【基因檢測方法比較】基因檢測方法有哪些 基因檢測技術原理

1、第一代測序

1.1 Sanger測序采用的是直接測序法

1977年(nian)，Frederick Sanger等發明了雙脫氧鏈末端終止法，這一技術隨后成為最為常用的基因測序技術。2001年，Allan Maxam和Walter Gibert發明(ming)了Sanger測序法，并在(zai)此(ci)后的(de)10年里成為基(ji)因檢測的金標準。其(qi)基(ji)本原理即(ji)雙(shuang)脫氧核苷三磷酸(dideoxyribonucleoside triphosphate，ddNTP)缺(que)乏(fa)PCR延伸所(suo)需的(de)3'-OH，因此每當DNA鏈加入分子ddNTP，延伸便終止。每(mei)一次DNA測(ce)序(xu)是(shi)由(you)4個(ge)獨立(li)的反應組成(cheng)，將模板、引物和4種含(han)有(you)不同的放(fang)射性同位素標(biao)記的核苷酸(suan)的ddNTP分(fen)別(bie)與DNA聚合酶混(hun)合形成(cheng)長短不一的片段，大量起始點(dian)相同、終止(zhi)點(dian)不同的DNA片段存在于反應體系中，具有單個堿基差別的DNA序列可以被聚丙烯酰胺變性凝膠電(dian)泳分離(li)出來，得到放射性同(tong)位素自顯(xian)影條帶。依(yi)據(ju)電(dian)泳條帶讀(du)取DNA雙鏈的堿基序(xu)列。

人(ren)類基因組的(de)測序正是基于該技術完成的(de)。Sanger測(ce)序這種直接測(ce)序方(fang)法具(ju)有高(gao)(gao)度的(de)準確性和簡單、快捷等(deng)特(te)點(dian)。目前，依然對(dui)于一些臨(lin)床(chuang)上(shang)小樣本(ben)遺傳(chuan)疾病基因的(de)鑒定(ding)具(ju)有很高(gao)(gao)的(de)實用(yong)價值。例如，臨(lin)床(chuang)上(shang)采用(yong)Sanger直接測序FGFR 2基因證實(shi)單基因Apert綜(zong)合征和直接測序TCOF1基因(yin)可以檢出多(duo)達90%的與Treacher Collins綜合征相(xiang)關的突變。值(zhi)得注意的是，Sanger測序是針(zhen)對已知(zhi)致病基因的突(tu)變(bian)位點設計(ji)引物，進行PCR直(zhi)接擴增測序。單個(ge)突變點(dian)的擴增包括該(gai)位(wei)點(dian)在內的外顯子片段即可，不必將該(gai)點(dian)所(suo)在基因的全(quan)部(bu)外顯子都擴增。

因(yin)此，應明確定位(wei)要擴(kuo)增的位(wei)點(dian)所在(zai)的基(ji)因(yin)外顯子和該(gai)點(dian)的具體位(wei)置(zhi)，設計包括該(gai)點(dian)在(zai)內的上(shang)下游150~200 bp的外(wai)(wai)顯子片(pian)段引物。此外(wai)(wai)，盡(jin)管有NGS的(de)出現(xian)，但Sanger測序對(dui)于有致病基因(yin)位點(dian)明確(que)并且數量有限的(de)(de)單基因(yin)遺(yi)傳疾病的(de)(de)致病基因(yin)的(de)(de)檢測是非常經濟和高效的(de)(de)。到(dao)目前為止(zhi)，Sanger測(ce)序仍然是(shi)(shi)作為基(ji)因檢測(ce)的金(jin)標準，也是(shi)(shi)NGS基因檢測(ce)后進(jin)行家系(xi)內(nei)和(he)正常(chang)對(dui)照組驗證的(de)主要手段。

