一、培養基配好后為什么必須立即滅菌

培養基配(pei)好后(hou)，必須要馬(ma)上進行滅菌處理，這是(shi)為什(shen)么呢？

之所以培養基配(pei)好(hao)就要滅(mie)菌(jun)(jun)，是因為未滅(mie)菌(jun)(jun)的剛(gang)(gang)剛(gang)(gang)配(pei)置好(hao)的培養基是暴露在環境中的，可能染上環境中的大(da)量細菌(jun)(jun)，而培養基也是這些細菌(jun)(jun)生長所需要的良好(hao)條(tiao)件；如(ru)果不及時滅(mie)菌(jun)(jun)，會導(dao)致在環境中染上的細菌(jun)(jun)大(da)量繁殖(zhi)，消耗(hao)培養基中的營(ying)養成分，甚至產生有害物(wu)質，造成培養基滅(mie)菌(jun)(jun)后也不能使(shi)用。

二、如何檢查滅菌后的培養基是否為無菌

滅菌后，如果要求比較嚴格(ge)，必須是(shi)無菌培養基的(de)話(hua)，可以進(jin)行無菌試驗(yan)，具體的(de)方法是(shi)：

將已經滅完(wan)菌(jun)的菌(jun)棒放到25－28℃的恒溫環(huan)境中(zhong)避(bi)光(guang)培養(yang)3天后，拿出來檢查看袋內(nei)有(you)沒有(you)雜菌(jun)滋(zi)生(sheng)的痕跡，看菌(jun)袋內(nei)有(you)沒沒有(you)導演變色、出現斑點等情況的發(fa)生(sheng)，如(ru)果(guo)有(you)就證明(ming)滅菌(jun)不(bu)徹底。

三、影響培養基滅菌效果的因素有哪些

培養(yang)基滅(mie)菌(jun)要求要徹底(di)，不(bu)徹底(di)的(de)話可(ke)能影響微(wei)生物的(de)培養(yang)，一般影響培養(yang)基滅(mie)菌(jun)效果的(de)因(yin)素主要有(you)：

1、營養成分的保持

濕熱滅(mie)菌時，微生(sheng)物被殺死的(de)同時，培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)的(de)營養(yang)成(cheng)分也遭到了一定(ding)的(de)破壞(huai)，特別是氨(an)基(ji)(ji)酸和(he)維生(sheng)素(su)。如在(zai)121℃，僅20min，就(jiu)有59%的(de)賴氨(an)酸和(he)精氨(an)酸及其他堿性氨(an)基(ji)(ji)酸被破壞(huai)，蛋氨(an)酸和(he)色氨(an)酸也有相當數(shu)量被破壞(huai)。在(zai)熱的(de)作(zuo)用下某些(xie)營養(yang)成(cheng)分還可能(neng)因受熱而相互之間發生(sheng)反(fan)應(ying)，造(zao)成(cheng)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)中原有營養(yang)成(cheng)分的(de)數(shu)量變化，因而影響培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)質量。

2、微生物的耐熱性

細(xi)菌芽孢(bao)的(de)熱阻較大，滅菌所(suo)需要(yao)的(de)時間(jian)取(qu)決于把細(xi)菌芽孢(bao)減(jian)少到所(suo)規(gui)定(ding)數目(mu)的(de)時間(jian)。

3、pH值

pH值對微生物的耐熱性影響很大。pH值介于6.0~8.0時，微生物最不易死亡。pH<6.0時，微生物比較容易死亡，此時H+很容易滲入微生物的細胞，從而改變細胞的生理反應，促使其死亡。所以培養基的pH越低，所需的時間也越短。

4、培養基成分

油(you)脂、糖類(lei)及(ji)蛋白質等(deng)組(zu)成的(de)高濃度有(you)機(ji)物會包于細胞的(de)周圍(wei)形式一層薄膜、影響熱的(de)傳導(dao)。而高濃度的(de)鹽(yan)類(lei)、色素則削弱其耐熱性，滅菌較易。例如：大腸桿菌在水中加熱至60-65℃便死(si)亡，在10%糖液(ye)中需70℃加熱4-6分鐘(zhong)(zhong)才死(si)亡，在30%糖液(ye)中需30分鐘(zhong)(zhong)才死(si)亡。一般糖類(lei)含量較多的(de)時候最好選(xuan)用115℃，30分鐘(zhong)(zhong)；一般的(de)培養基可選(xuan)擇121℃20分鐘(zhong)(zhong)。

5、泡沫

泡沫中(zhong)的空氣形成隔熱層，使(shi)熱量難以滲透進去，殺(sha)死其中(zhong)的雜菌。

6、顆粒

顆(ke)粒小，容易(yi)滅菌，顆(ke)粒大，則難滅菌。對于含有(you)少量較大顆(ke)粒及(ji)粗纖維的(de)培養基，可用粗濾的(de)方法（不(bu)(bu)應影響(xiang)培養基質量）予以除去(qu)，培養基結塊會造(zao)成培養基滅菌的(de)不(bu)(bu)徹底(di)。

8、滅菌鍋內空氣是否排凈

這個是(shi)影響滅(mie)菌是(shi)溫度和(he)壓力比(bi)例(li)關(guan)系的(de)要點，同樣達到了相同的(de)壓力的(de)情況下，如(ru)果空氣未能(neng)排(pai)凈，也(ye)就是(shi)說不(bu)是(shi)純蒸汽滅(mie)菌，此(ci)時的(de)溫度不(bu)一定能(neng)達到目的(de)要求(qiu)，會嚴重影響滅(mie)菌效果。