一、培養基的種類有哪些
培養(yang)基是(shi)指供給微生(sheng)物(wu)(wu)(wu)、植(zhi)物(wu)(wu)(wu)或(huo)動(dong)物(wu)(wu)(wu)(或(huo)組(zu)織)生(sheng)長(chang)繁殖的(de),由不(bu)(bu)同(tong)營養(yang)物(wu)(wu)(wu)質組(zu)合配制而成的(de)營養(yang)基質,它的(de)種類(lei)(lei)(lei)眾多,按照(zhao)不(bu)(bu)同(tong)的(de)分(fen)(fen)類(lei)(lei)(lei)方法可(ke)分(fen)(fen)為不(bu)(bu)同(tong)類(lei)(lei)(lei)型(xing),一般(ban)主要有化學分(fen)(fen)類(lei)(lei)(lei)、物(wu)(wu)(wu)理分(fen)(fen)類(lei)(lei)(lei)和(he)用途分(fen)(fen)類(lei)(lei)(lei)三種分(fen)(fen)類(lei)(lei)(lei)方法:
1、化學分類
(1)天然培養基:天然培(pei)養(yang)(yang)基(ji)是指一類(lei)利(li)用(yong)(yong)動物(wu)(wu)、植物(wu)(wu)或(huo)微生物(wu)(wu)體包(bao)(bao)括其提取物(wu)(wu)制成(cheng)的(de)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)。例如。牛肉膏蛋白胨培(pei)養(yang)(yang)基(ji)、麥芽汁(zhi)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)和(he)LB培(pei)養(yang)(yang)基(ji)等。常用(yong)(yong)的(de)天然有機營養(yang)(yang)物(wu)(wu)質(zhi)包(bao)(bao)括豆芽汁(zhi)、玉米粉、土壤(rang)浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁(zhi)等。天然培(pei)養(yang)(yang)基(ji)成(cheng)本(ben)較低,除在實驗室經(jing)常使用(yong)(yong)外,也適于用(yong)(yong)來進行工業上(shang)大規模的(de)微生物(wu)(wu)發酵生產。
(2)組合(he)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji):合(he)成(cheng)(cheng)(cheng)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)是根據天然培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)的成(cheng)(cheng)(cheng)分,用(yong)(yong)化學(xue)物質模擬合(he)成(cheng)(cheng)(cheng)、人工(gong)設計(ji)而配(pei)(pei)制的培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)。例如,高(gao)氏1號培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)和(he)查氏培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)等。合(he)成(cheng)(cheng)(cheng)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)有(you)一定(ding)的配(pei)(pei)方,配(pei)(pei)制合(he)成(cheng)(cheng)(cheng)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)時重復性強,但與(yu)天然培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)相比其(qi)(qi)成(cheng)(cheng)(cheng)本較高(gao),微(wei)生(sheng)物在(zai)其(qi)(qi)中生(sheng)長(chang)速度(du)較慢(man),一般適于在(zai)實驗(yan)室用(yong)(yong)來進行有(you)關微(wei)生(sheng)物營養(yang)(yang)(yang)(yang)需求、代謝(xie)、分類鑒定(ding)、生(sheng)物量測(ce)定(ding)、菌(jun)種(zhong)選育及(ji)遺傳分析等方面的研(yan)究工(gong)作。