值得注意的是，Sanger測(ce)序目(mu)的(de)(de)是(shi)尋找與疾病有(you)關的(de)(de)特定的(de)(de)基因突變。對于沒有(you)明確候選基因或候選基因數量(liang)較多的(de)(de)大樣本病例篩查是(shi)難以完(wan)成的(de)(de)，此類測(ce)序研(yan)究還要依靠具有(you)高通量(liang)測(ce)序能力的(de)(de)NGS。雖(sui)然Sanger測(ce)序(xu)(xu)具有高度的分析(xi)準確(que)性(xing)，但(dan)其準確(que)性(xing)還取決于測(ce)序(xu)(xu)儀器以(yi)及測(ce)序(xu)(xu)條(tiao)件的設(she)定。另外(wai)，Sanger測序不(bu)能檢測出大(da)片段缺失或拷貝數(shu)變異等基因(yin)(yin)突變的(de)類型，因(yin)(yin)此對于一(yi)些與此相關的(de)遺傳性疾(ji)病還不(bu)能做出基因(yin)(yin)學診斷。

1.2連鎖分析采用的是間接測序法

在NGS出現之前，國(guo)際(ji)通用的(de)疾病基(ji)(ji)因(yin)(yin)定位(wei)克(ke)(ke)隆策略是(shi)建(jian)立在(zai)(zai)大規模(mo)全基(ji)(ji)因(yin)(yin)掃描和連鎖分析基(ji)(ji)礎(chu)上(shang)(shang)的(de)位(wei)置候選基(ji)(ji)因(yin)(yin)克(ke)(ke)隆。人類的(de)染色體成對(dui)出現，一條來(lai)自(zi)(zi)父親，一條來(lai)自(zi)(zi)母親，每(mei)一對(dui)染色體在(zai)(zai)同樣的(de)位(wei)置上(shang)(shang)擁有相同的(de)基(ji)(ji)因(yin)(yin)，但是(shi)其(qi)序(xu)列并(bing)不完全相同，被(bei)稱為父系和母系等(deng)位(wei)基(ji)(ji)因(yin)(yin)。

遺傳(chuan)標(biao)記(ji)是指在(zai)人群中表(biao)現出多態現象的DNA序(xu)列(lie)，可追蹤染(ran)(ran)色體、染(ran)(ran)色體某一(yi)(yi)節段或某個(ge)(ge)基因座在家系中傳(chuan)(chuan)遞的任何(he)一(yi)(yi)種遺傳(chuan)(chuan)特(te)性(xing)(xing)。它存(cun)在于每一(yi)(yi)個(ge)(ge)人(ren)，但大(da)小和(he)序(xu)列(lie)有差別，具有可遺傳(chuan)(chuan)性(xing)(xing)和(he)可識(shi)別性(xing)(xing)。目前采用第(di)二代遺傳(chuan)(chuan)標記(ji)，即重復序(xu)列(lie)多態性(xing)(xing)，特(te)別是短(duan)串聯重復序(xu)列(lie)，又稱微衛星(xing)標記(ji)。

連(lian)鎖(suo)分析是(shi)(shi)以連(lian)鎖(suo)這種遺傳(chuan)現象為基(ji)(ji)(ji)礎(chu)，研究致病基(ji)(ji)(ji)因(yin)與遺傳(chuan)性標記之間關系的(de)(de)方法。如果控(kong)制某(mou)一表型性狀的(de)(de)基(ji)(ji)(ji)因(yin)附近存(cun)在遺傳(chuan)標記，那么利用某(mou)個(ge)遺傳(chuan)標記與某(mou)個(ge)擬定(ding)位的(de)(de)基(ji)(ji)(ji)因(yin)之間是(shi)(shi)否(fou)存(cun)在連(lian)鎖(suo)關系，以及連(lian)鎖(suo)的(de)(de)緊密(mi)程(cheng)度就能(neng)將該基(ji)(ji)(ji)因(yin)定(ding)位到(dao)染色體某(mou)一位置上(shang)。1986年(nian)Morton等提出優勢對數(shu)記分法(log odds score method，LOD)，主要檢(jian)測(ce)兩基因以某一重(zhong)組率連鎖時的似然性(xing)。LOD值為正，支持連鎖；LOD值為(wei)負，則否定連鎖。通過計算家系(xi)中的微衛星標記與致病位點之間的LOD值，可以初步估算二者(zhe)間的(de)遺傳距離及連鎖程(cheng)度，從(cong)而(er)確定(ding)該基(ji)(ji)因(yin)在染色(se)(se)體上的(de)粗(cu)略位(wei)置(zhi)。然后利用該區域的(de)染色(se)(se)體基(ji)(ji)因(yin)圖譜(pu)，分析定(ding)位(wei)區域內所有基(ji)(ji)因(yin)的(de)功(gong)能(neng)與表達(da)，選(xuan)(xuan)擇合(he)適的(de)候選(xuan)(xuan)基(ji)(ji)因(yin)進行突變檢測，最(zui)終將致病基(ji)(ji)因(yin)定(ding)位(wei)或(huo)克隆。

