一、培養基的種類有哪些
培養(yang)基是(shi)指(zhi)供(gong)給微生物(wu)、植物(wu)或(huo)動物(wu)(或(huo)組織)生長繁殖的,由不(bu)同營養(yang)物(wu)質組合配制而成的營養(yang)基質,它的種類(lei)眾(zhong)多,按照不(bu)同的分(fen)(fen)類(lei)方(fang)法可分(fen)(fen)為(wei)不(bu)同類(lei)型,一般(ban)主要(yao)有化學分(fen)(fen)類(lei)、物(wu)理分(fen)(fen)類(lei)和用途分(fen)(fen)類(lei)三種分(fen)(fen)類(lei)方(fang)法:
1、化學分類
(1)天然培養基:天(tian)(tian)然培(pei)養(yang)(yang)基(ji)是指一(yi)類利(li)用(yong)動(dong)物(wu)(wu)(wu)(wu)、植(zhi)物(wu)(wu)(wu)(wu)或微生(sheng)物(wu)(wu)(wu)(wu)體包(bao)括(kuo)其提取物(wu)(wu)(wu)(wu)制(zhi)成的培(pei)養(yang)(yang)基(ji)。例(li)如。牛(niu)肉膏蛋白胨培(pei)養(yang)(yang)基(ji)、麥芽汁培(pei)養(yang)(yang)基(ji)和LB培(pei)養(yang)(yang)基(ji)等。常(chang)用(yong)的天(tian)(tian)然有機營養(yang)(yang)物(wu)(wu)(wu)(wu)質包(bao)括(kuo)豆(dou)芽汁、玉米(mi)粉、土壤浸液、麩皮(pi)、牛(niu)奶(nai)、血清(qing)、椰子(zi)汁等。天(tian)(tian)然培(pei)養(yang)(yang)基(ji)成本較(jiao)低,除在實驗室經常(chang)使(shi)用(yong)外,也(ye)適于(yu)用(yong)來(lai)進行工業上大規模(mo)的微生(sheng)物(wu)(wu)(wu)(wu)發(fa)酵生(sheng)產。
(2)組(zu)合(he)培(pei)養(yang)(yang)基(ji):合(he)成培(pei)養(yang)(yang)基(ji)是根據天(tian)然培(pei)養(yang)(yang)基(ji)的(de)(de)成分(fen)(fen),用化學物質模(mo)擬合(he)成、人(ren)工設計而配制(zhi)的(de)(de)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)。例如,高氏1號培(pei)養(yang)(yang)基(ji)和查(cha)氏培(pei)養(yang)(yang)基(ji)等(deng)。合(he)成培(pei)養(yang)(yang)基(ji)有(you)(you)一定的(de)(de)配方(fang),配制(zhi)合(he)成培(pei)養(yang)(yang)基(ji)時重復性強(qiang),但與天(tian)然培(pei)養(yang)(yang)基(ji)相比其(qi)成本較高,微(wei)生物在其(qi)中生長速度(du)較慢,一般(ban)適(shi)于在實驗室用來進(jin)行有(you)(you)關微(wei)生物營養(yang)(yang)需(xu)求、代(dai)謝(xie)、分(fen)(fen)類鑒定、生物量測定、菌種選育及遺傳(chuan)分(fen)(fen)析等(deng)方(fang)面的(de)(de)研究工作(zuo)。
(3)半組合培養(yang)基(ji):指一(yi)類(lei)主要(yao)以(yi)化學試劑配制,同時還加有某種或某些天然成分(fen)的培養(yang)基(ji)。例如,馬(ma)鈴(ling)薯蔗糖培養(yang)基(ji)。
2、物理分類
(1)液體培養基(ji):80%~90%是水,其中配(pei)有可溶性的或不溶性的營養成分的培養基(ji)。
(2)固(gu)(gu)體培養(yang)(yang)基:一類配制成的固(gu)(gu)體狀態的基質(zhi)。根據性質(zhi)又分為固(gu)(gu)化(hua)培養(yang)(yang)基、非可逆性固(gu)(gu)化(hua)培養(yang)(yang)基、天然固(gu)(gu)態培養(yang)(yang)基、濾膜(mo)。
(3)半固(gu)(gu)體(ti)培(pei)養基:指在液體(ti)培(pei)養基中加入(ru)少量的(de)凝固(gu)(gu)劑而配制成的(de)半固(gu)(gu)體(ti)狀態的(de)培(pei)養基。
(4)脫水培(pei)(pei)養基(ji):又稱預制干燥培(pei)(pei)養基(ji),指含(han)有除水分(fen)外的一切成分(fen)的商品培(pei)(pei)養基(ji)。
3、用途分類
