一、分光光度計的組成部分
分光光度計的(de)型(xing)號繁(fan)多,但其(qi)基本結構(gou)由以(yi)下(xia)幾部分組(zu)成:光源、單色(se)器、吸收池、檢測系統(tong)及信號顯示(shi)系統(tong)。
1、光源
在(zai)吸光度的測量中(zhong),要求(qiu)光源發(fa)出(chu)的所需波長范圍內的連續光譜具(ju)有足夠的光強度,并能在(zai)一定時(shi)間內保持(chi)穩定。
2、單色器
單色(se)器是(shi)能(neng)將(jiang)光(guang)源(yuan)發射的(de)連續(xu)光(guang)源(yuan)分解為單色(se)光(guang)并(bing)從中(zhong)選出任一波長單色(se)光(guang)的(de)光(guang)學系(xi)統。它由入(ru)射狹縫、準光(guang)器、色(se)散原件(jian)、聚焦元件(jian)和出射狹縫等幾個部(bu)分組成。
3、吸收池
吸收池又稱比(bi)(bi)色皿,用于盛(sheng)裝參比(bi)(bi)溶(rong)液和待測試(shi)液。儀器一(yi)般配(pei)有液層厚度(du)為0.5cm、1cm、2cm、3cm等的(de)長方形比(bi)(bi)色皿。
4、檢測系統
檢(jian)測(ce)系(xi)統通常(chang)通過利用光電(dian)(dian)效應將透(tou)過吸收池的光信號轉變為可測(ce)的電(dian)(dian)信號,而且(qie)所產生的電(dian)(dian)信號應與照射于檢(jian)測(ce)器(qi)上的光信號成正(zheng)比。可見分(fen)光光度(du)計(ji)常(chang)常(chang)使(shi)用光電(dian)(dian)管(guan)或光電(dian)(dian)倍增管(guan)做檢(jian)測(ce)器(qi)。
5、信號顯示系統
光(guang)電轉換器產生的各種電信號(hao),經(jing)放大等處理(li)后,用一定方式顯示出來,以便于(yu)計算和記錄。
二、分光光度計原理
分(fen)光(guang)(guang)光(guang)(guang)度(du)計的(de)原理是采用一(yi)個可以產(chan)生(sheng)多個波長的(de)光(guang)(guang)源,通過系(xi)列分(fen)光(guang)(guang)裝(zhuang)置,從而產(chan)生(sheng)特定波長的(de)光(guang)(guang)源,光(guang)(guang)線透(tou)過測試的(de)樣(yang)(yang)品(pin)(pin)后,部分(fen)光(guang)(guang)線被(bei)吸(xi)收(shou),計算樣(yang)(yang)品(pin)(pin)的(de)吸(xi)光(guang)(guang)值,從而轉化(hua)成樣(yang)(yang)品(pin)(pin)的(de)濃(nong)度(du),樣(yang)(yang)品(pin)(pin)的(de)吸(xi)光(guang)(guang)值與樣(yang)(yang)品(pin)(pin)的(de)濃(nong)度(du)成正(zheng)比。
三、分光光度計的種類
1、可見分光光度計
用來測量(liang)(liang)待測物質對(dui)可見光(guang)的(de)吸光(guang)度并進行定(ding)量(liang)(liang)分析(xi)的(de)儀器,稱為可見分光(guang)光(guang)度計(ji)。
2、紫外可見分光光度計
紫外(wai)可見(jian)光譜儀(yi)用來測量待(dai)測物(wu)質(zhi)對可見(jian)光或紫外(wai)光(200-760nm)的(de)吸光度并進(jin)行定量分析(xi)的(de)儀(yi)器,可以(yi)測定核(he)酸和蛋白的(de)濃度,也(ye)可以(yi)測定細菌細胞密度。
3、紅外分光光度計
一般的紅(hong)外(wai)光譜(pu)(pu)是指(zhi)大(da)于760nm的紅(hong)外(wai)光譜(pu)(pu),這是研究有(you)機化合(he)物最常用的光譜(pu)(pu)區域,能分析各種狀態(氣、液、固)的試(shi)樣(yang)。
4、熒光分光光度計
熒光分光光度計是用于(yu)掃描(miao)液相(xiang)熒光標記物所發出的(de)熒光光譜的(de)一(yi)種儀(yi)器,應(ying)用于(yu)科研、化(hua)工、醫藥(yao)、生化(hua)、環保以(yi)(yi)及臨床檢驗、食(shi)品檢驗、教學實驗等領(ling)域,通(tong)過(guo)對(dui)這些(xie)參(can)數的(de)測定(ding),不但可以(yi)(yi)做一(yi)般的(de)定(ding)量(liang)分析,而且還可以(yi)(yi)推(tui)斷(duan)分子(zi)(zi)在各(ge)種環境(jing)下的(de)構象(xiang)變(bian)化(hua),從而闡明分子(zi)(zi)結構與功能之(zhi)間的(de)關系(xi)。