一、分光光度計的組成部分
分光光度計的型號繁多(duo),但其(qi)基本結構由以下(xia)幾(ji)部分組成:光源、單色器、吸收池、檢測系統(tong)及信號顯(xian)示系統(tong)。
1、光源
在(zai)吸光(guang)度的測量中,要求光(guang)源發出的所需波長范圍內的連續光(guang)譜具有足(zu)夠(gou)的光(guang)強度,并能在(zai)一定(ding)時(shi)間內保持穩定(ding)。
2、單色器
單色(se)(se)器(qi)是能將光源(yuan)發射(she)的連續光源(yuan)分解為單色(se)(se)光并從中(zhong)選出(chu)(chu)任一波長單色(se)(se)光的光學系統。它由入射(she)狹(xia)縫、準光器(qi)、色(se)(se)散原件(jian)、聚焦元件(jian)和(he)出(chu)(chu)射(she)狹(xia)縫等幾個部分組成。
3、吸收池
吸收池又(you)稱比(bi)(bi)色皿,用(yong)于盛裝參比(bi)(bi)溶液和待測試液。儀器一(yi)般配(pei)有液層厚(hou)度為0.5cm、1cm、2cm、3cm等的長方形比(bi)(bi)色皿。
4、檢測系統
檢測系(xi)統通常通過(guo)利用光(guang)(guang)電效(xiao)應將透(tou)過(guo)吸收池的(de)(de)光(guang)(guang)信(xin)(xin)號轉變為可測的(de)(de)電信(xin)(xin)號,而且所(suo)產(chan)生(sheng)的(de)(de)電信(xin)(xin)號應與照(zhao)射于檢測器上的(de)(de)光(guang)(guang)信(xin)(xin)號成正比。可見分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計常常使用光(guang)(guang)電管或光(guang)(guang)電倍增管做檢測器。
5、信號顯示系統
光電(dian)轉換器產生的各種電(dian)信(xin)號,經放大等處理后,用一定方式顯示出來,以便于計算和記錄。
二、分光光度計原理
分(fen)(fen)光(guang)光(guang)度計的(de)原理是采用(yong)一個可以產(chan)生多個波長(chang)的(de)光(guang)源,通過(guo)系列分(fen)(fen)光(guang)裝置,從(cong)而產(chan)生特定波長(chang)的(de)光(guang)源,光(guang)線透(tou)過(guo)測(ce)試的(de)樣(yang)品(pin)后,部(bu)分(fen)(fen)光(guang)線被吸(xi)收,計算樣(yang)品(pin)的(de)吸(xi)光(guang)值,從(cong)而轉(zhuan)化成樣(yang)品(pin)的(de)濃度,樣(yang)品(pin)的(de)吸(xi)光(guang)值與樣(yang)品(pin)的(de)濃度成正(zheng)比。
三、分光光度計的種類
1、可見分光光度計
用(yong)來測量(liang)待測物質對可(ke)見(jian)光的吸光度并進行(xing)定量(liang)分析的儀器,稱為(wei)可(ke)見(jian)分光光度計。
2、紫外可見分光光度計
紫(zi)(zi)外可(ke)見(jian)光(guang)譜儀(yi)用(yong)來(lai)測(ce)(ce)量(liang)待測(ce)(ce)物質對(dui)可(ke)見(jian)光(guang)或紫(zi)(zi)外光(guang)(200-760nm)的吸光(guang)度并進行定(ding)量(liang)分析(xi)的儀(yi)器,可(ke)以(yi)測(ce)(ce)定(ding)核酸和(he)蛋白的濃度,也(ye)可(ke)以(yi)測(ce)(ce)定(ding)細(xi)菌細(xi)胞密度。
3、紅外分光光度計
一般(ban)的紅外光譜(pu)(pu)是(shi)指大于760nm的紅外光譜(pu)(pu),這是(shi)研究有機化合物最(zui)常用的光譜(pu)(pu)區(qu)域(yu),能分析各種狀態(氣、液、固(gu))的試樣。
4、熒光分光光度計
熒(ying)(ying)光(guang)分(fen)光(guang)光(guang)度計是(shi)用于(yu)掃描液相熒(ying)(ying)光(guang)標記物所發出的熒(ying)(ying)光(guang)光(guang)譜的一(yi)種儀器,應用于(yu)科研、化工、醫(yi)藥、生(sheng)化、環保以及臨床檢驗、食品檢驗、教學(xue)實驗等領域(yu),通過(guo)對這些參數的測定,不但可以做(zuo)一(yi)般的定量分(fen)析,而且還可以推斷分(fen)子在(zai)各種環境下的構象變化,從而闡明(ming)分(fen)子結構與功能(neng)之(zhi)間的關系。