(1)基(ji)(ji)(ji)礎(chu)(chu)(chu)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji):大多數(shu)微生物共同需(xu)要(yao)的(de)營養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)礎(chu)(chu)(chu)。某--微生物如有特殊需(xu)要(yao),可(ke)在此基(ji)(ji)(ji)礎(chu)(chu)(chu)上添加某種成分即可(ke),如蛋(dan)白(bai)胨水(shui)(shui)、肉(rou)湯培(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)、營養(yang)(yang)(yang)瓊脂等。1%蛋(dan)白(bai)胨水(shui)(shui)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)便(bian)是一(yi)個最簡(jian)單的(de)基(ji)(ji)(ji)礎(chu)(chu)(chu)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji),該(gai)基(ji)(ji)(ji)礎(chu)(chu)(chu)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)本身可(ke)供一(yi)般(ban)細菌增(zeng)(zeng)菌培(pei)養(yang)(yang)(yang)和靛基(ji)(ji)(ji)質試(shi)驗(yan)用(yong)(yong)(yong),若再加入指示劑和糖類,則配成糖發(fa)酵培(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji),供糖發(fa)酵試(shi)驗(yan)用(yong)(yong)(yong),成為鑒別培(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji);若在1%蛋(dan)白(bai)胨水(shui)(shui)中增(zeng)(zeng)加氯(lv)化鈉用(yong)(yong)(yong)量并(bing)將pH提高到8.6左右,則變(bian)成堿(jian)性蛋(dan)白(bai)胨水(shui)(shui),用(yong)(yong)(yong)于霍(huo)亂弧菌的(de)增(zeng)(zeng)菌培(pei)養(yang)(yang)(yang),成為專用(yong)(yong)(yong)增(zeng)(zeng)菌培(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)。
(2)營養(yang)培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji):在(zai)(zai)基(ji)礎(chu)培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)(zhong)添加一些特殊的(de)(de)(de)營養(yang)物質,如葡萄糖、血(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)液、血(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)清、酵母浸膏、生長(chang)因子等(deng),可供營養(yang)要求較高的(de)(de)(de)細(xi)菌在(zai)(zai)其中(zhong)(zhong)生長(chang)。例如鏈球菌、肺(fei)炎鏈球菌等(deng)需在(zai)(zai)含血(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)液或血(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)清的(de)(de)(de)培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)(zhong)生長(chang);結(jie)核(he)分(fen)枝桿(gan)菌的(de)(de)(de)培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)(zhong)須添加雞蛋、馬鈴薯、甘油等(deng)。最(zui)常用的(de)(de)(de)營養(yang)培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)是(shi)血(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)瓊脂(zhi)平板(ban)。
(3)增菌(jun)(jun)培養(yang)基(ji):一般為液體培養(yang)基(ji),用于(yu)細菌(jun)(jun)的(de)增菌(jun)(jun)培養(yang),可泛用,也(ye)可專(zhuan)用,在專(zhuan)用增菌(jun)(jun)培養(yang)基(ji)中常含(han)有目(mu)的(de)菌(jun)(jun)生(sheng)長所需要的(de)特殊營養(yang)物質或(huo)生(sheng)長因子。
