一、培養基的種類有哪些
培(pei)養(yang)基是指供給微(wei)生物、植物或(huo)動物(或(huo)組織(zhi))生長繁(fan)殖的(de),由(you)不(bu)同營(ying)養(yang)物質組合配制而成的(de)營(ying)養(yang)基質,它的(de)種類(lei)(lei)眾(zhong)多,按照不(bu)同的(de)分(fen)(fen)類(lei)(lei)方(fang)法可分(fen)(fen)為不(bu)同類(lei)(lei)型,一般主要有化(hua)學分(fen)(fen)類(lei)(lei)、物理(li)分(fen)(fen)類(lei)(lei)和用途分(fen)(fen)類(lei)(lei)三種分(fen)(fen)類(lei)(lei)方(fang)法:
1、化學分類
(1)天然培養基:天然培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)是(shi)指一(yi)類利用(yong)動物(wu)(wu)、植物(wu)(wu)或微(wei)生(sheng)物(wu)(wu)體包括其提取物(wu)(wu)制成的(de)(de)培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)。例如。牛(niu)肉(rou)膏蛋(dan)白(bai)胨培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)、麥(mai)芽汁(zhi)培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)和(he)LB培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)等(deng)。常(chang)(chang)用(yong)的(de)(de)天然有機營養(yang)物(wu)(wu)質包括豆芽汁(zhi)、玉米粉、土(tu)壤浸液、麩皮(pi)、牛(niu)奶、血清、椰(ye)子汁(zhi)等(deng)。天然培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)成本較低(di),除在實驗室經常(chang)(chang)使用(yong)外,也適(shi)于用(yong)來進行(xing)工業上(shang)大規模(mo)的(de)(de)微(wei)生(sheng)物(wu)(wu)發(fa)酵生(sheng)產。
(2)組合(he)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji):合(he)成(cheng)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)是根據天(tian)然(ran)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)的(de)成(cheng)分,用化學物(wu)質模擬合(he)成(cheng)、人工設計(ji)而(er)配制的(de)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)。例如,高氏(shi)1號(hao)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)和查氏(shi)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)等。合(he)成(cheng)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)有(you)一定的(de)配方(fang),配制合(he)成(cheng)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)時(shi)重(zhong)復性強,但與天(tian)然(ran)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)相(xiang)比其(qi)成(cheng)本較高,微生物(wu)在其(qi)中生長速度較慢,一般適于在實驗室(shi)用來進行有(you)關(guan)微生物(wu)營養(yang)(yang)需求(qiu)、代謝、分類鑒定、生物(wu)量測定、菌種選育及遺傳(chuan)分析等方(fang)面的(de)研究工作。
(3)半組合培養基(ji):指(zhi)一類主要以化學試劑配制(zhi),同時還加(jia)有某種(zhong)或某些天然成分的培養基(ji)。例如,馬鈴薯蔗糖培養基(ji)。
2、物理分類
(1)液(ye)體培(pei)養基:80%~90%是水,其中配有可溶(rong)性(xing)的或不(bu)溶(rong)性(xing)的營養成分(fen)的培(pei)養基。
(2)固(gu)體培養(yang)基(ji):一類配制(zhi)成的固(gu)體狀態的基(ji)質。根(gen)據性(xing)質又分為固(gu)化培養(yang)基(ji)、非可逆性(xing)固(gu)化培養(yang)基(ji)、天然固(gu)態培養(yang)基(ji)、濾(lv)膜(mo)。
(3)半固(gu)體(ti)培(pei)養(yang)(yang)基(ji):指在液體(ti)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)中加入少量(liang)的(de)(de)凝固(gu)劑而(er)配制成的(de)(de)半固(gu)體(ti)狀態的(de)(de)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)。