然而(er)，采用連鎖分析(xi)進行基因(yin)檢測存在很(hen)大(da)的(de)局限性。不但所(suo)需遺(yi)傳樣本量較(jiao)大(da)，一(yi)般要求提供三代及(ji)以上遺(yi)傳家(jia)系患者血樣，而(er)且數據量大(da)、處理復(fu)雜、產出(chu)速度較(jiao)慢(man)、定位不夠精確(一般只能定位在染色(se)體(ti)某一區間(jian))，這就使(shi)(shi)得研(yan)究(jiu)工作(zuo)繁重(zhong)和定位基因的(de)時間周(zhou)期特(te)別長。目前，連鎖分析采(cai)用的(de)單(dan)核苷酸多(duo)肽性(xing)(xing)和短串聯重(zhong)復序列還在使(shi)(shi)用，但經典(dian)的(de)間接測(ce)序方(fang)法(fa)，如單(dan)鏈構象多(duo)肽性(xing)(xing)、變性(xing)(xing)梯(ti)度凝膠(jiao)電泳和異源雙(shuang)鏈分析在美國已(yi)被淘(tao)汰，而在發(fa)展中國家作(zuo)為研(yan)究(jiu)手段還在有限使(shi)(shi)用。

2、新一代測序(NGS)

主要包括全基因組(zu)重測序(whole-genomesequencing，WGS)、全(quan)外(wai)顯(xian)子組測序(whole-exomesequencing，WES)和目標區域(yu)測(ce)序(Targeted regionssequencing，TRS)，它們同(tong)屬于新一代(dai)測序技術(shu)。總體而言，NGS技術具有通(tong)量(liang)大(da)、時間短、精確度高和(he)(he)信息量(liang)豐(feng)富等優點(dian)，使得(de)遺(yi)傳(chuan)學者可以(yi)在(zai)短時間內對感興趣的(de)基因(yin)進行精確定(ding)位。但這些不(bu)同的(de)測序技術在(zai)測序范圍(wei)、數(shu)據分析(xi)量(liang)以(yi)及測序費用和(he)(he)時間等方面又有很(hen)大(da)差別，如果選(xuan)擇適合的(de)方法(fa)，對于臨床診斷和(he)(he)科學研究將(jiang)起到(dao)事半(ban)功(gong)倍的(de)作用。

2.1目標區域測序目前常用的是基因芯片技術

其測序原理是基(ji)于DNA雜交原(yuan)理，利(li)用目標基(ji)因組區(qu)域定制的探針與基(ji)因組DNA進行芯片(pian)雜交或(huo)溶液雜交，將目標基因(yin)區域DNA富集，再(zai)通過NGS技術進(jin)行測序。其測序過程是通(tong)過把數以萬計的cDNA或寡聚核苷(gan)酸(suan)置(zhi)于芯片(pian)(pian)上制成列陣，將芯片(pian)(pian)上固定(ding)好的(de)(de)已知序(xu)(xu)(xu)(xu)列的(de)(de)核苷(gan)酸(suan)探針與溶(rong)液中(zhong)含有熒光標記的(de)(de)相(xiang)應核酸(suan)序(xu)(xu)(xu)(xu)列進行互補配對，根據測(ce)序(xu)(xu)(xu)(xu)儀所顯示強熒光的(de)(de)位置(zhi)和強度，獲取每組點陣列信息(xi)，再利(li)用生物(wu)信息(xi)學算(suan)法確定(ding)目的(de)(de)靶核苷(gan)酸(suan)的(de)(de)序(xu)(xu)(xu)(xu)列組成。測(ce)序(xu)(xu)(xu)(xu)所選(xuan)定(ding)的(de)(de)目標區域可(ke)以是連續的(de)(de)DNA序列，也(ye)可以是(shi)分(fen)布在(zai)同一個染(ran)色體(ti)不(bu)同區域或不(bu)同染(ran)色體(ti)上(shang)的片段(duan)。目標區域測序技術，對于以往通過連鎖(suo)分(fen)析將基因突變鎖(suo)定在(zai)染(ran)色體(ti)某一片段(duan)區域內，但無(wu)法找出突變是(shi)一個非常好的進一步檢測手段(duan)。2010年，Nicholas等使用基因分型(xing)芯片聯合(he)連鎖分析技術，成(cheng)功發現頭小畸形的新基因WDR62，文章發表在《NatGenet》雜志。類(lei)似的研究在家族性胰腺癌中確(que)定(ding)8個候(hou)選變異位點和(he)在(zai)家(jia)族性(xing)滲(shen)出性(xing)玻璃(li)體(ti)視(shi)網膜病(bing)變發現易感基因TSPAN12。

