一、分光光度計的組成部分
分光光度計的型(xing)號繁多,但其基(ji)本(ben)結構由以下幾部(bu)分組成:光源(yuan)、單色器、吸收池、檢測(ce)系(xi)(xi)統(tong)及信號顯示(shi)系(xi)(xi)統(tong)。
1、光源
在吸光度(du)的(de)測量中,要求光源(yuan)發出(chu)的(de)所需(xu)波長范圍內(nei)的(de)連續光譜具(ju)有(you)足夠(gou)的(de)光強(qiang)度(du),并(bing)能在一定(ding)時間內(nei)保(bao)持穩定(ding)。
2、單色器
單色器是能將光(guang)(guang)(guang)源發射的(de)(de)連續光(guang)(guang)(guang)源分(fen)解為單色光(guang)(guang)(guang)并(bing)從中(zhong)選出任一波(bo)長單色光(guang)(guang)(guang)的(de)(de)光(guang)(guang)(guang)學系統。它由(you)入射狹縫、準光(guang)(guang)(guang)器、色散(san)原件、聚焦元件和出射狹縫等幾個部分(fen)組(zu)成。
3、吸收池
吸收池又(you)稱比(bi)(bi)色皿(min),用于盛裝(zhuang)參(can)比(bi)(bi)溶液和待(dai)測試液。儀器(qi)一般配有液層(ceng)厚度(du)為0.5cm、1cm、2cm、3cm等的長(chang)方形比(bi)(bi)色皿(min)。
4、檢測系統
檢測(ce)系統通常(chang)通過(guo)利用光(guang)(guang)電(dian)(dian)效應將透過(guo)吸(xi)收池的光(guang)(guang)信號轉變為可測(ce)的電(dian)(dian)信號,而且所產生的電(dian)(dian)信號應與照射于檢測(ce)器(qi)上的光(guang)(guang)信號成正比。可見分(fen)光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計常(chang)常(chang)使用光(guang)(guang)電(dian)(dian)管或(huo)光(guang)(guang)電(dian)(dian)倍增(zeng)管做檢測(ce)器(qi)。
5、信號顯示系統
光電轉(zhuan)換(huan)器(qi)產(chan)生的(de)各(ge)種電信號,經放大等(deng)處(chu)理后,用一定(ding)方式(shi)顯(xian)示出來(lai),以便于計算和(he)記錄。
二、分光光度計原理
分(fen)光(guang)光(guang)度計的(de)原理是采用一個可以產生多個波長的(de)光(guang)源,通(tong)過(guo)系(xi)列(lie)分(fen)光(guang)裝置,從而(er)產生特定(ding)波長的(de)光(guang)源,光(guang)線透過(guo)測試的(de)樣(yang)品(pin)(pin)(pin)(pin)后,部分(fen)光(guang)線被吸收,計算樣(yang)品(pin)(pin)(pin)(pin)的(de)吸光(guang)值,從而(er)轉化成樣(yang)品(pin)(pin)(pin)(pin)的(de)濃度,樣(yang)品(pin)(pin)(pin)(pin)的(de)吸光(guang)值與樣(yang)品(pin)(pin)(pin)(pin)的(de)濃度成正比。
三、分光光度計的種類
1、可見分光光度計
用來測量(liang)待測物質(zhi)對可(ke)(ke)見光的吸光度并進(jin)行定量(liang)分析的儀器,稱為可(ke)(ke)見分光光度計。
2、紫外可見分光光度計
紫外(wai)可見光譜儀用來測量(liang)(liang)待測物質對可見光或紫外(wai)光(200-760nm)的(de)吸光度并進(jin)行定(ding)量(liang)(liang)分(fen)析的(de)儀器,可以測定(ding)核(he)酸(suan)和(he)蛋白的(de)濃(nong)度,也可以測定(ding)細(xi)菌細(xi)胞(bao)密度。
3、紅外分光光度計
一般的(de)(de)(de)紅外光(guang)譜(pu)是指大于(yu)760nm的(de)(de)(de)紅外光(guang)譜(pu),這是研究有(you)機化(hua)合物最常(chang)用(yong)的(de)(de)(de)光(guang)譜(pu)區域,能分析各種狀態(氣、液、固)的(de)(de)(de)試樣。
4、熒光分光光度計
熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)分(fen)光(guang)(guang)(guang)光(guang)(guang)(guang)度計是用于掃描(miao)液相熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)標記物所發出的(de)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)光(guang)(guang)(guang)譜的(de)一(yi)種儀(yi)器(qi),應用于科研、化(hua)(hua)工、醫藥(yao)、生化(hua)(hua)、環保以及(ji)臨床檢驗、食(shi)品檢驗、教學實驗等領(ling)域(yu),通過對這些參數的(de)測定(ding),不(bu)但可以做(zuo)一(yi)般的(de)定(ding)量分(fen)析(xi),而且(qie)還可以推斷分(fen)子(zi)在(zai)各種環境(jing)下的(de)構象變化(hua)(hua),從而闡明分(fen)子(zi)結構與功(gong)能(neng)之間(jian)的(de)關系。