一、分光光度計的組成部分
分光光度計的型號繁多,但(dan)其基本(ben)結構(gou)由以(yi)下(xia)幾(ji)部(bu)分組成(cheng):光(guang)源、單色器、吸(xi)收池(chi)、檢測系(xi)統及信號顯示(shi)系(xi)統。
1、光源
在吸光(guang)度(du)的(de)(de)測量中(zhong),要求光(guang)源發出的(de)(de)所需波(bo)長范圍內(nei)的(de)(de)連續光(guang)譜具有足夠(gou)的(de)(de)光(guang)強度(du),并能在一定時間(jian)內(nei)保持穩定。
2、單色器
單(dan)色(se)器(qi)是能將光(guang)(guang)(guang)(guang)源(yuan)發射的連(lian)續光(guang)(guang)(guang)(guang)源(yuan)分(fen)解為單(dan)色(se)光(guang)(guang)(guang)(guang)并從(cong)中選出(chu)任一波長(chang)單(dan)色(se)光(guang)(guang)(guang)(guang)的光(guang)(guang)(guang)(guang)學系統。它由入射狹縫、準光(guang)(guang)(guang)(guang)器(qi)、色(se)散原件、聚焦元(yuan)件和出(chu)射狹縫等(deng)幾個部分(fen)組(zu)成。
3、吸收池
吸(xi)收池(chi)又稱比(bi)色皿,用(yong)于盛裝參比(bi)溶液(ye)和待測試液(ye)。儀器一般配有液(ye)層(ceng)厚度(du)為0.5cm、1cm、2cm、3cm等的長方形比(bi)色皿。
4、檢測系統
檢(jian)測(ce)系統通常通過利用光電效應將透過吸收(shou)池(chi)的(de)光信號(hao)轉變為(wei)可(ke)測(ce)的(de)電信號(hao),而(er)且所產(chan)生的(de)電信號(hao)應與照射于檢(jian)測(ce)器上(shang)的(de)光信號(hao)成正比。可(ke)見(jian)分光光度(du)計常常使用光電管或光電倍增管做檢(jian)測(ce)器。
5、信號顯示系統
光電轉換器產生的各種電信號,經放大等處理后,用一定(ding)方(fang)式(shi)顯示出來,以便于計算和記錄。
二、分光光度計原理
分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計的原理是采用(yong)一個(ge)(ge)可(ke)以(yi)產生多個(ge)(ge)波長(chang)的光(guang)(guang)源,通(tong)過系列分光(guang)(guang)裝置(zhi),從(cong)而產生特定波長(chang)的光(guang)(guang)源,光(guang)(guang)線透過測試的樣(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)后,部分光(guang)(guang)線被吸(xi)收,計算樣(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)的吸(xi)光(guang)(guang)值,從(cong)而轉化成樣(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)的濃度,樣(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)的吸(xi)光(guang)(guang)值與樣(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)的濃度成正比。
三、分光光度計的種類
1、可見分光光度計
用來測量待測物質對可見光(guang)(guang)的吸光(guang)(guang)度(du)并進行定量分析的儀器,稱為(wei)可見分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度(du)計。
2、紫外可見分光光度計
紫(zi)外可見光譜儀用(yong)來測(ce)量(liang)待測(ce)物質對可見光或紫(zi)外光(200-760nm)的(de)吸光度(du)并(bing)進行定(ding)量(liang)分(fen)析的(de)儀器,可以測(ce)定(ding)核酸和蛋(dan)白(bai)的(de)濃度(du),也(ye)可以測(ce)定(ding)細菌細胞(bao)密(mi)度(du)。
3、紅外分光光度計
一般的紅(hong)外(wai)光譜(pu)是(shi)指大于760nm的紅(hong)外(wai)光譜(pu),這是(shi)研究有(you)機化合物最常(chang)用(yong)的光譜(pu)區域,能分(fen)析各(ge)種(zhong)狀態(氣、液、固)的試樣(yang)。
4、熒光分光光度計
熒(ying)(ying)光(guang)(guang)分(fen)(fen)光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計(ji)是用(yong)于掃描液相熒(ying)(ying)光(guang)(guang)標記物(wu)所發(fa)出的(de)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)光(guang)(guang)譜的(de)一種儀器,應用(yong)于科研、化工、醫藥、生化、環(huan)保(bao)以及臨床檢驗、食品檢驗、教學實驗等領域,通過對(dui)這些(xie)參數(shu)的(de)測(ce)定,不但可(ke)以做一般(ban)的(de)定量分(fen)(fen)析,而且(qie)還可(ke)以推斷(duan)分(fen)(fen)子(zi)(zi)在各種環(huan)境(jing)下(xia)的(de)構(gou)象(xiang)變化,從而闡(chan)明分(fen)(fen)子(zi)(zi)結(jie)構(gou)與功能之(zhi)間的(de)關系。