基(ji)(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)(yin)(yin)芯(xin)片(pian)測(ce)序(xu)技術可以(yi)將經過(guo)連鎖分析(xi)鎖定(ding)了目(mu)標(biao)范圍或經過(guo)全基(ji)(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)(yin)(yin)組(zu)篩(shai)選的(de)(de)特定(ding)基(ji)(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)(yin)(yin)或區域(yu)進行更深一層的(de)(de)研究(jiu)，是解決連鎖分析(xi)無法(fa)發現致病基(ji)(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)(yin)(yin)的(de)(de)有(you)效(xiao)手(shou)段(duan)。基(ji)(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)(yin)(yin)芯(xin)片(pian)技術對于已知基(ji)(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)(yin)(yin)突變的(de)(de)篩(shai)查具有(you)明顯(xian)優(you)勢(shi)，可以(yi)快速、全面地檢測(ce)出目(mu)標(biao)基(ji)(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)(yin)(yin)突變。同時，由于目(mu)標(biao)區域(yu)受到(dao)了限制，測(ce)序(xu)范圍大幅度減少，測(ce)序(xu)時間和費(fei)用(yong)相應降低(di)。但基(ji)(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)(yin)(yin)芯(xin)片(pian)檢測(ce)所需要的(de)(de)DNA的(de)量要大，由于已(yi)提取(qu)的(de)DNA存在降解的(de)(de)風(feng)險，用于(yu)(yu)基因芯(xin)片研究的(de)(de)血(xue)標本(ben)最好是冰凍的(de)(de)全血(xue)，這樣可(ke)以使用于(yu)(yu)檢測DNA的量有(you)充分保證(zheng)。

2.2全外顯子組測序(WES)

外(wai)顯子組(zu)是單個個體的基因(yin)組(zu)DNA上所有(you)蛋白質(zhi)編碼序列(lie)的(de)總合。人類外顯子組序列(lie)約占(zhan)人類全部基因組序列(lie)的(de)1%，但大約(yue)包含85%的致病突變(bian)。WES是利用序(xu)列捕獲(huo)技術將全外顯子區域DNA捕捉并(bing)富集后進行高通量(liang)測序的基(ji)因分析(xi)方法。采用的技術平臺主要是羅氏公(gong)司(si)的SeqCap EZ全外顯子捕獲系統，Illumina公司的Solexa技術和Agilent公(gong)司的SureSelect外(wai)顯子靶向序列富集系統(tong)。其(qi)捕獲的目標區在(zai)34~62 M之間，不(bu)僅(jin)包括編(bian)碼(ma)區同(tong)時也加入了部(bu)分非編(bian)碼(ma)區。NGS的測序過程主(zhu)要(yao)包括DNA測序文庫(ku)的制備、錨定橋接、PCR擴增、單堿基(ji)(ji)延伸測序和數據分析。研究(jiu)者根據測序儀捕(bu)獲到在測序過程(cheng)中(zhong)摻入有不同(tong)熒光標記(ji)堿基(ji)(ji)片段，經計算機將(jiang)熒光信號轉化成不同(tong)顏色的測序峰圖和堿基(ji)(ji)序列。基(ji)(ji)因測序結果與(yu)NCBI的SNP數據(ju)庫(ku)、千(qian)人(ren)基因組數據(ju)庫(ku)等國際權威數據(ju)庫(ku)比對(dui)，最終(zhong)確定是否為突(tu)變(bian)基因。