(4)選(xuan)擇性(xing)培養(yang)基:一類(lei)根據某(mou)微生物的(de)(de)特殊營養(yang)要求或其對某(mou)化學、物理(li)因素的(de)(de)抗性(xing)而設計的(de)(de)培養(yang)基,具有使混合菌(jun)樣中的(de)(de)劣勢菌(jun)變成優(you)勢菌(jun)的(de)(de)功能(neng),廣泛(fan)用于菌(jun)種篩選(xuan)等領域。
(5)鑒別(bie)培養基:一類在成分中加有能(neng)與目的(de)菌(jun)的(de)無色代(dai)謝產物發生(sheng)顯色反(fan)應的(de)指示劑,從而達到只須用肉眼辨別(bie)顏(yan)色就能(neng)方(fang)便的(de)從近(jin)似菌(jun)落中找出目的(de)菌(jun)菌(jun)落的(de)培養基。例如,伊紅美藍乳(ru)糖培養基(EMB)。
(6)厭氧(yang)(yang)(yang)(yang)菌培(pei)(pei)養(yang)基(ji):供厭氧(yang)(yang)(yang)(yang)菌的(de)分離、培(pei)(pei)養(yang)和(he)鑒別用(yong)的(de)培(pei)(pei)養(yang)基(ji),稱為(wei)厭氧(yang)(yang)(yang)(yang)菌培(pei)(pei)養(yang)基(ji)。由于厭氧(yang)(yang)(yang)(yang)菌自(zi)身缺乏有氧(yang)(yang)(yang)(yang)代(dai)謝(xie)所必(bi)需的(de)各(ge)種酶(mei)(mei),如細胞色素和(he)細胞色素氧(yang)(yang)(yang)(yang)化酶(mei)(mei)、過氧(yang)(yang)(yang)(yang)化氫酶(mei)(mei)和(he)過氧(yang)(yang)(yang)(yang)化物酶(mei)(mei)、超氧(yang)(yang)(yang)(yang)化歧化酶(mei)(mei),所以造成自(zi)身代(dai)謝(xie)的(de)缺陷,無法進(jin)行(xing)有氧(yang)(yang)(yang)(yang)代(dai)謝(xie),而無氧(yang)(yang)(yang)(yang)酵解所產生(sheng)(sheng)的(de)能量又不足(zu),因(yin)此厭氧(yang)(yang)(yang)(yang)菌在(zai)正常的(de)大氣環境下不能生(sheng)(sheng)長和(he)生(sheng)(sheng)存。為(wei)使厭氧(yang)(yang)(yang)(yang)菌能正常生(sheng)(sheng)長,必(bi)須制備營養(yang)成分豐富,氧(yang)(yang)(yang)(yang)化還原電(dian)勢較低,具有特(te)殊生(sheng)(sheng)長因(yin)子的(de)專用(yong)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)。
(7)細(xi)胞培養(yang)基:是指用于各種(zhong)目的(de)的(de)體外(wai)培養(yang)、保存、運輸活(huo)組織、器官及(ji)細(xi)胞的(de)液體,實質為人工模擬體內生長的(de)營(ying)養(yang)環境(jing),使細(xi)胞在此環境(jing)中有生長和繁殖的(de)能力。由(you)于其成(cheng)分數量明確(que)并可通過調節(jie)某(mou)一種(zhong)成(cheng)分來(lai)觀察被(bei)研究(jiu)對象的(de)各種(zhong)生物學改變,被(bei)廣泛(fan)應用于細(xi)胞生物學科的(de)研究(jiu)。
二、如何選擇合適種類的培養基
對于微生(sheng)物的(de)(de)(de)培養(yang),選擇合適的(de)(de)(de)培養(yang)基(ji)(ji)是很重要的(de)(de)(de),現在對培養(yang)基(ji)(ji)的(de)(de)(de)選擇還沒有一個統一的(de)(de)(de)標準,不(bu)過有幾點建(jian)議可供參考:
1、建立(li)某種(zhong)微(wei)生物(wu)所用的培養基(ji)應該(gai)是培養這種(zhong)微(wei)生物(wu)首選的培養基(ji)。可(ke)以查閱參考(kao)文獻,或在購買微(wei)生物(wu)時咨詢。
2、其他實驗室慣用的培養基不妨一試(shi),許多(duo)培養基可以適合多(duo)種微生物。
3、根據微(wei)生物的特點、實(shi)驗的需要來選擇培養基(ji)。如(ru)小鼠細胞(bao)株多選RPMI1640培養基(ji)。
4、用(yong)多種培養基培養目(mu)的微(wei)生(sheng)物,觀察其生(sheng)長狀(zhuang)態,可(ke)以用(yong)生(sheng)長曲線、集落形(xing)成率(lv)等指標判斷(duan),根據實(shi)驗(yan)結果選擇最佳培養基,這是(shi)最客觀的方(fang)法,但比較繁瑣。