(4)脫(tuo)水培(pei)養(yang)(yang)基:又(you)稱預制干燥(zao)培(pei)養(yang)(yang)基,指含有除水分(fen)外(wai)的(de)一切成分(fen)的(de)商品(pin)培(pei)養(yang)(yang)基。
3、用途分類
(1)基礎(chu)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基:大(da)多數(shu)微生物(wu)共(gong)同(tong)需要(yao)的營養(yang)(yang)(yang)基礎(chu)。某--微生物(wu)如有特殊需要(yao),可在(zai)此基礎(chu)上添加(jia)(jia)某種成(cheng)(cheng)分即(ji)可,如蛋白胨水、肉湯培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基、營養(yang)(yang)(yang)瓊脂等(deng)。1%蛋白胨水培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基便是一個(ge)最簡單(dan)的基礎(chu)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基,該基礎(chu)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基本身可供(gong)一般細菌(jun)(jun)增(zeng)菌(jun)(jun)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)和靛(dian)基質(zhi)試驗(yan)用,若(ruo)再加(jia)(jia)入指示劑和糖(tang)類,則配成(cheng)(cheng)糖(tang)發酵培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基,供(gong)糖(tang)發酵試驗(yan)用,成(cheng)(cheng)為鑒(jian)別培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基;若(ruo)在(zai)1%蛋白胨水中增(zeng)加(jia)(jia)氯化鈉用量(liang)并將(jiang)pH提高到8.6左右,則變(bian)成(cheng)(cheng)堿性蛋白胨水,用于(yu)霍(huo)亂弧菌(jun)(jun)的增(zeng)菌(jun)(jun)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang),成(cheng)(cheng)為專用增(zeng)菌(jun)(jun)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基。
(2)營(ying)養(yang)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji):在(zai)基(ji)(ji)(ji)(ji)礎培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji)中添加一些特殊的營(ying)養(yang)物質,如葡萄糖(tang)、血(xue)液、血(xue)清(qing)、酵母浸膏(gao)、生(sheng)長因子等(deng),可(ke)供營(ying)養(yang)要求較(jiao)高(gao)的細菌(jun)在(zai)其中生(sheng)長。例如鏈(lian)球菌(jun)、肺炎鏈(lian)球菌(jun)等(deng)需在(zai)含血(xue)液或血(xue)清(qing)的培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji)中生(sheng)長;結核分枝(zhi)桿菌(jun)的培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji)中須添加雞蛋、馬鈴(ling)薯、甘油(you)等(deng)。最常用的營(ying)養(yang)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji)是(shi)血(xue)瓊脂平(ping)板。
(3)增(zeng)菌(jun)培養基(ji)(ji):一般為液體培養基(ji)(ji),用于細(xi)菌(jun)的增(zeng)菌(jun)培養,可(ke)泛用,也可(ke)專(zhuan)用,在(zai)專(zhuan)用增(zeng)菌(jun)培養基(ji)(ji)中(zhong)常含(han)有(you)目的菌(jun)生(sheng)長所需要的特殊營養物質或(huo)生(sheng)長因(yin)子。
(4)選擇性培養(yang)基(ji):一類根據(ju)某(mou)微生物的特(te)殊(shu)營(ying)養(yang)要求或其對某(mou)化學(xue)、物理因素的抗性而設計的培養(yang)基(ji),具有(you)使混合菌(jun)樣中的劣勢菌(jun)變成優(you)勢菌(jun)的功能,廣泛(fan)用于菌(jun)種(zhong)篩選等(deng)領域。
(5)鑒別(bie)(bie)培養(yang)基(ji):一(yi)類在(zai)成分中加有(you)能(neng)與目的(de)菌(jun)的(de)無色代謝(xie)產物發生顯色反應的(de)指示(shi)劑,從而(er)達到只須用肉眼辨別(bie)(bie)顏色就(jiu)能(neng)方便的(de)從近(jin)似菌(jun)落中找出目的(de)菌(jun)菌(jun)落的(de)培養(yang)基(ji)。例(li)如(ru),伊紅(hong)美藍乳糖培養(yang)基(ji)(EMB)。