自NGS技術(shu)問(wen)世以來(lai)，利用(yong)WES在(zai)臨床疾(ji)(ji)病致病基因(yin)(yin)的(de)鑒定研究中(zhong)(zhong)取(qu)得(de)前所未有的(de)成果。這些成果不(bu)僅(jin)集中(zhong)(zhong)在(zai)單基因(yin)(yin)遺傳疾(ji)(ji)病，還在(zai)多基因(yin)(yin)影響的(de)復雜(za)疾(ji)(ji)病中(zhong)(zhong)獲得(de)大(da)量相關(guan)基因(yin)(yin)的(de)發(fa)現。在(zai)單基因(yin)(yin)遺傳性疾(ji)(ji)病中(zhong)(zhong)，如視網膜(mo)色素(su)變(bian)性、終端(duan)骨發(fa)育不(bu)良等發(fa)現新基因(yin)(yin)或已知(zhi)基因(yin)(yin)新突變(bian)。在(zai)一(yi)些罕見的(de)疾(ji)(ji)病中(zhong)(zhong)，如Kabuki綜(zong)合征、家(jia)族性混合型低脂血(xue)癥和脊髓小(xiao)腦共濟失(shi)調癥等疾病(bing)中(zhong)發現新的致(zhi)病(bing)基(ji)因。同時，在小(xiao)細(xi)胞肺癌(ai)、慢(man)性淋巴細(xi)胞性白血(xue)病(bing)等腫(zhong)瘤研究和諸如肥胖癥、腦皮質(zhi)發育(yu)不良等復雜疾病(bing)的研究中(zhong)也取(qu)得豐碩成果(guo)。

WES技(ji)(ji)術在(zai)篩(shai)查范圍和檢出率等方面較其他測(ce)序(xu)技(ji)(ji)術具(ju)有明顯的(de)優(you)勢(shi)。例如，對于采(cai)用Sanger測(ce)序和(he)基因(yin)芯(xin)片測(ce)序不能篩(shai)查(cha)出(chu)基因(yin)的樣本，可以采(cai)用WES來進一步基因篩查鑒(jian)定。應用WES技術能夠(gou)獲(huo)得較傳統Sanger等方法(fa)對(dui)編碼區測序更深的(de)覆蓋度和更準確的(de)數據。由于(yu)信息量的(de)大幅度增加，WES可以獲得更(geng)多個(ge)體(ti)的編(bian)碼區信息，因(yin)此成為檢(jian)測致病基因(yin)和易感基因(yin)位(wei)點的有效(xiao)手(shou)段。與連鎖分析定(ding)位(wei)方(fang)法比較，WES對家系(xi)的要求并不(bu)十分嚴格，在單基因遺傳病同(tong)一家系(xi)中有2~3個患者和1個正(zheng)常人即可進行致病基因的(de)(de)鑒定研究，而不(bu)需要(yao)連續三(san)代的(de)(de)遺傳家系。由(you)于(yu)不(bu)需要(yao)嚴格的(de)(de)三(san)代以上的(de)(de)遺傳家系，WES使以前不能(neng)進行(xing)研究(jiu)(jiu)的家系(xi)成為可(ke)能(neng)。不僅對于單基因遺傳病是(shi)一個很好的研究(jiu)(jiu)手段(duan)，對于許多常見(jian)病，如腫瘤、糖尿病等疾病也可(ke)進行(xing)大規模比較(jiao)研究(jiu)(jiu)。

2.3全基因組重測序(WGS)

