的(de)(de)質量，會(hui)改變顏色、透明度降低、pH變化等，那么哪種方(fang)法比較好呢？

由(you)于不(bu)同(tong)微生物培(pei)養需要(yao)的(de)(de)培(pei)養基(ji)(ji)不(bu)同(tong)，滅菌方(fang)(fang)法的(de)(de)選擇方(fang)(fang)面也有所不(bu)同(tong)，一般來(lai)說，培(pei)養基(ji)(ji)的(de)(de)滅菌方(fang)(fang)法應按照說明書或(huo)驗證試驗參數來(lai)采(cai)(cai)用(yong)不(bu)同(tong)方(fang)(fang)法，常(chang)規的(de)(de)是采(cai)(cai)用(yong)濕熱(re)滅菌，特殊要(yao)求的(de)(de)采(cai)(cai)用(yong)薄膜(mo)過濾等。