(3)半組合(he)培(pei)養(yang)基(ji):指一類主(zhu)要以化學試劑配制,同(tong)時還加有某種或某些(xie)天然成分(fen)的培(pei)養(yang)基(ji)。例如,馬鈴薯蔗糖培(pei)養(yang)基(ji)。
2、物理分類
(1)液體(ti)培(pei)養(yang)基:80%~90%是水,其中配有(you)可(ke)溶性(xing)的(de)或不(bu)溶性(xing)的(de)營養(yang)成分(fen)的(de)培(pei)養(yang)基。
(2)固(gu)體培(pei)養基:一類配(pei)制成的固(gu)體狀態的基質。根(gen)據性(xing)質又分為固(gu)化培(pei)養基、非可逆性(xing)固(gu)化培(pei)養基、天然固(gu)態培(pei)養基、濾(lv)膜。
(3)半固(gu)(gu)體(ti)培養基(ji):指在液體(ti)培養基(ji)中加入少量的(de)凝固(gu)(gu)劑而配制成的(de)半固(gu)(gu)體(ti)狀態的(de)培養基(ji)。
(4)脫(tuo)水培養(yang)基:又稱預制干(gan)燥培養(yang)基,指含有除水分外的一(yi)切成分的商品培養(yang)基。
3、用途分類
(1)基(ji)(ji)(ji)礎(chu)培養(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji):大多數微生(sheng)物共同需要的(de)(de)營養(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)礎(chu)。某--微生(sheng)物如(ru)有特殊需要,可(ke)在此(ci)基(ji)(ji)(ji)礎(chu)上添加某種成(cheng)分即(ji)可(ke),如(ru)蛋白胨(dong)水、肉湯培養(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)、營養(yang)(yang)瓊脂等。1%蛋白胨(dong)水培養(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)便(bian)是一(yi)個最簡單的(de)(de)基(ji)(ji)(ji)礎(chu)培養(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji),該(gai)基(ji)(ji)(ji)礎(chu)培養(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)本身可(ke)供一(yi)般細菌(jun)增(zeng)(zeng)菌(jun)培養(yang)(yang)和(he)靛(dian)基(ji)(ji)(ji)質試驗用,若再(zai)加入指示劑和(he)糖(tang)類,則(ze)配成(cheng)糖(tang)發酵培養(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji),供糖(tang)發酵試驗用,成(cheng)為鑒別培養(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji);若在1%蛋白胨(dong)水中增(zeng)(zeng)加氯(lv)化(hua)鈉(na)用量并將pH提高到8.6左右,則(ze)變成(cheng)堿(jian)性蛋白胨(dong)水,用于霍亂弧菌(jun)的(de)(de)增(zeng)(zeng)菌(jun)培養(yang)(yang),成(cheng)為專用增(zeng)(zeng)菌(jun)培養(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)。
(2)營(ying)(ying)養培(pei)養基(ji)(ji):在(zai)基(ji)(ji)礎(chu)培(pei)養基(ji)(ji)中(zhong)添(tian)加一些特殊的(de)營(ying)(ying)養物質(zhi),如葡萄糖(tang)、血(xue)液、血(xue)清、酵(jiao)母浸膏、生(sheng)長因(yin)子等,可供營(ying)(ying)養要求較高的(de)細菌(jun)在(zai)其中(zhong)生(sheng)長。例如鏈球(qiu)菌(jun)、肺(fei)炎鏈球(qiu)菌(jun)等需在(zai)含(han)血(xue)液或血(xue)清的(de)培(pei)養基(ji)(ji)中(zhong)生(sheng)長;結核分枝桿菌(jun)的(de)培(pei)養基(ji)(ji)中(zhong)須添(tian)加雞蛋、馬鈴(ling)薯(shu)、甘油等。最(zui)常用(yong)的(de)營(ying)(ying)養培(pei)養基(ji)(ji)是(shi)血(xue)瓊脂平板。