WGS是對(dui)(dui)已知基(ji)因組(zu)序(xu)列的(de)物(wu)種(zhong)進行不同個體的(de)全基(ji)因組(zu)的(de)測序(xu)，經過數據分(fen)析后對(dui)(dui)序(xu)列進行拼接(jie)、組(zu)裝并獲得基(ji)因組(zu)圖譜，或(huo)是對(dui)(dui)不同組(zu)織進行測序(xu)并分(fen)析體細胞突變的(de)一(yi)種(zhong)研究方法。盡管WES可以(yi)(yi)快速全面地找(zhao)出個體基(ji)因組上的(de)所有突變，從而找(zhao)到個體間的(de)差異(yi)，但(dan)對于(yu)外(wai)顯子以(yi)(yi)外(wai)的(de)區域則不能有效(xiao)地進行(xing)基(ji)因檢測(ce)。對于(yu)此種情(qing)況，目前還要借助WGS進行全基(ji)因(yin)組檢測。但由(you)于人類基(ji)因(yin)組過(guo)于龐大，一次單端(duan)全基(ji)因(yin)組測序(xu)很難達到(dao)所需要(yao)的(de)測序(xu)深度。因(yin)此(ci)，需要(yao)重復測序(xu)或雙端(duan)測序(xu)，由(you)此(ci)帶來測序(xu)成本的(de)大幅(fu)度提高和由(you)于不能達到(dao)足夠的(de)測序(xu)深度所導致的(de)結果準確(que)性的(de)降低。而對于臨床疾病診(zhen)斷和普通科研工作，其高昂的(de)檢測費用也是難以(yi)承(cheng)受的(de)。盡管如此(ci)，對于部分臨床研究和WES不能解決(jue)的科研課題還需要借助WGS進行更(geng)加全(quan)面(mian)的基因(yin)檢測。

3、展望

NGS的(de)(de)(de)(de)(de)出現(xian)為新興的(de)(de)(de)(de)(de)基因(yin)組技術增添了無限的(de)(de)(de)(de)(de)活力和(he)想(xiang)象空間。特別是基因(yin)芯片(pian)的(de)(de)(de)(de)(de)問世和(he)已在臨(lin)床上應用于大樣本(ben)的(de)(de)(de)(de)(de)疾病篩(shai)查和(he)基因(yin)診斷中所展(zhan)現(xian)出的(de)(de)(de)(de)(de)活力，以及其商業化發展(zhan)的(de)(de)(de)(de)(de)模式都令人(ren)鼓(gu)舞。在眼科是單基因(yin)病最常見的(de)(de)(de)(de)(de)學(xue)科，利(li)用芯片(pian)技術進行Laber病(bing)的(de)(de)篩查已使很多病(bing)因不清(qing)楚的(de)(de)視神(shen)經萎縮(suo)得到(dao)明確診斷。而原發性(xing)(xing)開角型青光(guang)眼(yan)是眼(yan)科最(zui)具隱蔽(bi)性(xing)(xing)和危險(xian)性(xing)(xing)的(de)(de)致盲性(xing)(xing)眼(yan)病(bing)，其(qi)致病(bing)基因或突變的(de)(de)鑒(jian)定研究對疾病(bing)篩查將有(you)著非常(chang)重要的(de)(de)臨床價值和巨大的(de)(de)商業價值。在(zai)新生(sheng)兒(er)糖尿病(bing)的(de)(de)篩查中采用(yong)基因芯片技術可以更加快速、全面經濟，避免第一代測序過于繁瑣(suo)和漏檢。

基因芯(xin)片(pian)技(ji)術在產前診斷中更加具(ju)有發展前景。只(zhi)要對孕婦進行DNA血液檢查(cha)即可進(jin)行遺傳疾病的(de)篩查(cha)，避(bi)免(mian)以往通(tong)過羊膜(mo)穿刺抽取(qu)羊水(shui)進(jin)行有創檢查(cha)的(de)局限性(xing)和危險性(xing)。目前(qian)(qian)，基(ji)(ji)因(yin)檢測(ce)(ce)技(ji)術水(shui)平的(de)提升和檢測(ce)(ce)費用(yong)的(de)不(bu)斷降低，發展大規模個體(ti)化基(ji)(ji)因(yin)檢測(ce)(ce)在(zai)不(bu)久的(de)將來成為(wei)可能。同(tong)時(shi)，藥物(wu)易感性(xing)基(ji)(ji)因(yin)和疾病發生(sheng)的(de)易感基(ji)(ji)因(yin)的(de)檢測(ce)(ce)的(de)深入(ru)開展，個體(ti)化醫療(liao)將在(zai)基(ji)(ji)因(yin)檢測(ce)(ce)的(de)基(ji)(ji)礎(chu)上(shang)得以實現。有理由相信(xin)，隨(sui)著(zhu)人們生(sheng)活水(shui)平的(de)不(bu)斷提高(gao)和健康意識不(bu)斷增強，基(ji)(ji)因(yin)檢測(ce)(ce)在(zai)未來醫學發展中(zhong)應用(yong)前(qian)(qian)景(jing)將十分可觀。