(6)厭氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)菌(jun)(jun)(jun)培養(yang)(yang)(yang)基(ji):供厭氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)菌(jun)(jun)(jun)的(de)(de)(de)分離、培養(yang)(yang)(yang)和(he)鑒別用(yong)的(de)(de)(de)培養(yang)(yang)(yang)基(ji),稱為厭氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)菌(jun)(jun)(jun)培養(yang)(yang)(yang)基(ji)。由于厭氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)菌(jun)(jun)(jun)自(zi)身(shen)缺(que)乏有氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)代謝(xie)所必需的(de)(de)(de)各種酶(mei),如細胞色素和(he)細胞色素氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)化(hua)(hua)酶(mei)、過氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)化(hua)(hua)氫酶(mei)和(he)過氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)化(hua)(hua)物酶(mei)、超氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)化(hua)(hua)歧化(hua)(hua)酶(mei),所以造成自(zi)身(shen)代謝(xie)的(de)(de)(de)缺(que)陷,無(wu)法進行有氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)代謝(xie),而無(wu)氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)酵解所產(chan)生的(de)(de)(de)能量又不(bu)足,因此(ci)厭氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)菌(jun)(jun)(jun)在(zai)正常的(de)(de)(de)大氣環境下不(bu)能生長(chang)和(he)生存。為使厭氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)菌(jun)(jun)(jun)能正常生長(chang),必須制備(bei)營養(yang)(yang)(yang)成分豐富,氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)化(hua)(hua)還原電(dian)勢較低(di),具(ju)有特殊生長(chang)因子的(de)(de)(de)專(zhuan)用(yong)培養(yang)(yang)(yang)基(ji)。
(7)細(xi)(xi)胞培(pei)(pei)養基:是指用于各種(zhong)(zhong)目的(de)(de)(de)(de)的(de)(de)(de)(de)體外培(pei)(pei)養、保(bao)存、運輸活(huo)組織、器官及細(xi)(xi)胞的(de)(de)(de)(de)液(ye)體,實質為人工模(mo)擬(ni)體內生(sheng)長的(de)(de)(de)(de)營(ying)養環境(jing),使(shi)細(xi)(xi)胞在此環境(jing)中有生(sheng)長和繁(fan)殖的(de)(de)(de)(de)能力(li)。由于其(qi)成分(fen)數量明(ming)確并可通(tong)過調節某一種(zhong)(zhong)成分(fen)來觀(guan)察被研究(jiu)對象的(de)(de)(de)(de)各種(zhong)(zhong)生(sheng)物學改變(bian),被廣泛應用于細(xi)(xi)胞生(sheng)物學科(ke)的(de)(de)(de)(de)研究(jiu)。
二、如何選擇合適種類的培養基
對于微生物的培養,選擇(ze)合適的培養基是很重要的,現在對培養基的選擇(ze)還(huan)沒(mei)有一個統一的標準(zhun),不(bu)過(guo)有幾點建議可供參考(kao):
1、建立某種微生物所(suo)用的培(pei)養(yang)基應該(gai)是培(pei)養(yang)這(zhe)種微生物首選的培(pei)養(yang)基。可以查閱參考文獻,或在(zai)購買微生物時咨詢。
2、其他實驗室慣用的培養基不妨(fang)一試,許(xu)多(duo)培養基可(ke)以適(shi)合多(duo)種微生物。
3、根據微(wei)生物的(de)特點、實驗的(de)需要來選擇培養(yang)基。如(ru)小鼠細胞(bao)株多選RPMI1640培養(yang)基。
4、用(yong)多種培養(yang)基培養(yang)目的微生物,觀察其生長(chang)狀態,可以用(yong)生長(chang)曲線、集(ji)落形成率等指標(biao)判斷,根據實驗結(jie)果選擇(ze)最佳培養(yang)基,這是最客觀的方(fang)法,但比較繁瑣(suo)。