一、培養基的種類有哪些
培養基是指供給微生(sheng)(sheng)物(wu)、植物(wu)或動物(wu)(或組織)生(sheng)(sheng)長繁殖的(de),由不同營養物(wu)質組合配(pei)制(zhi)而成(cheng)的(de)營養基質,它(ta)的(de)種類(lei)(lei)(lei)眾(zhong)多,按照(zhao)不同的(de)分類(lei)(lei)(lei)方(fang)法(fa)可分為不同類(lei)(lei)(lei)型(xing),一般主(zhu)要有化學分類(lei)(lei)(lei)、物(wu)理分類(lei)(lei)(lei)和用途(tu)分類(lei)(lei)(lei)三(san)種分類(lei)(lei)(lei)方(fang)法(fa):
1、化學分類
(1)天然培養基:天然(ran)培養(yang)(yang)基是(shi)指一(yi)類利(li)用動物(wu)、植物(wu)或微生物(wu)體(ti)包(bao)括(kuo)其提(ti)取物(wu)制成的培養(yang)(yang)基。例如。牛肉膏蛋白胨(dong)培養(yang)(yang)基、麥芽汁培養(yang)(yang)基和LB培養(yang)(yang)基等(deng)。常用的天然(ran)有(you)機營養(yang)(yang)物(wu)質包(bao)括(kuo)豆芽汁、玉(yu)米粉、土壤浸(jin)液、麩皮、牛奶(nai)、血(xue)清、椰子汁等(deng)。天然(ran)培養(yang)(yang)基成本較低,除在實驗室經常使用外,也適于用來進行工業(ye)上大規模的微生物(wu)發酵生產。
(2)組合培養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji):合成(cheng)培養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)是根據天然培養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)的成(cheng)分,用化學物質模(mo)擬合成(cheng)、人工設計而配制的培養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)。例(li)如,高氏(shi)(shi)1號培養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)和查氏(shi)(shi)培養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)等(deng)。合成(cheng)培養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)有一定(ding)的配方(fang),配制合成(cheng)培養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)時重(zhong)復性(xing)強,但與天然培養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)相比(bi)其(qi)(qi)成(cheng)本(ben)較高,微生物在其(qi)(qi)中生長速度較慢,一般適于在實驗室用來進行有關微生物營養(yang)(yang)(yang)需求、代謝、分類鑒定(ding)、生物量測定(ding)、菌種選育(yu)及遺傳分析等(deng)方(fang)面的研(yan)究工作。
(3)半組合培養基(ji):指一類(lei)主要以化學試(shi)劑配制,同時還(huan)加有(you)某種或某些天然成分的培養基(ji)。例如,馬鈴薯蔗糖(tang)培養基(ji)。
2、物理分類
(1)液(ye)體培養基(ji):80%~90%是水(shui),其中(zhong)配有可溶性的或(huo)不溶性的營(ying)養成分的培養基(ji)。
(2)固(gu)體培養(yang)基(ji)(ji):一類配(pei)制成(cheng)的(de)固(gu)體狀態的(de)基(ji)(ji)質。根據性質又分為固(gu)化培養(yang)基(ji)(ji)、非(fei)可逆性固(gu)化培養(yang)基(ji)(ji)、天然固(gu)態培養(yang)基(ji)(ji)、濾膜。
(3)半(ban)固(gu)體(ti)培養基(ji):指(zhi)在液體(ti)培養基(ji)中(zhong)加(jia)入少量的凝固(gu)劑而配制成(cheng)的半(ban)固(gu)體(ti)狀態的培養基(ji)。
(4)脫(tuo)水培養(yang)基:又稱預制干燥培養(yang)基,指(zhi)含有除水分(fen)外的一切成(cheng)分(fen)的商(shang)品(pin)培養(yang)基。
3、用途分類
