一、分光光度計的組成部分
分光光度計的型號繁多(duo),但其基本結構由以下幾(ji)部分組成:光源、單(dan)色器、吸收池、檢測(ce)系統(tong)及信號顯(xian)示系統(tong)。
1、光源
在吸光度的(de)測量(liang)中(zhong),要(yao)求光源(yuan)發出的(de)所需(xu)波長范圍內的(de)連續光譜具有(you)足(zu)夠(gou)的(de)光強度,并能在一(yi)定(ding)時間內保持穩定(ding)。
2、單色器
單色(se)(se)器(qi)是能將光(guang)源發射(she)(she)的連續光(guang)源分解為單色(se)(se)光(guang)并從中選出(chu)任一波長(chang)單色(se)(se)光(guang)的光(guang)學(xue)系(xi)統。它由(you)入射(she)(she)狹縫(feng)、準光(guang)器(qi)、色(se)(se)散原件、聚(ju)焦元件和(he)出(chu)射(she)(she)狹縫(feng)等幾(ji)個部分組成。
3、吸收池
吸收(shou)池又稱比(bi)(bi)色(se)皿(min),用于(yu)盛(sheng)裝參比(bi)(bi)溶液和(he)待測試液。儀(yi)器一(yi)般(ban)配(pei)有液層厚度為0.5cm、1cm、2cm、3cm等的長方(fang)形(xing)比(bi)(bi)色(se)皿(min)。
4、檢測系統
檢(jian)測系統(tong)通(tong)常通(tong)過利用光(guang)(guang)電效(xiao)應將透過吸收池的(de)光(guang)(guang)信號(hao)轉變為可測的(de)電信號(hao),而且所產(chan)生的(de)電信號(hao)應與照射于檢(jian)測器上的(de)光(guang)(guang)信號(hao)成正比。可見分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計常常使用光(guang)(guang)電管或光(guang)(guang)電倍增管做檢(jian)測器。
5、信號顯示系統
光電轉換器產生(sheng)的各種電信號(hao),經放大等處理(li)后,用(yong)一定方(fang)式顯示出來,以便(bian)于計(ji)算和記(ji)錄。
二、分光光度計原理
分(fen)光(guang)(guang)光(guang)(guang)度(du)計的(de)原(yuan)理(li)是采(cai)用一個(ge)(ge)可以產生多個(ge)(ge)波長的(de)光(guang)(guang)源,通過(guo)系列分(fen)光(guang)(guang)裝(zhuang)置,從(cong)而產生特(te)定(ding)波長的(de)光(guang)(guang)源,光(guang)(guang)線透過(guo)測(ce)試的(de)樣(yang)品(pin)(pin)后,部分(fen)光(guang)(guang)線被(bei)吸收(shou),計算樣(yang)品(pin)(pin)的(de)吸光(guang)(guang)值,從(cong)而轉(zhuan)化成樣(yang)品(pin)(pin)的(de)濃度(du),樣(yang)品(pin)(pin)的(de)吸光(guang)(guang)值與樣(yang)品(pin)(pin)的(de)濃度(du)成正(zheng)比。
三、分光光度計的種類
1、可見分光光度計
用來(lai)測(ce)量待測(ce)物質對(dui)可見光(guang)(guang)的吸光(guang)(guang)度(du)并進行定量分析的儀器,稱為可見分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度(du)計。
2、紫外可見分光光度計
紫(zi)外(wai)(wai)可(ke)見光(guang)譜(pu)儀(yi)(yi)用來測量待測物質對(dui)可(ke)見光(guang)或紫(zi)外(wai)(wai)光(guang)(200-760nm)的(de)吸光(guang)度并進行(xing)定量分析的(de)儀(yi)(yi)器,可(ke)以測定核酸和(he)蛋(dan)白的(de)濃度,也可(ke)以測定細菌(jun)細胞密度。
3、紅外分光光度計
一般的(de)(de)紅外(wai)(wai)光(guang)譜(pu)(pu)是(shi)指大于760nm的(de)(de)紅外(wai)(wai)光(guang)譜(pu)(pu),這是(shi)研究有機(ji)化合物最常用的(de)(de)光(guang)譜(pu)(pu)區域,能(neng)分析各種(zhong)狀(zhuang)態(氣、液、固)的(de)(de)試樣。
4、熒光分光光度計
熒(ying)光(guang)分光(guang)光(guang)度計(ji)是用(yong)于掃(sao)描(miao)液相熒(ying)光(guang)標(biao)記物(wu)所發出的(de)(de)熒(ying)光(guang)光(guang)譜(pu)的(de)(de)一(yi)種(zhong)(zhong)儀(yi)器,應(ying)用(yong)于科研、化(hua)工、醫藥、生化(hua)、環保以及臨床檢驗、食品檢驗、教學實驗等(deng)領域,通過對這些參數的(de)(de)測(ce)定,不但可以做一(yi)般的(de)(de)定量分析(xi),而且還可以推(tui)斷(duan)分子在各種(zhong)(zhong)環境下的(de)(de)構象(xiang)變化(hua),從而闡明(ming)分子結構與功能之(zhi)間的(de)(de)關(guan)系(xi)。