一、培養基配好后為什么必須立即滅菌

培(pei)養基配好后，必須要馬上(shang)進行滅菌處理，這(zhe)是為(wei)什么呢？

之所以培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)配好就要滅菌(jun)(jun)，是(shi)因為(wei)未滅菌(jun)(jun)的剛剛配置好的培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)是(shi)暴露(lu)在環(huan)(huan)境中(zhong)的，可能染上環(huan)(huan)境中(zhong)的大(da)(da)量細菌(jun)(jun)，而培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)也是(shi)這(zhe)些細菌(jun)(jun)生長(chang)所需(xu)要的良好條件；如果不及時滅菌(jun)(jun)，會導(dao)致在環(huan)(huan)境中(zhong)染上的細菌(jun)(jun)大(da)(da)量繁殖(zhi)，消(xiao)耗培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)中(zhong)的營養(yang)(yang)成分，甚至產(chan)生有害物質，造成培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)滅菌(jun)(jun)后也不能使用。

二、如何檢查滅菌后的培養基是否為無菌

滅菌后(hou)，如果要求比較嚴(yan)格，必須(xu)是無(wu)菌培養(yang)基(ji)的(de)話，可(ke)以進(jin)行無(wu)菌試(shi)驗，具(ju)體的(de)方(fang)法是：

將已經滅完菌的(de)菌棒放到25－28℃的(de)恒溫環境中避光培養3天后(hou)，拿出來(lai)檢查看(kan)袋(dai)內有沒(mei)有雜菌滋生(sheng)的(de)痕跡，看(kan)菌袋(dai)內有沒(mei)沒(mei)有導演(yan)變色、出現(xian)斑(ban)點等情況的(de)發生(sheng)，如(ru)果有就證明(ming)滅菌不徹底。

三、影響培養基滅菌效果的因素有哪些

培養基(ji)滅菌要求要徹底，不徹底的(de)話(hua)可能(neng)影響(xiang)微生物的(de)培養，一般影響(xiang)培養基(ji)滅菌效果的(de)因素主要有：

1、營養成分的保持

濕(shi)熱(re)滅(mie)菌時，微生物被殺死的(de)(de)同時，培(pei)養基(ji)的(de)(de)營(ying)養成分也遭到了一定的(de)(de)破(po)壞，特別是氨(an)(an)基(ji)酸(suan)和維生素。如在121℃，僅20min，就有59%的(de)(de)賴氨(an)(an)酸(suan)和精氨(an)(an)酸(suan)及其(qi)他堿性氨(an)(an)基(ji)酸(suan)被破(po)壞，蛋氨(an)(an)酸(suan)和色氨(an)(an)酸(suan)也有相當數(shu)量被破(po)壞。在熱(re)的(de)(de)作用下某些(xie)營(ying)養成分還可能因受熱(re)而(er)(er)相互之間發生反應，造成培(pei)養基(ji)中原有營(ying)養成分的(de)(de)數(shu)量變化，因而(er)(er)影響培(pei)養基(ji)質量。

2、微生物的耐熱性

細菌芽孢的熱阻(zu)較大，滅菌所需要的時間(jian)取決于(yu)把細菌芽孢減少到(dao)所規定(ding)數目的時間(jian)。

3、pH值

pH值對微生物的耐熱性影響很大。pH值介于6.0~8.0時，微生物最不易死亡。pH<6.0時，微生物比較容易死亡，此時H+很容易滲入微生物的細胞，從而改變細胞的生理反應，促使其死亡。所以培養基的pH越低，所需的時間也越短。

4、培養基成分

油脂、糖(tang)(tang)(tang)類及蛋白質等組成的高(gao)濃度有(you)機物會包于細(xi)胞的周圍形(xing)式一(yi)層薄膜、影響熱(re)的傳導。而高(gao)濃度的鹽類、色素則削弱(ruo)其(qi)耐熱(re)性，滅菌較易。例如：大腸桿菌在水中加(jia)熱(re)至(zhi)60-65℃便死(si)亡，在10%糖(tang)(tang)(tang)液(ye)中需70℃加(jia)熱(re)4-6分鐘(zhong)(zhong)才死(si)亡，在30%糖(tang)(tang)(tang)液(ye)中需30分鐘(zhong)(zhong)才死(si)亡。一(yi)般糖(tang)(tang)(tang)類含量(liang)較多的時候最好(hao)選用115℃，30分鐘(zhong)(zhong)；一(yi)般的培(pei)養基可(ke)選擇121℃20分鐘(zhong)(zhong)。

5、泡沫

泡沫(mo)中(zhong)的(de)空氣形(xing)成隔熱(re)層，使熱(re)量難以滲(shen)透(tou)進去，殺死其(qi)中(zhong)的(de)雜(za)菌。

6、顆粒

顆(ke)粒(li)小，容(rong)易(yi)滅菌(jun)，顆(ke)粒(li)大，則難滅菌(jun)。對(dui)于含有少量較大顆(ke)粒(li)及粗纖(xian)維的(de)培(pei)養基，可用粗濾的(de)方(fang)法（不(bu)應影響培(pei)養基質量）予以(yi)除去，培(pei)養基結(jie)塊(kuai)會造成(cheng)培(pei)養基滅菌(jun)的(de)不(bu)徹底。

8、滅菌鍋內空氣是否排凈

這個是影(ying)響滅菌(jun)(jun)是溫度(du)和壓(ya)力(li)比例關系的(de)要點，同樣達(da)到了相同的(de)壓(ya)力(li)的(de)情況下(xia)，如果空氣未能排凈，也就是說不是純蒸(zheng)汽滅菌(jun)(jun)，此時的(de)溫度(du)不一定能達(da)到目的(de)要求(qiu)，會嚴重影(ying)響滅菌(jun)(jun)效果。