(1)基(ji)(ji)(ji)(ji)礎培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji):大多數微生(sheng)物(wu)共同需要的(de)(de)營養(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji)礎。某--微生(sheng)物(wu)如有特(te)殊需要,可在此基(ji)(ji)(ji)(ji)礎上添加某種成(cheng)分(fen)即可,如蛋(dan)白胨水、肉湯培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji)、營養(yang)瓊脂(zhi)等。1%蛋(dan)白胨水培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji)便是一個最簡單的(de)(de)基(ji)(ji)(ji)(ji)礎培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji),該基(ji)(ji)(ji)(ji)礎培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji)本(ben)身可供一般細菌(jun)增(zeng)菌(jun)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)和(he)靛基(ji)(ji)(ji)(ji)質試驗用(yong),若再(zai)加入指示劑和(he)糖(tang)類,則(ze)配成(cheng)糖(tang)發酵(jiao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji),供糖(tang)發酵(jiao)試驗用(yong),成(cheng)為(wei)鑒別(bie)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji);若在1%蛋(dan)白胨水中增(zeng)加氯化鈉(na)用(yong)量并將pH提高到8.6左右,則(ze)變成(cheng)堿性蛋(dan)白胨水,用(yong)于霍亂弧(hu)菌(jun)的(de)(de)增(zeng)菌(jun)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang),成(cheng)為(wei)專用(yong)增(zeng)菌(jun)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji)。
(2)營養(yang)培養(yang)基(ji)(ji):在基(ji)(ji)礎培養(yang)基(ji)(ji)中(zhong)(zhong)添(tian)加(jia)一些特殊(shu)的(de)營養(yang)物(wu)質(zhi),如葡萄(tao)糖、血(xue)液(ye)、血(xue)清(qing)(qing)、酵母(mu)浸膏、生(sheng)(sheng)長因子等(deng),可供營養(yang)要求(qiu)較高的(de)細菌(jun)(jun)在其中(zhong)(zhong)生(sheng)(sheng)長。例(li)如鏈球菌(jun)(jun)、肺炎鏈球菌(jun)(jun)等(deng)需在含(han)血(xue)液(ye)或(huo)血(xue)清(qing)(qing)的(de)培養(yang)基(ji)(ji)中(zhong)(zhong)生(sheng)(sheng)長;結(jie)核分枝桿菌(jun)(jun)的(de)培養(yang)基(ji)(ji)中(zhong)(zhong)須(xu)添(tian)加(jia)雞(ji)蛋(dan)、馬鈴薯、甘油等(deng)。最常用(yong)的(de)營養(yang)培養(yang)基(ji)(ji)是血(xue)瓊脂平(ping)板。
(3)增(zeng)菌(jun)(jun)(jun)培(pei)養基(ji):一般為液(ye)體培(pei)養基(ji),用(yong)(yong)于細(xi)菌(jun)(jun)(jun)的(de)增(zeng)菌(jun)(jun)(jun)培(pei)養,可泛(fan)用(yong)(yong),也(ye)可專用(yong)(yong),在專用(yong)(yong)增(zeng)菌(jun)(jun)(jun)培(pei)養基(ji)中(zhong)常(chang)含(han)有目的(de)菌(jun)(jun)(jun)生長所需要(yao)的(de)特殊營養物質(zhi)或生長因子。
(4)選(xuan)擇性培養基:一類根(gen)據某(mou)微(wei)生物的特殊營(ying)養要求或其對(dui)某(mou)化學、物理因素的抗性而設(she)計的培養基,具(ju)有(you)使混合菌樣中的劣勢(shi)菌變成(cheng)優勢(shi)菌的功能,廣泛用于(yu)菌種篩選(xuan)等領域。
(5)鑒別(bie)(bie)培養基(ji):一類在(zai)成分中加有(you)能與(yu)目的(de)菌的(de)無(wu)色代謝產物發生顯色反應的(de)指示劑,從(cong)(cong)而達到只須用肉(rou)眼辨別(bie)(bie)顏色就能方(fang)便(bian)的(de)從(cong)(cong)近似菌落中找出目的(de)菌菌落的(de)培養基(ji)。例如,伊紅美藍乳(ru)糖培養基(ji)(EMB)。
