一、分光光度計的組成部分
分光光度計的型(xing)號繁多,但(dan)其基(ji)本結(jie)構由以下幾部分組(zu)成:光源、單色器、吸收池、檢(jian)測系統及信(xin)號顯示系統。
1、光源
在吸光(guang)度的(de)測量中,要(yao)求(qiu)光(guang)源發出的(de)所需波長范圍內(nei)(nei)的(de)連續光(guang)譜具(ju)有足夠的(de)光(guang)強度,并能在一定時間內(nei)(nei)保持穩(wen)定。
2、單色器
單色器是(shi)能(neng)將光(guang)源發射的(de)連(lian)續(xu)光(guang)源分(fen)解為單色光(guang)并(bing)從(cong)中(zhong)選出任(ren)一波(bo)長(chang)單色光(guang)的(de)光(guang)學(xue)系統。它由入射狹縫、準光(guang)器、色散原件、聚焦元件和出射狹縫等幾個部分(fen)組成。
3、吸收池
吸收池又稱比色(se)皿(min),用于盛裝參(can)比溶液和待測試(shi)液。儀(yi)器一般配(pei)有液層厚(hou)度(du)為0.5cm、1cm、2cm、3cm等的長方形比色(se)皿(min)。
4、檢測系統
檢測(ce)(ce)系統(tong)通(tong)常通(tong)過利用光(guang)(guang)電(dian)效應(ying)將透過吸收池的(de)光(guang)(guang)信(xin)(xin)號(hao)(hao)轉變為可測(ce)(ce)的(de)電(dian)信(xin)(xin)號(hao)(hao),而(er)且所產(chan)生的(de)電(dian)信(xin)(xin)號(hao)(hao)應(ying)與照射于檢測(ce)(ce)器上(shang)的(de)光(guang)(guang)信(xin)(xin)號(hao)(hao)成正比(bi)。可見分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計常常使用光(guang)(guang)電(dian)管(guan)或光(guang)(guang)電(dian)倍增管(guan)做(zuo)檢測(ce)(ce)器。
5、信號顯示系統
光(guang)電轉換器(qi)產生的各(ge)種電信號(hao),經放大等處(chu)理后(hou),用(yong)一定(ding)方式顯示出來,以便(bian)于計算和記錄。
二、分光光度計原理
分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計(ji)的(de)(de)原理是采(cai)用一個可以(yi)產(chan)生(sheng)多個波長的(de)(de)光(guang)(guang)源,通過系列分光(guang)(guang)裝置,從而(er)產(chan)生(sheng)特(te)定波長的(de)(de)光(guang)(guang)源,光(guang)(guang)線(xian)(xian)透(tou)過測試的(de)(de)樣(yang)品(pin)(pin)后(hou),部(bu)分光(guang)(guang)線(xian)(xian)被(bei)吸(xi)收,計(ji)算樣(yang)品(pin)(pin)的(de)(de)吸(xi)光(guang)(guang)值,從而(er)轉(zhuan)化成樣(yang)品(pin)(pin)的(de)(de)濃(nong)度,樣(yang)品(pin)(pin)的(de)(de)吸(xi)光(guang)(guang)值與(yu)樣(yang)品(pin)(pin)的(de)(de)濃(nong)度成正比。
三、分光光度計的種類
1、可見分光光度計
用來測量(liang)待測物(wu)質(zhi)對可見光(guang)(guang)的(de)吸光(guang)(guang)度(du)(du)并進行定量(liang)分(fen)析的(de)儀(yi)器,稱(cheng)為可見分(fen)光(guang)(guang)光(guang)(guang)度(du)(du)計。
2、紫外可見分光光度計
紫外(wai)可(ke)(ke)(ke)(ke)見光(guang)(guang)譜(pu)儀用(yong)來測量待測物(wu)質(zhi)對(dui)可(ke)(ke)(ke)(ke)見光(guang)(guang)或紫外(wai)光(guang)(guang)(200-760nm)的吸光(guang)(guang)度并(bing)進行定(ding)量分(fen)析的儀器,可(ke)(ke)(ke)(ke)以測定(ding)核酸(suan)和蛋白的濃(nong)度,也(ye)可(ke)(ke)(ke)(ke)以測定(ding)細菌細胞密度。
3、紅外分光光度計
一般的(de)紅外光譜是(shi)指大于760nm的(de)紅外光譜,這是(shi)研究有機化(hua)合物最常用的(de)光譜區域,能分析各種狀態(tai)(氣、液、固)的(de)試(shi)樣(yang)。
4、熒光分光光度計
熒光(guang)分光(guang)光(guang)度計是(shi)用于掃(sao)描液相(xiang)熒光(guang)標記物所發出的(de)熒光(guang)光(guang)譜的(de)一種(zhong)儀(yi)器,應(ying)用于科(ke)研、化工、醫藥、生(sheng)化、環保以(yi)及臨床(chuang)檢驗、食品檢驗、教學(xue)實驗等領域(yu),通過對這些參數的(de)測(ce)定,不(bu)但可以(yi)做(zuo)一般的(de)定量(liang)分析,而且還可以(yi)推斷(duan)分子在各(ge)種(zhong)環境(jing)下的(de)構(gou)象變(bian)化,從而闡明(ming)分子結構(gou)與功(gong)能之間的(de)關系(xi)。