(3)增菌培(pei)養(yang)基:一般為(wei)液(ye)體培(pei)養(yang)基,用(yong)于細菌的(de)增菌培(pei)養(yang),可(ke)泛用(yong),也可(ke)專用(yong),在專用(yong)增菌培(pei)養(yang)基中常含(han)有(you)目(mu)的(de)菌生長(chang)所需(xu)要的(de)特殊(shu)營養(yang)物質或生長(chang)因子。
(4)選擇(ze)性培養(yang)基:一(yi)類根據某微生物的特殊營養(yang)要求或其對某化學、物理因素的抗(kang)性而(er)設(she)計(ji)的培養(yang)基,具有使(shi)混合菌樣中(zhong)的劣勢菌變成優勢菌的功能,廣泛用(yong)于菌種篩(shai)選等(deng)領域。
(5)鑒別培養(yang)基:一類在成分中(zhong)加(jia)有(you)能(neng)與目的(de)(de)菌(jun)的(de)(de)無(wu)色代(dai)謝產物發生顯色反應的(de)(de)指示劑,從而達(da)到只須用(yong)肉眼辨別顏色就能(neng)方便(bian)的(de)(de)從近(jin)似(si)菌(jun)落(luo)中(zhong)找出(chu)目的(de)(de)菌(jun)菌(jun)落(luo)的(de)(de)培養(yang)基。例如,伊紅美藍乳糖培養(yang)基(EMB)。
(6)厭(yan)氧(yang)菌(jun)(jun)(jun)培養基(ji):供厭(yan)氧(yang)菌(jun)(jun)(jun)的(de)(de)分離(li)、培養和(he)(he)鑒別用的(de)(de)培養基(ji),稱為厭(yan)氧(yang)菌(jun)(jun)(jun)培養基(ji)。由于厭(yan)氧(yang)菌(jun)(jun)(jun)自(zi)(zi)身缺乏有氧(yang)代謝(xie)所必需的(de)(de)各種酶,如細(xi)胞色(se)素(su)和(he)(he)細(xi)胞色(se)素(su)氧(yang)化(hua)酶、過氧(yang)化(hua)氫酶和(he)(he)過氧(yang)化(hua)物(wu)酶、超氧(yang)化(hua)歧化(hua)酶,所以造成自(zi)(zi)身代謝(xie)的(de)(de)缺陷(xian),無法進行有氧(yang)代謝(xie),而無氧(yang)酵解所產生的(de)(de)能量又(you)不(bu)足(zu),因此厭(yan)氧(yang)菌(jun)(jun)(jun)在正常(chang)的(de)(de)大氣環境下不(bu)能生長和(he)(he)生存。為使(shi)厭(yan)氧(yang)菌(jun)(jun)(jun)能正常(chang)生長,必須(xu)制備(bei)營養成分豐富,氧(yang)化(hua)還(huan)原(yuan)電勢較低(di),具有特殊生長因子的(de)(de)專用培養基(ji)。
(7)細(xi)胞培(pei)養(yang)基:是指用于各種(zhong)目的(de)的(de)體(ti)外培(pei)養(yang)、保(bao)存、運輸活(huo)組織、器官及細(xi)胞的(de)液體(ti),實(shi)質為人(ren)工模擬體(ti)內(nei)生長的(de)營養(yang)環(huan)境,使細(xi)胞在此環(huan)境中有生長和(he)繁殖的(de)能力(li)。由于其成分數量(liang)明確并可(ke)通過調節某(mou)一(yi)種(zhong)成分來觀察(cha)被研(yan)(yan)究對象的(de)各種(zhong)生物學(xue)改變,被廣(guang)泛應用于細(xi)胞生物學(xue)科的(de)研(yan)(yan)究。
二、如何選擇合適種類的培養基
對于微生(sheng)物的(de)(de)培養,選擇合適的(de)(de)培養基是很重要的(de)(de),現在(zai)對培養基的(de)(de)選擇還沒有(you)(you)一個統(tong)一的(de)(de)標準,不過有(you)(you)幾點建議可供參(can)考(kao):
1、建立某種微生物(wu)所用的(de)培(pei)養(yang)基應(ying)該是培(pei)養(yang)這種微生物(wu)首選的(de)培(pei)養(yang)基。可以查閱參考文獻,或在(zai)購買微生物(wu)時(shi)咨詢。
2、其他實驗室慣用的培養基不妨一試,許(xu)多培(pei)養基可以適合多種微生(sheng)物。
3、根據微生物的特(te)點、實驗的需要(yao)來選擇培(pei)養基(ji)。如(ru)小鼠(shu)細(xi)胞(bao)株多選RPMI1640培(pei)養基(ji)。
4、用(yong)多種培(pei)養基培(pei)養目的(de)微生物,觀(guan)察其生長狀態,可以用(yong)生長曲(qu)線、集落(luo)形(xing)成率(lv)等(deng)指標判斷(duan),根據實驗結(jie)果選(xuan)擇最佳培(pei)養基,這是(shi)最客觀(guan)的(de)方(fang)法,但比較(jiao)繁瑣。