一、培養基滅菌的方法有哪些

培養基配制好后，必須立即滅菌，因為如果長時間不進行滅菌，培養料內的微生物就會在料內發酵生長，從而破壞培養基內的營養成分。一般來說，培養基的滅菌方法主要有以(yi)下六種：

1、干熱滅菌

多用于(yu)耐熱器皿滅(mie)(mie)(mie)菌，例如移液管和玻璃(li)平皿等、玻璃(li)試(shi)管或者金(jin)屬器皿等等，可(ke)在170攝(she)氏度(du)滅(mie)(mie)(mie)菌2-4h，也(ye)可(ke)在200所說的(de)滅(mie)(mie)(mie)菌0.5-1h。接種(zhong)環(huan)，接種(zhong)針等、涂(tu)布(bu)棒之類(lei)的(de)實驗器材，可(ke)用酒精燈直接灼燒滅(mie)(mie)(mie)菌。

滅菌效(xiao)果(guo)：滅菌效(xiao)果(guo)好(hao)，能殺(sha)死(si)一切(qie)微(wei)生物，芽(ya)孢也不例(li)外。

注意事項：干(gan)熱滅菌過程的熱穿透效果差(cha)且比較慢，因此在烘(hong)箱內進行干(gan)熱滅菌時，不可擺(bai)放過滿；塑料(liao)、橡膠等不耐熱材質不可采用此方法滅菌；紙、棉的滅菌溫(wen)度不能超過170℃。

2、高壓蒸氣滅菌（濕熱滅菌）

通(tong)常用(yong)于實驗室(shi)大部(bu)分培養(yang)基的滅(mie)(mie)菌(jun)，亦可(ke)用(yong)在玻(bo)璃(li)器皿上、金屬器皿滅(mie)(mie)菌(jun)。通(tong)常采用(yong)121°C高壓滅(mie)(mie)菌(jun)15-20min或(huo)116°C高壓滅(mie)(mie)菌(jun)30min，滅(mie)(mie)菌(jun)參數可(ke)以依據培養(yang)基的不同而調節。

滅菌效果：它能殺(sha)死一切微生(sheng)物，芽孢也不例外。

注(zhu)意事項(xiang)：滅(mie)(mie)(mie)菌時(shi)冷空氣沒有(you)排出、培養(yang)基本身含有(you)過多的(de)芽孢、滅(mie)(mie)(mie)菌方式不(bu)(bu)當、滅(mie)(mie)(mie)菌鍋(guo)中的(de)物品放置過滿，均會造成滅(mie)(mie)(mie)菌的(de)失敗(bai)；在進(jin)行容器(qi)滅(mie)(mie)(mie)菌時(shi)，容器(qi)不(bu)(bu)可(ke)密封(feng)，需與滅(mie)(mie)(mie)菌鍋(guo)內(nei)空氣流通。

3、水浴-加熱-流動蒸汽滅菌

常用(yong)(yong)于含有不耐(nai)熱成(cheng)分(fen)培養(yang)基的滅菌，如XLD瓊脂等(deng)、亞硒酸鹽胱氨(an)酸增菌液等(deng)、亞硫酸鉍(bi)瓊脂等(deng)等(deng)。用(yong)(yong)流動蒸(zheng)汽對培養(yang)基進行(xing)滅菌，若(ruo)無對應流動蒸(zheng)汽滅菌設備，既可用(yong)(yong)水浴加熱，也可用(yong)(yong)“蒸(zheng)”法殺菌。

滅(mie)菌(jun)(jun)效(xiao)果：能殺死微生物的(de)繁殖體(ti)，無(wu)法(fa)殺死芽(ya)孢(bao)體(ti)，用這種(zhong)方法(fa)殺菌(jun)(jun)的(de)培(pei)養(yang)基，一般抑菌(jun)(jun)性較強，或者需(xu)要很短的(de)時間。

注意(yi)事項(xiang)：不同培(pei)養(yang)基(ji)成分(fen)耐熱(re)(re)性有差別，加(jia)熱(re)(re)時應注意(yi)，如將含(han)有亞硒酸鹽的培(pei)養(yang)基(ji)（SC、SBG等(deng)）加(jia)熱(re)(re)到90°C左右，過高的加(jia)熱(re)(re)可(ke)導致亞硒酸氫鈉的分(fen)解(jie)，培(pei)養(yang)基(ji)變(bian)紅色，含(han)有瓊脂的培(pei)養(yang)基(ji)可(ke)以加(jia)熱(re)(re)沸騰4-6次，也(ye)可(ke)以沸水浴后20-30min讓瓊脂充分(fen)溶解(jie)。

4、過濾滅菌

多用(yong)于抗生素(su)或(huo)(huo)含有(you)不耐熱成分的培(pei)養基滅菌，通常采用(yong)孔(kong)徑為0.22μm微(wei)孔(kong)濾(lv)膜或(huo)(huo)者濾(lv)芯過濾(lv)除(chu)菌。實驗室生產(chan)無菌空氣(qi)時亦可使(shi)用(yong)此(ci)法，采用(yong)特殊濾(lv)芯或(huo)(huo)者濾(lv)網，過濾(lv)和除(chu)菌空氣(qi)。

滅菌效果：能(neng)去除(chu)常見的細菌，真菌和(he)芽孢體，卻(que)無法去除(chu)支原體，病毒和(he)其(qi)他體積微(wei)小的生物(wu)。

