一、培養基配好后為什么必須立即滅菌

培養(yang)基配好后，必須要(yao)馬上(shang)進行滅菌(jun)處理(li)，這是為(wei)什(shen)么呢(ni)？

之所以培(pei)養(yang)(yang)基(ji)配好就要滅菌，是因為未滅菌的(de)剛剛配置好的(de)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)是暴露在環(huan)境(jing)中(zhong)的(de)，可能(neng)(neng)染(ran)上環(huan)境(jing)中(zhong)的(de)大量細(xi)菌，而培(pei)養(yang)(yang)基(ji)也是這些細(xi)菌生長所需要的(de)良(liang)好條件；如(ru)果不及時滅菌，會導致在環(huan)境(jing)中(zhong)染(ran)上的(de)細(xi)菌大量繁殖，消(xiao)耗培(pei)養(yang)(yang)基(ji)中(zhong)的(de)營養(yang)(yang)成分(fen)，甚至產生有害物質，造成培(pei)養(yang)(yang)基(ji)滅菌后也不能(neng)(neng)使用。

二、如何檢查滅菌后的培養基是否為無菌

滅菌(jun)(jun)后，如果(guo)要求比(bi)較嚴格，必須(xu)是(shi)無菌(jun)(jun)培養基的話，可以進行無菌(jun)(jun)試驗，具體(ti)的方法是(shi)：

將已經滅完菌(jun)(jun)(jun)的菌(jun)(jun)(jun)棒放到25－28℃的恒(heng)溫環境中避(bi)光培養(yang)3天后(hou)，拿出來檢查看(kan)(kan)袋內(nei)有沒(mei)有雜菌(jun)(jun)(jun)滋生的痕跡，看(kan)(kan)菌(jun)(jun)(jun)袋內(nei)有沒(mei)沒(mei)有導(dao)演變色、出現斑點等情(qing)況的發生，如(ru)果有就證明(ming)滅菌(jun)(jun)(jun)不徹底。

三、影響培養基滅菌效果的因素有哪些

培(pei)養基(ji)滅菌要求要徹(che)底(di)(di)，不徹(che)底(di)(di)的話可(ke)能影響微生物的培(pei)養，一般(ban)影響培(pei)養基(ji)滅菌效(xiao)果的因(yin)素(su)主(zhu)要有(you)：

1、營養成分的保持

濕(shi)熱(re)滅菌時，微生(sheng)物被殺死的(de)(de)同(tong)時，培養基(ji)的(de)(de)營養成(cheng)(cheng)分也(ye)(ye)遭到了一定的(de)(de)破(po)壞，特別是(shi)氨(an)基(ji)酸和(he)維生(sheng)素。如在(zai)121℃，僅20min，就有(you)59%的(de)(de)賴氨(an)酸和(he)精氨(an)酸及(ji)其他堿(jian)性氨(an)基(ji)酸被破(po)壞，蛋氨(an)酸和(he)色氨(an)酸也(ye)(ye)有(you)相當數(shu)(shu)量被破(po)壞。在(zai)熱(re)的(de)(de)作用下某些(xie)營養成(cheng)(cheng)分還(huan)可(ke)能因(yin)受熱(re)而(er)相互之(zhi)間發生(sheng)反應(ying)，造成(cheng)(cheng)培養基(ji)中原有(you)營養成(cheng)(cheng)分的(de)(de)數(shu)(shu)量變化，因(yin)而(er)影響培養基(ji)質量。

2、微生物的耐熱性

細菌芽孢的(de)熱阻較大，滅菌所(suo)需(xu)要(yao)的(de)時(shi)間(jian)取(qu)決(jue)于把細菌芽孢減(jian)少到所(suo)規定數目的(de)時(shi)間(jian)。

3、pH值

pH值對微生物的耐熱性影響很大。pH值介于6.0~8.0時，微生物最不易死亡。pH<6.0時，微生物比較容易死亡，此時H+很容易滲入微生物的細胞，從而改變細胞的生理反應，促使其死亡。所以培養基的pH越低，所需的時間也越短。

4、培養基成分

油脂(zhi)、糖類及蛋白質等(deng)組(zu)成的(de)(de)高濃(nong)度有(you)機物會(hui)包于細胞的(de)(de)周(zhou)圍(wei)形式一層(ceng)薄膜、影響(xiang)熱的(de)(de)傳導。而高濃(nong)度的(de)(de)鹽類、色素則削弱其耐熱性，滅菌(jun)較(jiao)易(yi)。例如：大腸桿菌(jun)在水中(zhong)加熱至60-65℃便死(si)亡，在10%糖液中(zhong)需70℃加熱4-6分(fen)(fen)鐘(zhong)才死(si)亡，在30%糖液中(zhong)需30分(fen)(fen)鐘(zhong)才死(si)亡。一般(ban)糖類含量(liang)較(jiao)多的(de)(de)時候最好選用115℃，30分(fen)(fen)鐘(zhong)；一般(ban)的(de)(de)培養基可選擇121℃20分(fen)(fen)鐘(zhong)。

5、泡沫

泡沫中的(de)空(kong)氣(qi)形成隔熱(re)層，使熱(re)量難以滲透(tou)進去，殺(sha)死其中的(de)雜菌(jun)。

6、顆粒

顆粒小，容易(yi)滅菌，顆粒大，則難滅菌。對于含有少量較大顆粒及粗纖(xian)維(wei)的培養(yang)(yang)基(ji)，可用(yong)粗濾的方法（不應影(ying)響培養(yang)(yang)基(ji)質量）予以除去，培養(yang)(yang)基(ji)結塊會(hui)造(zao)成培養(yang)(yang)基(ji)滅菌的不徹底(di)。

8、滅菌鍋內空氣是否排凈

這個是(shi)影響(xiang)滅(mie)菌是(shi)溫(wen)度和壓力比例關系的(de)要點，同樣達(da)到了相(xiang)同的(de)壓力的(de)情況下，如果空氣未(wei)能排凈，也就是(shi)說不是(shi)純蒸汽滅(mie)菌，此時的(de)溫(wen)度不一定能達(da)到目的(de)要求，會嚴重(zhong)影響(xiang)滅(mie)菌效果。