一、分光光度計的組成部分
分光光度計的型號(hao)繁多,但其(qi)基本結構(gou)由以下幾(ji)部分組成:光源、單色(se)器、吸收池(chi)、檢測系統(tong)及信號(hao)顯示系統(tong)。
1、光源
在吸光度(du)的測量中,要(yao)求(qiu)光源發出(chu)的所需波長(chang)范圍內的連續(xu)光譜具有(you)足夠(gou)的光強度(du),并能在一定時間內保(bao)持穩定。
2、單色器
單(dan)色(se)器(qi)是能(neng)將(jiang)光(guang)(guang)源發射的連續光(guang)(guang)源分解為(wei)單(dan)色(se)光(guang)(guang)并(bing)從(cong)中選(xuan)出任一波(bo)長單(dan)色(se)光(guang)(guang)的光(guang)(guang)學系(xi)統。它由入射狹(xia)縫(feng)、準(zhun)光(guang)(guang)器(qi)、色(se)散原(yuan)件、聚焦元(yuan)件和(he)出射狹(xia)縫(feng)等幾個(ge)部分組(zu)成。
3、吸收池
吸收池(chi)又稱(cheng)比色皿(min),用于盛(sheng)裝參比溶(rong)液(ye)(ye)和(he)待測試液(ye)(ye)。儀器一般配(pei)有液(ye)(ye)層(ceng)厚度為0.5cm、1cm、2cm、3cm等(deng)的長方形比色皿(min)。
4、檢測系統
檢(jian)測系(xi)統通常(chang)通過(guo)利用光(guang)電(dian)(dian)(dian)效應(ying)將透過(guo)吸收(shou)池的(de)光(guang)信(xin)號(hao)轉變為可測的(de)電(dian)(dian)(dian)信(xin)號(hao),而且所(suo)產生的(de)電(dian)(dian)(dian)信(xin)號(hao)應(ying)與照射于檢(jian)測器上的(de)光(guang)信(xin)號(hao)成正比。可見分光(guang)光(guang)度計常(chang)常(chang)使用光(guang)電(dian)(dian)(dian)管(guan)或光(guang)電(dian)(dian)(dian)倍增管(guan)做檢(jian)測器。
5、信號顯示系統
光電(dian)轉(zhuan)換器產生的各種電(dian)信號,經放大等處理后(hou),用一(yi)定方式顯示出(chu)來,以便于(yu)計算(suan)和記錄。
二、分光光度計原理
分(fen)(fen)(fen)光光度計的原理是采(cai)用一個可(ke)以產(chan)生多個波(bo)長(chang)的光源,通過(guo)系列分(fen)(fen)(fen)光裝置,從(cong)而產(chan)生特定(ding)波(bo)長(chang)的光源,光線透過(guo)測試(shi)的樣品后(hou),部分(fen)(fen)(fen)光線被吸(xi)收,計算樣品的吸(xi)光值,從(cong)而轉化(hua)成樣品的濃度,樣品的吸(xi)光值與樣品的濃度成正比。
三、分光光度計的種類
1、可見分光光度計
用來測量待測物質對可見光的(de)吸光度并進行定量分(fen)析的(de)儀器,稱為可見分(fen)光光度計(ji)。
2、紫外可見分光光度計
紫外(wai)可(ke)見光(guang)譜(pu)儀用來測(ce)(ce)量待測(ce)(ce)物質(zhi)對可(ke)見光(guang)或紫外(wai)光(guang)(200-760nm)的(de)吸光(guang)度并進行(xing)定量分析的(de)儀器,可(ke)以測(ce)(ce)定核酸和蛋(dan)白的(de)濃度,也可(ke)以測(ce)(ce)定細菌細胞密(mi)度。
3、紅外分光光度計
一般的紅(hong)外光(guang)譜(pu)是指大于760nm的紅(hong)外光(guang)譜(pu),這(zhe)是研究有(you)機化(hua)合物最常(chang)用的光(guang)譜(pu)區域,能分析各(ge)種狀態(氣、液、固(gu))的試樣。
4、熒光分光光度計
熒光(guang)分光(guang)光(guang)度計是用于掃描(miao)液(ye)相熒光(guang)標記物所發出的熒光(guang)光(guang)譜的一(yi)種儀(yi)器,應用于科研(yan)、化工、醫藥、生化、環(huan)(huan)保以及臨床檢驗、食品檢驗、教學實(shi)驗等領域,通過對這些參數(shu)的測(ce)定,不但可以做(zuo)一(yi)般的定量分析,而且還可以推斷分子在各種環(huan)(huan)境下的構象變化,從而闡(chan)明分子結構與功能(neng)之(zhi)間(jian)的關系。