一、培養基配好后為什么必須立即滅菌

培養基配好后，必(bi)須要馬上進行滅菌(jun)處理(li)，這是為(wei)什么呢？

之所以培(pei)養(yang)基(ji)(ji)配好就要滅(mie)菌(jun)，是因為未滅(mie)菌(jun)的(de)(de)(de)剛剛配置(zhi)好的(de)(de)(de)培(pei)養(yang)基(ji)(ji)是暴露在(zai)環境(jing)(jing)中的(de)(de)(de)，可能染上環境(jing)(jing)中的(de)(de)(de)大(da)量(liang)(liang)細菌(jun)，而培(pei)養(yang)基(ji)(ji)也是這(zhe)些細菌(jun)生長所需(xu)要的(de)(de)(de)良好條件(jian)；如果(guo)不及時滅(mie)菌(jun)，會導致在(zai)環境(jing)(jing)中染上的(de)(de)(de)細菌(jun)大(da)量(liang)(liang)繁殖，消耗(hao)培(pei)養(yang)基(ji)(ji)中的(de)(de)(de)營養(yang)成分，甚至產生有害(hai)物質，造(zao)成培(pei)養(yang)基(ji)(ji)滅(mie)菌(jun)后也不能使用。

二、如何檢查滅菌后的培養基是否為無菌

滅(mie)菌后，如(ru)果要求(qiu)比較(jiao)嚴格，必(bi)須是無菌培養基的話，可以進行無菌試驗，具(ju)體(ti)的方(fang)法是：

將(jiang)已經滅完(wan)菌的(de)(de)菌棒放到25－28℃的(de)(de)恒溫(wen)環境中避光培養3天后，拿出來檢(jian)查看(kan)袋內有(you)沒有(you)雜菌滋生的(de)(de)痕跡，看(kan)菌袋內有(you)沒沒有(you)導(dao)演變色、出現斑點等(deng)情況的(de)(de)發生，如果有(you)就(jiu)證明滅菌不徹底。

三、影響培養基滅菌效果的因素有哪些

培養基(ji)(ji)滅(mie)菌(jun)要求要徹(che)底，不徹(che)底的(de)話可能影響微生物的(de)培養，一般影響培養基(ji)(ji)滅(mie)菌(jun)效果的(de)因素(su)主(zhu)要有：

1、營養成分的保持

濕(shi)熱(re)(re)滅菌時，微生物被(bei)(bei)殺死的(de)(de)同時，培(pei)養(yang)基(ji)(ji)的(de)(de)營養(yang)成分(fen)也遭到了一(yi)定(ding)的(de)(de)破(po)壞(huai)，特(te)別是氨(an)基(ji)(ji)酸和(he)維生素(su)。如在121℃，僅20min，就有(you)(you)59%的(de)(de)賴氨(an)酸和(he)精氨(an)酸及其他堿(jian)性(xing)氨(an)基(ji)(ji)酸被(bei)(bei)破(po)壞(huai)，蛋氨(an)酸和(he)色(se)氨(an)酸也有(you)(you)相當(dang)數量被(bei)(bei)破(po)壞(huai)。在熱(re)(re)的(de)(de)作用(yong)下(xia)某些營養(yang)成分(fen)還(huan)可能因(yin)受(shou)熱(re)(re)而相互之間發生反(fan)應，造成培(pei)養(yang)基(ji)(ji)中原有(you)(you)營養(yang)成分(fen)的(de)(de)數量變化，因(yin)而影響培(pei)養(yang)基(ji)(ji)質(zhi)量。

2、微生物的耐熱性

細(xi)菌芽孢的(de)(de)熱(re)阻(zu)較(jiao)大，滅菌所需要的(de)(de)時間(jian)取決于(yu)把(ba)細(xi)菌芽孢減少(shao)到所規定數目的(de)(de)時間(jian)。

3、pH值

pH值對微生物的耐熱性影響很大。pH值介于6.0~8.0時，微生物最不易死亡。pH<6.0時，微生物比較容易死亡，此時H+很容易滲入微生物的細胞，從而改變細胞的生理反應，促使其死亡。所以培養基的pH越低，所需的時間也越短。

4、培養基成分

油脂(zhi)、糖(tang)(tang)類及蛋(dan)白(bai)質等組成的(de)高(gao)濃度有機(ji)物(wu)會包于細(xi)胞的(de)周(zhou)圍形式一(yi)(yi)層薄膜、影響熱(re)(re)的(de)傳導。而(er)高(gao)濃度的(de)鹽類、色素則(ze)削弱其耐熱(re)(re)性(xing)，滅菌(jun)較(jiao)易。例如：大(da)腸桿菌(jun)在水中(zhong)(zhong)加熱(re)(re)至60-65℃便(bian)死亡(wang)，在10%糖(tang)(tang)液中(zhong)(zhong)需(xu)70℃加熱(re)(re)4-6分鐘才死亡(wang)，在30%糖(tang)(tang)液中(zhong)(zhong)需(xu)30分鐘才死亡(wang)。一(yi)(yi)般糖(tang)(tang)類含量較(jiao)多(duo)的(de)時候最好選用115℃，30分鐘；一(yi)(yi)般的(de)培養基(ji)可選擇121℃20分鐘。

5、泡沫

泡沫中的(de)空氣形(xing)成隔熱層，使熱量難以滲透進去，殺死其中的(de)雜(za)菌。

6、顆粒

顆(ke)粒(li)(li)小，容易滅(mie)菌，顆(ke)粒(li)(li)大，則難滅(mie)菌。對于含有(you)少量(liang)較大顆(ke)粒(li)(li)及粗(cu)纖維的(de)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)，可用(yong)粗(cu)濾的(de)方法（不應影響(xiang)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)質量(liang)）予(yu)以除去，培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)結(jie)塊會造成培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)滅(mie)菌的(de)不徹底(di)。

8、滅菌鍋內空氣是否排凈

這(zhe)個是影響滅菌是溫度和壓力(li)比例(li)關系(xi)的要點，同(tong)樣達到了(le)相同(tong)的壓力(li)的情況下，如果空氣未能排凈，也就是說不是純蒸汽滅菌，此時的溫度不一定能達到目的要求，會嚴重影響滅菌效果。