注意事項：使(shi)用前通常需按照說(shuo)明書使(shi)濾(lv)膜或(huo)濾(lv)芯(xin)浸濕(shi)；需要嚴格(ge)遵守過(guo)濾(lv)器或(huo)者(zhe)濾(lv)膜的指(zhi)示，速度過(guo)快或(huo)者(zhe)過(guo)濾(lv)體積過(guo)大(da)都(dou)會(hui)造(zao)成濾(lv)膜的斷裂和除菌的失敗；黏(nian)度較大(da)或(huo)有沉淀的培養基不適合用此方(fang)式除菌。

5、輻照滅菌

微(wei)波、紫(zi)外線(xian)(xian)、X射(she)(she)線(xian)(xian)、γ射(she)(she)線(xian)(xian)都可(ke)以(yi)進行(xing)滅菌(jun)(jun)。γ射(she)(she)線(xian)(xian)具有很(hen)強的(de)穿(chuan)透(tou)力(li)，滅菌(jun)(jun)效(xiao)果(guo)良好，在食(shi)品中得(de)到了廣泛的(de)應用(yong)、藥品行(xing)業的(de)產品滅菌(jun)(jun)，亦(yi)多用(yong)于(yu)微(wei)生物(wu)培(pei)養基中、實(shi)驗(yan)器材的(de)滅菌(jun)(jun)。某些特(te)殊培(pei)養基或者添加劑成分，由于(yu)不(bu)宜采(cai)用(yong)高(gao)溫蒸汽滅菌(jun)(jun)、過濾除菌(jun)(jun)等(deng)等(deng)，可(ke)用(yong)γ射(she)(she)線(xian)(xian)照(zhao)射(she)(she)滅菌(jun)(jun)。紫(zi)外線(xian)(xian)殺菌(jun)(jun)作用(yong)弱(ruo)，很(hen)少有穿(chuan)透(tou)力(li)，一(yi)般只適用(yong)于(yu)實(shi)驗(yan)室內(nei)空氣(qi)或者物(wu)體表(biao)面的(de)殺菌(jun)(jun)。

滅(mie)菌效果：γ射線(xian)具有良好(hao)的滅(mie)菌和穿(chuan)透力，能殺滅(mie)一切微生物，芽孢體也(ye)不例(li)外。

注(zhu)意(yi)事項：并非所有(you)培養基(ji)都可以(yi)采用γ射(she)線輻照滅(mie)菌方(fang)式，一(yi)些染料或(huo)不(bu)穩定(ding)成(cheng)分經輻照后會發生(sheng)變化；γ射(she)線對瓊(qiong)脂有(you)一(yi)定(ding)的(de)損(sun)傷，所以(yi)在固體培養基(ji)滅(mie)菌的(de)過程中(zhong)，輻照劑(ji)量及瓊(qiong)脂的(de)加(jia)入(ru)量均需適(shi)當(dang)調(diao)整；玻璃制品、金屬制品一(yi)般不(bu)可采用此方(fang)法滅(mie)菌。

6、化學試劑滅菌

通常用(yong)環氧(yang)乙(yi)烷殺菌(jun)，及各(ge)種消毒(du)劑(ji)的(de)浸泡滅(mie)菌(jun)。環氧(yang)乙(yi)烷在平皿(min)中曾經得到廣泛應(ying)用(yong)、對一次性醫療(liao)產品進行滅(mie)菌(jun)，卻因(yin)環境污染大，滅(mie)過菌(jun)后(hou)的(de)制(zhi)品需(xu)要較長時間放置，讓環氧(yang)乙(yi)烷散去，目前已逐(zhu)漸為其他(ta)滅(mie)菌(jun)方(fang)式所代替。

滅菌效果：不(bu)同消(xiao)毒劑(ji)的殺滅效果是(shi)有區(qu)別的，粗略地可以分(fen)為低效消(xiao)毒劑(ji)、中(zhong)，高(gao)效消(xiao)毒劑(ji)。環氧乙(yi)烷是(shi)一(yi)種高(gao)效消(xiao)毒劑(ji)，能殺死(si)含(han)有芽孢(bao)等一(yi)切微生物。

注(zhu)意(yi)事項：此類(lei)滅菌方(fang)式通常會有殘(can)留(liu)，且(qie)對環境有污染，因此一般不(bu)適合用(yong)于直接(jie)進行(xing)微生物培養相關(guan)器皿滅菌；殺菌能力越(yue)強(qiang)的消(xiao)毒(du)(du)劑，刺激性、腐蝕性、毒(du)(du)性往往越(yue)大，使(shi)用(yong)時需注(zhu)意(yi)防護(hu)。

二、培養基滅菌用哪種方法好

培養基(ji)的(de)滅(mie)菌(jun)方(fang)法(fa)眾(zhong)多，采(cai)用(yong)不適當的(de)滅(mie)菌(jun)方(fang)法(fa)可(ke)能會破壞培養基(ji)的(de)質量，會改(gai)變顏色、透明度降低、pH變化等，那么哪種方(fang)法(fa)比較好呢？

由(you)于不同微生(sheng)物(wu)培(pei)養需要的培(pei)養基不同，滅(mie)菌(jun)方法(fa)的選(xuan)擇方面也(ye)有所不同，一(yi)般(ban)來說，培(pei)養基的滅(mie)菌(jun)方法(fa)應(ying)按照說明書或(huo)驗(yan)證試(shi)驗(yan)參(can)數來采用(yong)不同方法(fa)，常(chang)規的是(shi)采用(yong)濕熱(re)滅(mie)菌(jun)，特(te)殊要求的采用(yong)薄(bo)膜過濾等。