(6)厭(yan)(yan)(yan)氧(yang)(yang)(yang)(yang)菌培(pei)養(yang)(yang)(yang)基:供(gong)厭(yan)(yan)(yan)氧(yang)(yang)(yang)(yang)菌的(de)分(fen)(fen)離、培(pei)養(yang)(yang)(yang)和(he)(he)鑒別用(yong)的(de)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基,稱為(wei)厭(yan)(yan)(yan)氧(yang)(yang)(yang)(yang)菌培(pei)養(yang)(yang)(yang)基。由于厭(yan)(yan)(yan)氧(yang)(yang)(yang)(yang)菌自身缺乏有(you)氧(yang)(yang)(yang)(yang)代(dai)(dai)謝(xie)所(suo)(suo)必需的(de)各種酶(mei),如(ru)細(xi)胞色(se)(se)素和(he)(he)細(xi)胞色(se)(se)素氧(yang)(yang)(yang)(yang)化(hua)酶(mei)、過氧(yang)(yang)(yang)(yang)化(hua)氫(qing)酶(mei)和(he)(he)過氧(yang)(yang)(yang)(yang)化(hua)物酶(mei)、超氧(yang)(yang)(yang)(yang)化(hua)歧化(hua)酶(mei),所(suo)(suo)以(yi)造成自身代(dai)(dai)謝(xie)的(de)缺陷,無法進行(xing)有(you)氧(yang)(yang)(yang)(yang)代(dai)(dai)謝(xie),而無氧(yang)(yang)(yang)(yang)酵解所(suo)(suo)產生的(de)能(neng)量又不足,因此厭(yan)(yan)(yan)氧(yang)(yang)(yang)(yang)菌在(zai)正(zheng)(zheng)常(chang)的(de)大氣環境下不能(neng)生長和(he)(he)生存。為(wei)使厭(yan)(yan)(yan)氧(yang)(yang)(yang)(yang)菌能(neng)正(zheng)(zheng)常(chang)生長,必須制備(bei)營養(yang)(yang)(yang)成分(fen)(fen)豐(feng)富,氧(yang)(yang)(yang)(yang)化(hua)還原電勢較低(di),具有(you)特殊生長因子的(de)專用(yong)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基。
(7)細胞(bao)培養(yang)基:是指用于(yu)各(ge)種(zhong)(zhong)目的(de)(de)(de)的(de)(de)(de)體(ti)外培養(yang)、保存、運輸活組(zu)織、器官及細胞(bao)的(de)(de)(de)液(ye)體(ti),實(shi)質為人工模擬體(ti)內生長(chang)的(de)(de)(de)營養(yang)環境(jing)(jing),使(shi)細胞(bao)在此環境(jing)(jing)中有生長(chang)和繁殖(zhi)的(de)(de)(de)能(neng)力。由(you)于(yu)其成分數量(liang)明確并可(ke)通過調節某一種(zhong)(zhong)成分來觀察被研究(jiu)對象的(de)(de)(de)各(ge)種(zhong)(zhong)生物學改變,被廣泛應用于(yu)細胞(bao)生物學科的(de)(de)(de)研究(jiu)。
二、如何選擇合適種類的培養基
對(dui)于微生物(wu)的(de)(de)培養,選擇(ze)合適(shi)的(de)(de)培養基(ji)是很重要的(de)(de),現在(zai)對(dui)培養基(ji)的(de)(de)選擇(ze)還(huan)沒有(you)一(yi)個(ge)統一(yi)的(de)(de)標準,不過(guo)有(you)幾(ji)點(dian)建議可(ke)供(gong)參考:
1、建立某(mou)種(zhong)微生(sheng)物(wu)所用的培養基應該是培養這種(zhong)微生(sheng)物(wu)首選的培養基。可以查閱參考文獻,或在購買微生(sheng)物(wu)時咨詢。
2、其他實驗室慣用的培養基不妨一試,許多培養基可以適合多種微生(sheng)物。
3、根據微(wei)生物的特點、實驗(yan)的需要來選(xuan)擇(ze)培養(yang)基。如小(xiao)鼠細胞株多選(xuan)RPMI1640培養(yang)基。
4、用多種培(pei)養基培(pei)養目的(de)微生物,觀察其生長狀態,可以用生長曲線(xian)、集落形成率(lv)等(deng)指標判(pan)斷,根據(ju)實(shi)驗結果(guo)選擇最佳(jia)培(pei)養基,這是最客(ke)觀的(de)方法,但比較繁瑣(suo)。